يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

مورين كولوستومي القاصي، نموذجا جديداً من تسريب التهاب القولون في الفئران C57BL/6

13K مشاهدة

DOI:

10.3791/57616

يوليو 12, 2018

في هذه المقالة

ملخص

مورين كولوستومي القاصي نموذجا مورين لالتهاب القولون تسريب البشرية، التهاب القولون الليمفاوي غالباً في الجزء القولون مستبعدة من مجرى البراز.

الملخص

تسريب التهاب القولون (DC) حالة سريرية متكررة التي تحدث في المرضى مع قطاعات الأمعاء مستبعدة من مجرى البراز نتيجة تحويل انتيروستومي. مسببات هذا المرض ما زال غير محددة، لكن يبدو أن تختلف عن تلك الأمراض الكلاسيكية التهاب الأمعاء مثل مرض كرون والتهاب القولون التقرحي. البحوث الرامية إلى فك الآليات الفيزيولوجية المرضية التي تؤدي إلى تطور هذا المرض تعطلت بعدم وجود نموذج مورين مناسب. ينشئ هذا البروتوكول نموذج مورين من العاصمة التي تسهل دراسة دور النظام المناعي وتفاعله مع ميكروبيومي في وضع DC. في هذا النموذج باستخدام الحيوانات C57BL/6، تستبعد الأجزاء البعيدة من القولون من تيار البراز بإنشاء كولوستومي القاصي وأحداث تنمية خفيفة إلى معتدلة التهاب في قطاعات الأمعاء المستبعدة واستنساخ الآفات السمة المميزة للإنسان العاصمة مع استجابة التهابات الجهازية معتدلة. على النقيض من نموذج الفئران، تتوفر عدد كبير من نماذج مورين معدلة وراثيا على خلفية C57BL/6. المزيج من هذه الحيوانات مع نموذجنا يسمح الأدوار المحتملة للفرد السيتوكينات أو المستقطبات أو مستقبلات الجزيئات النشطة بيولوجيا (مثلاً، انترلوكين (إيل)-17؛ IL-10، تشيموكيني CXCL13، ومستقبلات تشيموكيني CXCR5 و CCR7، ومستقبلات سفينجوسيني-1-فوسفات 4) إلى تقييم في الآلية المرضية للعاصمة. توافر سلالات الماوس كونجينيك على خلفية C57BL/6 يسهل إلى حد كبير نقل التجارب تحديد دور كل من أنواع الخلايا المتميزة المشاركة في المسببات للعاصمة. وأخيراً، يقدم النموذج الفرصة لتقييم تأثيرات التدخلات المحلية (مثلاً، تعديل ميكروبيومي المحلية أو العلاج للالتهابات المحلية) على حصانة المخاطي في قطاعات الأمعاء المتضررة وغير المتضررة وفي التوازن المناعي الجهازية.

المقدمة

في السنوات الأخيرة، عدد كبير من الكيانات غير المعدية التهاب القولون مختلفة من أمراض التهاب الأمعاء الكلاسيكية (إيبدس؛ أي.، المرض أو التهاب القولون التقرحي كرون) اتسمت سريرياً وهيستوباثولوجيكالي في البشر. الآليات الفيزيولوجية المرضية التي تؤدي إلى تطوير هذه أشكال التهاب القولون هي ليست مفهومة تماما جزئيا لأن المناسبة نماذج حيوانية نادرة. تسريب التهاب القولون واحد من هذه الكيانات وصف مؤخرا. على الرغم من أن المصطلح أطلق في عام 1980 من Glotzer1، وصف الأولى النمط الظاهري مماثلة قدمت في عام 1972 مورسون2. تطور المرض في 50% إلى 91% مرضى مع تحويل انتيروستومي، وتتفاوت شدته السريرية3،4. ونظرا للإصابة السنوية بحوالي 000 120 مريض كولوستومي في الولايات المتحدة الأمريكية، يشكل هذا الكيان المرض مشكلة صحية هامة.

وكان الهدف العام المتمثل في وضع هذا البروتوكول تقديم نموذج DC مورين التي تعتمد على الزناد التهاب القولون مشابهة للتي تشهدها العاصمة البشرية وأن يستنسخ الميزات نسيجية الأولية للأمراض البشرية. خلافا لنماذج أخرى مورين التهاب القولون، التهاب القولون التعريفي في نموذجنا لا تتطلب الحيوانات المحورة وراثيا (مثلالفئران المعدلة وراثيا إيل-7، N-كادهيرين الفئران السلبية السائدة أو الفئران-/- TGFβ)، التطبيق كيميائيا غضب من المواد (مثلاً, ديكستران كبريتات الصوديوم (DSS)-التهاب القولون المستحث، أو حامض السلفونيك ترينيتروبينزيني (تنبس)-التي يسببها التهاب القولون)، أو نقل السكان خلية معينة في الفئران القصور المناعي (كما هو الحال في نقلعالية CD45RB نموذج لالتهاب القولون) (استعراض، انظر5). خلافا لنماذج أخرى، المناعي سليمة لنموذجنا DC يسمح تقييم الآلية المناعية التي تشارك في تطوير العاصمة. الحد التهاب الغشاء المخاطي للجزء المتعلق بالامعاء المستبعدة يسمح تقييم انعكاساتها على حصانة المخاطي في أجزاء أخرى من الجهاز الهضمي، في التوازن المناعي في المقصورات الأخرى محصنة من الأمعاء (مثلاً ، بير في بقع والغدد الليمفاوية ميسينتيريالي)، وفي التوازن المناعي في الحي كامل. وأخيراً، لدينا نموذج يشكل أداة مناسبة للتحقيق في آليات السيطرة المحلية المحفزات الالتهابات الناشئة عن التغيرات في البيئة المحلية العادية لكلا ميكروبيومي المحلية، فضلا عن المستضدات غير معروف.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

جميع الأساليب الموصوفة هنا أقرتها السلطة الحكومية البيطرية (لانديسامت für لاندويرتشافت und لبينسميتيلسيتشيرهيت مصائد الأسماك مكلينبيرج-فوربوميرن، (ﻷلف M-V)).

1-قبل الجراحة الرعاية وإعداد الحيوانات

  1. لدى وصوله إلى مرفق الحيوانية، تقسيم الحيوانات (C57Bl/6) إلى مجموعات ذات حجم مماثل، قفص كل مجموعة معا، وإبقاء المجموعات ثابتة طوال هذه التجارب.
    ملاحظة: استخدام الحيوانات من نفس الجنس. تم الحصول على النتائج المذكورة مع الفئران الذكور.
    ملاحظة: إذا تم استخدام الحيوانات الذكور، مجموعات قفص بدءاً معا عندما تكون 7 أسابيع عمر حيث أنه يمكن إنشاء تسلسل هرمي، وبالتالي تقليل مخاطر السلوك العدواني خلال التجارب.
  2. أسبوع واحد على الأقل قبل الجراحة، قم بالتبديل إلى بالطاقة عالية (> 14 مللي جول/كغ)، ونسبة عالية من البروتين (> 20%) الأعلاف التي تحتوي على جميع العناصر النزرة الأساسية والفيتامينات (لمزيد من التفاصيل، انظر قائمة المواد).
    ملاحظة: أؤكد لجميع الفئران وزنها على الأقل 25 ز عندما يتم إجراء عملية جراحية.
  3. حمل التخدير والتسكين بالحقن داخل الكيتامين (القائمة 87 مغ/كغ) وهيدروكلوريد إكسيلازيني (القائمة 13 مغ/كغ). انتظر حتى تتسامح الفأرة الميكانيكية التحفيز، مثل الملعب أخمص القدمين، دون استجابة المحرك.
  4. تأمين الماوس ناركوتيزيد مع الأشرطة في موقف ضعيف في موضعها حرارة وضع مكتب العملية، وضمان تحديد المواقع أثناء عملية مستقرة وتجنب خسائر ساحقة من حرارة الجسم.
    ملاحظة: يجب أن يكون موضعها الحرارة درجة حرارة سطحية من 36 درجة مئوية إلى 40 درجة مئوية؛ يجب أن تكون درجة حرارة الغرفة التشغيل 21 درجة مئوية.

2-القاصي كولوستومي العملية

  1. حلق شعر البطن. قبل البدء بعملية جراحية، تطهير الحقل العملية ثلاث مرات باستخدام الكحول 70% وإيودوفور. ثني الميدانية العملية لضمان ظروف معقمة.
  2. القيام فتح البطن 15 ملم وسيط قبل إينسيسينج عضلات البطن والصفاق على طول ينيا ألبا، وبالتالي التقليل إلى أدنى حد من فقدان الدم.
  3. استخدام الملقط أتروماتيك دبغي اثنين، بعناية سحب الأعور والمحطة الطرفية الدقاق، وتصاعدي والقولون عرضية من التجويف الصفاقى.
    ملاحظة: كن حذراً تحد بشكل صارم التلاعب الميكانيكية للامعاء لمنع الإصابة بهياكل المساريقي العلوي.
  4. تحديد القطب سيكل وتصاعدي القولون والأمعاء (الأرقام 1a و 1b).
    ملاحظة: تحديد الهوية الصحيحة من القولون تصاعدي شرطا أساسيا للموضع الصحيح كولوستومي. في الحالات التي يكون فيها تشريح منطقة اللفائفيه غامضة، يحدد وجود البقع في بييير الأمعاء، ووجود البراز شكلت يميز القولون.
  5. استخدم مسطرة لتحديد موقف كولوستومي مستقبلا. ينبغي أن توضع 20 مم القاصي الصمام اللفائفيه كولوستومي البعيدة.
  6. جعل شق 3 مم ثانية في جدار البطن في الربع الأيمن العلوي. سحب الجزء القولون التي سبق تحديدها من خلال هذا الشق لتشكيل حلقة، مع الحرص على عدم تشويه في الحلقة.
  7. تمرير بعناية قنية رابعا 22-قياس مرونة من خلال ميسوكولون. الحرص على عدم إتلاف هياكل الأوعية الدموية المساريقي العلوي.
  8. عودة الأمعاء إلى التجويف الصفاقى.
  9. إصلاح طرفي أنبوب مرن للجلد باستخدام غرز بسيطة وخياطة ريسوربابل (مثلاً، بوليجلاكتين 910 أو بوليفيل 4-0 1/2 (ج)).
  10. قبل إغلاق فتح البطن، تؤدي السوائل الإنعاش باستخدام حقن المحلول الملحي 0.9% 0.5 مل داخل.
  11. إغلاق الصفاق وطبقة العضلات مع خياطة مستمر استخدام خياطة ريسوربابل (مثلاً، بوليجلاكتين 910 أو بوليفيل 4-0 1/2 (ج)). إغلاق الجلد بخياطة مستمرة استخدام خياطة ريسوربابل (على سبيل المثال، بوليجلاكتين 910 أو بوليفيل 4-0 1/2 (ج)).
  12. فتح حلقة القولون اكستيريوريزيد بأداء ترانسيكشن المجموع فرعي استخدام مقص ما يرام. تجنب كل ضرر مساريق. لا قطاع القولون تماما.
  13. إصلاح كل افتتاح كولوستومي باستخدام ثلاث غرز كامل-سمك واحد للصفاق والجلد استخدام مونوفيل، وخياطة قابلة للامتصاص (مثلاً، بوليديوكسانوني أو مونوفيل 6-0 3/8s). حلقة الزبائ، الذي نهاية-كولوستومي وظيفية، وحلقة ناقل، وناسور الأغشية المخاطية، يفصل بوضوح في هذه المرحلة (الشكل 1 ج).
    ملاحظة: يجب أن يكون وقت العملية أقل من 20 دقيقة للحد من الخسائر الحرارية والسوائل.
  14. بعد الانتهاء من الجراحة، وتطهير الأدوات استخدام حل خالية من ألدهيد تطهير في حمام الموجات فوق الصوتية وفقا لتعليمات الشركة المصنعة.

3-الشام العملية (كولوتومي)

  1. نفذ الخطوات 1.1. من خلال 2.4.
  2. استخدم مسطرة لتحديد موضع كولوتومي المستقبل. يجب أن ترحل إلى كولوتومي نفس المسافة من الصمام اللفائفيه كولوستومي في المجموعة التجريبية.
  3. فتح القولون على الأقل ثلثي محيط استخدام مقص جيد.
  4. إغلاق كولوتومي مع طبقة واحدة، توقف كامل-سمك خياطة استخدام مونوفيل، وخياطة قابلة للامتصاص (مثلاً، بوليديوكسانوني، مونوفيل 6-0 3/8s).
    ملاحظة: يجب أن يكون وقت العملية أقل من عشرين دقيقة على جراح جربت، الحد من الخسائر الحرارية والسوائل.
  5. نفذ الخطوات 2.10. ، 2.11. و 2.14.

4-بعد العملية الجراحية الرعاية

  1. إرجاع الحيوانات إلى اقفاصها. توفير مناخ جيد خفف من 37 درجة مئوية (مثلاً، مع مصباح الأشعة تحت حمراء) حتى الفئران مستيقظا تماما. وبعد ذلك، الحفاظ على الفئران في بيئة تنظيم درجة الحرارة والرطوبة (21 درجة مئوية؛ 30% ± 10% رطوبة نسبية). السماح بحرية الوصول إلى الغذاء ومياه الشرب. لتسهيل امتصاص السوائل، توفير العلف الحيواني إضافية غارقة في المياه.
  2. بدء التسكين بعد العملية الجراحية عن طريق حقن البوبرينورفين وزن الجسم 0.1 مغ/كغ الليبي عند الحيوانات تظهر استجابة للتحفيز الميكانيكي. كن حذراً لتجنب هبوط في التنفس.
  3. الملحق مياه الشرب مع ترامادول 1 ملغ/مل لاستمرار المسكنات خلال الأسبوع الأول بعد العملية الجراحية.
  4. للتعويض عن انخفاض كمية السائل نظراً لانخفاض التنقل، وتوفير "منصة متينة تشرب" في القفص خلال الأسبوع الأول بعد العملية الجراحية.
  5. وزن الحيوانات وسلوك الحيوانات نقاط يوميا خلال الأسبوع الأول، كل يوم الثاني خلال الفترة المتبقية الشهر الأول، وفي كل يوم الثالث خلال الشهر الثاني باستخدام درجة شدة المرض الموصوفة في كلينورت et al. 6.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

جراحة هو جيد التحمل في المجموعات الشام (كولوتومي) والتجريبية (كولوستومي) على حد سواء. الوفيات المحيطة بالجراحة يجب إلا تتجاوز 10% عندما يتم بشكل صحيح تنفيذ إدارة الجراحة والمحيطة بالجراحة. في الأسبوع الأول بعد الجراحة، يعتبر فقدان الوزن الكبير في كلتا المجموعتين التجريبية والشام. حيوانات مجموعة الشام بلوغ بهم نادر الوزن عادة نحو اليوم الرابع بعد العملية الجراحية، ولكن حدوثه يوم واحد في وقت لاحق في المجموعة التجريبية. فقدان الوزن هو أكثر وضوحاً في المجموعة التجريبية، وصلت إلى 21.7 في المائ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

نموذج مورين من العاصمة التي عرضت في هذا البروتوكول موثوق يستنسخ نسيجية ملامح العاصمة البشرية (مثلاً، و حيثياته تطوير المسام اللمفاوية في submucosa قطاعات الأمعاء الملتهبة وسرداب تقصير، والتخفيضات في أرقام الخلية قدح). وبصرف النظر عن هذه الميزة، هذا النموذج هو الناجمة عن عامل المسبّب مشابهة جداً ويقدم بدوره سريرية من متوسطة إلى خفيفة الشدة كما الحال في البشر الأكثر تضررا.

للحصول على النتائج استنساخه والفتك المحيطة بالجراحة مقبولة، بعض الممارسات في مجال تقنيات ميكروسورجيكال ضرو...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

أن تعلن جميع المؤلفين أن لديهم لا تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
مواد التشغيل< / em>
طبقة أساسية للحرارة ، 6 واتThermoLux ، Witte + Sutor GmbH461265
الإيثانول 70٪ (مع ميثيل إيثيل كيتون)صيدلية مستشفى جامعة Greifswald
أدوات تطبيق خشبية ، رأس قطني صغير من جانب واحد ، عصا خشبية ، بطول 150 ممCentramed GmbH ، ألمانيا8308370لتطهير مجال العملية
مقصAesculap (BRAUN)BC064R
ملقط DeBakey الرضحيAesculap (BRAUN)OC021R
حامل إبرةAesculap (BRAUN)BM012R
Vasofix Safety iv< / em> قنية 22GBraun Melsungen AG ، ألمانيا4268091S-01
VICRYL Plus 4-0 بنفسجي مضفر ؛ V-5 17 م 1/2 ج ؛ 70 سمETHICON، Inc.VCP994H
PDS II 6-0 monofil ؛ V-18 13 مم 3/8c ؛ 70 سمETHICON، Inc.Z991H
BD Plastipak 1 مل (محاقن بإبرة داخلية معقمة)BDMedical 305501
Triacid-N (N-Dodecylpropan-1،3-diamin)ANTISEPTICA ، ألمانيا18824-01تطهير الأدوات الجراحية في الحمام بالموجات فوق الصوتية
الأدوية < / em >
الكيتامين 10٪ ، 100 مجم / مل (هيدروكلوريد الكيتامين)Selectavet ، د. أوتو فيشر جيإتش 9089.01.0087 مجم / كجم i.p.< / em>
Xylasel ، 20 مجم / مل (زيلازين هيدروكلوريد)سيليكتافيت ، د. أوتو فيشر GmbH400300.00.0013 مجم / كجم i.p.< / em>
كلوريد الصوديوم 0.9٪براون ميلسونجن إيه جي ، ألمانيا6697366.00.00
بوبرينوفيت 0.3 مجم / مل (بوبرينورفين)باير ، ألمانياPZN: 014988700.1 مجم / كجم s.c.
قطرات الترامال, 100 ملغ/مل (ترامادول هيدروكلوريد)غرامü nenthal GmbH ، ألمانيا101168381 مجم / مل مياه شرب
Ceftriaxon-saar 2 g (ceftriaxone)   ؛Cephasaar GmbH ، ألمانياPZN: 0884425225 مجم / كجم من وزن الجسم i.p.< / em>
metronidazole 5 مجم / ملBraun Melsungen AG ، ألمانياPZN: 0554351512.5 مجم / كجم من وزن الجسم i.p< / em>
Food
ssniff M-Z Ereichssniff, Germany  V1184-3
مشروب صلب Dehyprev Vit BIO ، الحقائبTripleATrading ، هولنداSDSHPV-75
Equipment
Nikon Eclipse Ci-LNikon Instruments Europe BV ، ألمانياالمجهر الخفيف
VetScan HM 5 & nbsp ؛Abaxis ، الولايات المتحدة الأمريكية770-9000محلل أمراض الدم البيطري من 50 & micro ؛ ل الوريدية EDTA-الدم
Bandelin SONOREX (حمام بالموجات فوق الصوتية)Bandelin الإلكترونيات, ألمانياRK 100 Hتطهير الأدوات الجراحية
Software< / em>
NIS-Element BR4 البرمجياتنيكون الأدوات أوروبا BV, ألمانيا
GraphPad Prism الإصدار 6GraphPad Software, Inc.
إم بي

المراجع

  1. Glotzer, D. J., Glick, M. E., Goldman, H. Proctitis and colitis following diversion of the fecal stream. Gastroenterology. 80, 438-441 (1981).
  2. Morson, B., Dawson, I. Gastrointestinal Pathology. , Blackwell Scientific Publications. London. (1972).
  3. Whelan, R. L., Abramson, D., Kim, D. S., Hashmi, H. F. Diversion colitis. A prospective study. Surg Endosc. 8, 19-24 (1994).
  4. Haas, P. A., Fox, T. A., Szilagy, E. J. Endoscopic examination of the colon and rectum distal to a colostomy. Am J Gastroenterol. 85, 850-854 (1990).
  5. Valatas, V., Bamias, G., Kolios, G. Experimental colitis models: Insights into the pathogenesis of inflammatory bowel disease and translational issues. Eur J Pharmacol. 759, 253-264 (2015).
  6. Kleinwort, A., Döring, P., Hackbarth, C., Heidecke, C. D., Schulze, T. Deviation of the Fecal Stream in Colonic Bowel Segments Results in Increased Numbers of Isolated Lymphoid Follicles in the Submucosal Compartment in a Novel Murine Model of Diversion Colitis. Biomed Res Int. 2017, 13(2017).
  7. Tangjarukij, C., Navasumrit, P., Zelikoff, J. T., Ruchirawat, M. The effects of pyridoxine deficiency and supplementation on hematological profiles, lymphocyte function, and hepatic cytochrome P450 in B6C3F1 mice. J Immunotoxicol. 6, 147-160 (2009).
  8. Soave, O., Brand, C. D. Coprophagy in animals: a review. Cornell Vet. 81, 357-364 (1991).
  9. Ebino, K. Y., Yoshinaga, K., Suwa, T., Kuwabara, Y., Takahashi, K. W. Effects of prevention of coprophagy on pregnant mice--is coprophagy beneficial on a balanced diet. Jikken Dobutsu. 38, 245-252 (1989).
  10. Babickova, J., Tothova, L., Lengyelova, E., Bartonova, A., Hodosy, J., Gardlik, R., Celec, P. Sex Differences in Experimentally Induced Colitis in Mice: a Role for Estrogens. Inflammation. 38, 1996-2006 (2015).
  11. Lee, S. M., Kim, N., Son, H. J., Park, J. H., Nam, R. H., Ham, M. H., Choi, D., Sohn, S. H., Shin, E., Hwang, Y. J., et al. The Effect of Sex on the Azoxymethane/Dextran Sulfate Sodium-treated Mice Model of Colon Cancer. J Cancer Prev. 21, 271-278 (2016).
  12. Angele, M. K., Pratschke, S., Hubbard, W. J., Chaudry, I. H. Gender differences in sepsis: cardiovascular and immunological aspects. Virulence. 5, 12-19 (2013).
  13. Brown, R. Z. Social Behaviour, reproduction, and population changes in the house mouse (Mus musculus L). Eccological Monographs. 23, 788-795 (1953).
  14. Poole, T. B., Morgan, H. D. R. Differences in aggressive behaviour betweeen male mice (Mus musculus L.) in colonies of different sizes. Animal Behaviour. 21, 788-795 (1973).
  15. Pasquarelli, N., Voehringer, P., Henke, J., Ferger, B. Effect of a change in housing conditions on body weight, behavior and brain neurotransmitters in male C57BL/6J mice. Behav Brain Res. 333, 35-42 (2017).
  16. Langgartner, D., Foertsch, S., Fuchsl, A. M., Reber, S. O. Light and water are not simple conditions: fine tuning of animal housing in male C57BL/6 mice. Stress. 20, 10-18 (2017).
  17. Nicholson, A., Malcolm, R. D., Russ, P. L., Cough, K., Touma, C., Palme, R., Wiles, M. V. The response of C57BL/6J and BALB/cJ mice to increased housing density. J Am Assoc Lab Anim Sci. 48, 740-753 (2009).
  18. Buchler, G., Wos-Oxley, M. L., Smoczek, A., Zschemisch, N. H., Neumann, D., Pieper, D. H., Hedrich, H. J., Bleich, A. Strain-specific colitis susceptibility in IL10-deficient mice depends on complex gut microbiota-host interactions. Inflamm Bowel Dis. 18, 943-954 (2012).
  19. Nakanishi, M., Tazawa, H., Tsuchiya, N., Sugimura, T., Tanaka, T., Nakagama, H. Mouse strain differences in inflammatory responses of colonic mucosa induced by dextran sulfate sodium cause differential susceptibility to PhIP-induced large bowel carcinogenesis. Cancer Sci. 98, 1157-1163 (2007).
  20. Mahler, M., Bristol, I. J., Leiter, E. H., Workman, A. E., Birkenmeier, E. H., Elson, C. O., Sundberg, J. P. Differential susceptibility of inbred mouse strains to dextran sulfate sodium-induced colitis. Am J Physiol. 274, 544-551 (1998).
  21. Mekada, K., Abe, K., Murakami, A., Nakamura, S., Nakata, H., Moriwaki, K., Obata, Y., Yoshiki, A. Genetic differences among C57BL/6 substrains. Exp Anim. 58, 141-149 (2009).
  22. Sellers, R. S., Clifford, C. B., Treuting, P. M., Brayton, C. Immunological variation between inbred laboratory mouse strains: points to consider in phenotyping genetically immunomodified mice. Vet Pathol. 49, 32-43 (2012).
  23. Mills, C. D., Kincaid, K., Alt, J. M., Heilman, M. J., Hill, A. M. M-1/M-2 macrophages and the Th1/Th2 paradigm. J Immunol. 164, 6166-6173 (2000).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم