مقالة منهجية

طريقة محسنة لجمع السائل الدماغي النخاعي من الفئران تخديره

DOI:

10.3791/56774

⸱

مارس 19, 2018

 ,  ,  ,  ,  , 
1Shanghai Advanced Research Institute, University of Chinese Academy of Sciences, Chinese Academy of Science, 2Shanghai Institute of Materia Medica, University of Chinese Academy of Sciences, Chinese Academy of Science, 3Center of Functionally Integrative Neuroscience, Department of Clinical Medicine, Aarhus University, 4Sino-Danish Center for Education and Research (SDC), 5Department of Neurology, Xinhua Hospital Chongming Branch Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, 6Department of Nuclear Medicine and PET-centre, Aarhus University Hospital

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويصف هذا البروتوكول تقنية محسنة لمجموعة وفيرة من السائل الدماغي النخاعي (CSF) مع أي تلوث من الدم. مع أكبر جمع العينات والنقاء، يمكن إجراء مزيد من التحليلات باستخدام قوات الأمن المركزي لزيادة فهمنا للأمراض التي تصيب المخ والحبل الشوكي.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

السائل الدماغي النخاعي (CSF) سائل الجسم قيماً للتحليل في أبحاث علم الأعصاب. هو واحد من السوائل على اتصال أوثق بالجهاز العصبي المركزي، وهكذا، يمكن استخدامها لتحليل حالة المريضة من الدماغ أو الحبل الشوكي دون الوصول مباشرة إلى هذه الأنسجة. ومع ذلك، في الفئران من الصعب الحصول على ماغنا تشيستيرنا نظراً للتقارب في الأوعية الدموية، التي غالباً ما تلوث العينات. المنطقة لجمع السائل الدماغي النخاعي في الفئران من الصعب أيضا تشريح ويتم الحصول على عينات صغيرة غالباً فقط (الحد الأقصى من 5-7 ميليلتر أو أقل). يصف هذا البروتوكول بالتفصيل أسلوب الذي يحسن في الأساليب الحالية لجمع لتقليل التلوث من الدم والسماح لمجموعة وفيرة من السائل الدماغي النخاعي (في المتوسط يمكن أن تجمع 10-15 ميليلتر). يمكن استخدام هذا الأسلوب مع غيرها من أساليب التشريح لجمع الأنسجة من الفئران، كما أنها لا تؤثر على أي أنسجة أثناء استخراج السائل الدماغي النخاعي. وهكذا، المخ والحبل الشوكي لا تتأثر بهذا الأسلوب، وتظل على حالها. مع أكبر جمع عينة السائل النخاعي والنقاء، مزيد من التحليلات يمكن استخدامها مع هذا البحث الأعصاب السوائل لزيادة المعونة، وفهم أفضل للأمراض التي تصيب المخ والحبل الشوكي.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الخدمات القطرية سائل الجسم قيماً للتحليل في أبحاث علم الأعصاب. الخدمات القطرية يتكون أساسا من بلازما الدم، التي تحتوي على بعض الخلايا (لا خلايا الدم الحمراء وخلايا الدم البيضاء قليلة فقط)، وهي خالية تقريبا من البروتين. أنها واحدة من السوائل على اتصال وثيق مع الجهاز العصبي المركزي (CNS) وأنه يمكن تمرير الشوارد العديد من من المخ والحبل الشوكي إلى النظام الطرفية. في البشر، وعينات السائل الدماغي النخاعي يمكن جمعها للمساعدة في تشخيص المرض، أو لأغراض البحث في التجارب السريرية، كالعمود الفقري الحنفية (أو البزل القطني) هو إجراء طفيفة والغازية: السائل السائل الدماغي النخاعي يمكن أن تعكس التغيرات في الجهاز العصبي المركزي دون الحاجة إلى الوصول مباشرة إلى هذه الأنسجة. وهكذا، وفي السنوات الأخيرة، لأغراض البحث في العيادة، حصلت عينات السائل الدماغي النخاعي من مرضى أمراض الأعصاب مثل مرض الزهايمر وغيرها2،ديمينتياس،من13. وهناك العديد من فحوصات العلامات البيولوجية التي تم تطويرها باستخدام عينات السائل الدماغي النخاعي يحتمل أن تكون المساعدة في تشخيص الأمراض في عيادة2،3. ومع ذلك، هناك الكثير من النقاش حول موثوقية هذه الاختبارات لتحقيق نتائج متسقة والحساسة لتشخيص المرض4،5على وجه التحديد. لذا، هناك حاجة كبيرة لوضع أفضل من فحوصات والأهداف، التي يمكن العثور عليها في إطار الخدمات القطرية، للمساعدة في إنتاج تقنية قياسية لتشخيص أمراض الأعصاب بحساسية وخصوصية أكبر. نظراً للأهمية المحتملة للبشرية عينات CSF في الأمراض، جمع السائل النخاعي من القوارض في أبحاث علم الأعصاب أيضا للفائدة.

الفئران الحيوانات هامة في البحوث الطبية والبيولوجية والسماح للاختبار لإثبات مفهوم الدراسات قبل التجارب السريرية البشرية والمركبات العلاجية المحتملة. ومع ذلك، في الفئران من الصعب الحصول على عينات السائل الدماغي النخاعي نظراً لأن قربه من الدماغ في حيوانات صغيرة، كما الأسلوب المعتاد لمجموعة الخدمات القطرية في الفئران الحصول عليه عن طريق السيستيرنا ماجنا، فتح بين المخيخ والظهريه سطح سيسائيه لب. وهذا يسبب صعوبة في جمع عينات السائل الدماغي النخاعي كما من الصعب تشريح لهذا المجال أو بالقرب من الأوعية الدموية، ويزيد من خطر التلوث من خلايا الدم. نظراً لهذه الصعوبات، يمكن لمعظم الباحثين فقط الحصول على كمية صغيرة من السائل الدماغي النخاعي للتحليل (وعادة ما ذكر ميليلتر 5-7) وتلوث عينات السائل الدماغي النخاعي بخلايا الدم هو الشاغل الرئيسي للتحليلات6،،من78 , 9-تلوث الدم يمكن أن يحجب النتائج وليس حقاً تعكس الحالة من الجهاز العصبي المركزي. وعلاوة على ذلك، يمكن أن تؤثر عينة محدودة جمعت البحوث حسب المبلغ المعتاد التي جمعت من الفئران بما فيه الكفاية لقياس واحد فقط (في تكرار أو ثلاث نسخ) باستخدام مقايسة الممتز المرتبط بالانزيم (ELISA). وهكذا، مجمعة عينات السائل الدماغي النخاعي عادة من الفئران متعددة كي يكون عينة كافية لتشغيل فحوصات متعددة. وضع بروتوكول لوفرة، جمع غير ملوثة من السائل النخاعي من الفئران هو المطلوب إلى حد كبير وسوف تكون مفيدة في تحسين بحوث علم الأعصاب باستخدام القوارض.

في هذا البروتوكول، تقنية لوفرة (في متوسط 10-15 ميليلتر) مجموعة من الخدمات القطرية من الفئران تخديره هو وصف بالتفصيل ويقوم بتحسين طريقة جمع السائل الدماغي النخاعي لتقليل التلوث من الدم10معروفة حاليا. بروتوكول قوية لجمع السائل الدماغي النخاعي سيساعد في تطوير فحوصات العلامات البيولوجية على أساس الخدمات القطرية، التي يمكن استخدامها للمساعدة في تشخيص المرض، فضلا عن تحسين البحث في الآليات التي تكمن وراء الأمراض التي تؤثر الجهاز العصبي المركزي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

أجريت جميع التجارب على الحيوانات وفقا لسياسات المجتمع "علم الأعصاب" (الولايات المتحدة الأمريكية) واللجان الأخلاقية في جامعة فودان في شانغهاي (الصين). ويتم هذا الإجراء لجراحة غير البقاء على قيد الحياة.

1-إعداد جهاز جمع السائل الدماغي النخاعي

  1. سحب الزجاج الشعرية (القطر الداخلي 0.75 ملم، القطر الخارجي 1.0 مم) باستخدام ساحبة ميكروبيبيتي (كما هو موضح في ليو et al. 10؛ شحذ الشعرية ويرد في الشكل 1).
  2. مكان زجاج شحذ شعرية في حامل الشعيرات الدموية التي شنت بشدة على ميكرومانيبولاتور (الشكل 1A).
  3. كسر غيض الشعرية شحذ مع الملقط على التوالي تحت مجهر تشريح، حيث يكون القطر الداخلي لنصيحة مقطوعة عن 10-20 ميكرومتر (الشكل 1).
  4. إرفاق أنبوب رفيع وحقنه في الطرف الآخر من صاحب الشعرية، وقم بتوصيل أنبوب رفيع والمحاقن مع صمام ثلاثي.
  5. تحويل صمام ثلاثي لفتح ويغرق حقنه بضربه جوية من المحاقن من خلال الأنبوب للزجاج الشعرية طرد أي ملوثات وخلق ضغط إيجابي في الأنبوبة الشعرية.
  6. كرر ذلك عدة مرات بتضليل الاتصال وإعادة الاتصال حقنه بصمام ثلاثي، ووضع المحاقن ~ 100-200 ميليلتر قبل إعادة الاتصال الأخير من المحاقن مع صمام ثلاثي (الشكل 1B).
  7. تحريك ميكرومانيبولاتور مع الزجاج الشعرية إلى جانب منع الضرر أثناء تشريح الفأر.

figure-protocol-1
رقم 1. المجهر، ميكرومانيبولاتور، والإعداد الشعرية. مجهر (A) وميكرومانيبولاتور مع شعري تعلق الإعداد، فضلا عن صورة أوثق من (ب) بحقنه متصلة وصمام ثلاثي لفتح (الموضح هنا) أو إغلاق الأنابيب، و (ج) دون انقطاع (يمين) وكسر (يسار) نصيحة شعرية جاهزة لجمع السائل الدماغي النخاعي. مرة واحدة مكسورة، ينبغي أن يكون غيض من شعري بالقطر الداخلي 0.75 مم والقطر الخارجي من 1.0 مم. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

2-تشريح الماوس

  1. تخدير الماوس.
    ملاحظة: لهذا البروتوكول و C57BL/6 اميلويد السلائف البروتين/presenilin 1 (التطبيق/PS1) المعدلة وراثيا كانت تستخدم الفئران (طراز الماوس مرض الزهايمر) وتخديره مع 4% كلورال هيدرات (في dH20) في 10 ميليلتر/غرام وزن الماوس عبر داخل حقن.
  2. عند تخديره تماما، ضمان أن يتم تخديره الماوس على نحو كاف. يتم تنفيذ استجابة الانسحاب إلى أخمص القدمين قرصه، بتمديد أطرافه هند قليلاً ومعسر أصابع القدم ومشاهدة استجابة انسحاب، لأؤكد للتخدير الكافي. تحقق من معسر جميع أطرافه الأربعة؛ إذا لم يكن هناك أي رد فعل من تخديره الماوس بشكل صحيح. قص وتشذيب الشعر في الجزء الخلفي من الرأس للماوس فوق العينين، وبين الأذنين إلى أسفل الرقبة باستخدام مقص تشريح (الشكل 2A). وبدلاً من ذلك، يمكن استخدام مقص أو كريم مزيل الشعر للمساعدة في إزالة الشعر.
  3. تأمين رأس الماوس باستخدام محول ماوس (مؤخرة الرأس مواجهة مع الآنف وأشار إلى أسفل في ~ 45 °، الشكل 2 أ). إصلاح القضبان الإذن بين الأذنين والعينين للماوس وتشديد. تأكد من الرأس لا يمكن نقل وتأمين محكم في المحول عن طريق دفع بلطف إلى أسفل إلى رأس الماوس.
  4. إعادة فحص استجابة الانسحاب إلى أخمص القدمين رشة قبل إجراء الشق الجراحي وبصورة منتظمة بعد ذلك أن أؤكد للطائرة الجراحية التخدير. بصريا ملاحظة أي تغير في معدل التنفس أثناء الإجراء للإشارة إلى التغييرات في الطائرات للتخدير. يمكن استخدام تقنية نظيفة وغير معقمة، لهذه الجراحة غير البقاء على قيد الحياة قصيرة. باستخدام المقص والملقط المنحنية، قطع من خلال الجلد والطبقة الأولى من العضلات حتى يتم كشف قاعدة الجمجمة مع سوى طبقة رقيقة من العضلات.
    ملاحظة: قطع طريق الجلد الماوس عبر الجزء الخلفي الرقبة وثم قطع الجلد أسفل منتصف الجمجمة بين الأذنين والعينين من الماوس. الجلد والأنسجة يمكن ثم سحبها بعيداً والخروج من المنطقة عبر ماجنا تشيستيرنا.
  5. بينما العرض من خلال مجهر تشريح، بعناية تشريح بعيداً آخر رقيقة طبقات من العضلات على قاعدة الجمجمة استخدام الملقط ونقل هذه الطبقات من العضلات إلى الجانب والخروج من مجال الاهتمام. إذا كان هناك نزيف، استخدام براعم القطن لإزالة وتساعد على وقف النزيف.
  6. عندما يتعرض لها دوراً أكثر ماغنا تشيستيرنا (الثلاثي في الشكل مع عادة الأوعية الدموية الكبيرة 1-2 يمر عبر المنطقة؛ أما الجانب أو بين الأوعية الدموية الأمثل للإدراج الشعرية وجمع السائل الدماغي النخاعي، الشكل 2)، استخدم رطب براعم القطن مسح الغشاء نظيفة ومن ثم استخدام برعم القطن جافة لتجفيف المنطقة.

figure-protocol-2
رقم 2. إعداد الماوس والتشريح بالصور التمثيلية للإدراج الشعرية لجمع السائل النخاعي. إعداد الماوس جاهزة لاستخراج السائل الدماغي النخاعي مع (أ) حلق الرأس فرضت في مكان لتشريح و (ب) تفاصيل الصورة (العرض x 10) دوراً الماوس تشريح تغطي ماجنا تشيستيرنا (سهم متقطع يظهر الأوعية الدموية يمر عبر المنطقة و سهم خالص يظهر المجال الأمثل للإدراج الشعرية). الصور مفصلة (العرض x 10) (ج) شحذ غيض زجاج الشعرية المنحازة ضد دوراً السيستيرنا ماجنا، (د) النقطة الذي مدبب شعري تقريبا دوراً، مع بعض المقاومة من دوراً، و (ه) نصيحة الشعرية استغلالها من خلال دوراً لجمع السائل الدماغي النخاعي. يجب أن يكون السائل الدماغي النخاعي سائل واضحة جمعت في الزجاج الشعرية (سهم منقط). تشير إلى كافة أشرطة الجدول في أسفل كل صورة مجهر الحق 100 ميكرومتر. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

3-الخدمات القطرية جمع من تخديره من الماوس

  1. محاذاة الشعرية الزجاج إلى الجزء الخلفي الرأس الماوس حتى لا يكون نقطة شحذ خلف الغشاء في ~ زاوية 30-45 درجة مئوية (الشكل 2).
  2. يغرق حقنه مرة واحدة أو بضع مرات، ورسم حقنه ~ 100-200 ميليلتر (للتأكد من أن هناك لا الملوثات، وهناك ضغط سلبي في الزجاج الشعرية).
  3. استخدام ميكرومانيبولاتور، الانتقال الشعرية تلميح أقرب للغشاء حتى يمكن رؤية المقاومة، ولكن لا ثقب ذلك (الشكل 2D).
  4. مرة واحدة ويعتبر المقاومة بين الحافة شعري والغشاء، بلطف اضغط الأنبوبة الشعرية عبر الغشاء من يطرق على عناصر التحكم ميكرومانيبولاتور. استخدام المجهر لرؤية شحذ نقطة ثقب الشعرية إلى ماجنا السيستيرنا. تلقائياً يمكن استخلاصها الخدمات القطرية في الأنبوبة الشعرية مرة واحدة وقد تم فتح ثقب (الشكل 2E).
  5. اترك شعري ببطء جمع السائل الدماغي النخاعي. إذا تم إيقاف الخدمات القطرية استخلاص، رسم المحاقن تصل كمية صغيرة ببطء (~ 50 ميليلتر) لخلق ضغط سلبي أكثر في شعري لاستخراج خارج إطار الخدمات القطرية.
    ملاحظة: بدلاً من ذلك، الشعرية يمكن أن تكون بلطف وبطء انسحبت من الدماغ باستخدام عناصر التحكم ميكرومانيبولاتور الجميلة للسماح لقوات الأمن المركزي تتدفق شعري مرة أخرى. مبلغ إجمالي قدرة ~ 10-15 ميليلتر للخدمات القطرية (~ 3-4 سم الشعرية) يأخذ ~ 10-30 دقيقة، وفي بعض الأحيان 20 ميليلتر أو أكثر يمكن جمعها. على الرغم من أن ليس من الضروري على الإطلاق، ينصح باستخدام لوحة حرارة أثناء جمع السائل الدماغي النخاعي. تم تنفيذ مجموعة الخدمات القطرية في درجة حرارة الغرفة (~ 23 درجة مئوية).
  6. حالما يتم جمع كمية السائل النخاعي المطلوب، قم بإغلاق الأنبوب بتحويل صمام ثلاثي لإغلاق (لإيقاف الرسم خارج إطار الخدمات القطرية).
  7. إخراج حقنه متصلة بالأنابيب، وثم فتح وإغلاق الأنبوب (لخلق ضغط التعادل في الشعرية وأنابيب ومنطقة خارج شعري). إعادة المحاقن مع صمام ثلاثي، لكن لا يغرق المحاقن.
  8. بلطف إزالة شعري الزجاج من ميكرومانيبولاتور باستخدام الماوس.
  9. ضع أنبوب جمع (1.5 مل microtubes مع 1 ميليلتر من 20 x مثبط البروتياز) تحت النقطة شحذ الزجاج الشعرية.
  10. فتح الأنبوب ويغرق حقنه بلطف: الخدمات القطرية ينبغي أن تنبثق من الشعرية وإلى أنبوب جمع.
  11. بعد جمع، بسرعة الطرد المركزي (نبض تدور 5 s بالسرعة القصوى باستخدام أجهزة الطرد مركزي مصغرة) الخدمات القطرية لخلط العينة مع مثبط البروتياز في الجزء السفلي من أنبوب جمع.
    ملاحظة: يمكن أن تكون عينات السائل الدماغي النخاعي الكوتيد ثم تخزينها لمزيد من التحليل في-80 درجة مئوية. يمكن تشريح بقية الماوس للأنسجة الأخرى، مثل المخ والحبل الشوكي. الماوس لا يزال حيا في هذه المرحلة، وهكذا الدم يمكن أن تجمع أيضا، إذا لزم الأمر.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

باستخدام الإجراء المذكورة هنا (الشكل 1 و الشكل 2)، ينبغي أن يكون السائل الدماغي النخاعي جمعت فورا في شعري واضحة (2E الشكل)، ولا الوردي أو الأحمر. إذا لم يكن هناك وردي لمسحه حمراء للسائل التي تم جمعها في شعري، ثم كان هناك تلوث بالدم.

كمثال لتطبيق عينة السائل الدماغي النخاعي جمعت بهذه الطريقة، تم قياس مستويات البروتين اميلويد بيتا (Aβ) استخدا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويصف هذا البروتوكول بالتفصيل أسلوب الذي يحسن في الأساليب الحالية10 جمع السائل الدماغي النخاعي لتقليل التلوث من الدم، والسماح لمجموعة وفيرة من الخدمات القطرية (في المتوسط ~ يمكن الحصول على 10-15 ميليلتر) من الفئران. عند كسر تلميح الشعرية، غيض من الشعرية لا ينبغي صغيرة جداً (كما ثم الخدمات القطرية سيتم استخراج ببطء شديد) أو كبير جداً (سوف لا تكون كافية لجمع الخدمات القطرية بشكل جيد والأنسجة يمكن أن تصبح استقرت في شعري). وينبغي توخي الحذر عند تشريح المنطقة لجمع السائل الدماغي النخاعي: ينبغي وقف أي نز...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

