إظهار الورم التماس العلاج الخلايا الجذعية الوسيطة (MSCs) وعد لعلاج جليوبلاستوما الغازية. زرع الأمثل يشمل تسليم MSCs في تجويف استئصال الورم على السقالات. هنا، يتم توفير التقنيات الإكلينيكية لدراسة ماجستير معاملة جليوبلاستوما بما في ذلك: استئصال ورم الموجهة بصورة؛ غرس السقالات المصنفة من قبل لجنة السلامة البحرية؛ والعلاج بعد العملية الجراحية التي تتبع.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
استئصال الموجهة بصورة جليوبلاستوما وغرس السقالات المصنف الخلايا الجذعية العلاجية داخل الجمجمة
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
يحمل جليوبلاستوما (GBM)، سرطان الدماغ الأولية الأكثر شيوعاً والعدوانية، متوسط عمر 12-15 شهرا. قصيرة العمر المتوقع يعزى جزئيا إلى عدم قدرة العلاج الحالي، وتتألف من الاستئصال الجراحي متبوعاً بالإشعاع والعلاج الكيميائي، للقضاء على البؤر الورم الغازية. يمكن تحسين العلاج من هذه البؤر مع توموريسيدال البشرية الخلايا الجذعية الوسيطة (MSCs). MSCs يحمل انتحاء الورم قوية ويمكن إجراء هندسة عكسية للبروتينات العلاجية إكسبريس التي تقتل الخلايا السرطانية. التقدم في نماذج الإكلينيكية تشير إلى أن الاستئصال الجراحي يستحث سابق لأوانه MSC الخسارة ويقلل من الفعالية العلاجية. يمكن تحسين فعالية العلاج MSC ببذر MSCs على سقالة poly(lactic acid) القابلة للتحلل (جيش التحرير الشعبي). يعيد تقديم ماجستير في تجويف الاستئصال الجراحي في سقالة جيش التحرير الشعبي الصيني استبقاء خلية والمثابرة، وقتل الورم. ويلزم لدراسة آثار زرع جيش التحرير الشعبي الصيني المصنف لجنة السلامة البحرية في الخليج للحاسبات الآلية، نموذج دقيق السريرية. هنا نقدم بروتوكول السريري جراحي لاستئصال الورم موجهة بصورة من الخليج للحاسبات الآلية في الفئران التي تفتقر إلى المناعة متبوعاً بغرس سقالة المصنف MSC. يتم إجراء هندسة عكسية MSCs مع بنيات لينتيفيرال للتعبير عن مؤثرا وتفرز العلاجية المتعلقة ب TNFα الذي يحفز المبرمج يجند (درب) فضلا عن البروتين الفلورية الخضراء (التجارة والنقل) للسماح بتتبع الفلورسنت. وبالمثل، تم تصميم الخلايا السرطانية U87 مشري صريحة ولوسيفراس اليراع، توفير المزدوج فلوري/الإنارة تتبع. بينما تستخدم حاليا للتحقيق في إيصال الخلايا الجذعية بوساطة المداواة، يمكن تعديل هذا البروتوكول للتحقيق في تأثير الاستئصال الجراحي في تدخلات أخرى في الخليج للحاسبات الآلية.
المقدمة
جليوبلاستوما (GBM) هو سرطان الدماغ الأولية الأكثر شيوعاً في البالغين، مع متوسط بقاء كئيبة للتو 12-15 شهرا1،2،3،،من45. البقاء على قيد الحياة لم يتحسن كثيرا منذ عام 2005 عندما كان معيار السريرية الحالية من الاستئصال الجراحي القصوى متبوعاً بالإشعاع والعلاج الكيميائي temozolomide ملازم و adjuvant اعتمدت6،7. مستوى العلاج والرعاية في حين توفر هذا العلاج المرضى الذين يعانون من إغاثة مؤقتة للأعراض، دائماً النتائج في تكرار التهرب من استئصال بؤر سرطان الغازية....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
عليها جميع الأساليب الموصوفة هنا "رعاية الحيوان المؤسسية" واستخدام اللجنة (إياكوك) من "جامعة شمال كارولاينا" في تشابل هيل.
ملاحظة: يتم تنفيذ هذا الإجراء على الفئران مع اوديما مفتوحة، كصيغة معدلة للبروتوكول من جانب موستاني وبورترا كيليو19 حيث يتم تجاهل الأنسجة العظام التي يتم إزالتها جراحيا، ترك الدماغ موجوداً لإنشاء و في نهاية المطاف استئصال أورام GBM. بعد اوديما، تنشأ الأورام عن طريق غرس المناظير باستخدام الأشعة كما هو موضح في أوزاوا وجيمس20. ونحن زرع 1 × 105 U87 صحة الأم والطفل-فلوريدا الخلايا عند الإحداثيات التالية المناظير باستخدام الأشعة (في مم من بريجما): (2، 5، 0،-0.5).
<....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تم إجراء هندسة عكسية الخلايا السرطانية U87 مشري صريحة ويراعه لوسيفراس (U87 صحة الأم والطفل-فلوريدا) قبل الحقن، والسماح لاستئصال الموجهة بالصورة والإضاءة الحيوية تتبع (الشكل 2 أ-ج). وبالمثل كانت الخلايا الجذعية هندسيا مع تشخيص بروتينات فلورية خضراء-رلوك (ماجستير-التجارة والنقل) أو العلاجية بروتينات فلورية خضراء-المحاكمة (MSC تريل) والمصنف على السقالات جيش التحرير الشعبي الصيني لتأكيد الحجز وانتشار (الشكل 2D
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
جراحة يمكن عادة تكتمل في غضون 30 دقيقة كل الماوس، نظراً لأن تؤخذ النقاط التالية في الاعتبار تحقيق أقصى قدر من الدقة، وتجنب المزالق تستغرق وقتاً طويلاً. أولاً، ضمان وضع الماوس بشكل صحيح في الصك ستيريوتاكسيك قبل بدء هذا الإجراء. حركات الرأس غير المرغوب فيها ستحد من دقة جراحية اوديما، موقع غرس الورم، ودرجة لاستئصال الورم. قبل الاستئصال، تماما إزالة الجزء من بلده دوراً يغطي الورم. دوراً صعباً، الليفي يصلب كما أنها تمنعه من خلال الاستنشاق. إذا تمت إزالة غير كامل، قد يكون دوراً تصلب الحد من تنقل نصيحة المضخة ومنع استئصال الورم.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
أوراق بيليغوز وباغو، وهينجتجين بالإنصاف في "المداواة فالكون" الذي رخصت جوانب الخلايا الجذعية والتكنولوجيا سقالة من UNC تشابل هيل.
شكر وتقدير
الكتاب الاعتراف بمساهمات تحريرية من د. كاثرين بيتروسيموني. جيش التحرير الشعبي الصيني السقالات صنعت بمختبر الدكتورة إليزابيث لوبا في جامعة ولاية كارولينا الشمالية. هذا العمل كان يدعمها صندوق أبحاث السرطان في جامعة مركز السرطان الشامل UNC لينبرجر ومتعدية UNC ومعهد العلوم الإكلينيكية (KL2TR001109، UL1TR001111).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| فقط للفأر أداة التجسيمية | Stoelting | 51730 | يحافظ على وضع ثابت للرأس أثناء الجراحة |
| تشريح المجهر المجسم | الفلوري Leica | M165 FC & nbsp ؛ | يسمح بالتصوير في الوقت الفعلي للورم أثناء الاستئصال |
| نظام حاقن التجسيم المتكامل الآلي (ISI) | Stoelting | 53315 | يسمح بحجم ومعدل حقن الخلايا السرطانية بدقة |
| لاصق الأنسجة Vetbond | 3M | 1469 | الغراء Sugical لإغلاق الجرح الجلدي |
| الدموع الاصطناعية | Akorn | 664268 | يمنع العينين من الجفاف أثناء الجراحة |
| Webcol الكحول يجهز | Covidien | 6818 | تعقيم موقع الشق |
| مقشر البيتادين الجراحي | شركة بوردو فريديك | 6761815117 | تعقيم موقع الشق |
| أدوات التطبيق ذات الرؤوس القطنية | فيشربراند | 23-400-115 | أداة الجراحة |
| الشفط E-vac | Argos | EV310 | مضخة تفريغ تستخدم لاستئصال الورم |
| الفيبرينوجين والثرومبين المستخرج من TISSEEL | Baxter | لتأمين السقالة مؤقتا في تجويف الاستئصال | |
| IVIS Kinetic in vivo نظام التصوير البصري | Caliper Life Science | Bioluminescent | |
| Imager D-Luciferin ملح البوتاسيوم | PerkinElmer | 122799 | عامل التصوير في الجسم الحي |
المراجع
- Adamson, C., et al. Glioblastoma multiforme: a review of where we have been and where we are going. Expert opinion on investigational drugs. 18 (8), 1061-1083 (2009).
- Asthagiri, A. R., Pouratian, N., Sherman, J., Ahmed, G., Shaffrey, M. E. Advances in Brain Tumor ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
