مقالة منهجية

نموذج في المختبر نظام التروية التوازي-لوحة لدراسة البكتيريا التمسك Graft الأنسجة

DOI:

10.3791/58476

⸱

يناير 7, 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Cardiovascular Developmental Biology, Department of Cardiovascular Sciences, KU Leuven, 2Centre for Molecular and Vascular Biology, Department of Cardiovascular Sciences, KU Leuven, 3Department of Biohybrid & Medical Textiles, AME - Helmholtz Institute for Biomedical Engineering, RWTH Aachen University, 4European Homograft Bank, Saint Jean Clinique, 5Division of Clinical Cardiac Surgery, Department of Cardiovascular Sciences, KU Leuven

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يصف لنا داخلية مصممة في المختبر تدفق دائرة نموذجا، الذي يتيح التحقيق البكتيرية التمسك graft الأنسجة.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وتستخدم مختلف قنوات المزودة بصمامات وصمامات محمولة على دعامات لاستبدال صمام تدفق البطين الأيمن المسالك (رفوت) في المرضى الذين يعانون من أمراض القلب الخلقية. عند استخدام المواد الاصطناعية ومع ذلك، هذه الطعوم عرضه للعدوى البكتيرية واستجابات المضيف مختلفة.

تحديد العوامل البكتيرية والمضيفة التي تلعب دوراً حيويا في الانضمام اللمفاوية من الكائنات المجهرية ذات أهمية لفهم أفضل الفسيولوجيا المرضية لبداية العدوى مثل عدوى التهاب الشغاف (IE) ووضع الوقائية الاستراتيجيات. ولذلك فمن الضروري تطوير نماذج المختصة للتحقيق في التصاق البكتيريا تحت الظروف الفسيولوجية القص. هنا، يمكننا وصف استخدام المصممة حديثا في المختبر نضح الدائرة استناداً إلى اللوحات الموازية التي تتيح دراسة البكتيريا التمسك بعناصر مختلفة من الأنسجة الاختلاس مكشوف مثل المصفوفة خارج الخلية وخلايا بطانية ومناطق خاملة . هذا الأسلوب جنبا إلى جنب مع تشكيل مستعمرة وحدة (زيمبابوي) عد مناسبة لتقييم ميل مواد الفساد نحو التصاق البكتيريا تحت التدفق. كذلك، يمكن استخدام هذا النظام الدائرة تدفق التحقيق في دور مكونات الدم في التصاق البكتيريا تحت ظروف القص. أظهرنا أن المصدر من الأنسجة ومورفولوجيا السطحية وخصوصية الأنواع البكتيرية ليست العوامل المحددة الرئيسية في البكتيريا التمسك graft الأنسجة باستخدام نموذجنا نضح داخلية مصممة في المختبر .

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المكوّرات العنقودية الذهبية (S. aureus) وتستخدم مجموعة متنوعة من استراتيجيات الفوعة للتحايل على نظام الدفاع المناعي المضيف استعمار سطوح البيولوجية وغير البيولوجية مزروع في تعميم البشرية، الأمر الذي يؤدي إلى التهابات حادة داخل الأوعية مثل الانتان و أي1،2،3،،من45. إنترنت إكسبلورر ما زال المرتبطة علاج مهم مضاعفات في المرضى بعد زرع صمامات القلب الاصطناعية بينما العوامل الفردية التي تسهم في ظهور إيياري لا غير مفهومة تماما6،في الفترة من7. تحت ظروف التدفق، تواجه البكتيريا قوات القص، وأنهم بحاجة إلى التغلب عليها من أجل التمسك بجدار السفينة8. النماذج، والتي تسمح لدراسة التفاعل بين البكتيريا والأنسجة الاصطناعية صمام أو البطانة تحت التدفق، تعتبر ذات أهمية كما أنها تعكس الحالة في فيفو أكثر.

عدة آليات محددة تيسر البكتيرية الانضمام إلى خلايا بطانية (ECs) والمصفوفة سوبيندوثيليال المكشوفة (ECM) مما أدى إلى استعمار الأنسجة ونضوج تنبتات، يجري اتخاذ خطوات مبكرة أساسيا في إنترنت إكسبلورر9. وصف مختلف البروتينات السطحية العنقوديات أو مسكرامس (مكونات السطح الميكروبية الاعتراف بالجزيئات مصفوفة لاصقة) كوسطاء لالتصاق الخلايا المضيفة وبروتينات ECM من خلال التفاعل مع جزيئات مثل فيبرونيكتين، الفيبرينوجين والكولاجين وفون ويليبراند عامل (فوف)8،،من1011. ومع ذلك، نظراً للطي داخل الجزيئية لبعض عوامل الفوعة، درس معظمهم في ظروف ثابتة، والعديد من هذه التفاعلات قد تكون ذات أهمية مختلفة في الالتهابات اللمفاوية في تعميم الدم.

ولذلك، فإننا نقدم داخلية مصممة في المختبر تدفق مواز-لوحة دائرة نموذجا، مما يسمح تقييم الالتزام البكتيرية إلى مكونات مختلفة لإدارة المحتوى في المؤسسة و ECs في سياق ترقيع الأنسجة مزروع في موقف رفعت. يتمثل الهدف العام للطريقة الموضحة في هذا العمل هو لدراسة آليات التفاعل بين البكتيريا والأنسجة اللمفاوية الكامنة في ظروف التدفق، والتي ترتبط ارتباطاً وثيقا بالبيئة في فيفو مجرى الدم مسببات الأمراض مثل س. في المذهبة. ويركز هذا النهج المبتكر قابلية الاختلاس الأنسجة الأسطح للانضمام البكتيرية لتحديد عوامل الخطر المحتملة لتطوير أي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. إعداد الأنسجة الابتزاز للدراسات في المختبر

ملاحظة: استخدمت ثلاثة أنواع من الأنسجة: "تامور البقري" التصحيح (BP)، والطعوم Homograft Cryopreserved (CH) و "البقر حبل الوريد" (بجف). وفي حالة قناة بجف والفصل (الأنسجة المجهزة بالضفة هوموجرافت الأوروبية (آب) وتخزينها في النتروجين السائل قبل استخدامها)، استخدمت كلا من الجدار ومنشورات صمامات القلب. وتم شراء BP التصحيح وقناة بجف من الشركات المصنعة. قبل الشروع في الاستخدام، ذوبان الجليد CH بعد تعليمات آب12.

  1. شطف جميع الأنسجة مع 0.9% كلوريد الصوديوم قبل الاستخدام.
  2. إعداد خزعات الأنسجة خزعة جلد يمكن التخلص منها باستخدام لكمه قطع قطعة دائرية الأنسجة (10 ملم في القطر).
  3. قطع جميع الأنسجة بقع بنفس الارتفاع باستخدام المشارط العقيمة المتاح.
  4. للأنسجة الثابتة مع جلوتارالديهيدي (على سبيل المثال قناة بجف)، احتضان قطع الفساد بين عشية وضحاها في 4 درجات مئوية مع 200 غرام/لتر من الزلال البشري لتحييد مثبت.
  5. أغسل بها بقايا glutaraldehyde مع 0.9% كلوريد الصوديوم في لوحة ميكروتيتير.  كرر 3 مرات لمدة 1 دقيقة.

2-إعداد البكتيريا لتجارب التروية

ملاحظة: استخدمت العزلات البكتيرية الثلاثة: كوان (ATCC 12598) S. aureus , S. epidermidis ATCC 149900 و الدم س. NCTC 7864. كانت تزرع المذهبة س. و . س. ابيديرميديس في 37 درجة مئوية في مرق الصويا تريبتيك (TSB) و الدم س. يزرع في 37 درجة مئوية مع 5% CO2 في الدماغ القلب ضخ مرق (بهي).

  1. تعد الثقافة بين عشية وضحاها من البكتيريا على طبق أجار الدم صلبة.
    1. استخدم حلقة عقيمة كشط البكتيريا المجمدة قبالة وتلقيح على طبق أجار الدم مولر هينتون للثقافة بين عشية وضحاها في 37 درجة مئوية.
  2. استخدم حلقة تلقيح معقمة لالتقاط مستعمرة واحدة من ثقافة أجار الدم بين عشية وضحاها، وتطعيم في 10 مل TSB أو بهي في أنبوب 14 مل والثقافة بين عشية وضحاها في 37 درجة مئوية.
  3. الطرد المركزي الثقافات بين عشية وضحاها (3000 × ز، 4 درجة مئوية، 10 دقيقة) وريسوسبيند الكريات في 10 مل من المحلول الملحي الفوسفات مخزنة (PBS). وضع أنابيب 14 مل على الجليد.
  4. إعداد قاسمة للحل 3.7 mg/mL 5 (6)-كاربوكسي-فلوريسسين ن-هيدروكسي سوكسينيميديل إستر (CF) في الإيثانول وتخزينها في-20 درجة مئوية. كذلك يؤدي إلى تمييع المخزون من قوات التحالف إلى 150 ميكروغرام/مل تستخدم المياه 'عالي النقاوة'.
    ملاحظة: حماية الأنابيب من الضوء باستخدام رقائق الألومنيوم وتخزينها في-20 درجة مئوية.
  5. الطرد المركزي البكتيريا (3000 × ز، 4 درجة مئوية، 10 دقيقة) وريسوسبيند الكريات في 800 ميليلتر من برنامج تلفزيوني وإضافة 200 ميليلتر من الحل CF 150 ميكروغرام/مل (تركيز 30 ميكروغرام/مل تستخدم لنضح التجارب النهائية). حماية الأنابيب من الضوء مع رقائق الألومنيوم واحتضان مدة 30 دقيقة باستخدام شاكر مداري.
  6. بعد وضع العلامات، كتلة مع 2% حل ألبومين المصل البقري (BSA) في برنامج تلفزيوني وتدور (3000 × ز، 4 درجة مئوية، 10 دقيقة). اتبع مع خطوة غسيل باستخدام 10 مل بكتيريا برنامج تلفزيوني وبيليه بالطرد المركزي (3000 × ز، 4 درجة مئوية، 10 دقيقة).
  7. تضعف البكتيريا مع برنامج تلفزيوني للحصول على الوحدات المكونة للمستعمرة7 10/mL (زيمبابوي) (يتم التحقق من زيمبابوي تعول على لوحات أجار الدم مولر هينتون)، الذي يتوافق مع OD600 (الكثافة البصرية) من 0.65. تبقى الأنابيب في الظلام على الجليد قبل نضح التجارب.
    ملاحظة. ضع في اعتبارك أن القياسات600 OD تعكس العدد التقريبي للبكتيريا. لعد جرعة تطعيم فعال، أسلوب تمييع المسلسل خطوة إضافية ضرورية للتحقق من التطوير التنظيمي على أساس الأرقام كما هو موضح في القسم 3.8.

3-"تجارب نضح" في المختبر باستخدام "الدائرة تدفق" مواز-لوحة

  1. جبل خزعات الأنسجة من 10 ملم في القطر ونفس سمك (أعد الخطوات 1.1-1.5) إلى نظام دائرة تدفق مع السطح الداخلي مواجها لأعلى للحصول على اتصال مع تعليق البكتيرية.
    ملاحظة: نفس سمك الأنسجة عبر مختلف الطعوم ويضمن أن يتم التوصل إلى نفس الارتفاع الأنسجة في القناة السماح الاندفاق الصفحي في جميع الظروف. تعرض كافة عناصر الدائرة تدفق وهو موضح في الشكل 1.
    1. للبدء البروتوكول، ضع قطعة النسيج جولة بين شريحة مجهر مع ثقب دائري 8 مم وطوقا مطاط.
      ملاحظة: الشريحة المجهر يمتلك الفيلم أسفل رقيقة جداً للسماح بتوليد ثقب 8 مم. جنبا إلى جنب مع ورقة المطاط، وأنه يعمل على إصلاح الأنسجة لتمكين الاتصال المباشر بين العينة والمتوسط المتدفقة ويمنع تفكك الخزعة خلال التجربة أيضا. لا يمكن معالجته على سطح النسيج التحقيق، الذي يتعرض للتدفق (القطر الأصغر) بالملقط.
    2. إدراج حامل مع الأنسجة في الورقة طوقا مضمن في إطار معدني أسفل الدائرة.
    3. إرفاق الإطار المعدني العلوي مع الورقة طوقا المقابلة على الجزء السفلي من الدائرة مع حامل مناديل تم إدراجه مسبقاً. وفي وقت لاحق جبل الدائرة كاملة مع ثمانية مسامير والمسمار الجوز. تأكد من أن ارتفاع الدائرة هو نفسه دائماً عبر الطعوم.
      ملاحظة: ارتفاع الدائرة ينبغي أن يحدد دائماً على تشديد الخناق. استخدام الفرجار أو المسطرة.
  2. قم بتوصيل الدائرة تدفق مضخة تمعجية وخزان السائل مع الأنابيب.
  3. نتخلل الأنسجة مع تعليق7 10 زيمبابوي/مليلتر (التحقق من زيمبابوي العد والمتصلة بالقياسات600 OD) البكتيريا المسماة فلوريسسينتلي في برنامج تلفزيوني مع إجهاد القص 3 داين/سم2 (داين كل وحدة الضغط سنتيمتر مربع) من يعني مضخة تمعجية (معدل تدفق 4 مل/دقيقة) لاستخدام خزان 400 مل بكتيرية (تصميم داخلي، الشكل 1) مكيفة على 37 درجة مئوية باستخدام لوحة الحرارة (جدول المواد) ح 1.
  4. أوافيكم باستمرار تعليق 100 مل البكتيرية استخدام خزان جمع نفسه.
  5. بعد نضح، تفكيك الدائرة للإفراج عن الاختلاس وتغسل قطعة النسيج مرتين مع 4 مل من برنامج تلفزيوني في صفيحة 12-جيدا باستخدام المختبر المداري شاكر لمدة 3 دقائق. بعد ذلك قص الجزء الداخلي من الابتزاز استخدام خزعة جلد لكمه قطر أصغر.
  6. ضع كل خزعة النسيج في أنبوب مل 14 منفصلة تحتوي على 1 مل العقيمة 0.9% كلوريد الصوديوم. قم بتسمية الأنبوب # 1.
  7. فصل البكتيريا من الأنسجة باستخدام حمام سونيكيشن لمدة 10 دقائق (السعة = 100% والتردد = 45 كيلو هرتز).
    ملاحظة: بالمقارنة مع مفرزة كاملة من البكتيريا من الأنسجة ينبغي تقييم الطعوم عند احتضان بقع بين عشية وضحاها في 37 درجة مئوية في المتوسط TSB السائل يليه OD600 قياسات مراقبة بقع تعامل مع حل حرة بكتيريا.
  8. استخدام أسلوب تمييع مسلسل على لوحات أجار الدم مولر هينتون لعد كفوس.
    1. إعداد أنبوب مل 14 واحد مع 10 مل من المحلول الملحي العقيمة جعل تخفيف مسلسل تعليق البكتيرية التي تم الحصول عليها بعد sonication. قم بتسمية هذا الأنبوب كما #2.
      ملاحظة: لكل الأنسجة تجربة أنبوب واحد مع 10 مل من 0.9% ضروري كلوريد الصوديوم.
    2. إعداد ثلاثة أنابيب 14 مل مع 10 مل من العقيمة 0.9% كلوريد الصوديوم لتخفيف المسلسل من تعليق البكتيرية الأولية من الخطوة 2.7. قم بتسمية هذه الأنابيب على النحو التالي #3، #4، #5.
      ملاحظة: هذه الخطوة ضرورية لمعرفة عدد زيمبابوي الحقيقية في تعليق البكتيرية المستخدمة في التجربة التروية.
    3. مزيج دوامة كل أنبوبة لدوامة س. 15 الأنابيب مع خزعة النسيج، فضلا عن تعليق البكتيرية الأولية جعل تخفيف المسلسل.
    4. إعداد لوحات أجار ثلاثة، اثنان للتجربة الأنسجة (نضح بكتيريا ونضح التحكم من برنامج تلفزيوني)، والثلث لتعليق البكتيرية الأولية المستخدمة بيرفوسيونس.
    5. قم بتسمية ثلاثة قطاعات كل لوح للتجربة الأنسجة في نحو 10 التالية-1، 10-3 و 10-4. لحساب العدد كفوس في perfusates البكتيرية، تسمية اللوحة كما يلي: 10-1، 10-3، 10-5 و 10-7.
      ملاحظة: جميع المؤشرات في أجار لوحات مثل 10-1و 10-3 وهكذا تشير إلى أن العدد النهائي لزيمبابوى/مل حساب في اليوم التالي. لوحة التحكم لا يحتاج إلى أي القطاعات. قبل الاستخدام، ينبغي أن توضع تحت غطاء محرك السيارة الصفحي لوحات أجار الدم وفتح لإزالة الرطوبة الزائدة.
    6. الاستمرار في إعداد تخفيف المسلسل، نقل 100 ميليلتر من أنبوب #1 إلى أنبوب #2 ومزيج من قوة مع دوامة.
    7. نشر 100 ميليلتر لمحتويات الأنبوبة #1 و #2 على قطاعات 10 المقابلة-1 و 10-3 لصفيحة أجار. وبالمثل، انتشرت 10 ميليلتر من أنبوب #2 في القطاع 10-4، كرر هذه الخطوة أربع مرات للحصول على 4 زوائد منفصلة من كل حجم من 10 ميليلتر.
      ملاحظة: نظراً لصغر حجم المستخدمة للطلاء على قطاع 10-4، ينصح أن يكون عدد متعددة من قطرات جعل عدد متوسط من كفوس نمت.
    8. إعداد تخفيف المسلسل الثقافة الأولية ونقل 100 ميليلتر من تعليق البكتيرية من الخطوة 2.7 إلى أنبوب #3 والمزيج بقوة مع دوامة. إضافة 100 ميليلتر من أنبوب #3 إلى أنبوب #4 ومزيج جيد، كرر هذا الإجراء لأنبوب اللاحقة #5.
    9. نشر 100 ميليلتر من محتويات الأنابيب #3، #4، #5 وتعليق البكتيرية المعدلة (الخطوة 2.7)، على التوالي، على قطاعات 10-3، 10-5، 10-7 و 10-1 من لوحة أجار الدم.
    10. ترك لوحات أجار الدم في هود الصفحي للهواء الجاف ينتشر البكتيرية، عادة لمدة 10 دقائق. وبعد ذلك وضع اللوحات في 37 درجة مئوية للحضانة بين عشية وضحاها.
    11. بعد الاحتضان بين عشية وضحاها، عد المستعمرات البكتيرية للحصول على عدد كفوس الناتجة من الالتصاق خزعات الأنسجة، فضلا عن كفوس مليلتر في انطلاق تعليق البكتيرية المستخدمة التروية. التعبير عن النتائج كزيمبابوي/سم2.

4-الأسفار مجهرية للبكتيريا انضمت Graft الأنسجة عند نضح

  1. بعد نضح، تغسل قطعة النسيج مع برنامج تلفزيوني (راجع الخطوة 3، 5) وقص الجزء الداخلي من الابتزاز استخدام لكمه قطر أصغر.
  2. إعداد لوحة 6-جيدا ووضع قطرات من تصاعد المتوسطة (جدول المواد).
  3. وضع كل قطعة من النسيج مع سطحه perfused إلى الأسفل على قطره واحدة من تصاعد المتوسطة.
  4. قراءة لوحة باستخدام ماسح ضوئي فلورية (جدول المواد). تعيين معلمات من موجات الإثارة والانبعاثات وفقا فلوروفوري يستخدم لوسم البكتيرية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لفهم أفضل للآليات وراء أي التنمية، هذا النموذج يتيح تقييم البكتيريا والأنسجة المرتبطة العوامل الموجودة في حالة ظهور الإصابة في فيفو .

بالتفصيل، يسمح نهج الرواية في المختبر لقياس التصاق البكتيريا في ظروف التدفق إلى أنسجة مختلفة من الابتزاز من بيرفوسينج البكتيريا المسماة فلوريسسينتلي على الأنسجة ممارسة الضغوط القص في نطاق الفسيولوجية داين 3-10/ سم2 لرفعت. في هذا العمل، قمنا باستخدام معدل تدفق ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

إعطاء الملاحظات السريرية الأخيرة التوعية الخاصة لأي كمضاعفات في المرضى بعد أن خضع استبدال صمام6،رفعت13. الخلل الوظيفي للصمام مزروع في IE هو نتيجة تفاعل البكتيريا مع الاختلاس اللمفاوية مما يؤدي إلى واسعة التحريضية وبروكواجولانت ردود فعل1،14. نموذج عرض الرواية في المختبر سمح لنا بالتحقيق إذا كانت الاختلافات في هياكل النسيج وعوامل بكتيرية من المرجح أن تعدل قابلية للإصابة بالعدوى في فيفو است...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

أشرفت على هذه الدراسة من منحة "وفين كو صندوق البحوث" (OT/14/097) نظراً للصحة الإنجابية. وكان عبرها "زميل ما بعد الدكتوراه" في "مؤسسة أبحاث فو"-فلاندرز (بلجيكا؛ منح رقم-12K0916N) ويدعمها صندوق البحوث السريرية لوفين UZ RH.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
تصحيح التامور البقري (BP) ، الابتكارات الجراحية المرنة Peri-Guard Peri-Guard BoycardiumSynovis ، الولايات المتحدة الأمريكيةPC-0404SN
قنوات الوريد الوداجي البقري (BJV)قناة Contegra ؛ شركة Medtronic Inc ، الولايات المتحدة الأمريكيةM333105D001
CH المحفوظ بالتبريدالبنك الأوروبي للطعم المتجانس (EHB)-
Acu-PunchAcuderm Inc ، الولايات المتحدة الأمريكيةP850 (8 مم) ؛ P1050 (10 مم)
ألبومين بشريفليكسبومين. باكستر ، بلجيكاBE171464
LOT: 16G12C
مرق الصويا الترژبي (TSB)فلوكا ، شتاينهايم ، ألمانيا22092-500 جرام
مرق ضخ القلب (BHI)فلوكا53286-500 جرام
ملحي مخزن بالفوسفات (PBS).Gibco14190-094
5 (6) - كربوكسي فلوريسين N-hydroxysuccinimide إستر (CF)سيجما ألدريتش ، ألمانيا21878-100MG-F
مضخة تمعجية (موديل ISM444B) معيارIsmatec BVP-Z ؛ كول بارمر ، فيرثيم ، ألمانيا631942-2
Sonication bathVWR منظف بالموجات فوق الصوتية ؛ VWR ، رادنور ، بنسلفانيا142-6044230 فولت / 50 -60 هرتز 60 فولت أمبير ؛ HF45kHz ، 30W
ProLong Gold Antifade MountantInvitrogen بواسطة ThermoFisherP36930
InCell Analyzer 2000 (ماسح ضوئي مضان) GEHealthcare Life Sciences ، بيتسبرغ ، بنسلفانيا29027886
Arium Pro VF - مياه فائقة النقاء - H2< / sub>O MilliQMillipore87206462
شرائح مجهرية - غرف زراعة الأنسجة (1 بئر)Sarstedt94.6140.102
1-بئر على Lumox قابل للفصلSarstedt94.6150.101
الفولاذ المقاوم للصدأ - شفرات جراحيةSwann-Morton311
Tygon أنابيب السيليكون ، 1/8 "معرف × 1/4" ODCole-ParmerEW-95702-06نطاق درجة الحرارة: &ndash ؛ 80 إلى 200 درجة ؛ تعقيم C
: مع أكسيد الإيثيلين أو تشعيع جاما أو الأوتوكلاف لمدة 30 دقيقة ، 15 رطل لكل بوصة مربعة من الضغط
PharMed BPT TubingSaint-GobainAY242012قابل للتعقيم لمدة 30 دقيقة عند 121 درجة ؛ C
Tygon LMT-55 أنابيبSaint Gobain Performance Plastics & Trade ؛15312022
ترموستاتBMG BIOMEDIZINTECHNIK300-0042230 فولت ، 90 فولت أمبير ، 50 هرتز
محلول

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Que, Y. A., Moreillon, P. Infective endocarditis. Nature Reviews Cardiology. 8 (6), 322-336 (2011).
  2. Werdan, K., et al. Mechanisms of infective endocarditis: pathogen-host interaction and risk states. Nature Reviews Cardiology. 11 (1), 35-50 (2014).
  3. Moreillon, P., Que, Y. A. Infective endocarditis. The Lancet. 363 (9403), 139-149 (2004).
  4. Jalal, Z., et al. Selective propensity of bovine jugular vein material to bacterial adhesions: An in vitro study. International Journal of Cardiology. 198, 201-205 (2015).
  5. Sharma, A., Cote, A. T., Hosking, M. C. K., Harris, K. C. A Systematic Review of Infective Endocarditis in Patients With Bovine Jugular Vein Valves Compared With Other Valve Types. JACC Cardiovascular Interventions. 10 (14), 1449-1458 (2017).
  6. Malekzadeh-Milani, S., et al. Incidence and predictors of Melody(R) valve endocarditis: a prospective study. Archives of Cardiovascular Diseases. 108 (2), 97-106 (2015).
  7. Hill, E. E., et al. Management of prosthetic valve infective endocarditis. American Journal of Cardiology. 101 (8), 1174-1178 (2008).
  8. Claes, J., et al. Clumping factor A, von Willebrand factor-binding protein and von Willebrand factor anchor Staphylococcus aureus to the vessel wall. Journal of Thrombosis and Haemostasis. 15 (5), 1009-1019 (2017).
  9. Fowler, T., et al. Cellular invasion by Staphylococcus aureus involves a fibronectin bridge between the bacterial fibronectin-binding MSCRAMMs and host cell beta1 integrins. European Journal of Cell Biology. 79 (10), 672-679 (2000).
  10. Patti, J. M., Hook, M. Microbial adhesins recognizing extracellular matrix macromolecules. Current Opinion in Cell Biology. 6 (5), 752-758 (1994).
  11. Massey, R. C., et al. Fibronectin-binding protein A of Staphylococcus aureus has multiple, substituting, binding regions that mediate adherence to fibronectin and invasion of endothelial cells. Cellular Microbiology. 3 (12), 839-851 (2001).
  12. Jashari, R., et al. Belgian and European experience with the European Homograft Bank (EHB) cryopreserved allograft valves--assessment of a 20 year activity. Acta Chirurgica Belgica. 110 (3), 280-290 (2010).
  13. Cheatham, J. P., et al. Clinical and hemodynamic outcomes up to 7 years after transcatheter pulmonary valve replacement in the US melody valve investigational device exemption trial. Circulation. 131 (22), 1960-1970 (2015).
  14. Que, Y. A., et al. Fibrinogen and fibronectin binding cooperate for valve infection and invasion in Staphylococcus aureus experimental endocarditis. The Journal of Experimental Medicine. 201 (10), 1627-1635 (2005).
  15. Veloso, T. R., et al. Bacterial adherence to graft tissues in static and flow conditions. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 325-332 (2018).
  16. Liesenborghs, L., Verhamme, P., Vanassche, T. Staphylococcus aureus, master manipulator of the human hemostatic system. Journal of Thrombosis and Haemostasis. 16 (3), 441-454 (2018).
  17. Chiu, J. J., et al. Shear stress increases ICAM-1 and decreases VCAM-1 and E-selectin expressions induced by tumor necrosis factor-[alpha] in endothelial cells. Artheriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 24 (1), 73-79 (2004).
  18. Jockenhoevel, S., Zund, G., Hoerstrup, S. P., Schnell, A., Turina, M. Cardiovascular tissue engineering: a new laminar flow chamber for in vitro improvement of mechanical tissue properties. ASAIO Journal. 48 (1), 8-11 (2002).
  19. Veltrop, M. H. A. M., et al. Bacterial Species- and Strain-Dependent Induction of Tissue Factor in Human Vascular Endothelial Cells. Infection and Immunity. 67 (11), 6130-6138 (1999).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Staphylococcus Aureus

مقالات ذات صلة