كان يؤيد هذا العمل "الوطنية الطبيعية مؤسسة العلوم الصينية" (81650110527، 81371400) و "الوطنية المفتاح الأساسي البحث برنامج الصين" (2013CB530900).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
هيدرات الكلورال (تستخدم كمخدر)شركة Sinopharm Chemicals Reagen Co., Ltd.30037517رقم CAS 302-17-0.
مقص تشريح66 تقنيةالرؤية 54002
تشريح ملقط منحني66 تقنيةالرؤية 53072
تشريح ملقط مستقيم66 تقنية الرؤية53070
محول ماوس (مع قضبان أذن)صنع في المنزل.غير متاح معداتمماثلة من World Precision Instruments.
تشريح المجهرMeiji LabaxModel 15381
MicromanipulatorWorld Precision InstrumentsM3301
قاعدة مغناطيسية للمناور الدقيقKanetecMB-K
الشعيرات الدموية الزجاجيةWorld PrecisionInstruments 1B100-4
مجتذب الماصاتالدقيقة Sutter Instrumentsموديل P-1000
محاقن (1 مل)02024692تانسول1 مل.
الأنابيب الدقيقة (1.5 مل)AxygenMCT-150-C
كالبيوكيمالخاليمن EDTA 539134
الإنسان A & beta ؛ 42 مجموعة ELISAKHB3441Invitrogen
(أنابيب تفلون)World Precision InstrumentsMMP-KITتم الحصول عليها من مجموعة الحقن المجهري ومرفقة بحامل الشعيرات الدموية والحقنة.
أجهزة الطرد المركزي الصغيرةTiangen BiotechOSE-MC8
براعم القطنالتي تم الحصول عليها من أي متجر / صيدلية منزلية.غير متاح
مجموعة كوكتيل مثبطات البروتياز III أنابيب

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Anoop, A., Singh, P. K., Jacob, R. S., Maji, S. K. CSF Biomarkers for Alzheimer's Disease Diagnosis. Int. J. Alzheimers. Dis. 2010, 1-12 (2010).
  2. Blennow, K., Hampel, H., Weiner, M., Zetterberg, H. Cerebrospinal fluid and plasma biomarkers in Alzheimer disease. Nat. Rev. Neurol. 6 (3), 131-144 (2010).
  3. Schoonenboom, N. S. M., et al. Cerebrospinal fluid markers for differential dementia diagnosis in a large memory clinic cohort. Neurology. 78 (1), 47-54 (2012).
  4. Molinuevo, J. L., et al. The clinical use of cerebrospinal fluid biomarker testing for Alzheimer's disease diagnosis: A consensus paper from the Alzheimer's Biomarkers Standardization Initiative. Alzheimer's Dement. 10 (6), 808-817 (2014).
  5. Fagan, A. M. CSF biomarkers of Alzheimer's disease: impact on disease concept, diagnosis, and clinical trial design. Adv. Geriatr. 2014, 1-14 (2014).
  6. Ramautar, R., et al. Metabolic profiling of mouse cerebrospinal fluid by sheathless CE-MS. Anal. Bioanal. Chem. 404 (10), 2895-2900 (2012).
  7. Liu, L., Herukka, S., Minkeviciene, R., Vangreon, T., Tanila, H. Longitudinal observation on CSF Aβ42 levels in young to middle-aged amyloid precursor protein/presenilin-1 doubly transgenic mice. Neurobiol. Dis. 17 (3), 516-523 (2004).
  8. Schelle, J., et al. Prevention of tau increase in cerebrospinal fluid of APP transgenic mice suggests downstream effect of BACE1 inhibition. Alzheimer's Dement. , (2016).
  9. You, J. -S., Gelfanova, V., Knierman, M. D., Witzmann, F. A., Wang, M., Hale, J. E. The impact of blood contamination on the proteome of cerebrospinal fluid. Proteomics. 5 (1), 290-296 (2005).
  10. Liu, L., Duff, K. A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse. J. Vis. Exp. (21), (2008).
  11. Maia, L. F., et al. Changes in amyloid-β and Tau in the cerebrospinal fluid of transgenic mice overexpressing amyloid precursor protein. Sci. Transl. Med. 5 (194), 194re2(2013).
  12. Oshio, K. Reduced cerebrospinal fluid production and intracranial pressure in mice lacking choroid plexus water channel Aquaporin-1. FASEB J. , (2004).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Cerebrospinal Fluid CollectionMouse CSF ExtractionCisterna Magna AccessMicromanipulator TechniqueBlood Contamination ReductionCSF Sample PurificationProtease Inhibitor AdditionStereotaxic Frame UseDissecting Microscope ViewCapillary Tip Preparation

مقالات ذات صلة