نقدم هنا، بروتوكولا لإدخال نموذج الفئران من التعب المركزي استخدام تعديل أسلوب منصة متعددة (ممبم).
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
نقدم هنا، بروتوكولا لإدخال نموذج الفئران من التعب المركزي استخدام تعديل أسلوب منصة متعددة (ممبم).
في هذه المقالة، قمنا بعرض نموذج الفئران من التعب المركزي استخدام تعديل أسلوب منصة متعددة (ممبم). تم تصميم مربع "منصة متعددة" كخزان لمياه مع المنصات الضيقة في الجزء السفلي. نموذج الفئران إلى الخزان ووقفت على المنصات ح 14 (18:00-08:00) يوميا لمدة 21 يوما على التوالي، مع مجموعة عنصر تحكم فارغاً للتباين. وأظهرت الفئران في المجموعة النموذجية في نهاية النمذجة، مظهر التعب واضحة. تقييم النموذج، أجرينا العديد من الاختبارات السلوكية، بما في ذلك فتح الحقل اختبار (الغفور)، مرتفعة الإضافة إلى المتاهة (EPM)، واختبار السباحة حصرية (ES). وأظهرت النتائج هذا القلق، وضعف الإدراك المكاني، أداء ضعف العضلات، وانخفض النشاط التطوعي المعروضة في نموذج الفئران تأكيد تشخيص التعب المركزي. كما أن التغيرات العصبية المركزية التحقق من النتيجة. وفي الختام، محاكاة النموذج بنجاح التعب المركزي، وقد تساعد الدراسة في المستقبل مع النموذج تكشف عن الآلية المرضية لهذا المرض.
التعب هو أحد العوامل الرئيسية التي تهدد صحة الإنسان1. في العقود الماضية، أثبتت البحوث المختلفة أن التعب آثار محيطيا لكن يحركها مركزياً، ويقترن دائماً مع الاضطرابات العاطفية والمعرفية. أول من اقترح فيزيولوجي الإيطالية Mosso ألف كلمة "التعب المركزي"2. ومن يعرف عموما محدودة النشاط التطوعي وضعف الإدراك بسبب الخلل في انتقال دفعة في الجهاز العصبي المركزي (CNS)3. بالمقارنة مع العضلات المحيطية والإرهاق، التعب المركزي يؤكد التغييرات في الجهاز العصبي المركزي، فضلا عن ما يترتب عليها من الاضطرابات النفسية/السلوكية، بما في ذلك الاكتئاب والقلق، وضعف الإدراك، وفقدان الذاكرة. دراسة واحدة تبين أن عوامل عديدة يمكن أن تحدث التعب المركزي، بين النشاط البدني المفرط والضغوط النفسية التي هي غنى جداً4. أما بالنسبة للآلية المرضية، شرح نظريات مثل فرضية المسار التربتوفان-كينورينيني5 التغييرات في مسارات معينة؛ ومع ذلك، إجراء دراسات أكثر تعمقاً لا يزال يتعين الكشف عن الارتباطات الوسطى-الطرفية من التعب المركزي.
كما الآلية الكامنة وراء التعب المركزي لا يزال غير واضح، نموذج حيوان فعال مهم جداً لإجراء مزيد من البحوث. نماذج التعب الموجودة هي معظمها الناجمة عن الإفراط في ممارسة، مثل المطاحن6 والسباحة محملة بوزن7، مع الاهتمام قليلاً بشأن العوامل النفسية. لمحاكاة أفضل وضع التعب المركزي، وضع مجموعتنا نموذج الفئران مع ممبم. خلال عملية النمذجة، تظل الفئران الدائمة على منصات الضيقة في المربع "منصة متعددة" لساعات طويلة بما في ذلك جزء من وقت النوم. تختلف عن نماذج الممارسة المفرطة، يستخدم طراز ممبم الحرمان من النوم الجزئي كعامل عقلية مع مراعاة الآلية المرضية المعقدة من التعب المركزي.
نموذج التقييم، نستخدم الاختبارات OFT و EPM لتحديد المزاج القلق والنشاط التطوعي. أجرى الاختبار دا لقياس أداء العضلات المحيطية. وبالإضافة إلى ذلك، نحن نأخذ الدماغ في الفئران واكتشاف الدوبامين (DA)/السيروتونين (5-HT) المحتوى في كلا هيبوثالاموسيس مراعاة الاختلافات العصبي المركزي.
البروتوكول الواردة أدناه صمم للنموذج المركزي التعب الناجم عن النشاط البدني المتكرر وقلة النوم، محاكاة حالة شائعة في حياة الإنسان. ومع ذلك، بضبط المدة النموذجي، استخدامها في العديد من المجالات الأخرى، مثل في دراسات المراقبة والإجهاد النوم. في المستقبل للبحث، ونأمل أن هذا النموذج سوف تساعد في اكتشاف المزيد من التغييرات في الجهاز العصبي المركزي وعلاقتهم مع النظام الطرفية، وتكشف عن الآلية المرضية من التعب المركزي.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم الإبقاء على جميع الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية في التشريع الصيني على استخدام الأخلاقية، ورعاية الحيوانات المختبرية.
1-النمذجة قبل إعداد
2-النمذجة مع ممبم
ملاحظة: العملية تبدأ الساعة 18:00 وتنتهي الساعة 08:00 في اليوم التالي، لما مجموعة 14 ساعة يوميا، أكثر من 21 يوما. لتجنب عوامل التدخل، نفس الشخص المطلوب إجراء التجربة كاملة، بينما يرتدي معطف مختبر نفس. 10 ويستار المستخدمة في التجربة.
3-نموذج التقييم: اختبار سلوكية
ملاحظة: يتم تنفيذ كافة الاختبارات في مختبر السلوكية. لا يسمح الضوضاء والضوء إضافية أثناء الاختبار لتجنب الاضطرابات. إذا كان ذلك ممكناً، استخدم نفس الشخص أو الأشخاص بإجراء كل اختبار. معطف داكن وقفازات مطلوبة من أجل الاعتراف بمقياس الرمادية في معالجة الصور. أداء مكتب التجارة المشروعة أولاً أنها أقل تأثير على سلوك الفئران.
4-نموذج التقييم: الكشف العصبي المركزي
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يصف لنا نموذج الفئران من التعب المركزي باستخدام ممبم. وتنقسم ويستار 24 عشوائياً إلى مجموعة المراقبة والمجموعة النموذجية، مع 12 من الفئران في كل مجموعة. تم تصميم الجهاز النموذجي كخزان لمياه مع المنصات الضيقة في الجزء السفلي (الشكل 1). نموذج الفئران الوقوف على المنصات ح 14 يوميا، بما في ذلك وقت النوم الجزئي، لمدة 21 يوما (الشكل 2).
يتم إجراء الاختبارات السلوكية بعد النمذج...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ممبم هي مصممة أصلاً للنوم الحرمان9. الفئران هي المطلقة في خزان لمياه مع المنصات الثابتة في الجزء السفلي. بدافع الخوف الغريزي من المياه، الفئران يظل قائما على المنصات والنوم لا يحدث. وتبين الدراسة أن ساعات مختلفة من الحرمان من النوم يؤدي إلى مختلف التغيرات في سلوك الفئران والمزاج، بما في ذلك الاعتراف بضعف10،11من المشاعر السلبية، والتعب المركزي. إثبات بعض الباحثين أن الحرمان من النوم المزمن مع أسلوب منصة واحدة (SPM) يمكن أن يستحث التعب المركزي، مع الاع...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
أيد هذا العمل مؤسسة العلوم الطبيعية ببكين (No.7162124)، ومؤسسة شين-ao لجامعة بكين "الطب الصيني".
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| تخصيص خزان مياه الحرمان من النوم متعدد المنصات | ، يتم توفيره من قبل مختبر المناعة العصبية بجامعة بكين للطب الصيني | 110 سم × 60 سم × 40 سم. هناك 15 منصة بلاستيكية صغيرة في الأسفل. يبلغ قطر المنصة الصغيرة 6.5 سم وارتفاع 8 سم | |
| فئران Wistar | Beijing Weitong Lihua Experimental Animal Technology | Company رقم ترخيص SYXK (بكين) 2016-0011 | استخدم 32 فأرا من ذكور Wistar الأصحاء ، 8 أسابيع (200-210 جم) |
| Agilent 1100LC كروماتوجراف سائل عالي الأداء ؛ | Agilent | G1379A ، G1311A ، G1313A ، G1316A ؛ | G1379A ، G1311A نوع مضخة كروماتوغرافية ، G1313A أخذ العينات الأوتوماتيكية ، G1316A صندوق درجة حرارة العمود |
| DECADE II SDC كاشف كهروكيميائي | ANTEC | ، قطب مرجعي Ag / AgCl ، محطات العمل (Clarity CHS) | |
| Biofuge Stratos جهاز طرد مركزي للتبريد عالي السرعة | HERAEUS | ||
| VCX130 أداة التكسير بالموجات فوق الصوتية | SONICS | ||
| ACS-ZEAS المقياس الإلكتروني | Phos تطوير التكنولوجيا ، بكين. | يمكن أن يكون وزن الفئران دقيقا حتى 0.1 جرام. | |
| صندوق المجال المفتوح | ، يتم توفيره من قبل مختبر المناعة العصبية بجامعة بكين للطب الصيني | صندوق خشبي من الحقل المفتوح ؛ 100 سم × 100 سم × 40 سم ، داخل الجدار وأسفل مثل الرمادي. ينقسم الجزء السفلي إلى 25 مربعا متساويا ، كل منها 20 سم × 20 سم ، والشبكات ال 16 على طول الجدار الخارجي هي الشبكات الخارجية ، والشبكات 9 الأخرى مركزية. الكاميرا مثبتة فوق المتوسط. | |
| مرتفعة بالإضافة إلى متاهة | بكين تشونغشي ديشوانغ لتطوير التكنولوجيا المحدودة. | تتكون الأذرع المفتوحة والقريبة من أذرع الصليب من 30 سم × 5 سم × 15 سم ، والمساحة المركزية 5 سم × 5 سم ، مع كاميرا مثبتة فوق المركز وارتفاع 45 سم. | |
| دلو سباحة الفئران. | Zhenhua البيولوجية أداة المعدات المحدودة. آنهوي ، الصين. | حجم الأسطوانة البلاستيكية 70 سم × 30 سم × 110 سم ، والتي تستخدم للسباحة في الفئران. | |
| ميزان الحرارة Shiya | أداة المحدودة ، تشانغتشو ، الصين. | التحكم في درجة حرارة الماء | |
| مضخة مياه صغيرة | Xincheng التكنولوجيا المحدودة ، تشنغدو ، الصين. | تستخدم لخزان المياه وسلوك السباحة. | |
| برنامج Ethovition3.0 السلوكي. | Nuldus ، هولندا | تحليل قياس مقاطع فيديو سلوك الفئران. |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.