مقالة منهجية

أسلوب صافي المستندة إلى القالب لإنشاء أنسجة القلب خالية من السقالة ثلاثي الأبعاد

DOI:

10.3791/58252

⸱

أغسطس 5, 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Cardiac Surgery, The First Hospital of Jilin University, 2Division of Cardiac Surgery, Johns Hopkins Hospital

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هذا البروتوكول وصف أسلوب المستندة إلى القالب صافي لإنشاء أنسجة القلب خالية من السقالة ثلاثية الأبعاد مع السلامة الهيكلية مرضية وسلوك الضرب متزامن.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويصف هذا البروتوكول الرواية وسهلة الأسلوب صافي المستندة إلى القالب لإنشاء ثلاثية الأبعاد (ثلاثي الأبعاد) أنسجة القلب دون مواد إضافية سقالة. وتعزل cardiomyocytes المستمدة من الخلايا الجذعية pluripotent التي يتسبب فيها الإنسان (اللجنة التوجيهية-المهاجرة) والليفية القلب البشري (هكفس)، والخلايا البطانية البشرية الوريد السري (هوفيكس) وتستخدم لتوليد تعليق خلية مع 70% اللجنة التوجيهية-المهاجرة، هكفس 15%، و 15% هوفيكس. أنها تربى اشتركت في نظام "قطره معلقة" مرفق منخفضة للغاية، الذي يحتوي على ميكروبوريس للتكثيف مئات الماغنيسيوم في وقت واحد. تجميع الخلايا وتشكل الماغنيسيوم الضرب تلقائياً بعد 3 أيام ثقافة المشارك. الماغنيسيوم تحصد، المصنفة في تجويف قالب رواية، ومثقف في شاكر في الحاضنة. الماغنيسيوم تصبح أنسجة فنية ناضجة حوالي 7 أيام بعد البذر. الأنسجة المتعددة الطبقات الناتجة تتألف من الماغنيسيوم تنصهر مع السلامة الهيكلية مرضية وسلوك الضرب متزامن. هذا الأسلوب الجديد إمكانات واعدة كأسلوب استنساخه وفعالة من حيث التكلفة لإنشاء هندسة الأنسجة لعلاج فشل القلب في المستقبل.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هندسة الأنسجة القلبية الحالي يهدف إلى تطوير علاج لاستبدال أو إصلاح هيكل ووظيفة النسيج المصاب احتشاء عضلة القلب1. طرق لإنشاء نماذج ثلاثية الأبعاد من أنسجة القلب نستعرض خصائص الهوس والكهربية الهامة من أنسجة القلب الأصلي وقد تم التوسع بسرعة2،3. تم استكشاف مجموعة متنوعة من الاستراتيجيات والمستخدمة في الدراسات4،5. أساليب تتراوح هذه استخدام محددة الاصطناعية والطبيعية النشطة بيولوجيا الهلاميات المائية، مثل الببتيدات وفيبرينوجين، الجيلاتين والكولاجين6، تقنيات الترسيب بيو-حبر2 وبيوبرينتينج التكنولوجيات7.

لقد ثبت أن أساليب خالية من سقالة يمكن أن تنتج أنسجة قابلة للمقارنة كالطرق على أساس مادة بيولوجية، دون عيوب إدراج مواد السقالات الخارجية8. كاسبي أورين et al. أثبت أن دمج أنواع مختلفة من الخلايا يمكن توليد عالية vascularized أنسجة القلب هندسيا البشرية9. الذقن وآخرون وضع طريقة طباعة ثلاثية الأبعاد لإنشاء تصحيح القلب من الماغنيسيوم. تتألف البقع الناتجة من cardiomyocytes، والخلايا الليفية، وخلايا بطانية في 70:15:15 نسبة10. الماغنيسيوم قد ثبت أن تكون فعالة "لبنات" لإنشاء أنسجة القلب خالية من السقالة، كما أنها تقاوم ضد نقص وتمتلك سلامة ميكانيكية كافية لغرس11،12. أظهرت الدراسات السابقة تلفيق العديد من الطرق لإنشاء كروي، بما في ذلك استخدام المعلقة إسقاط غزل قوارير13وموائع جزيئية نظم14، الأسلوب والأسطح غير ملتصقة الثقافة غير المصقول أو المطلي مع [اغروس] قوالب الصغيرة15. في هذا البروتوكول، نستخدم معلقة جهاز الإسقاط، الذي يحتوي على ميكروبوريس للتكثيف مئات الماغنيسيوم في وقت واحد.

تقدم هذه الدراسة الرواية والأسلوب كفاءة خالية من السقالة لإنشاء أنسجة القلب، والتي تشمل البذر يدوياً الماغنيسيوم في تجويف قالب مربعة وتفرخ الأنسجة على شاكر للنضج. نشر الأوكسجين تحت ظروف الثقافة الثابتة المعتادة، ويقتصر على الجوانب الخارجية لبناء الأنسجة، أسفر عن نخر المركزية. ومع ذلك، مع الصافي العفن، مغمورة جميع الماغنيسيوم تبذر في القالب في وسائل الإعلام مع حركة فلويديك مستمرة، مما يسمح لزيادة نشر المواد المغذية والأكسجين. بالإضافة إلى ذلك، هذا الأسلوب القائم على العفن يسمح بإنشاء متزامنة من بقع الأنسجة مختلفة الأحجام مع الحد الأدنى من الجهد اليدوي، ويمكن بسهولة إزالة الأنسجة الناتجة من العفن. يسمح هذا الأسلوب رواية لإنشاء كفاءة واستنساخه من بقع القلب خالية من السقالة، متعدد الطبقات.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1-إعداد كارديوميوسيتيس

  1. معطف لوحات 6-جيدا مع الغشاء مصفوفة والثقافة التي يسببها الإنسان pluripotent الخلايا الجذعية (هيبسكس) كما هو موضح سابقا17.
  2. تفرق هيبسكس في هيبسك-CMs باستخدام الأساليب المذكورة سابقا18.
  3. في د 16-18 ما بعد التمايز، تعليق كارديوميوسيتيس بدهن كل بئر مع 2 مل 1 × مخزنة الفوسفات المالحة (PBS) دون الكالسيوم أو المغنيسيوم، تليها الحضانة مع 1 مل/جيدا لكاشف الانفصال التربسين أو الخلية (انظر الجدول من المواد) لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة.
  4. تحييد الكاشف الانفصال التربسين أو الخلية (انظر الجدول للمواد) باستخدام وحدة تخزين تساوي معهد ميموريال بارك في روزويل (ربمي) خلية الإعلام تستكمل مع B-27 (وسائل الإعلام خلية ربمي/ب-27). "الماصة؛" صعودا وهبوطاً لتخفيف أي خلايا التقيد بها.
  5. جمع cardiomyocytes مع وقف التنفيذ مع ماصة 10 مل مصلية وتحويلها إلى أنبوب مخروطي 50 مل.
  6. الطرد المركزي بتعليق خلية في 250 x ز لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة للحصول على بيليه خلية.
  7. ريسوسبيند بيليه في 10 مل الإعلام خلية ربمي/ب-27.
  8. الجمع بين 20 ميليلتر من تعليق خلية مع مبلغ مساو من محلول تريبان الأزرق 0.4% وتخلط برفق.
  9. استخدام هيموسيتوميتير يدوي للاعتماد والحصول على جدوى تركيز وخلية من تعليق خلية.

2-إعداد الخلايا الليفية

  1. بدء ثقافة خط الخلية (نوع البطين الكبار) تنتجها الخلايا الليفية القلب البشري (HCF) كما هو موضح سابقا16.
  2. تعليق هكفس التي تفرخ لهم بمبلغ مناسب لكاشف الانفصال التربسين أو الخلية (انظر الجدول للمواد) لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة16. قارورة T175، استخدمت 10 مل كاشف الانفصال التربسين أو الخلية.
  3. تحييد الكاشف الانفصال التربسين أو الخلية (انظر الجدول للمواد) باستخدام وحدة تخزين متساوية من المتوسطة، ثم نقل العينة إلى أنبوب مخروطي 50 مل والطرد المركزي من تعليق خلية في 250 x ز لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة للحصول على بيليه.
  4. ريسوسبيند بيليه في 10 مل متوسط النمو تنتجها الخلايا الليفية (انظر الجدول للمواد).
  5. الجمع بين 20 ميليلتر من تعليق خلية HCF مع مبلغ مساو من محلول تريبان الأزرق 0.4% وتخلط برفق.
  6. استخدام العداد الآلي الخلية أو هيموسيتوميتير اليدوي للاعتماد والحصول على جدوى تركيز وخلية من تعليق خلية جديدة.

3-إعداد خلايا بطانية

  1. بدء ثقافة خط الخلية غشائي (هوفيك) الوريد السري البشرية كما هو موضح سابقا17. تعليق هوفيكس التي تفرخ لهم بمبلغ مناسب لكاشف الانفصال التربسين أو الخلية (انظر الجدول للمواد) لمدة 3 دقائق في درجة حرارة الغرفة17. تحييد الكاشف الانفصال التربسين أو الخلية (انظر الجدول للمواد) باستخدام وحدة تخزين متساوية من المتوسطة، ثم نقل إلى أنبوب مخروطي 50 مل والطرد المركزي من تعليق خلية في 250 x g لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة للحصول على بيليه.
    ملاحظة: لقارورة T175، استخدمت 10 مل كاشف الانفصال التربسين أو الخلية.
  2. ريسوسبيند بيليه في 10 مل متوسط نمو الخلايا البطانية (انظر الجدول للمواد).
  3. الجمع بين 20 ميليلتر من تعليق هوفيك ووصمة عار بمبلغ مساو من محلول تريبان الأزرق 0.4% وتخلط برفق.
  4. استخدام عداد الآلي خلية أو هيموسيتوميتير يدوي للاعتماد والحصول على جدوى تركيز وخلية من تعليق خلية.

4-إنشاء شنقاً الماغنيسيوم قطره

  1. ضع معلقة جهاز الإسقاط الذي يحتوي على ميكروبوريس 850 (كل قطره من 350 ميكرون) إلى معقمة جيدا 6 لوحات.
  2. عزل ثلاثة أنواع من الخلايا كما هو موضح أعلاه: هيبسك-اتفاقية الأنواع المهاجرة، وهكفس، وهوفيكس. الجمع بينهما في نسبة 70% اللجنة التوجيهية-اتفاقية الأنواع المهاجرة وهكفس 15% هوفيكس 15% في أنبوب 50 مل مخروطية مع ربمي/ب-27 خلية الإعلام بتركيز الخلايا 2,475,000 كل مل.
  3. الاستغناء عن 4 مل تعليق خلية (خلايا 2,475,000 كل مل) لكل بئر من مرفق فائقة منخفضة شنقاً إسقاط نظام (يبلغ قطرها ميكروبوري 350 ميكرون) يجلس في لوحة 6-جيدا.
  4. الماغنيسيوم ستشكل تلقائياً ضمن ح 12 من الاستغناء عن تعليق خلية في معلقة جهاز الإسقاط. لا تزال الثقافة لما مجموعة 72 ح (3 د) في 5% CO2، 37 درجة مئوية ورطوبة 95% لنضوج الماغنيسيوم.
  5. بعد 72 ساعة ثقافة، حصاد الماغنيسيوم عن طريق المسام في الجزء السفلي من معلق إسقاط النظام بوضع الجهاز في طبق مع المتوسطة ويحوم برفق للإفراج عن الماغنيسيوم من الشنق جهاز الإسقاط.

5-إنشاء تصحيح ثلاثي الأبعاد باستخدام القالب الصافي رواية

  1. القاعدة، أسفل لوحة مربعة، أسفل الصافية، والجانب الطبقات 10 شبكات يتم تجميعها لإنشاء قالب الرواية مع المعونة من زوج من الملقط العقيمة. أولاً، كومة ومحاذاة قاعدة، أسفل لوحة مربعة، وصافي استخدام الوظائف الزاوية السفلي. ثم المكدس وطبقة الشباك الجانبية 10 في توجيهات لإنشاء شبكة من غرامة الفولاذ المقاوم للصدأ شوكات بالتناوب.
  2. تدفق ملء قاعدة مع برنامج تلفزيوني أو متوسطة خفض التوتر السطحي، وثم قم بنقل العفن المجتمعون على قاعدة ملء.
  3. ويت تجويف القالب الصافي مع برنامج تلفزيوني أو المتوسطة في نفس الأسلوب. ملء ببطء الماغنيسيوم في تجويف المنطلقات للحجم المطلوب (2 × 2 × 1 مم، 4 × 4 × 1 مم، أو 6 × 6 × 1 مم).
    ملاحظة: تأكد من أن يتم تغذية 120% الحجم المتوقع من الماغنيسيوم في التجويف حيث تكون المجاميع الخلية في اتصال ضيقة وتبقى ثابتة.
  4. تجميع أعلى صافي وأعلى لوحة مربعة على ركن الوظائف وتأمين السدادات وأنابيب القابضة لمنع تبييض الماغنيسيوم.
  5. نقل النظام العفن صافية مليئة بلوح 6-جيدا مع 6 مل ربمي/ب-27 خلية الإعلام أو في حاوية معقمة مع المتوسطة ما يكفي لتغطية العفن مجمع بأكملها.
  6. احتضان لوحة 6-جيدا مع النظام العفن شغلها على شاكر يتأرجح لمدة 7-10 أيام في 3,000-4,000 س ز.
    ملاحظة: مدة الاحتضان يقررها حجم البقع القلب. مع بقع أكبر، سوف تحتاج فترة حضانة المرض زيادة نضج القلب التصحيح.

6-إزالة التصحيح من العفن صافي رواية

  1. إزالة هذا النظام العفن من وسائل الإعلام ووضعه على حصيرة المناولة المعقم في صحن 10 سم معقم.
  2. إزالة أنبوب عقد والسدادات وأعلى لوحة مربعة وصافي أعلى. عناية تنزلق الشباك الجانب الطبقات واحدة تلو الأخرى مع زوج من الملقط العقيمة. بعد ديكانولاتيون، هو الحصول تصحيح القلب سليمة فوق أسفل الصافي.
  3. التقاط أسفل الصافي مع التصحيح باستخدام الملقط المعقم ونقل الجزء السفلي الصافية إلى طبق 35 ملم مع 5 مل الإعلام ربمي/B27. بلطف ترخي التصحيح من أسفل الصافي بدوامات الصافية ببطء في الطبق، أو مع مكشطة خلية عقيمة. بعد مفرزة من أسفل الصافي، يمكن مثقف أنسجة القلب مع وسائط الإعلام ربمي/B27.
  4. الاستمرار في احتضان التصحيح القلب ثلاثي الأبعاد التعويم الحر في الطبق 35 ملم. ويمكن ملاحظة الضرب متزامن الوظيفية أقرب وقت 24 ساعة بعد الإزالة من العفن.
  5. بعد إزالة التصحيح من العفن الصافية، مراعاة المحافظة على شكله مع سلامة وكثافة الزيادات الضرب متزامن مع مرور الوقت.
    ملاحظة: عرضت ثلاثي الأبعاد صافي المستندة إلى القالب القلب البقع الكهربائية إدماج مكون كارديوسفيريس بعد ديكانوليشن. لاحظنا تردد ضرب تتراوح من 60 إلى 80 نبضة في الدقيقة التي استمرت لأكثر من 60 يوما.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

أننا استخدمت في تجاربنا، تعليق خلية 70% اللجنة التوجيهية-اتفاقية الأنواع المهاجرة وهكفس 15% هوفيكس 15% في ربمي/ب-27 خلية الإعلام بتركيز الخلايا 2,475,000 كل مل. بعد إنشاء تعليق خلية، نحن في الاستغناء عن 4 مل تعليق خلية لكل بئر من مرفق فائقة منخفضة شنقاً إسقاط النظام، كما هو موضح في الخطوة 4، 3 من البروتوكول. استخدام معلقة إسقاط النظام أسفرت عن تشكيل عفوية المئات من الضرب الماغنيسيوم بعد 3 أيام ثقافة في 5% CO2، 37 درجة مئوية ورطوبة 95%. الماغنيسيوم لوحظت بسهولة أن الضرب تحت مجهر...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وتكمن أهمية هذا الأسلوب في إمكانية تكرار نتائج وفعالية الأنسجة القلبية الطبقات الناتجة. في مجال هندسة الأنسجة القلبية، أحد الأهداف الحالية لتحديد أسلوب لبناء بقع القلب ثلاثي الأبعاد الضرب، والطبقات، والوظيفية. ونحن التقرير وسيلة كفؤة واستنساخه لإنشاء أنسجة القلب متعدد الطبقات بالبذر اليدوي المباشر من الماغنيسيوم تتألف من كارديوميوسيتيس وخلايا بطانية والليفية في رواية العفن صافية. صافي القالب المستخدمة في هذا الأسلوب قد مجموعة متنوعة من الأحجام المختلفة لإنشاء أنسجة تتراوح من 2 × 2 × 1 مم إلى 6 × 6 × 1 مم. يمكن أيضا تعديل...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الكتاب يعترف مصدر التمويل التالية: "السحر أن الصندوق المسائل" "أبحاث القلب والأوعية الدموية".

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
الخلايا الليفية القلبية البشرية (HCF)Sciencell6310
FM-2 يتكون من متوسط القاعديالمتوسط Sciencell2331HCF ثقافة
الخلايا البطانية للوريد السري البشري (HUVEC)LonzaCC-2935
EGM + Bullet Kit   ؛LonzaCC5035HUVEC ثقافة وسط
E8 media InvitrogenA1517001HiPSC ثقافة متوسطة
Geltrex  إنزيم InvitrogenA1413202
TrypLE Express (1X)Thermo Fisher12604013التربسين وكاشف تفكك
الخلية وسائط RPMIوسائط Invitrogen11875093RPMI مع ملحق B-27 هو ملحق ثقافة hiPSC-CM
B-27 (50x)Thermo Fisher17504044RPMI مع ملحق B-27 هو متوسط ثقافة hiPSC-CM
Trypan Blue الحل ، 0.4٪Thermo Fisher15250061
Novel net mold   ؛TissueByNet المحدودةNM25-1
معلقة إسقاط لوحةKuraray المحدودةMPc350
6 لوحات الآبار   ؛سيجما ألدريتشCLS-3516
متوسط وسائط

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Gao, L., et al. Myocardial Tissue Engineering With Cells Derived From Human-Induced Pluripotent Stem Cells and a Native-Like, High-Resolution, 3-Dimensionally Printed Scaffold. Circulation Research. 120 (8), 1318-1325 (2017).
  2. Borovjagin, A. V., Ogle, B. M., Berry, J. L., Zhang, J. From Microscale Devices to 3D Printing: Advances in Fabrication of 3D Cardiovascular Tissues. Circulation Research. 120 (1), 150-165 (2017).
  3. Tandon, N., et al. Electrical stimulation systems for cardiac tissue engineering. Nature Protocols. 4 (2), 155-173 (2009).
  4. Duran, A. G., et al. Regenerative Medicine/Cardiac Cell Therapy: Pluripotent Stem Cells. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 66 (1), 53-62 (2018).
  5. Lux, M., et al. In vitro maturation of large-scale cardiac patches based on a perfusable starter matrix by cyclic mechanical stimulation. Acta Biomaterialia. 30, 177-187 (2016).
  6. Eschenhagen, T., et al. Three-dimensional reconstitution of embryonic cardiomyocytes in a collagen matrix: a new heart muscle model system. The FASEB Journal. 11 (8), 683-694 (1997).
  7. Moldovan, N. I., Hibino, N., Nakayama, K. Principles of the Kenzan Method for Robotic Cell Spheroid-Based Three-Dimensional Bioprinting. Tissue Engineering Part B: Reviews. 23 (3), 237-244 (2017).
  8. Sugiura, T., Hibino, N., Breuer, C. K., Shinoka, T. Tissue-engineered cardiac patch seeded with human induced pluripotent stem cell derived cardiomyocytes promoted the regeneration of host cardiomyocytes in a rat model. Journal of Cardiothoracic Surgery. 11 (1), 163(2016).
  9. Caspi, O., et al. Tissue engineering of vascularized cardiac muscle from human embryonic stem cells. Circulation Research. 100 (2), 263-272 (2007).
  10. Ong, C. S., et al. Biomaterial-Free Three-Dimensional Bioprinting of Cardiac Tissue using Human Induced Pluripotent Stem Cell Derived Cardiomyocytes. Scientific Reports. 7 (1), 4566(2017).
  11. Kelm, J. M., et al. A novel concept for scaffold-free vessel tissue engineering: self-assembly of microtissue building blocks. Journal of Biotechnology. 148 (1), 46-55 (2010).
  12. Noguchi, R., et al. Development of a three-dimensional pre-vascularized scaffold-free contractile cardiac patch for treating heart disease. The Journal of Heart and Lung Transplantation. 35 (1), 137-145 (2016).
  13. Zuppinger, C. 3D culture for cardiac cells. Biochimica et Biophysica Acta. 1863 (7 Pt B), 1873-1881 (2016).
  14. Langenbach, F., et al. Generation and differentiation of microtissues from multipotent precursor cells for use in tissue engineering. Nature Protocols. 6 (11), 1726-1735 (2011).
  15. Fennema, E., Rivron, N., Rouwkema, J., van Blitterswijk, C., de Boer, J. Spheroid culture as a tool for creating 3D complex tissues. Trends in Biotechnology. 31 (2), 108-115 (2013).
  16. Agocha, A., Sigel, A. V., Eghbali-Webb, M. Characterization of adult human heart fibroblasts in culture: a comparative study of growth, proliferation and collagen production in human and rabbit cardiac fibroblasts and their response to transforming growth factor-beta1. Cell Tissue Research. 288 (1), 87-93 (1997).
  17. Baudin, B., Bruneel, A., Bosselut, N., Vaubourdolle, M. A protocol for isolation and culture of human umbilical vein endothelial cells. Nature Protocols. 2 (3), 481-485 (2007).
  18. Pimentel, C. R., et al. Three-dimensional fabrication of thick and densely populated soft constructs with complex and actively perfused channel network. Acta Biomaterialia. 65, 174-184 (2018).
  19. Shimizu, T., et al. Polysurgery of cell sheet grafts overcomes diffusion limits to produce thick, vascularized myocardial tissues. The FASEB Journal. 20 (6), 708-710 (2006).
  20. Sakaguchi, K., Shimizu, T., Okano, T. Construction of three-dimensional vascularized cardiac tissue with cell sheet engineering. Journal of Controlled Release. 205, 83-88 (2015).
  21. Ong, C. S., et al. Creation of Cardiac Tissue Exhibiting Mechanical Integration of Spheroids Using 3D Bioprinting. Journal of Visualized Experiments. 125 (e55438), (2017).
  22. Tan, Y., et al. Cell number per spheroid and electrical conductivity of nanowires influence the function of silicon nanowired human cardiac spheroids. Acta Biomaterialia. 51, 495-504 (2017).
  23. Karra, R., Poss, K. D. Redirecting cardiac growth mechanisms for therapeutic regeneration. Journal of Clinical Investigation. 127 (2), 427-436 (2017).
  24. Bartholoma, P., et al. Three-dimensional in vitro reaggregates of embryonic cardiomyocytes: a potential model system for monitoring effects of bioactive agents. Journal of Biomolecular Screening. 10 (8), 814-822 (2005).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Scaffold free Cardiac TissueNet Mold MethodHanging Drop SystemSpheroid FormationiPSC CMs HCFs HUVECsUltra low AttachmentMicropore DeviceStainless Steel NetsTissue MaturationBeating Spheroids

مقالات ذات صلة