آثار الذوق مما يشير إلى إلغاء البروتين على التهاب الأمعاء في طراز ماوس مرض التهاب الأمعاء

Ya-Wen Du; Qun Liu; Xiao-Cui Luo; