مورين كولوستومي القاصي نموذجا مورين لالتهاب القولون تسريب البشرية، التهاب القولون الليمفاوي غالباً في الجزء القولون مستبعدة من مجرى البراز.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
مورين كولوستومي القاصي نموذجا مورين لالتهاب القولون تسريب البشرية، التهاب القولون الليمفاوي غالباً في الجزء القولون مستبعدة من مجرى البراز.
تسريب التهاب القولون (DC) حالة سريرية متكررة التي تحدث في المرضى مع قطاعات الأمعاء مستبعدة من مجرى البراز نتيجة تحويل انتيروستومي. مسببات هذا المرض ما زال غير محددة، لكن يبدو أن تختلف عن تلك الأمراض الكلاسيكية التهاب الأمعاء مثل مرض كرون والتهاب القولون التقرحي. البحوث الرامية إلى فك الآليات الفيزيولوجية المرضية التي تؤدي إلى تطور هذا المرض تعطلت بعدم وجود نموذج مورين مناسب. ينشئ هذا البروتوكول نموذج مورين من العاصمة التي تسهل دراسة دور النظام المناعي وتفاعله مع ميكروبيومي في وضع DC. في هذا النموذج باستخدام الحيوانات C57BL/6، تستبعد الأجزاء البعيدة من القولون من تيار البراز بإنشاء كولوستومي القاصي وأحداث تنمية خفيفة إلى معتدلة التهاب في قطاعات الأمعاء المستبعدة واستنساخ الآفات السمة المميزة للإنسان العاصمة مع استجابة التهابات الجهازية معتدلة. على النقيض من نموذج الفئران، تتوفر عدد كبير من نماذج مورين معدلة وراثيا على خلفية C57BL/6. المزيج من هذه الحيوانات مع نموذجنا يسمح الأدوار المحتملة للفرد السيتوكينات أو المستقطبات أو مستقبلات الجزيئات النشطة بيولوجيا (مثلاً، انترلوكين (إيل)-17؛ IL-10، تشيموكيني CXCL13، ومستقبلات تشيموكيني CXCR5 و CCR7، ومستقبلات سفينجوسيني-1-فوسفات 4) إلى تقييم في الآلية المرضية للعاصمة. توافر سلالات الماوس كونجينيك على خلفية C57BL/6 يسهل إلى حد كبير نقل التجارب تحديد دور كل من أنواع الخلايا المتميزة المشاركة في المسببات للعاصمة. وأخيراً، يقدم النموذج الفرصة لتقييم تأثيرات التدخلات المحلية (مثلاً، تعديل ميكروبيومي المحلية أو العلاج للالتهابات المحلية) على حصانة المخاطي في قطاعات الأمعاء المتضررة وغير المتضررة وفي التوازن المناعي الجهازية.
في السنوات الأخيرة، عدد كبير من الكيانات غير المعدية التهاب القولون مختلفة من أمراض التهاب الأمعاء الكلاسيكية (إيبدس؛ أي.، المرض أو التهاب القولون التقرحي كرون) اتسمت سريرياً وهيستوباثولوجيكالي في البشر. الآليات الفيزيولوجية المرضية التي تؤدي إلى تطوير هذه أشكال التهاب القولون هي ليست مفهومة تماما جزئيا لأن المناسبة نماذج حيوانية نادرة. تسريب التهاب القولون واحد من هذه الكيانات وصف مؤخرا. على الرغم من أن المصطلح أطلق في عام 1980 من Glotzer1، وصف الأولى النمط الظاهري مماثلة قدمت في عام 1972 مورسون2. تطور المرض في 50% إلى 91% مرضى مع تحويل انتيروستومي، وتتفاوت شدته السريرية3،4. ونظرا للإصابة السنوية بحوالي 000 120 مريض كولوستومي في الولايات المتحدة الأمريكية، يشكل هذا الكيان المرض مشكلة صحية هامة.
وكان الهدف العام المتمثل في وضع هذا البروتوكول تقديم نموذج DC مورين التي تعتمد على الزناد التهاب القولون مشابهة للتي تشهدها العاصمة البشرية وأن يستنسخ الميزات نسيجية الأولية للأمراض البشرية. خلافا لنماذج أخرى مورين التهاب القولون، التهاب القولون التعريفي في نموذجنا لا تتطلب الحيوانات المحورة وراثيا (مثلالفئران المعدلة وراثيا إيل-7، N-كادهيرين الفئران السلبية السائدة أو الفئران-/- TGFβ)، التطبيق كيميائيا غضب من المواد (مثلاً, ديكستران كبريتات الصوديوم (DSS)-التهاب القولون المستحث، أو حامض السلفونيك ترينيتروبينزيني (تنبس)-التي يسببها التهاب القولون)، أو نقل السكان خلية معينة في الفئران القصور المناعي (كما هو الحال في نقلعالية CD45RB نموذج لالتهاب القولون) (استعراض، انظر5). خلافا لنماذج أخرى، المناعي سليمة لنموذجنا DC يسمح تقييم الآلية المناعية التي تشارك في تطوير العاصمة. الحد التهاب الغشاء المخاطي للجزء المتعلق بالامعاء المستبعدة يسمح تقييم انعكاساتها على حصانة المخاطي في أجزاء أخرى من الجهاز الهضمي، في التوازن المناعي في المقصورات الأخرى محصنة من الأمعاء (مثلاً ، بير في بقع والغدد الليمفاوية ميسينتيريالي)، وفي التوازن المناعي في الحي كامل. وأخيراً، لدينا نموذج يشكل أداة مناسبة للتحقيق في آليات السيطرة المحلية المحفزات الالتهابات الناشئة عن التغيرات في البيئة المحلية العادية لكلا ميكروبيومي المحلية، فضلا عن المستضدات غير معروف.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
جميع الأساليب الموصوفة هنا أقرتها السلطة الحكومية البيطرية (لانديسامت für لاندويرتشافت und لبينسميتيلسيتشيرهيت مصائد الأسماك مكلينبيرج-فوربوميرن، (ﻷلف M-V)).
1-قبل الجراحة الرعاية وإعداد الحيوانات
2-القاصي كولوستومي العملية
3-الشام العملية (كولوتومي)
4-بعد العملية الجراحية الرعاية
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
جراحة هو جيد التحمل في المجموعات الشام (كولوتومي) والتجريبية (كولوستومي) على حد سواء. الوفيات المحيطة بالجراحة يجب إلا تتجاوز 10% عندما يتم بشكل صحيح تنفيذ إدارة الجراحة والمحيطة بالجراحة. في الأسبوع الأول بعد الجراحة، يعتبر فقدان الوزن الكبير في كلتا المجموعتين التجريبية والشام. حيوانات مجموعة الشام بلوغ بهم نادر الوزن عادة نحو اليوم الرابع بعد العملية الجراحية، ولكن حدوثه يوم واحد في وقت لاحق في المجموعة التجريبية. فقدان الوزن هو أكثر وضوحاً في المجموعة التجريبية، وصلت إلى 21.7 في المائ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
نموذج مورين من العاصمة التي عرضت في هذا البروتوكول موثوق يستنسخ نسيجية ملامح العاصمة البشرية (مثلاً، و حيثياته تطوير المسام اللمفاوية في submucosa قطاعات الأمعاء الملتهبة وسرداب تقصير، والتخفيضات في أرقام الخلية قدح). وبصرف النظر عن هذه الميزة، هذا النموذج هو الناجمة عن عامل المسبّب مشابهة جداً ويقدم بدوره سريرية من متوسطة إلى خفيفة الشدة كما الحال في البشر الأكثر تضررا.
للحصول على النتائج استنساخه والفتك المحيطة بالجراحة مقبولة، بعض الممارسات في مجال تقنيات ميكروسورجيكال ضرو...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
أن تعلن جميع المؤلفين أن لديهم لا تضارب في المصالح.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| مواد التشغيل< / em> | |||
| طبقة أساسية للحرارة ، 6 وات | ThermoLux ، Witte + Sutor GmbH | 461265 | |
| الإيثانول 70٪ (مع ميثيل إيثيل كيتون) | صيدلية مستشفى جامعة Greifswald | ||
| أدوات تطبيق خشبية ، رأس قطني صغير من جانب واحد ، عصا خشبية ، بطول 150 مم | Centramed GmbH ، ألمانيا | 8308370 | لتطهير مجال العملية |
| مقص | Aesculap (BRAUN) | BC064R | |
| ملقط DeBakey الرضحي | Aesculap (BRAUN) | OC021R | |
| حامل إبرة | Aesculap (BRAUN) | BM012R | |
| Vasofix Safety iv< / em> قنية 22G | Braun Melsungen AG ، ألمانيا | 4268091S-01 | |
| VICRYL Plus 4-0 بنفسجي مضفر ؛ V-5 17 م 1/2 ج ؛ 70 سم | ETHICON، Inc. | VCP994H | |
| PDS II 6-0 monofil ؛ V-18 13 مم 3/8c ؛ 70 سم | ETHICON، Inc. | Z991H | |
| BD Plastipak 1 مل (محاقن بإبرة داخلية معقمة) | BD | Medical 305501 | |
| Triacid-N (N-Dodecylpropan-1،3-diamin) | ANTISEPTICA ، ألمانيا | 18824-01 | تطهير الأدوات الجراحية في الحمام بالموجات فوق الصوتية |
| الأدوية < / em > | |||
| الكيتامين 10٪ ، 100 مجم / مل (هيدروكلوريد الكيتامين) | Selectavet ، د. أوتو فيشر جي | إتش 9089.01.00 | 87 مجم / كجم i.p.< / em> |
| Xylasel ، 20 مجم / مل (زيلازين هيدروكلوريد) | سيليكتافيت ، د. أوتو فيشر GmbH | 400300.00.00 | 13 مجم / كجم i.p.< / em> |
| كلوريد الصوديوم 0.9٪ | براون ميلسونجن إيه جي ، ألمانيا | 6697366.00.00 | |
| بوبرينوفيت 0.3 مجم / مل (بوبرينورفين) | باير ، ألمانيا | PZN: 01498870 | 0.1 مجم / كجم s.c. |
| قطرات الترامال, 100 ملغ/مل (ترامادول هيدروكلوريد)غرام | ü nenthal GmbH ، ألمانيا | 10116838 | 1 مجم / مل مياه شرب |
| Ceftriaxon-saar 2 g (ceftriaxone) ؛ | Cephasaar GmbH ، ألمانيا | PZN: 08844252 | 25 مجم / كجم من وزن الجسم i.p.< / em> |
| metronidazole 5 مجم / مل | Braun Melsungen AG ، ألمانيا | PZN: 05543515 | 12.5 مجم / كجم من وزن الجسم i.p< / em> |
| Food | |||
| ssniff M-Z Ereich | ssniff, Germany | V1184-3 | |
| مشروب صلب Dehyprev Vit BIO ، الحقائب | TripleATrading ، هولندا | SDSHPV-75 | |
| Equipment | |||
| Nikon Eclipse Ci-L | Nikon Instruments Europe BV ، ألمانيا | المجهر الخفيف | |
| VetScan HM 5 & nbsp ؛ | Abaxis ، الولايات المتحدة الأمريكية | 770-9000 | محلل أمراض الدم البيطري من 50 & micro ؛ ل الوريدية EDTA-الدم |
| Bandelin SONOREX (حمام بالموجات فوق الصوتية) | Bandelin الإلكترونيات, ألمانيا | RK 100 H | تطهير الأدوات الجراحية |
| Software< / em> | |||
| NIS-Element BR4 البرمجيات | نيكون الأدوات أوروبا BV, ألمانيا | ||
| GraphPad Prism الإصدار 6 | GraphPad Software, Inc. |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.