توضح هذه المقالة منهجية مفصلة لاستخدام مطاط سيليكون راديوباك تعتمد على الرصاص إلى نتخلل المفرج مورين للقياس الكمي قطر الابهر في طراز ماوس الابهر وتشريح.
Method Article
توضح هذه المقالة منهجية مفصلة لاستخدام مطاط سيليكون راديوباك تعتمد على الرصاص إلى نتخلل المفرج مورين للقياس الكمي قطر الابهر في طراز ماوس الابهر وتشريح.
تسلخ الابهر، ويرتبط مع كبير المراضة والوفيات بين السكان ويمكن أن تكون شديدة الفتك. على الرغم من وجود نماذج حيوانية من أمراض الابهر، في فيفو تصوير للمفرج كان محدودا. في السنوات الأخيرة، برز التصوير المقطعي المحوسبة الصغيرة (مايكرو-CT) كطريقة مفضلة للتصوير السفن الكبيرة والصغيرة على السواء في فيفو و السابقين فيفوعلى حد سواء. بالاقتران مع أسلوب الصب الأوعية الدموية، استخدمنا بنجاح الصغرى-CT تميز بالتردد وتوزيع أمراض الابهر في فئران C57/Bl6 β-أمينوبروبيونيتريلي-تعامل. وتشمل القيود التقنية لهذا الأسلوب الاختلافات في نوعية نضح عرضته سوء إعداد الحيوانات وتطبيق المنهجيات المناسبة لتقدير حجم السفينة، وعدم قابلية لهذا الإجراء. هذه المادة تفاصيل منهجية لنضح منتثر داخل الأوعية من المطاط سيليكون راديوباك التي تعتمد على الرصاص لوصف كمية من أورتوباثي في نموذج الفأر من الأوعية الدموية والتشريح. بالإضافة إلى تصور أمراض الابهر، يجوز استخدام هذا الأسلوب لدراسة أخرى أسرة الأوعية الدموية في الجسم الحي أو الأوعية الدموية أسرة إزالة الجثة.
حالات الإصابة تسلخ الابهر 3 حالات في ال 000 100 كل سنة1. تسلخ الابهر والتوسعات الأمراض مسؤولة عن وفاة ما يزيد على 10,000 في الولايات المتحدة كل عام، والمحاسبة 1-2 في المائة من جميع حالات الوفاة في البلدان الغربية2. تسلخ الابهر هو بدأها المسيل للدموع في طبقة إينتيمال من السفينة مع الدعوة للدم من خلال طبقات الجدار الابهري تحت الضغوط الفسيولوجية. وترتبط الضغوط نبض المريض مرتفعة مع زيادة في حدوث مضاعفات والتشريح. زيادة حائط القص إجهاد يرتبط بتوسيع جدار الاورطي مما يؤدي إلى3،تشكيل الأوعية الدموية4. وتشمل آثار تسلخ الابهر انسداد تدفق الدم إلى الأجهزة البعيدة بما في ذلك المخ، الكلي، الأمعاء، وأطرافه، وتشكيل تمدد الأوعية الدموية المزمنة، وتمزق، أو وفاة5،،من67.
وفي الوقت الحاضر، هي لا تزال غير مفهومة العمليات البيوكيميائية والخلوية التي ينطوي عليها في بدء وتطور لتمدد الأوعية الدموية الابهري وتشريح. نماذج حيوانية استنساخه من الابهر وتشريح هي المفتاح لفهم ما الفيزيولوجيا المرضية. Β-أمينوبروبيونيتريلي (بابن) هو مثبط أوكسيديز lysyl، الذي يمنع العابرة للربط من الايلاستين والكولاجين، وقد ثبت أن يغير كثيرا من هيكل المصفوفة خارج الخلية جدار السفينة و سلامة النشاط الحيوي6، 8. وقد استخدمت القوارض تعامل مع بابن كنموذج حيوانية مشتركة الابهر وتشريح9،10.
طرائق تصوير الأوعية الدموية تقوم بدور رئيسي في تحديد أمراض الأوعية الدموية ويؤكد سالكيه السفينة، وتقييم التروية الجهاز. في الآونة الأخيرة، استخدمت المحسوبة الدقيقة التصوير المقطعي (الصغرى-ط) دراسة المفرج الفئران والحيوانات الحجم وبالمثل. خلافا للعظام، وتصوير الأوعية الدموية بالتصوير المقطعي المحوري محدودة، كما إينترالومينال الدم راديولوسينت طبيعتها نسبيا. عندما جنبا إلى جنب مع عوامل التباين داخل الأوعية، ومع ذلك، مايكرو-CT تمكن إعادة البناء ثلاثي الأبعاد المفصلة للحيوان فاسكولاتوريس لدراسة أمراض الأوعية الدموية ماكرو التشريحية11.
(انظر الجدول للمواد) هو عامل تباين المحدد مطاط سيليكون راديوباك يحتوي على كرومات الرصاص كبريتات الرصاص. عند نضح حضور محفز، يصلب بسرعة لتشكيل المدلى بها من المفرج مع التعديلات الحد الأدنى في بنية الماكرو التشريحية للسفن، مما يجعل المفرج راديوباك عالية على النقيض من الأنسجة الخلفية عند فحص راديوجرافيكالي. هذا عامل تباين مفيد لأنه من السهل التعامل مع وتجنب تدهور الأنسجة وفقدان السفينة بسبب الكسر غالباً ما ترتبط مع التآكل المدلى بها الأوعية الدموية. كما أنها تشفي مع انكماش الحد الأدنى12، سفن مسح الدم تبقى براءات الاختراع وتسمح بإجراء تقييم دقيق الماكرو-المفرج الحيوان في تجارب غير البقاء على قيد الحياة. العمل السابقة وقد استخدمت بنجاح راديوباك سيليكون المطاط-التباين في مجموعة متنوعة من الدراسات الحيوانية. على وجه التحديد، وقد تبين انطباق في تصور التاجي، الكبيبي، والمشيمة، والتداولات الدماغي11،،من1213،،من1415 . في هذه الورقة، ونحن بالتفصيل المنهجية لفتح ثقب البطين الأيسر لنضح منتثر داخل الأوعية من السيليكون راديوباك التي تعتمد على الرصاص المطاط كمياً تميز أمراض الابهر الناجمة عن بابن في نموذج ماوس بالدقيقة-قيراط
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
وافقت "لجنة الاستخدام" بجامعة ماريلاند، بالتيمور (بروتوكول الحيوان رقم 0116024) و "رعاية الحيوان المؤسسية" البروتوكولات من أجل التعامل مع الحيوانات وتجري وفقا للمعايير "الدولية آآلاك".
1-إعداد الكواشف
2-الجراحة
3-المسح الجزئي CT والمعلمات
ملاحظة: سيتم لبارامترات صورة معينة تعتمد على الجهاز قيد الاستخدام.
4-مرحلة ما بعد المعالجة والتقديم
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
وبغية تقييم هذا البروتوكول، كانت perfused 20 الفئران الذكور البالغين، خلفية مختلطة كما هو موضح سابقا19 و 20-30 أسبوعا من العمر، مع أو بدون علاج بابن، مع مطاط سيليكون راديوباك التي تعتمد على الرصاص (انظر "الجدول للمواد" ) باستخدام البروتوكول المفصلة أعلاه. أنها خضعت لمسح الأشعة المقطعية الصغرى في اليوم التالي (الشكل 1 و الشكل 2). كانت هناك لا اختلافات كبيرة في إعمار الفئرا...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
يمكن استخدام التصوير بالأشعة المقطعية الصغرى لتوفير إعادة البناء مفصلة للغاية وثلاثي الأبعاد لأمراض الأوعية الدموية في نماذج حيوانية. من خلال استخدام وسائط الإعلام تعزيز التباين داخل الأوعية، يمكن أن تكون متباينة الأنسجة الرخوة غير محسنة، مثل التجويف الأوعية الدموية، من تلك التي تعمل على تحسين. بينما الليزر دوبلر، ميكروانجيوجرافي، والأوعية الرنين المغناطيسي، علم الأنسجة مع الفحص المجهري [كنفوكل]، أو اثنين-فوتون يمكن استخدامها لتقييم أسرة الأوعية الدموية، أنها عادة ما تركز على منطقة محدودة من الدراسة و/أو تقتصر على تقييما...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
ونود أن نشكر مارك سميث لمساعدته مع التصوير الشعاعي. هذا العمل تدعمه "المنحة T32 المعاهد الوطنية للصحة" "البحوث المتعددة التخصصات" في أمراض القلب والأوعية الدموية (بوا)، وجمعية القلب الأمريكية (SMC)، ومنحة R35 المعاهد الوطنية للصحة (DKS).
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| Microfil | Flow Tech، Inc | MV-122 | نحن نستخدم اللون الأصفر ، ويمكن طلب لون مختلف حسب الرغبة. تشتمل المجموعة على MV-Compound و MV-Dilent و MV-Curing Agent. |
| الهيبارين (1000 وحدة / مل) | ساجين للمستحضرات الصيدلانية | 25021-400-10 | |
| محلول ملحي مخزن بالفوسفات | Corning | 21-031-CV | |
| Isoflurane | Vet One ، MWI | 502017 | |
| 3-Aminopropionitrile fumarate salt | Sigma-Aldrich | A3134 | |
| مضخة حقنة واحدة | فيشر Scientific | 14-831-200 | |
| 27 مقياس إبرة مجموعة الوريد فروة الرأس | Exel Int | 26709 | 27G × 3/4 "، 12" أنبوب |
| Inveon Micro-CT ماسح | ضوئي Siemens Medical Solutions | ||
| Osirix MD | Pimxmeo SARL | الإصدار 8.0.2 | |
| Inveon Research مكان العمل | سيمنز الحلول | الإصدار 4.2 | |
| القوارض تشاو | هارلان تيكلاد | 2018sx |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission