ركائز مع تصلب في نطاق كيلوباسكال مفيدة لدراسة استجابة الخلايا لفسيولوجيا ذات الصلة الصغرى والبيئة صلابة. استخدام مجهر الأسفار ويديفيلد فقط، يمكن تحديد معامل للشباب من الهلام لينة سيليكون استخدام المسافة بادئة مع مجال مناسبة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
قياس صلابة من ركائز السيليكون لينة للدراسات ميتشانوبيولوجي باستخدام مجهر الأسفار ويديفيلد
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
الأنسجة الرخوة في جسم الإنسان وعادة ما يكون تصلب في نطاق كيلوباسكال (كيلو باسكال). بناء على ذلك، ثبت ركائز مرنة السيليكون والمائية لتكون ركائز مفيدة لاستزراع الخلايا في المكروية المادي الذي يحاكي جزئيا في فيفو الظروف. وهنا، يقدم بروتوكول بسيط لتميز بواقي للشباب من ركائز مطاطا خطي الخواص المستخدمة عادة للدراسات ميتشانوبيولوجي. يتكون البروتوكول من إعداد الركازة سيليكون ناعمة على طبق بيتري أو سيليكون قاسية، طلاء السطح العلوي للركيزة سيليكون مع الخرز الفلورسنت، واستخدام مجال ملليمتر-مقياس للمسافة البادئة السطح العلوي (بخطورة)، التصوير في فلوري الخرز على سطح السيليكون مسافة بادئة باستخدام مجهر الأسفار، وتحليل الصور الناتجة لحساب معامل للشباب من الركازة سيليكون. اقتران السطح العلوي للركيزة مع بروتين خارج الخلية مصفوفة بواقي (بالإضافة إلى الخرز الفلورسنت) يسمح الركيزة السيليكون يتم استخدامها بسهولة لطلاء الخلية والدراسات اللاحقة باستخدام تجارب الفحص المجهري قوة الجر. استخدام سيليكون قاسية، بدلاً من طبق بيتري، كالقاعدة السيليكون لينة، يمكن استخدام الدراسات ميتشانوبيولوجي التي تنطوي على امتداد خارجي. ميزة محددة من هذا البروتوكول هو مجهر الأسفار ويديفيلد، التي تتوفر عادة في العديد من المختبرات، المعدات الرئيسية اللازمة لتنفيذ هذا الإجراء. نظهر هذا البروتوكول عن طريق قياس معامل للشباب من ركائز السيليكون لينة من بواقي مطاطا مختلفة.
المقدمة
الخلايا في الأنسجة الرخوة الموجودة في بيئة الجزئي الذي تصلب في كيلوباسكال مجموعة1، على النقيض من أطباق زراعة الأنسجة التي تصلب عدة أوامر من حجم أكبر. وأظهرت تجارب مبكرة مع الخلايا في المصفوفة خارج الخلية ركائز الناعمة المغلفة بالبروتين أن تصلب الركازة التأثيرات كيف الخلايا الانتقال، فضلا عن التمسك بالمصفوفة خارج الخلية تحت2،3. في الواقع، يؤثر تصلب الركازة أساسا وظيفة الخلية4 بطريقة مماثلة للإشارات البيوكيميائية انتشارا. المواد الهلامية polyacrylamide (مغلفة بالبروتينات المصفوفة خارج الخلية) (تتخلل المياه) الهلاميات المائية التي استخدمت على نطاق واسع كخلية ركائز الثقافة للدراسات ميتشانوبيولوجي5. بولي دايمثيل سيلوكسان (PDMS)، سيليكون الأكثر شيوعاً (polysiloxane)، قد استخدمت على نطاق واسع سيليكون قاسية مع تصلب ميجا باسكال-مجموعة ل تصنيع ميكرون-مقياس6. أكثر مؤخرا, لينة سيليكون ركائز مع تصلب في النطاق ذات الصلة أكثر فسيولوجيا كيلوباسكال وقد استخدمت كركائز ثقافة الخلية للدراسات ميتشانوبيولوجي7،8.
وقد استخدمت عدة أساليب لقياس صلابة ركائز مرنة، بما في ذلك مجهر القوة الذرية، تشوه العيانية عينات كاملة عليها، ريولوجيا، وتمتد المسافة البادئة باستخدام المجالات وكرويا مقلوب ميكرويندينتورس9 . بينما كل أسلوب له مزاياه وعيوبه، المسافة البادئة مع مجال هي طريقة خاصة بسيطة ولكنها دقيقة إلى حد ما فقط ويتطلب الوصول إلى مجهر الأسفار ويديفيلد. وقد استخدمت المسافة البادئة مع مجال معدني لقياس صلابة من الهلاميات المائية في الأعمال السابقة3،،من910. الأعمال المبكرة التي أثبتت أهمية صلابة الركيزة لحركة الخلية تستخدم هذا الأسلوب لتحديد المائية الركازة صلابة3. في الآونة الأخيرة، استخدمت أيضا لتوصيف أنيقة10مجهرية [كنفوكل].
هنا، نحن نقدم بروتوكول خطوة بخطوة لإعداد الركازة سيليكون لينة، اقتران الخرز الفلورية (بروتين مصفوفة خارج الخلية مثل الكولاجين وأنا) فقط للسطح العلوي، التصوير مجالاً الطعج واستخدام السطح العلوي المرحلة و الأسفار التصوير، على التوالي، وأخيراً تحليل الصور لحساب معامل للشباب من الركازة سيليكون. يمكن أن تكون الركيزة السيليكون لينة أعد بهذه الطريقة استخدامها بسهولة لتجارب الفحص المجهري قوة الجر. كما يتيح استخدام سيليكون قاسية (بدلاً من طبق بيتري) كالقاعدة السيليكون لينة الدراسات ميتشانوبيولوجي باستخدام امتداد خارجي. متى استلزم الأمر ذلك، يتم أيضا الإشارة إلى الاعتبارات العملية اللازمة لتجنب المضاعفات المحتملة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1-تلفيق الركازة السيليكون لينة
- وزن أصل 1.75 ز المكون A و g 1.75 العنصر ب (A:B = 1:1) من السيليكون لينة الاستومر kit (البوليسترين) باستخدام وزنها الصواني.
- إضافة المكون A إلى المكون ب في علبة وزنها ومزجها معا لمدة 5 دقائق عصا قضيب مناسبة باستخدام.
- إضافة الخليط أعلاه إلى 35 مم طبق بيتري. السماح الخليط أن تنتشر بالتساوي عبر صحن بيتري لبضع دقائق.
ملاحظة: اختيار قطر طبق بيتري ومقدار السيليكون لينة ستحدد سماكة السيليكون لينة. وهنا سوف يكون السمك حوالي 3.5 مم؛ مزيد من المعلومات حول اختيار سمك الاستومر في جزء المناقشة . - ضع طبق بيتري مع خليط السيليكون، مع الغطاء قبالة، في فراغ غرفة لمدة 15 دقيقة لإزالة أي فقاعات الهواء. وخلال هذا الوقت، قبل تسخين صفيحة إلى 70 درجة مئوية.
- مجرد صفيحة تصل إلى 70 درجة مئوية، ضع شريحة زجاجية عليها ثم قم بوضع طبق بيتري مع خليط السيليكون على الشريحة الزجاجية. واسمحوا السيليكون علاج عند 70 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. لا تضع الطبق البوليستيرين مباشرة على صفيحة، كما قد تذوب طبق بيتري.
2-اقتران ميكروبيدس الفلورية السيليكون لينة
- ضع السيليكون لينة الشفاء (في طبق بتري كشفت) في غرفة الأشعة فوق البنفسجية عميقة (ضميمة مع مصباح الأشعة فوق البنفسجية عميقة لأطوال موجية الضوء نيوتن متر 185 و 254). تعرض العينة السيليكون لينة (~ 5-10 سم بعيداً عن مصباح الأشعة فوق البنفسجية) للأشعة فوق البنفسجية العميقة الخفيفة لمدة 5 دقائق.
- بينما السيليكون هو التعرض للأشعة فوق البنفسجية العميقة، المضي قدما في الخطوات 2، 2، 2-6 أدناه. بعد التعرض الأشعة فوق البنفسجية العميقة، ديغا قاعة الأشعة فوق البنفسجية العميقة لمدة 5 دقائق على الأقل قبل استرداد العينة.
- وفي الوقت نفسه، تزن بملغ 19 من كاربودييميدي 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) (EDC) في أنبوب ميكروسينتريفوجي 1.5 مل وإضافة 500 ميكروليتر من المياه المياه (DI) لذلك. حل الصادرات التي تهز الأنبوب بلطف.
- في أنبوب ميكروسينتريفوجي مل 1.5 منفصلة، تزن بملغ 11 من N-هيدروكسيسولفوسوكسينيميدي (سالفو--دائرة الصحة الوطنية) وإضافة 500 ميكروليتر من المياه دي لأنها وحل سالفو--دائرة الصحة الوطنية التي تهز الأنبوب بلطف. ثم، الجمع بين الحلول سالفو--دائرة الصحة الوطنية وتنمية الصادرات في أنبوب ميكروسينتريفوجي واحد.
- لهذا الحل تنمية الصادرات/سالفو--دائرة الصحة الوطنية، بإضافة 30 ميكروليتر ميكرومترات 0.44 قطرها الأحمر (أو أي لون الفلورية الأخرى استناداً إلى مكعبات التصفية المتوفرة في المجهر الأسفار) كاربوكسيلات تعديل ميكروبيدس نيون (مع تركيز مخزون 1% w/v).
- لتنمية الصادرات/سالفو--دائرة الصحة الوطنية/حبة المخلوط بإضافة 0.02 مغ الكولاجين أنا (من ذيل الفئران، تركز الأسهم 4 مغ/مل في حمض الخليك 0.02 M) للحصول على تركيز حوالي 0.02 ملغ/مل.
- دوامة تنمية الصادرات/المستشفيات/حبة/الكولاجين أنا المخلوط بإيجاز لضمان أن الخرز موزعة بالتساوي في جميع أنحاء، قبل اقتران.
- "الماصة؛" 1 مل تنمية الصادرات/المستشفيات/حبة/الكولاجين أنا الخليط على قطعة من بارافيلم وضعت على رأس آخر غطاء ضحلة، مسطحة (ذات قطر أصغر). عكس طبق بيتري مع سيليكون ناعمة في هذا الخليط حيث أن سطح السيليكون لينة المخلوط بالاتصال ولكن لا تلمس مباشرة على سطح غطاء صحن بيتري أصغر أدناه. رفع طبق بيتري مقلوب، استخدام الشرائح الزجاجية واحد أو اثنين تحت أي من جانبي الفواصل المقلوبة طبق بيتري.
ملاحظة: يرجى الرجوع إلى الشكل 1 لمعرفة كيف يتم تنفيذ الخطوة 2.7. - وتغطي العينة مع رقائق الألومنيوم واحتضانها في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة.
- إزالة طبق بيتري مع السيليكون لينة ووضعه تستقيم (سيليكون--الجانب الأعلى).
- أغسل سطح السيليكون لينة مع الفوسفات مخزنة المالحة (PBS) بإضافة 2 مل من برنامج تلفزيوني (درجة الحموضة 7.4) إلى الطبق. فلنجلس لبضع دقائق. نضح إيقاف برنامج تلفزيوني وتغسل السيليكون مرة أخرى مع 2 مل من برنامج تلفزيوني. واسمحوا علاج سيليكون المزيد لمدة يوم واحد. لهذا السبب، وضع العينة السيليكون لينة في برنامج تلفزيوني في 37 درجة مئوية بين عشية وضحاها.
3-قياس "صلابة السيليكون" مع "مسافة بادئة المجال" استخدام "مجهر الأسفار ويديفيلد"
- استرداد طبق بيتري مع السيليكون لينة والتأكد من أنه يحتوي على 1 مل على الأقل من برنامج تلفزيوني أن يكون سطح سيليكون مم عدة تحت سطح السائل.
- استخدام الملقط أشار، قطره خمسة ملم 1 الزركونيوم المجال إيندينتورس على السيليكون لينة. تزج المجالات في الوسط السائل وإفلاتها، بعيداً عن حواف طبقة السيليكون وعلى الأقل 5 أقطار indentor بعيداً عن موقع إيندينتورس الأخرى.
ملاحظة: عندما أسقطت فوق سطح السائل، قد تفشل المجالات بسبب التوتر السطحي في الوسط السائل الدخول المتوسطة السائل (عدد عشري). - ضع طبق بيتري مع السيليكون لينة على المسرح المجهر حيث أنه من الممكن للصورة عن طريق طبق بيتري قاعدة.
