هي المورثات هوميوبوكس الجينات التنظيمية التي غالباً ما ترتبط مع الأورام السرطانية في الكائنات الحية الكبار. نحن التحقيق في التعبير عنها مقارنة بالمناعي وتحليل PCR في الوقت الحقيقي، في ماكس العادي والتهاب الآنف والأورام سينوناسال من أجل استخدامها كأهداف تشخيصية وعلاجية ممكنة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تحديد OTX1 و OTX2 كاثنين من المؤشرات الجزيئية المحتملة للأورام السرطانية سينوناسال و Neuroblastomas حاسة الشم
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
يتم التعبير عن المورثات هوميوبوكس (غبطة) أوتكس أثناء morphogenesis الجنينية وتنمية حاسة الشم ظهارة في الكائنات الحية الكبار. وكثيراً ما تتصل بالطفرات التي تحدث في هذه الجينات توموريجينيسيس في الإنسان. لا تتوفر بيانات اليوم فيما يتعلق بالعلاقة الممكنة بين الجينات أوتكس وأورام في تجويف الآنف. والهدف من هذا العمل أن نفهم إذا كان يمكن اعتبار OTX1 و OTX2 الواسمات الجزيئية في تطوير أورام الآنف. اخترنا أدينوكارسينوماس الآنف وسينوناسال للتحقيق في التعبير عن الجينات OTX1 و OTX2 من خلال المناعي وتحاليل PCR الوقت الحقيقي. وتغيب OTX1 و OTX2 في جميع عينات من سينوناسال المعوية من نوع "أدينوكارسينوماس" (إيتاكس). تم تحديد مرناً OTX1 فقط في عدم المعوية "نوع أدينوكارسينوماس" (نيتاكس) في حين أعرب مرناً OTX2 إلا في "نيوروبلاستوماس حاسة الشم" (الوظائف). لقد أظهرنا أن التعبير الجيني التفاضلي للجينات OTX1 و OTX2 قد تكون علامة جزيئية مفيدة للتمييز بين أنواع مختلفة من الأورام سينوناسال.
المقدمة
أوتكس غبطة الجينات هي المناظرة الفقاريات الجينات المورفولوجية أورثودينتيكلي (أوتد) وهي ترميز لعوامل النسخ التي عادة ما يتم التعبير عنها أثناء morphogenesis الجنينية، ولكن يمكن أيضا أن أعربوا في الكائن الحي الكبار مع وظائف مختلفة . خلال التطور الجنيني يسيطرون على تحديد هوية الخلية وتمايز الخلية، وتحديد المواقع من axis¹ الجسم. وتشمل الأسرة أوتكس الجينات OTX1 و OTX2 التي تعرض وظائف مختلفة. وتشارك OTX1 في المخ ونمو الأعضاء الحسية. في الكائن الحي الكبار، ويتم التعبير عن في الحواس ويتم نسخها عند مستويات منخفضة في الفص الأمامي من الغدة النخامية2؛ كما أنها تلعب دوراً في هيماتوبويسيس، التي أعرب عنها في plurip....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
جميع الدراسات التي أجريت وفقا لإعلان هلسنكي (1975) كتب الموافقة عن علم، ووافقت عليها "اللجنة الأخلاقية" جامعة إينسوبريا في فاريزي.
1-جمع العينات
- جمع وتقسيم جميع العينات البشرية Formalin-Fixed Paraffin-Embedded (فب) إلى مجموعات فرعية مختلفة وفقا لتصنيف منظمة الصحة العالمية ل الرأس والرقبة الأورام14.
ملاحظة: هنا استخدمنا العينات التالية: الغشاء المخاطي سينوناسال الطبيعي كعنصر تحكم (10 عينات)؛ الورم الحليمي مقلوب (IP, رمز التصنيف الدولي للأمراض-O 8121/1)؛ سينوناسال إيتاك (رمز التصنيف الدولي للأمراض-O 8144/3، عينات 32)؛ نيتاك (رمز التصنيف الدولي للأمراض-O 8140/3، عينات 12)؛ سرطان غدانيه كيسي....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
لقد لاحظنا في الغشاء المخاطي الطبيعي مفاعليه نووية قوية ومتجانسة للجينات أوتكس في ظهارة تنفسية من نوع بسيودوستراتيفيد عضو وفي الخلايا الغدية submucosal (الشكل 1A). وجدنا أن أبرز تعبير النووية ل OTX1 في جميع عينات نيتاكس (الشكل 1B)، بينما يذكر أو تغيب إيمونوريكتيفيتي في إيتاكس (الشكل 1). إيمونوريكتيفيتي مكثفة كان حاضرا في جميع الوظائف (الشكل 1)؛ بدنيكس، أوتكس التعبير تفاو.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
وتبين هذه الدراسة لأول مرة أنه، استناداً إلى مستويات مرناً، يتم التعبير عن الجينات غبطة OTX1 و OTX2 في الغشاء المخاطي سينوناسال العادي والغدد سوبموكوسال، التهابات الزوائد الحليمية شنيديريان سينوناسال، وفي مختلف الظهارية ونيوروكتوديرمال الأورام الخبيثة، بما في ذلك الأورام السرطانية صدفية، adenocarcinomas سينوناسال نوع غير المعوية وأورام الغدة اللعابية من نوع، والأورام الهرمونية العصبية وإضافات.
التعديلات واستكشاف الأخطاء وإصلاحها:
لتجنب تدهور الجيش الملكي النيبالي، أجري.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
شكر وتقدير
هذا العمل كان يدعمها مركز غراندي سترومينتي جامعة dell'Insubria، مؤسسة التنسيق ديل فارستو، مؤسسة ديل مونتي دي لومبارديا، ومؤسسة Anna فيلا ه روسكوني فيليس.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| RecoverAll Total Acid Nucleic Isolation | Applied Biosystem | AM1975 | |
| النسخ العكسي cDNA عالية السعة | للنظام الحيوي المطبق | 4368814 | |
| TaqMan Universal PCR Master Mix ، no AmpErase UNG | Applied Biosystem | 4326614 | |
| ABI Prism 7000 ؛ | مسبار النظام الحيوي | التطبيقي 270001857 | |
| ACTB | النظام الحيوي | التطبيقي خارج الإنتاج. تسلسل محمي بموجب حقوق الطبع والنشر | |
| مسبار OTX1 | النظام الحيوي | التطبيقي خارج الإنتاج. تسلسل محمي بموجب حقوق الطبع والنشر | |
| مسبار OTX2 | النظام الحيوي | التطبيقي خارج الإنتاج. التسلسل محمي بموجب حقوق الطبع والنشر | |
| Acqueous Hydrogen Peroxide | Merk | 1072090250 | |
| Citrate Buffer | Sigma-Aldrich | 20276292 | |
| Triton | Sigma-Aldrich | 101473728 | |
| Tris | Merk | 108382 | |
| NaCl | Merk | 106404 | |
| Goat Anti-OTX2 مختبرات ناقلات الأجسام المضادة | خارج الإنتاج. رقم الفهرس غير متوفر | ||
| مختبرات ناقلات | الأجسام المضادة للأرانب | BA5000 | |
| ABC-بيروكسيداز مركب | ناقلات | PK6100 | |
| 3،3 '-diaminobenzidine رباعي هيدروكلوريد (DAB) | سيجما ألدريتش | D5905 | |
| هاريس هيماتوكسيلين | بيوبتيكا | 0506004 / L | |
| Pertek | Kaltek SRL | 1560 | |
| BioClear | Bioptica | W01030799 |
المراجع
- Boncinelli, E., Simeone, A., Acampora, D., Gulisano, M. Homeobox genes in the developing central nervous system. Ann genet. 36 (1), 30-37 (1993).
- Omodei, D., et al. Expression of the Brain Transcription Factor....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
