نقدم هنا، وضع بروتوكول لإنشاء نموذج الاكتئاب الماوس ومراقبة التغييرات السلوك المرتبطة بالإجهاد المزمن المعتدل لا يمكن التنبؤ بها (CUMS)، وتقييم تأثير المضادة الاكتئاب إكسياوياوسان.
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
نقدم هنا، وضع بروتوكول لإنشاء نموذج الاكتئاب الماوس ومراقبة التغييرات السلوك المرتبطة بالإجهاد المزمن المعتدل لا يمكن التنبؤ بها (CUMS)، وتقييم تأثير المضادة الاكتئاب إكسياوياوسان.
بالإضافة إلى استخدام موحدة للأدوية المضادة للاكتئاب والعلاج النفسي، استخدام الطب الصيني التقليدي قد يؤدي إلى حدوث تحسن عام للمرضى الذين يعانون من اضطراب الاكتئاب الرئيسي (MDD). ولذلك، كان الغرض من هذه الدراسة وضع نموذج الاكتئاب الماوس ومراقبة التغييرات السلوك المرتبطة بالإجهاد المزمن المعتدل لا يمكن التنبؤ بها (CUMS) ثم تقييم تأثير المضادة الاكتئاب إكسياوياوسان. وتم تقسيم الفئران عشوائياً إلى أربع مجموعات: مجموعة مراقبة ومجموعة طراز، مجموعة علاج مع إكسياوياوسان، ومجموعة علاج مع فلوكستين. وأبقى على حدة جميع الفئران في أقفاص، والاكتئاب قد يتسبب في الفئران بتعريضها لعدة ألاعيب CUMS مصممة لمدة 21 يوما، كما هو مبين في البروتوكول. الفئران في مجموعة التحكم ومجموعة نموذج تلقت 0.5 مل ماء المقطر، بينما تلقت الفئران في مجموعات العلاج أما إكسياوياوسان (0.25 غ/كغ/يوم) أو فلوكستين (2.6 مغ/كغ/يوم). وأعطيت الأدوية المستخدمة في الدراسة إينتراجاستريكالي يوميا خلال الثلاثة أسابيع كاملة. لتقدير السلوكيات مثل الاكتئاب، مجموعة من المعلمات بما في ذلك الدولة معطف، وزن الجسم، فتح نقاط الاختبار الميداني، وقد سجلت نقاط اختبار التفضيل السكروز. وأظهر تحليل البيانات أن السلوكيات نموذج الفئران التي تم تغييرها إلى حد كبير بالمقارنة مع سلوكيات الفئران في مجموعة التحكم، التي تم تحسينها بمعاملة إكسياوياوسان وفلوكسيتين. النتائج الحالية أثبتت آثار مضادة الاكتئاب إكسياوياوسان على سلوكيات الفئران التي يسببها CUMS، وكشفت عن أن مركبات من الوصفة إكسياوياوسان قد تكون جديرة بالاهتمام لعلاج الاكتئاب، والنظر في آثارها المفيدة على السلوكيات مثل الاكتئاب.
MDD مرض عقلية المزمنة والمتكررة جداً أن يعرض مع استمرار تدني الحالة المزاجية، والاكتئاب، وتدني احترام الذات، التخلف العقلي، فقدان الاهتمام، النوم اضطرابات، الاتجاهات تأثيراً عميقا في التشاؤم أو الانتحار؛ أنها تسببت في ضرر كبير على صحة الإنسان وتحقيق الاستقرار الاجتماعي1. فقد أصبح واحداً من العالم السبب الرئيسي للعجز، وقد يكون أحد أهم الأسباب الرئيسية لعبء المرض بحلول عام 2030، وفقا "منظمة الصحة العالمية"2،3. حاليا، تعتبر الأدوية المضادة للاكتئاب والعلاج النفسي لتكون الخيار الأول لعلاج MDD. ومع ذلك، عددا هائلا من المرضى الذين شخصت MDD لا تستجيب للعلاج أو الدواء مستمرة، ويتم سردها كوجود4من الاكتئاب المقاوم للعلاج.
إكسياوياوسان هو كلاسيكية صينية مجمع5 التي تم استخدامها على نطاق واسع لعلاج الأمراض النفسية لآلاف السنين منذ عهد أسرة سونغ في الصين6. وهو يتألف من الأعشاب الصينية 8: بوبليوري الرقم الأساسي، "الرقم الأساسي" بونيا ألبا، "الرقم الأساسي" Angelicae سينينسيس، بوريا، ماكروسيفالاي أتراكتيلوديس ريزوما، جليسيرهيزاي Radix، ريزوما زينجبيرس Recens ، و العود هيربا. إكسياوياوسان يحتوي على مكونات متعددة وله أهداف متعددة، وتستخدم مسارات متعددة7. إكسياوياوسان قد ثبت عموما أن تكون صيغة آمنة وفعالة لعلاج مختلف الأمراض ذات الصلة بالعقلية اضطرابات، وقد ركزت الدراسات الحديثة أيضا على الآلية المضادة الاكتئاب من هذا المجمع8،9، 10. إمراضية MDD حتى الآن غير واضحة، على الرغم من أن هناك فرضيات متنوعة، بما في ذلك فرضية مونوأمين، فرضية مستقبلات الناقل العصبي، فرضية تغيير وظيفة الغدد الصم العصبية، وفرضية الشذوذ المناعي، إلخ. لقد بينت دراسات عديدة أن تأثير مضاد إكسياوياوسان لديه اتصال مع الأسس المادية الفرضيات أعلاه11،12، وفي بيانات العمل العلاجي كتحسين للاكتئاب مثل 13من السلوكيات.
وعلاوة على ذلك، مع انتشار الاكتئاب، عانى المجتمع الحديث من تخفيضات في قوة العمل، والتقاعد المبكر، والعلاجات مكلفة14. تكلفة العلاج يحتاج إلى عناية طبية صارمة، مما يعني طائفة من زيادة التكاليف الطبية وتوقعا دقيقا دقة نتائج غير مرغوب فيها، فضلا عن الآثار الجانبية15. وقد عشب صيني إكسياوياوسان المكونات موجوداً وآثار فريدة من نوعها، وآثار جانبية طفيفة. التطبيق يمكن أن تلعب دوراً في تخفيف العبء على المعالجة الطبية الحديثة. ولذلك، لتوفير أساس نظري أكثر لتطبيق إكسياوياوسان، علاج السريري بديل ينبغي أن تقدم لعلاج الاكتئاب، وحالات الإصابة التي يزيد عاماً بعد عام، وينبغي تحسين صحة الإنسان في نفس الوقت. وتصف هذه الورقة بروتوكول التي تنطوي على استخدام إكسياوياوسان لمنع السلوكيات مثل الاكتئاب بإنشاء نموذج اكتئاب من الماوس. واستخدمت في حقل مفتوح واختبار السكروز الأفضلية للتحقق من آثار إكسياوياوسان المضادة للاكتئاب.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
هذا البروتوكول أقرته لجنة أخلاقيات الحيوان من جامعة بكين "الطب الصيني" ووفقا لجميع المبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية للصين. كان هناك أي حالة الوفاة العرضية أثناء إجراء التجارب، والحيوانات لا تحتاج إلى أن euthanized في هذه الدراسة.
1. إعداد المخدرات للتجربة
ملاحظة: تم شراؤها الأعشاب الصينية وثم مصادقة من قبل الدكتور ليو باء بجامعة بكين "الطب الصيني". إكسياوياوسان يحتوي على الأدوية الصينية التقليدية الثمانية التالية في نسبة 6:6:6:6:3:6:2:2: "الرقم الأساسي" Angelicae سينينسيس، وألبا بونيا "الرقم الأساسي"، بوريا، بوبليوري الرقم الأساسي، جليسيرهيزاي الرقم الأساسي، ماكروسيفالاي أتراكتيلوديس ريزوما، العود هيربا وريزوما زينجبيرس ريسينس،.
2-إعداد الفئران للإجراء التجريبي
ملاحظة: الإجراء التجريبي، 60 الفئران C57BL/6J صحية الذكور الذين تتراوح أعمارهم بين 12 أسبوعا واختيرت، مع الماوس كل وزنها بين 18 و 22 g.
3-تنظيم دورات تعريفية للاكتئاب في الفئران
ملاحظة: للحث على الاكتئاب، خضع الفئران في المجموعة النموذجية، ومجموعتين من العلاج CUMS لمدة 21 يوما18. يمكن تغيير الخطة حسب الحالة العملية، ولكن ينبغي أن يتبع مبدأ أن الضغوطات نفسه لا يمكن استخدامها بشكل مستمر.
4-إدارة شؤون إكسياوياوسان
ملاحظة: جرعة إكسياوياوسان (0.25 غ/كغ/يوم) واختيرت على أساس كفاءته مرضية كما هو موضح سابقا9.
5-السكروز تفضيل الاختبار
ملاحظة: تم تطبيق لا الحرمان المياه أو الطعام قبل الاختبار. وأجرى البروتوكول كما ذكر سابقا23.
6-فتح مجال الاختبار
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
علما بأن النتائج التي صدرت سابقا بالدكتور شيوى-فانغ دينغ، et al. 18
وأعرب عن البيانات ك ± يعني الخطأ المعياري للوسط (SEM). واستخدمت ANOVA أحادي اتجاه أو اختبار غير حدودي للبيانات العامة استناداً إلى اختبار الحياة الطبيعية واختبار تجانس التباين. تم استخدام اختبار LSD للمقارنات بين المجموعات. وبالإضافة إلى ذلك، استخدمت عملية القياس المتكرر للنموذج الخطي العام (GLM) لإجراء تحليل ANOVA أحادي الاتجاه ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
CUMS النموذج المستخدم في هذه الدراسة طريقة شائعة لإنشاء نموذج استهداف الإجهاد للاكتئاب24. ويمكن استعادة معظم مظاهر CUMS بالعقاقير المضادة للاكتئاب، الذي أشار إلى أن هذا الأسلوب النموذجي له صحة تنبؤية قوية25. بهذه الطريقة، الحيوانات تلقي المزمنة المحفزات مرهقة لا يمكن التنبؤ بها ووضع الأساسية أعراض الاكتئاب الرئيسية، بما في ذلك تكييف تفضيل المكان المنخفض و anhedonia والسلوكيات مثل العاطفة البصر26. هنا، في هذا البروتوكول، يمكن تحسين الاستخدام المستمر إ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
هذا البحث وأيده المنح المقدمة من الوطنية الطبيعية مؤسسة العلوم الصينية (رقم 81630104؛ ورقم 81473597)، وأموال البحوث الأساسية للجامعات المركزي (رقم 2018-جيبز-XS005). البروتوكول والنتائج أظهرت في هذه الورقة التي تنبع من المقالة مشاركة تطبيع الدبقية فيبريلاري الحمضية البروتين التعبير في هيبوكامبي في "آثار إكسياوياوسان أنتيديبريسانتليكي" على "شكل مزمن الفئران أكد" الدكتور. شيوى-فانغ دينغ، et al.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الأعشاب تم استخدام Software
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الصينية | Tongrentang (Bozhou ، AnHui) Decoction Pieces Limited Company | - | تم استخراج الأدوية من قبل غرفة تحضير الطب الصيني في مستشفى الصداقة الصيني الياباني ، وتم استخدام الماء المقطر لتحضير تعليق Xiaoyaosan ، وكانت الجرعة 0.25 جم / كجم / يوم. |
| فلوكستين | باثيون فرنسا | 5545 أ | تم استخدام الماء المقطر لتحضير معلق فلوكستين ، والجرعة 2.6 مجم / كجم / يوم. |
| C57BL / 6j الفئران | بكين الحيوي نهر من شركة نهر تشارلز | SCXK 2011-0004 | تم شراء 60 فأرا من الذكور الأصحاء C57BL / 6J الذين تتراوح أعمارهم بين 12 أسبوعا من نهر بكين الحيوي التابع لشركة نهر تشارلز. |
| قفص الماوس | تصفيف التكنولوجيا الحيوية | 34853016 | 318 & مرة ؛ 202 & تايمز ؛ 135 مم |
| ماء مقطر | - | تم استخدام الماء خلال التجربة. | |
| السكروز | سيجما | - | تم استخدام السكروز في اختبار تفضيل السكروز لتحضير محلول سكروز بنسبة 1٪. |
| ACS-2EAS التوازن الإلكتروني | بكين Hengzhongheng التكنولوجيا الالكترونية المحدودة | - | تم استخدامه لوزن أفوردوبويس الفئران في مراحل مختلفة. |
| صندوق خشبي أسود بلا لمعان | - | (40 سم × 40 سم × 15 سم) ، مقسم إلى 25 مربعا متساويا بخطوط زرقاء. | |
| كاميرا WV-CP470 | باناسونيك, | اليابان-كاميرا | رقمية عالية الدقة التي استخدمت لتسجيل العملية الكاملة لاختبار المجال المفتوح. |
| برنامج Etho Vision 3.0 | Noldus ، Wageningen ، | Holland-A نظام | تتبع الفيديو الذي تم استخدامه لتقييم الوظيفة الحركية والعاطفية للفئران. |
| SPSS Statistics 21.0 تم | استخدام برنامج IBM-SPSS 21.0 لتحليل البيانات ، وتم استخدام ANOVA أحادي الاتجاه أو اختبار غير معلمي للبيانات العامة بناء على اختبار الطبيعة واختبار التجانس للتباين ، وتم اعتماد طريقة LSD للمقارنات بين المجموعات. | ||
| برنامج Graphpad Prism 6.0 | Graphpad Software، Inc.USA-Graphpad | Prism 6.0 لرسم الرسوم البيانية الإحصائية. |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن