$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
المصفوفة خارج الخلية (ECM) توفر الرموز الفيزيائية والكيميائية الحيوية الهامة للحفاظ على التوازن الأنسجة. معقدة التركيب الجزيئي ينظم الخصائص الهيكلية والوظيفية على حد سواء من الأنسجة. تزويد الخلايا بالوعي المكاني البروتينات الهيكلية والسماح ل الالتصاق والهجرة1. يغاندس منضم تتفاعل مع مستقبلات سطح الخلية للتحكم في سلوك الخلية2. الكلي ECM يحتوي على عدد كبير جزيئات التي تكوينها وهيكلها يختلف اعتماداً على موقع التشريحية ومرحلة النمو والمرض الدولة3،4. أتصدى الطابع المعقد لإدارة المحتوى في المؤسسة أحد جوانب رئيسية في دراسة الخلايا المستمدة من الكلي في المختبر.
المحاولات السابقة لتكرار ميكرونفيرونمينتس إدارة المحتوى في المؤسسة ركزت على ديسيلولاريزينج الأنسجة كاملة لإنشاء السقالات قادرة على ريسيلولاريزيشن. وقد أجريت ديسيلولاريزيشن مع المنظفات الكيماوية مثل دوديسيل كبريتات الصوديوم (SDS) أو المنظفات غير الأيونية، وأنه يستخدم أما الجهاز كله نضح أو الغمر والانفعالات أساليب5،6،7 ،،من89،10،11،،من1213. الحفاظ على السقالات المعروضة هنا العظة الهيكلية والبيوكيميائية الموجودة في الأنسجة الأصلية إدارة المحتوى في المؤسسة؛ وعلاوة على ذلك، قد ريسيلولاريزيشن مع الخلايا الخاصة بالجهات المانحة أهمية سريرية في جراحة14،،من1516،،من1718، 19. ومع ذلك، تفتقر إلى المرونة الهيكلية هذه السقالات وبالتالي فهي غير متوافقة مع العديد من الأجهزة الحالية المستخدمة للدراسات في المختبر . للتغلب على هذا التحديد، العديد من المجموعات قد كذلك تجهيز ECM ديسيلولاريزيد الهلاميات المائية20،،من2122،،من2324. هذه الهلاميات المائية متوافقة مع حقن صب وبيوينك والتحايل على القيود المكانية مقياس ميكرومتر التي ديسيلولاريزيد مكان السقالات في الخلايا. وعلاوة على ذلك، يتم الاحتفاظ بالتركيب الجزيئي والنسب الموجودة في المحتوى الأصلي3،25. هنا نظهر أسلوب لاختلاق المائية المستمدة من قشرة الكلي ECM (كيكم).
والغرض من هذا البروتوكول هو إنتاج المائية التي يتطابق المكروية المنطقة القشرية الكلي. أنسجة قشرة الكلي هو ديسيلولاريزيد في حل الحزب الديمقراطي الصربي 1% تحت التحريض المستمر لإزالة هذه المسألة الخلوية. الحزب الديمقراطي الصربي يستخدم عادة ديسيلولاريزي الأنسجة بسبب قدرته على إزالة المواد الخلوية المناعية6،،من79،26بسرعة. كيكم يخضع ثم التجانس الميكانيكية وليوفيليزيشن5،،من69،،من1126. سولوبيليزيشن في حمض قوي مع بيبسن النتائج في20،أسهم حل نهائي المائية27. دعم البروتينات كيكم الأصلية التي هامة للهيكلية وإشارة يتم الاحتفاظ بتوصيل3،25. يمكن أيضا أن تبلور المائية إلى داخل النظام واحدة من حيث الحجم الكلي البشرية الأصلية اللحاء28،،من2930. هذه المصفوفة يوفر بيئة فسيولوجية التي تم استخدامها للحفاظ على التتابع الخلايا الخاصة بالكلى مقارنة الهلاميات المائية من البروتينات مصفوفة أخرى. وعلاوة على ذلك، تكوين مصفوفة يمكن التلاعب بها، وعلى سبيل المثال، عن طريق إضافة الكولاجين-الأول، إلى بيئات المرض نموذج للدراسة من التليف الكلوي وغيرها31،أمراض الكلي32.