- استخدام التصوير مرحلة ذات هدف X 10 (مثل جافة 10 X هدف نا 0.30)، قم بتحديد موقع وتجلب indentor مجال في التركيز.
- تأخذ صورة مرحلة جزء أو كلها إيندينتور وحفظ هذه الصورة. استخدام مسح بلاط إذا كانت متوفرة. إذا كان إيندينتور أي عيوب واضحة، تجاهل واستبداله بآخر إيندينتور.
- ظل يعيش مرحلة التصوير، عموم إلى يسار حافة إيندينتور حيث تكون الحافة اليسرى من الإطار على الأقل مسافة ~1.5 آر من مركز إيندينتور. ضمان أن مركز إيندينتور يبقى مرئياً على الجانب الأيمن، قريبة من الحافة اليمنى من إطار الصورة. تأخذ صورة مرحلة وحفظه.
- التبديل مصدر الضوء المجهر على الإضاءة لقناة الأحمر نيون. مع xو y-التركيز دون تغيير الإحداثيات ( x-y موقف وسط indentor داخل لكن قرب الحافة اليمنى من الإطار)، أسفل (النقصان Z) حتى ميكروبيدس نيون أحمر تحت المركز إيندينتور المجال ل مجرد الخروج من التركيز.
- تأخذ z-مكدس مع صورة لكل z-الزيادة 0.5 ميكرون حتى ميكروبيدس في الطبقة العليا من السيليكون أبعد ما تكون عن إيندينتور (بالقرب من الحافة اليسرى للإطار التصوير) الخروج من التركيز.
- كرر الخطوات من 3.4 3.8 مع إيندينتورس أخرى في العينة.
4-حساب صلابة سيليكون (معامل يونغ)
- فتح صورة المرحلة إيندينتور استخدام إيماجيج، انقر فوق الأداة خط، وقياس القطر إيندينتور في بكسل. انقر مع الاستمرار على نقطة على حافة indentor، حرك المؤشر إلى نقطة معاكس تماما على الحافة وملاحظة طول بكسل عرض في شريط الحالة للإطار الرئيسي ImageJ قبل تحرير المؤشر.
- تأكد من تعيين وحدة طول بكسل بواسطة النقر فوق تحليل | ضبط مقياس والتحقق من وحدة الطول.
- تحويل دائرة نصف قطرها إيندينتور بالبكسل ميكرومتر مع مراعاة تكبير موضوعية وحجم بكسل كاميرا CCD (R في ميكرومتر = R في بكسل x حجم بكسل كاميرا CCD في ميكرومتر/التكبير موضوعية).
- فتح قناة الأحمر z-كومة من الصور ميكروبيد (إذا كانت ميكروبيدس الأحمر نيون) في إيماجيج بالنقر فوق الملف | الاستيراد | صورة تسلسل وحدد أي صورة في المكدس، وانقر فوق موافق لفتح المكدس.
ملاحظة: F1 هو رقم الإطار الذي ميكروبيدس تحت مركز إيندينتور في التركيز ممكن أفضل و F2 هو رقم الإطار الذي يتم ميكروبيدس (في منطقة ~1.5 R بعيداً عن مركز حبة) قرب الحافة اليسرى من الإطار في التركيز ممكن أفضل. ض-هو الفرق بين إطارين δ عمق المسافة البادئة.- باستخدام أداة سطر في إيماجيج، رسم خط عبر ميكروبيد واضحة المعالم في الصورة. انقر فوق تحليل | ارسم الشخصية وانقر على زر لايف للحصول على كثافة المسح الضوئي تحديث خط عبر حبة أثناء تحديد أطر مختلفة. ويمكن اختيار الإطار الذي يعطي أعلى قيمة لكثافة قصوى كالإطار في التركيز.
- ولما z-الزيادة بين الإطارات في مكدس z-0.5 ميكرومتر، حساب عمق المسافة البادئة في ميكرومترات ك δ = (F2-F1) × 0.5.
- حساب القوة تمارسها على الهلام indentor بسبب وزنها (ناقص معارضة قوة الطفو)، هذا هو، قوة المسافة البادئة و، كحجم indentor x (كثافة indentor-كثافة متوسطة السائل) x التسارع الجاذبية. استخدام المعادلة F = x (4/3) 3.142 x (ص3) x (ρindentor -ρالمتوسطة) × ز حيث R هو نصف قطر إيندينتور، ρindentor هو كثافة indentor، ρالمتوسطة كثافة متوسطة السائل وهو g التسارع الجاذبية (9.81 م/ث2). التعبير عن جميع الكميات على الجانب الأيسر في وحدات SI للحصول على F (N).
- حساب معامل للشباب (ه) من السيليكون استخدام معدلة11 هيرتز النموذجي12 المعادلة:
حيث:
ج = عامل تصحيح الذي يقوم بتعديل التعبير النموذجي هيرتز الذي يلي ذلك؛
v = نسبة بواسون جل سيليكون (التي اتخذت ك 0.5 أما بالنسبة للمواد7)؛
F = القوة البادئة؛
R = نصف قطر إيندينتور؛ و
Δ = عمق المسافة البادئة.
التعبير عن جميع الكميات على الجانب الأيسر في وحدات SI للحصول على ه في السلطة الفلسطينية.- حساب معامل تصحيح c كما يلي3:
حيث:
; و
.
تجدر الإشارة إلى أن هذا عامل التصحيح على وجه التحديد ليتم استخدامها فقط عند السيليكون لينة تتمسك جيدا إلى طبق بتري (أو سيليكون قاسية) تحته (وهي الحال هنا). - حساب ارتفاع ح طبقة السيليكون لينة استناداً إلى كمية سيليكون أضيف وقطر طبق بيتري. وبدلاً من ذلك، الحصول على ح مباشرة بتحديد اﻻحداثي z للأسطح العلوية والسفلية لطبقة سيليكون بتصوير المرحلة (شوائب طفيفة موضع التركيز في أما السطح). لاحظ أنه بالنسبة ح كبير (ح2 > Rδ)، عامل تصحيح ج قريبة من 1.
- حساب معامل تصحيح c كما يلي3:
- كرر الخطوات من 4، 1-4، 4 لكل إيندينتور. متوسط معامل للشباب التي تم الحصول عليها من كل إيندينتور للحصول على معامل للشباب يعني للعينة سيليكون.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
استخدام بروتوكول المفصلة أعلاه، نحن إعداد السيليكون لينة في 35 مم طبق بيتري والشفاء عند 70 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة وإلى جانب ميكروبيدس نيون (والكولاجين وأنا) إلى السطح العلوي تخطيطياً كما مبين في الشكل 1. وقد استخدمت الأشعة فوق البنفسجية العميقة سابقا للبروتين في نهاية المطاف اقتران لركائز13. لاحظ أن (ط) شروط المعالجة المستخدمة هنا محددة لهذا السيليكون لينة ويتم تنفيذ (الثاني) بقياس المسافة البادئة في اليوم التالي كما متوقع السيل...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
بينما يكون الأسلوب المسافة البادئة المجال سهلة التنفيذ، يجب إيلاء اهتمام دقيق لاختيار إيندينتور وسمك العينة السيليكون لينة. المعادلة المستخدمة لحساب معامل للشباب يكون صالحاً بمقتضى مجموعة من الشروط11وهذه راضون عادة عندما يكون سمك العينة سيليكون > 10% من قيمة radius indentor و < ~ 13 × نصف قطرها إيندينتور. وجدنا أن سمك سيليكون x 5-10 دائرة نصف قطرها إيندينتور كان اختياراً جيدا، حيث سمك العينة ليست عالية جداً (أيالمسافة العامل الموضوعي لم يصبح القيد) وتصلب المحسوبة ليست حساسة للغاية القيمة ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
شكر وتقدير
ونحن نشكر مارغريت غارديل للسماح باستخدام رهيوميتير سخاء. نعترف بدعم من المعهد الوطني للصحة (1R15GM116082) الذي مكن هذا العمل.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| CY 52-276 A / B طقم المطاط الصناعي السيليكون | Dow Corning | CY 52-276 | يخزن في درجة حرارة الغرفة |
| Thermo Scientific Pierce EDC | Fisher Scientific | PI22980 | Store عند -20 درجة ؛ ج |
| ثيرمو علمية بيرس سولفو-NHS متشابك | فيشر Scientific | PI-24510 | مخزن في 4 درجة ؛ C |
| جزيئات الوردي الفلورية كربوكسيل ، 0.4-0.6 & م ، 2 مل | Spherotech، Inc. | CFP-0558-2 | تخزين في 4 درجة ؛ C ، لا تجمد |
| 1.0 مم حبات الزركونيوم المغسولة بالحمض | OPS Diagnostics LLC | BAWZ 1000-250-33 | |
| غرفة الأشعة فوق البنفسجية العميقة مع جهاز تفريغ الأوزون | Novascan Technologies، Inc. | PSD-UV4 ، OES-1000D | |
| مجهر مضان واسع المجال | Leica Microsystems | DMi8 | |
| Collagen I ، من ذيل الفئران | Corning | 354236 | تركيز المخزون = 4 مجم / مل ؛ تخزينها في 4 درجة ؛ C |
| برنامج المجال العام | ImageJ-NIH | N / A | / A |
المراجع
- Handorf, A. M., Zhou, Y., Halanski, M. A., Li, W. J. Tissue stiffness dictates development, homeostasis, and disease progression. Organogenesis. 11 (1), 1-15 (2015).
- Pelham, R. J., Wang, Y. -L. Cell locomotion and focal adhesions are regulated by substrate flexibility. Proceedings of the National Academy of Sciences. 94 (25), 13661-13665 (1997).
- Lo, C. M., Wang, H. B., Dembo, M., Wang, Y. L. Cell movement is guided by the rigidity of the substrate. Biophysical Journal. 79, 144-152 (2000).
- Discher, D. E., Janmey, P., Wang, Y. -L. Tissue cells feel and respond to the stiffness of their Substrate. Science. 310, 1139-1143 (2005).
- Kandow, C. E., Georges, P. C., Janmey, P. A., Beningo, K. A. Polyacrylamide hydrogels for cell mechanics: steps toward optimization and alternative uses. Methods in Cell Biology. 83, 29-46 (2007).
- Johnston, I. D., McCluskey, D. K., Tan, C. K. L., Tracey, M. C. Mechanical characterization of bulk Sylgard 184 for microfluidics and microengineering. Journal of Micromechanics and Microengineering. 24 (3), 035017(2014).
- Style, R. W., et al. Traction force microscopy in physics and biology. Soft Matter. 10 (23), 4047-4055 (2014).
- Lee, E., et al. Deletion of the cytoplasmic domain of N-cadherin reduces, but does not eliminate, traction force-transmission. Biochemical and Biophysical Research Communications. 478 (4), 1640-1646 (2016).
- Frey, M. T., Engler, A., Discher, D. E., Lee, J., Wang, Y. L. Microscopic methods for measuring the elasticity of gel substrates for cell culture: microspheres, microindenters, and atomic force microscopy. Methods Cell Biol. 83, 47-65 (2007).
- Lee, D., Rahman, M. M., Zhou, Y., Ryu, S. Three-dimensional confocal microscopy indentation method for hydrogel elasticity measurement. Langmuir. 31 (35), 9684-9693 (2015).
- Dimitriadis, E. K., Horkay, F., Maresca, J., Kachar, B., Chadwick, R. S. Determination of elastic moduli of thin layers of soft material using the atomic force microscope. Biophysical Journal. 82 (5), 2798-2810 (2002).
- Hertz, H. Über die Berührung fester elastischer Körper. Journal für die reine und angewandte Mathematik. 92, 156-171 (1882).
- Azioune, A., Carpi, N., Tseng, Q., Théry, M., Piel, M. Protein micropatterns: a direct printing protocol using deep UVs. Microtubules: In Vivo. Cassimeris, L., Tran, P. , Academic Press. Burlington, San Diego. 133-146 (2010).
- Bashirzadeh, Y., Qian, S., Maruthamuthu, V. Non-intrusive measurement of wall shear stress in flow channels. Sensors and Actuators A: Physical. 271, 118-123 (2018).
- Muhamed, I., Chowdhury, F., Maruthamuthu, V. Biophysical tools to study cellular mechanotransduction. Bioengineering (Basel). 4 (1), 12(2017).
- Dumbali, S. P., Mei, L., Qian, S., Maruthamuthu, V. Endogenous sheet-averaged tension within a large epithelial cell colony. Journal of Biomechanical Engineering. 139 (10), 101008(2017).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
