الالتهاب الرئوي المعدية من بين الأمراض الأكثر شيوعاً في الإنسان. نموذجا مناسباً في فيفو أمر بالغ الأهمية لفهم منشأ المرض واختبار فعالية العلاجات الجديدة. مع هذا الطراز الالتهاب الرئوي تطلع المكنسية مورين، أحد دراسة المرضية وعلاجات جديدة ضد هذه الأمراض القاتلة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نموذج طموح المكنسية مورين من الالتهاب الرئوي البكتيري المرتبطة بالتنفس الصناعي والمكتسبة في المستشفى
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
نماذج مورين العدوى ذات أهمية حاسمة لفهم منشأ المرض واختبار فعالية المداواة رواية مصممة لمكافحة العوامل الممرضة المسببة. الالتهاب الرئوي المعدية هي من بين الأمراض الأكثر شيوعاً المقدمة من المرضى في العيادة وهكذا أوامر نموذجا مناسباً في فيفو . التهاب رئوي نموذجي نماذج استخدام التلقيح داخل الآنف، الذي بإيداع الكائنات المفرط خارج الرئة، مما تسبب في مضاعفات خارج الهدف والأعراض، مثل التهاب الجيوب الأنفية والتهاب المعدة والأمعاء، الصدمات الجسدية أو يمثل التغشية إلى تقليد الهباء الجوي وانتشرت أكثر نموذجية من الالتهاب الرئوي الفيروسي أو الدخني أو الفطرية. هذه النماذج لا تعكس بدقة الآلية المرضية للالتهاب الرئوي البكتيري نموذجي اكتسب المجتمع أو الرعاية الصحية. وفي المقابل، يحاكي هذا النموذج مورين المكنسية طموح الالتهاب الرئوي الطريق الحبرية في الالتهاب الرئوي الحصول على الرعاية الصحية. تطعيم 50 ميليلتر من البكتيريا يسبب تعليق في بلعوم فموي للفئران تخديره تطلع انعكاسية، مما يؤدي إلى الالتهاب الرئوي. مع هذا النموذج، واحدة دراسة الآلية المرضية للعوامل الممرضة المسببة للالتهاب الرئوي وعلاجات جديدة لمكافحة هذه الأمراض.
المقدمة
عدوى الجهاز التنفسي السفلي هي الأمراض المعدية فتكاً في العالم، والسبب الأكثر شيوعاً للوفاة في البلدان النامية1. على الصعيد العالمي، تمثل هذه الإصابات أكثر من 3.2 مليون حالة وفاة1. وباﻹضافة إلى ذلك، المستشفوية الالتهاب الرئوي من بين النماذج الأكثر شيوعاً وفتكا من العدوى المكتسبة بالرعاية الصحية، وهي الناجمة عن العوامل الممرضة أكثر مقاومة للمضادات الحيوية2،3. مسار نموذجي لاقتناء الالتهاب الرئوي البكتيري على حد سواء المكتسبة في المجتمع، والالتهاب الرئوي في المستشفيات هو طموح لمحتويات المكنسية إلى الحويصلات الهوائية. مورين النماذج المستخدمة لدراسة هذه الأمراض في كثير....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
يجب أن يوافق جميع الإجراءات التي تنطوي على الحيوانات الباحث "رعاية الحيوان المؤسسية" واستخدام اللجنة (إياكوك).
1-إعداد العدوى البكتيرية
- عزل المستعمرات البكتيرية.
- خط سلالة بكتيرية (مثلاً، بوماني) أ ( "HUMC1") في مناسبة أجار العقيمة المتوسطة (مثلفول الصويا تريبتيك أجار)، مع الحرص على إنشاء المستعمرات المعزولة.
- احتضان في الظروف المناسبة (مثلاً، بين عشية وضحاها في 37 درجة مئوية).
- تنمو الثقافة بين عشية وضحاها.
- حدد ممثل، مستعمرة معزولة من لوحة أجار مع حلقة إينوكولاتينج عقيمة واستخدامها لتلقيح 10 مل من مرق معقمة مناسبة المتوسطة (مثلاً، مرق الصو....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
بعناية بعد على البروتوكول، استنساخه وقوية ويمكن بسهولة الحصول على البيانات. من المهم أن تلتزم إعداد بروتوكول لواحدة العدوى مخصصة للتجارب بالمقارنة إلى واحد كل منهما الآخر. كما أن من المهم معالجة الفئران بشكل صحيح أثناء إجراء العدوى. تأكد من وضع الفئران في دائرة لتخدير خالية من إيسوفلوراني. سوف الذعر إذا وضعت في غرفة التي كانت مليئة قبل isoflurane الفئران وقد تعاني من الإجهاد الزائد، الذي ربما يمكن أن تمس النتائج التجريبية. بعد تأمين غطاء حاوية، ببطء إدخال إيسوفلوراني بزيادة تركيزه من 0% إ.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
بالتأكيد، أن الفئران ليست البشر مصغرة. ويجب النظر فيها في سياق النتائج التي تم الحصول عليها من نماذج الماوس وتفسيرها لاحقاً لانطباق للبشر، استناداً إلى أوجه الاختلاف والتشابه بين هذين النوعين6. من المهم أيضا أن اختيار السلالة المناسبة الماوس كمعينة تكون أكثر عرضه لبعض أنواع العدوى من الآخرين؛ وينطبق نفس الشيء سلالة الممرض من اختيار16.
من الضروري أن تؤدي العدوى بطريقة متشددة واستنساخه بدرجة عالية. لقاح يمكن أن يكون مميتاً للفئران في قيمة واحدة بعد.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب يعلن أن لديهم لا تضارب المصالح المالية.
شكر وتقدير
وأيده هذا العمل بالمعهد الوطني للحساسية والأمراض المعدية في المعاهد الوطنية للصحة [أرقام المنحة R01 AI117211، R01 AI130060 و R21 AI127954 و AI106375 R42 لدرجة البكالوريوس] ولنا الغذاء والدواء [العقد HHSF223201710199C إلى BML].
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| Agar | BD | 214530 | تتحد مع TSB لصنع |
| حبات TSA ، زجاج البورسليكات | 135003 | التعقيم عن طريق الخبز أو التعقيم قبل كل استخدام | |
| دورق ، 250 مل | Pyrex | 1003 | تستخدم أثناء الاقتباس الدقيق للقاح البكتيري المركز |
| جهاز الطرد المركزي | Sorvall | ST 40R | قادر على 4,000 مرة. ز عند 4 درجة ؛ غرفة C |
| للتخدير | كينت العلمية | VetFlo-0720 | تستوعب ما يصل إلى 5 فئران |
| Cryomold ، متوسط الحجم | Sakura Tissue-Tek | 4566 | قوالب عينات الفينيل التي يمكن التخلص منها ، 15 مرة ؛ 15 ومرات. |
| خيط تنظيف الأسنان | 5 مم Oral-B | 37000469537 | ربط بعمود مستقر حوالي 6 بوصات فوق ارتفاع الطاولة |
| ملقط | VWR | 82027-440 | يستخدم لسحب اللسان برفق من فم الفأر |
| المجانس لأنسجة الرئة | Omni International | TM125-115 | الأوتوكلاف قبل الاستخدام الأول ؛ شطف بين العينات |
| Isoflurane للتخدير | Abbott | 10015516 | يمكن استخدام الأدوية البديلة. تعديل الإجراء وفقا لذلك |
| خرطوشة iSTAT | Abbott | 03P79-25 | تتوفر خراطيش مختلفة لتناسب احتياجاتك |
| الكيتامين ، 100 مجم / مل | من الإمدادات الطبية الغربية | 4165 | تمييع 1:10 في PBS إلى 1 مجم / مل وتمزج مع الزيلازين بمعدل 1 مجم / مل |
| مرهم للعيون | دموع Akorn | متجددة | تجنب لمس العين بطرف الموزع |
| درجة حرارة القطع المثلى (O.C.T.) مركب | فيشر العلمي | 23-730-571 | يستخدم لتجميد عينات الرئة عند -80 درجة ؛ C للتحضير لقسم علم الأمراض |
| طبق بتري | VWR | 25384-302 | البوليسترين ، يمكن التخلص منه ، معقم ، 100 مرة ؛ 15 مم |
| محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS) | Corning | 21-031-CM | Dulbecco's PBS بدون أطراف ماصة الكالسيوم والمغنيسيوم |
| ، 200-&mu ؛ L | VWR | 10017-044 | الأوتوكلاف قبل استخدام |
| ماصة ، 200-& L | Gilson | Pipetman P200 | الأوتوكلاف والمعايرة قبل الاستخدام |
| الموزع ، الخلية البكتيرية | Bel-Art | F377360006 | التعقيم عن طريق الخبز أو التعقيم قبل كل استخدام |
| شريط التحريك ، مغناطيسي ، 7.9 مم القطر والأوقات ؛ 38.1 مم طول | VWR | 58948-150 | يستخدم لتقليب اللقاحات البكتيرية المركزة أثناء نقل |
| لوحة التحريك ، المغناطيسية | Corning | PC-620D | يستخدم لتقليب اللقاحات البكتيرية المركزة أثناء تناول |
| مرق الصويا Tryptic (TSB) | BD | 211822 | يمزج مع أجار لصنع |
| قارورة TSA ، مخروطي ، معقم ، 50 مل | Corning | 431720 | يستخدم لتحضير قارورة اللقاح البكتيرية |
| ، مخروطي ، معقم ، 500 مل | 431123 | Corning يستخدم لتركيز اللقاحات لتحضير قارورة اللقاح | |
| المجمدة ، مبردة ، 2.0 مل | 430659 Corning | يستخدم للتخزين المبرد لللقاح البكتيري المركز | |
| زيلازين ، 20 مجم / مل | Akorn | AnaSed Injection | يخفف 1:20 في PBS إلى 1 مجم / مل ويمزج مع الكيتامين عند 1 مجم / مل |
المراجع
- Media Centre, W. H. O. World Health Organization. Fact Sheet - Top 10 Causes of Death. , Available from: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs310/en/ (2017).
- Spellberg, B., Talbot, G. H. Recommended Design Features of Future Clinical Trials of Antibacterial Agents for Hospital-Acqu....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
