نموذج أورثوتوبيك طرحه ونيون مورين سينجينيك المعتمدة على الاندروجين والاخصاء مقاومة سرطان البروستاتا

ويقدر سرطان البروستاتا لديها أعلى معدل لانتشار (الرجال 161,360) وتتسبب في وفيات السرطان ثالث أهم الذكور (الرجال 84,590) في عام 2017¹. عند التشخيص، وأورام البروستاتا المعتمدة على الاندروجين، وتتم معاملتها بواسطة عملية استئصال غدة البروستاتا الجراحي، العلاج بالإشعاع، و/أو العلاج الاندروجين الحرمان (ADT)، بعد كل معاملة غير مقترنة مع متعددة مضاعفات والمراضات الكبرى^{2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10}-وعلى الرغم من تراجع الورم بعد ADT، تتكرر ما يقرب من جميع الأورام كسرطان البروستاتا المقاوم للخصي (قانون الإجراءات الجنائية). وفي هذه المرحلة، تشمل العلاجات الموافق عليها دوسيتاكسيل، تي سيبوليوسيل المناعي، والجزيئات الصغيرة المضادة للالاندروجين انزالوتاميدي abiraterone، بعد العلاج الفردي لا يمنح فائدة البقاء على قيد الحياة لأكثر من¹¹شهرا 5.2^{، 12 , 13 , 14 , 15 , 16 , 17}-ولذلك تحتاج الرجال في جميع مراحل الإصابة بسرطان البروستاتا خيارات تحسين العلاج وإدارة المراضات، لمرض ما قبل السريرية المثلى التي النمذجة أمر حاسم.

مع الإجراء الصحيح، يمكن أن تغرس خطوط خلايا سرطان البروستاتا جراحيا في البروستاتا مورين، مما يؤدي إلى تطوير أورام أورثوتوبيك سينجينيك أو إكسينوجينيك على حد سواء. النمذجة الورم أورثوتوبيك مثالي لكل ورم البيولوجيا والمخدرات بحوث التنمية، مما يسمح للتنمية الورم مع ممثل سريرياً وورم المكروية (TME). قد أثبتت الدراسات السابقة أن تحت الجلد (الليبي) الأورام المفرج غيرت ورم، مما يؤدي إلى استجابات سريرياً دقيقة التفاضلية وأقل للأوعية مكافحة العلاجات^18،19. وبالإضافة إلى ذلك، دراسات متعددة قد لاحظ تزايد أو تناقص فعالية تشريعات متعددة في علاج نفس الخط الخليوي، اعتماداً على ما إذا كان يدير الليبي أو أورثوتوبيكالي، هذه الأخيرة التي تمثل أفضل ما يرى في الإنسان سرطان^20،،من²¹²². علاوة على ذلك، فقط في نموذج أورثوتوبيك لسرطان القولون، ولكن ليس في النموذج الليبي، الأورام تنتج إنزيمات بوليمرات الصحيحة اللازمة لحمل خبيث²³. وأخيراً، كما إيمونوثيرابيس تستمر في الظهور في طليعة علاج السرطان، وخاصة وأنها لم تقدم فائدة كبيرة لسرطان البروستاتا^24،25، نماذج ما قبل السريرية سينجينيك مع TME دقيقة و تجفيف الغدد الليمفاوية في الأشخاص المضيفين الحاسمة.

هناك العديد من العوامل المسؤولة عن هذه النتائج غير متناسقة استناداً إلى موقع الورم. مع TME مختلفة، الخلايا السرطانية تتعرض لمختلف الأنسجة على حدة البطانة وغيرت الأوعية، مما يؤثر على الورم التنمية^26،27. الأورام أورثوتوبيك مع TME الصحيح تسمح بإيصال الأدوية ذات الصلة سريرياً وظروف التاكسج، وتقييم العلاجات المضادة-الأوعية²⁸. بينما تحتوي نماذج المهندسة وراثيا (الأحجار الكريمة) على TME دقيقة، أنها تتطلب فترة طويلة مرات لتربية وتكلفة عالية، وهي غالباً ما تستند إلى التلاعب الجينات واحد أو عدد قليل من خرج أو أوفيريكسبريسيد ما يتجاوز المستويات ذات الصلة سريرياً. وفي المقابل، خطوط خلايا سرطان البروستاتا البشرية أو مورين المستخدمة في الأورام أورثوتوبيك، مثل الأورام البشرية، معقدة أكثر وراثيا سواء داخل خلايا مفردة أو في عرض عدم التجانس بين الخلايا^29،30. أيضا خلافا للأحجار الكريمة، أورثوتوبيك سرطان الخلية خطوط يمكن إجراء هندسة عكسية للتعبير عن طرائق التصوير أو زيادة أو انخفاض مستويات جزيئات أخرى من الاهتمام، و في المختبر و في فيفو النتائج التجريبية يمكن مقارنتها مباشرة. يمكن أيضا أن تشكل الأورام أورثوتوبيك من الخلايا الأولية المستمدة من المريض. هنا، نحن التقرير منهجية إجراء الحقن داخل البروستاتا من خلايا سرطان البروستات التي تشكل أورثوتوبيك المعتمدة على الاندروجين الأورام، وبعد عملية الاخصاء، تتكرر أورثوتوبيك قانون الإجراءات الجنائية.

كلها الحيوان الإجراءات المبينة في هذا البروتوكول التي يتعين القيام بها وفقا للقواعد الأخلاقية والموافقة على "رعاية الحيوان المؤسسية" الجامعة المناسبة واستخدام اللجنة (إياكوك).

1-إعداد المواد الجراحية والخلايا السرطانية

1. قبل اليوم من الجراحة، اﻷوتوكﻻف مقص تشريح الصغرى، الملقط جرايفى، جرايفى ملقط الأنسجة، مع قطع خياطة حامل الإبرة، والعدد المناسب من الستائر. تعقيم 50 ميليلتر المحاقن والإبر 28-قياس بغاز أكسيد الإيثيلين (الشكل 1).
2. قبل اليوم الجراحة، وثقافة الحد الأقصى لحركة الخلايا في أطباق 10 سم في ربمي تكملة مع 10% مصل بقرى الجنين (FBS) و 1% البنسلين/ستربتوميسين (P/S) في 37 درجة مئوية 5% CO₂ حاضنة. لرصد الورم طرحه و/أو الفلورسنت، ترانسفيكت الخلايا 293T مع متجهات مناسبة وبعد ذلك ترانسدوسي كاب حركة الخلايا مع 0.45 ميكرومتر تصفية lentivirus³¹. فرز الخلايا لتوليد خط خلية مستقرة مع الإيجابية توصيل 100%.
   ملاحظة: تنفيذ جميع زراعة الأنسجة تحت ظروف معقمة، والتحقق من أن جميع خطوط الخلايا الحرة مفطورة. هو ترانسدوسيد خط خلية سرطان البروستاتا مورين المستخدمة في هذه الدراسة، والحد الأقصى لحركة³²، للتعبير عن ستابلي لوسيفراس اليراع ومشري على حد سواء. الحد الأقصى لحركة الخلية خط المحطة الفضائية الدولية المعزولة من ج-حركة-overexpressing مرحبا-حركة الماوس، وهذه الخلايا تحتوي مستقبلات الاندروجين تضخيم (ع)، التي هي المعتمدة على الاندروجين³² وتشكل الأورام اللجنة بعد عملية الاخصاء مورين³³. جميع الفئران في هذه الدراسة هي القديمة في الأسبوع 6-8 ذكور الفئران ففب/نيو جيرسي. يمكن استخدام خطوط خلايا سرطان البروستاتا مورين البديلة مع الفئران الخلفية الوراثية المناسبة، فضلا عن خطوط خلايا سرطان البروستاتا البشرية أو خلايا سرطان البروستاتا الأولية المستمدة من المريض مع الفئران العوز. وينبغي تحديد العدد الأمثل للخلايا للحقنة تجريبيا لخطوط خلايا بديلة. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن أن تستخدم التصوير الطرائق البديلة لتصور الأورام، بما في ذلك التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) أو التصوير المقطعي بالبوزيترون (PET) أو التصوير المقطعي (CT)، فضلا عن التجارة والنقل كبديل مشري.
3. في الليلة السابقة للجراحة، ووضع مصفوفة الغشاء ماتريجيل وخالية من الفينول الحمراء على الجليد في 4 درجات مئوية لإذابة الجليد.
4. في يوم الجراحة، جمع الخلايا بغسلها مع الفوسفات مخزنة المالحة (PBS) وفصل مع التربسين-يدتا 0.25%. تحييد التربسين مع ربمي مع 10% FBS و 1% P/s.
5. الطرد المركزي الخلايا في 400 غرام x لمدة 5 دقائق.
6. تغسل الخلايا مع 10 مل ربمي دون FBS أو P/s.
7. عد الخلايا وريسوسبيند الخلايا في برنامج تلفزيوني بتركيز 6.67x10⁷ خلايا/مل (1 × 10⁶ خلايا/15 ميليلتر).
8. إضافة وحدة تخزين متساوية من ماتريجيل لإنشاء تعليق خلية برنامج تلفزيوني/ماتريجيل 1:1 بتركيز 1 × 10⁶ خلايا/30 ميليلتر نهائية، وإبقاء الخلايا على الجليد حتى الحقن لمنع التجميد.
   ملاحظة: إجراء الحقن داخل البروستاتا داخل ح 3 من إعداد ماتريجيل تعليق خلية. إذا كان أداء الحقن داخل البروستاتا في الفئران أكثر من 5، كرر الخطوات المذكورة أعلاه لإعداد تعليق خلية ماتريجيل طازجة.

2-إعداد الماوس قبل العملية

ملاحظة: البيت الفئران في مرفق جامعة الحيوان لمدة أسبوع واحد على الأقل قبل الجراحة للسماح للتكيف الملائم وتقليل الإجهاد الحيوانية. يتم تنفيذ الخطوات 2.1-2.6 مساعد الجراح. يتم تنفيذ جميع الخطوات الجراحية اللاحقة بالجراح باستخدام قفازات معقمة والأدوات الجراحية مع تقنية تعقيم.

1. تخدير الفئران مع إيسوفلوراني (2-5% لتحريض عبر الدائرة، 1-3% للصيانة عن طريق الآنف مخروط). تحقق من الاستقراء الكامل بفقدان إصبع قرصه العاكسة.
2. وزن الفئران وإدارتها على الأقل 0.05 مغ/كغ البوبرينورفين مسكن الليبي
   ملاحظة: وزن الماوس إيه تو زيرو ز مثالي لنجاح الحقن داخل البروستاتا.
3. تطبيق مرهم العيون تزييت لكلتا العينين لمنع تجفيف القرنية.
4. حلق جميع الفراء من البطن.
5. تعقيم البطن بثلاث جولات من تطبيق التعميم فرك الجراحية استخدام منصات العقيمة غير الملتزمة تليها مناديل الكحول العقيمة. السماح للبطن لتجف.
   ملاحظة: لبقية العملية الجراحية، يمكن فقط قفازات معقمة والأدوات الجراحية اتصل البطن الماوس معقمة.
6. نقل الماوس مستلق على سطح نظيف على وسادة تدفئة مباشرة تحت مجهر جراحي نظيفة والهدف.
7. تغطية الماوس مع ثني عقيمة مع ثقب صغير قص على البطن.

3-داخل البروستاتا حقن

ملاحظة: جميع الخطوات الجراحية تحت ظروف معقمة. ضبط المجهر، موضع الماوس، أو أي يجب أن يتم كائنات أخرى غير معقمة بمساعد الجراح.

1. القيام حوالي 1 سم في شق الجلد الخارجي على طول خط الوسط البطن متفوقة على القضيب والغدد بريبوتيال (الشكل 1).
2. فصل النسيج الضام بين الجلد الخارجي البطن وعضلات البطن الداخلية عن طريق فتح المقص بين الطبقات.
3. تنفيذ شق مماثلة لعضلات البطن الداخلية أثناء استخدام الملقط لرفع الجهاز العضلي لتجنب ثقب الأمعاء أو المثانة (الشكل 1).
4. تحديد موقع أحد الحويصلات ثنائية (الشكل 1A، الأبيض)/الفصوص البروستاتا الأمامي (الشكل 1A، الأسود)، التي غالباً ما تكون الخلفي والجانبي أعلى قليلاً بالمثانة (الشكل 1A، الأصفر)، ولكن هذا قد تختلف بين الفئران . الفصوص البروستاتا الأمامي المرفقة إلى انحناء أقل من الحويصلات بيضاء وشفافة.
5. وتثير بلطف غيض حويصلة استخدام الملقط الأنسجة جرايفى لخلق التوتر في الأنسجة دون ثقب حويصلة (الشكل 1E).
6. خلط الحل ماتريجيل الحد الأقصى لحركة بالغير اليهود بيبيتينج (التي تؤديها مساعد الجراح)، كما قد يكون القريبون الخلايا، ونضح 30 ميليلتر (1 × 10⁶ خلايا) ببطء إلى الإبرة لتجنب فقاعات الهواء.
7. إدراج المجسم مشطوف الحواف الموازية إبرة المحور الطويل للفص البروستاتا الأمامي بعناية. ببطء بحقن 30 ميليلتر الفص وتتراجع ببطء الإبرة لمنع التسرب (الشكل 1F). تحقق من حقن الكافية التي تحفل الفص الأمامي البروستاتا (الشكل 1).
8. عقد بعناية في حويصلة وحقن الفص البروستاتا خارج الماوس لحوالي 30 ثانية للسماح ماتريجيل على ترسيخ جزئيا داخل الفص. وخلال هذا الوقت، جمع أي تسرب حل الخلية في البطن استخدام من بوليستر عقيمة يميل قضيب لمنع حدوث تطور الورم غير أورثوتوبيك، دون الضغط على الفص البروستاتا حقن.
9. بعناية العودة حويصلة والفص البروستاتا حقنه في البطن دون الضغط على الفص. استبدال أي الأنسجة الخارجية.
10. إجراء خياطة الجروح المستمر لإغلاق عضلات البطن الداخلية مع 5-0 فيكريل القطع عكس الامتصاص إبرة خياطة الجروح.
11. إجراء خياطة الجروح توقف لإغلاق الجلد البطن الخارجي مع 4-0 شعيرات النايلون غير امتصاص قطع عكس إبرة خياطة الجروح.
    ملاحظة: دبابيس عيار 9 ملم معقمة يمكن أيضا استخدام لإغلاق الجلد البطن الخارجي. ومع ذلك، خلافا لخياطة الجروح، أنها تتداخل مع أي ورم طرحه ونيون اللاحقة التصوير إشارة.
12. تنظيف جميع الأدوات مع مناديل معقمة الإيثانول (افتتح مساعد الجراح) ووضعها في معقم حبة زجاج للسماح س. 30 الأدوات تجف قبل استخدام الماوس القادم.
13. مسح المحاقن والإبر في المحلول الملحي العقيمة (افتتح مساعد الجراح) لمنع انسداد ببقايا ماتريجيل.
    ملاحظة: مساعد جراح أن يكون حاضرا لجميع العمليات، القيام بإعداد الماوس قبل العملية كلها غير معقمة والرعاية الماوس بعد العمليات الجراحية، وكذلك فيما يتعلق بالمزيج الحل ماتريجيل كاب حركة قبل الحقن. لتقليل الوقت، كما سيتطلب إجراءات الماوس داخل البروستات كل 20-30 دقيقة، يمكن أن يبدأ مساعد الجراح إعداد الماوس التالية كما هو خياطة الجراح الماوس الحالي.

4-بعد العمليات الجراحية الماوس الرعاية

1. إدارة 1 مغ/كغ ميلوكسيكام مسكن الليبي فورا وح 24 48 ساعة بعد الجراحة.
2. السماح للفئران لاسترداد في قفص مع الأسرة لا توضع في منتصف الطريق على وسادة تدفئة. مراقبة الفئران لمدة 30 دقيقة على الأقل بعد الجراحة حتى أنها تستعيد التنقل العادي والنشاط، بعد التي وضعها في قفص نظيف مع المواد الغذائية على أرضية القفص.
3. كذلك رصد الفئران يوميا لالتئام سليم ووزن الجسم والاستمالة وأمبوليشن بعد عملية جراحية. منفصلة من الفئران في أقفاص فردية على أي أدلة للقتال.
4. قم بإزالة أية خيوط المتبقية في غضون 14 يوما بعد الجراحة.

5-طرحه الورم التصوير

1. إعداد العقيمة التي تمت تصفيتها نا⁺ أو ك⁺ د-لوسيفرين، كما وصف من قبل الشركة المصنعة والمحمية من الضوء.
2. حقن الفئران داخل بيريتونيلي مع 10 ميليلتر/غرام من وزن الجسم من لوسيفرين.
3. على الأقل 10 دقيقة في وقت لاحق، الفئران الصورة مع "نظام التصوير الطيف إيفيس"، كما تم وصفه سابقا^34،35.
4. تحليل الصور باستخدام "البرمجيات الصورة الحية"، كما هو موضح سابقا^34،35.
   ملاحظة: إيفيس التصوير تحليل مفيد لتحديد نجاح الحقن داخل البروستاتا والتنمية الورم الأولى لتطبيع العبء الورم بين المجموعات التجريبية. بيد اعتماداً على كثافة إشارة طرحه أو الفلورسنت، قد يسبب تشبع هضبة في التحديد الكمي الصورة على الرغم من زيادة حجم الورم الفعلية. ولذلك، في المراحل المتأخرة من نمو الورم، تصوير إيفيس قد يكون أكثر فائدة لتحديد الانخفاض في حجم الورم عند نجاح العلاج بدلاً من الزيادات في حجم بعد تشبع الصورة.

6-ورم في جمع وتحليل الورم وبقاء نقطة النهاية

1. إذا جمع الورم لتحليلها، معاملة إنسانية euthanize الفئران بالتعرض₂ CO والتفكك عنق الرحم الثانوي، أو بأساليب بديلة IACUC وافق، وتشريح الأورام من البطن. وينبغي أن الأورام أورثوتوبيكالي الموجود في البروستاتا.
   ملاحظة: الأورام تعلق على جدار البطن الأمامي أو تبذر في جميع أنحاء البطن تشير إلى الحقن داخل البروستاتا الفقراء أو راشح، ولا ينبغي أن تعتبر الأورام أورثوتوبيك.
2. وزن الأورام.
3. حساب حجم الورم ك π/6 × ل × ث × ح (L = طول المحور أطول من الورم، ث = عرض عمودي، ح = الارتفاع عمودي).
4. الأورام يمكن تحليلها بعلم الأنسجة (الإصلاح في الفورمالين مخزنة محايدة 10%)، والتدفق الخلوي (إنشاء تعليق خلية مفردة)، البروتين (إعداد الأنسجة في المخزن المؤقت للمعهد الملكي)، أو الحمض النووي الريبي (فورا مكان الأنسجة في رنالاتير).
5. لتحليل المناعية، كما جمع البروستاتا تجفيف الورم الفقرة الابهري الليمفاوية (الشكل 1B، البرتقالي) والطحال.
   ملاحظة: إذا بعد الفئران للبقاء على قيد الحياة، نقطة النهاية لهذا النموذج يعرف بأنه المظهر لاستسقاء البطن النزفية³⁶ و/أو انخفض أمبوليشن والاستمالة، و/أو بيلوريكشن³⁷. تلقي التسكين قبل وبعد العمليات الجراحية (خطوات البروتوكول 2، 2، 4، 1) الفئران لتحليل البقاء على قيد الحياة ويجب أن تراقب بانتظام. يجب فصل الفئران في أقفاص فردية إذا كان أي قتال يحدث، وينبغي أن تكون إنسانية euthanized عند ظهور أي من قراءات نقطة النهاية أعلاه.

7-العمليات الجراحية الاخصاء نموذج قانون الإجراءات الجنائية

1. نموذج قانون الإجراءات الجنائية، لتنفيذ ما ورد أعلاه الحقن داخل البروستاتا البروتوكول (بروتوكول الخطوات 1-5).
2. وبعد أسبوع واحد على الأقل بعد تطور الورم، إجراء الاخصاء الجراحي عن طريق الكي، كما هو موضح سابقا³⁸.
3. رصد الانحدار الورم وتكرار بتصوير طرحه. بعد الاخصاء، الانحدار الورم سوف تحدث في غضون 3 أيام وتكرار الورم سوف تحدث داخل 30 يوما تقريبا، يمثل قانون الإجراءات الجنائية.

وفي هذه المخطوطة، نحن جراحيا حقن خط خلية سرطان البروستاتا مورين، حركة الحد الأقصى، في الفص البروستاتا الأمامي (الشكل 1A)، مما يؤدي إلى تطوير أورام البروستاتا أورثوتوبيك مع TME ذات صلة سريرياً والصحيح تجفيف البروستاتا الغدد الليمفاوية (الشكل 1B). تم إجراء هذا باستخدام مقص تشريح الصغرى جرايفى الملقط وجرايفي ملقط الأنسجة، وحامل الإبرة مع قطع خياطة، وحقنه 50 ميليلتر بإبرة 28-قياس (الشكل 1). بعد القيام حوالي 1 سم خط الوسط شق البطن أعلاه الغدد بريبوتيال (الشكل 1)، حويصلة واحدة والمرفقة من الفص الأمامي البروستاتا كانت موجودة وتخريجها (الشكل 1E) و 30 ميليلتر (1 × 106 خلايا) من كان حقن تعليق خلية برنامج تلفزيوني/ماتريجيل 1:1 في البروستاتا (الشكل 1F)، تحققت أصلاً تحفل الفص وعدم التسرب (الشكل 1).

لمراقبة نمو الورم أورثوتوبيك، نحن ستابلي transfected خلايا حركة-كاب للتعبير عن لوسيفراس اليراع ومشري، مما يسمح للأورام يعقبه غير الغازية في فيفو الإضاءة الحيوية (الشكل 2A) والأسفار (الشكل 2B)، على التوالي. واحد الحد من هذا التصوير أنه، اعتماداً على قوة الإشارة، التصوير الكمي قد تشبع في حين تواصل الورم زيادة في الحجم. ولذلك، مع إشارة عالية الشدة، هذا التصوير في فيفو أكثر فائدة لتطبيع عبء الورم في البداية عبر المجموعات التجريبية وبعد تحديد النقصان في حجم الورم بعد العلاج التجريبي. ويمكن أيضا استخدام طرائق التصوير إضافية، مثل الحيوانات الصغيرة التصوير بالرنين المغناطيسي، والحيوانات الأليفة، أو قيراط

تم تشريح الأورام أورثوتوبيك من البطن يوم 30 بعد الحقن داخل البروستاتا (الشكل 3A). ينبغي أن يكون أورام أورثوتوبيك يقع في موقع الفص البروستاتا الأمامي. ورم الجماهير في جميع أنحاء البطن أو يعلق على جدار البطن الأمامي تشير إلى الحقن داخل البروستاتا غير لائق والتسرب. مع الأسلوب السليم، يمكن تسجيل حجم الورم (الشكل 3B) والوزن (الشكل 3) مع الخطأ القياسي صغيرة نسبيا. ومع ذلك، كما لاحظ، سيكون هناك بعض التباين مع الجماهير الأورام الصغيرة والكبيرة. ولذلك، الاستخدام الأولى للمعالجة المسبقة التصوير الكمي لتحقيق التعادل عبء الورم بين الأسلحة التجريبية حاسم بالنسبة لجميع التجارب. علاوة على ذلك، كما تم حقن هذه الخلايا السرطانية مورين الأشخاص ففب/نيو جيرسي الفئران، يمكن تحليلها TME immunohistochemistry (المدينة) (أو التدفق الخلوي أو تقنيات أخرى) للخلايا التائية CD3 (3D الشكل) (أو أنواع الخلايا المناعية الأخرى). وأخيراً، هذا النموذج يوفر نقطة موضوعية البقاء على قيد الحياة، ك استسقاء البطن النزفية الأسباب جماعية كبيرة الورم الرئيسي36 (الرقم 3E) و/أو انخفض أمبوليشن والاستمالة، و/أو بيلوريكشن37. أحياناً، قد يكون سبب الوفاة أيضا بنمو الأورام تمنع إخراج البول.

وأخيراً، يمكن أن تستخدم هذا الطراز لدراسة سرطان البروستاتا المعتمدة على الاندروجين وقانون الإجراءات الجنائية، هذه الأخيرة التي تمنح سوء التشخيص وهو في حاجة إلى خيارات العلاج رواية. بعد تطور الورم أورثوتوبيك، جراحيا مخصي الفئران، كما هو موضح سابقا38. هذا هو عملية جراحية بقاء الرئيسية الثانية، يجب إيلاء الرعاية الإضافية لرصد للانتعاش وأي أحداث سلبية أو مضاعفات. خلال 3 أيام بعد عملية الاخصاء، لوحظ تراجع الورم قوية متبوعاً بتكرار الورم اللاحقة بعد 30 يوما تقريبا، تمثل اللجنة (الشكل 4 أ). أورام قانون الإجراءات الجنائية يمكن تشريح وتحليل الأشيع، ولا يتم عرض أي تمايز الغدد الصم العصبية، كما أنها الحفاظ على مستويات عالية من ع وهي سلبية بالنسبة لعلامة الغدد الصم العصبية، سينابتوفيسين (الشكل 4 باء).

رقم 1: الفص الأمامي البروستاتا والغدد الليمفاوية تجفيف وتقنية الممثل لحقن الخلايا داخل البروستات. صور للفص البروستاتا الحق الأمامي (A) (أسود، *)، تعلق حق حويصلة منوية (أبيض)، حق لوحة الدهون (الأخضر)، الخصية والمثانة (أصفر)، (ب) الثنائية استنزاف البروستاتا الفقرة الابهري الليمفاوية (برتقالي)، (ج) مقص تشريح الصغرى جرايفى الملقط، جرايفى ملقط الأنسجة، حائز إبرة مع قطع خياطة و 50 ميليلتر حقنه بإبرة 28-قياس (من اليسار إلى اليمين)، (د) خط الوسط شقوق وحويصله (ه) والفص الأمامي البروستاتا تخريج، (و)، والحقن داخل البروستاتا، وتحفل (ز) من الفص البروستاتا الأمامي. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

الشكل 2: في فيفو تصوير الورم طرحه ونيون. (أ) لوسيفراس و (ب) مشري-وإذ يعرب عن الأورام أورثوتوبيك كاب حركة تم تصويرها باستخدام "نظام التصوير الطيف إيفيس". وكان كمياً الإضاءة الحيوية بالتدفق الإجمالي (الفوتونات/s). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

رقم 3: تحليل الورم أورثوتوبيك بحجم الورم، والوزن، علم الأنسجة لتسلل المناعية، والبقاء على قيد الحياة- الأورام أورثوتوبيك تم تشريح يوم 30 بعد الحقن داخل البروستاتا وتحليلها من قبل (أ) إجمالي التصوير، (ب) ورم حجم (π/6 × ل × ث × ح؛ L = طول المحور أطول من الورم، ث = عرض عمودي، ح = الارتفاع عمودي)، وزن الورم (ج) ، (د) CD3 المدينة (شريط مقياس = 100 ميكرومتر)، والبقاء على قيد الحياة (E) ، مع نقطة النهاية الهدف كمظهر البطن نزفية استسقاء. (أ-ب) بيانات يتم تمثيلها ك ± يعني الخطأ المعياري للوسط. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

الشكل 4: حقن داخل البروستات مع الاخصاء الجراحي اللاحقة نموذج سرطان البروستاتا المعتمدة على الاندروجين وقانون الإجراءات الجنائية- (أ) تم تصويرها الفئران التي تحمل أورثوتوبيك لوسيفراس-الإعراب عن الأورام بالإضاءة الحيوية ما قبل وما بعد عملية الاخصاء (Cx)، وتكررت (ب) قانون الإجراءات الجنائية تم تشريح الأورام (أسود = أورثوتوبيك ورم البروستات؛ والأصفر = المثانة) وتحليلها بواسطة ح & ه، ع المدينة، وسينابتوفيسين المدينة (مع مراقبة مورين الإيجابية) (شريط المقياس = 50 ميكرومتر). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.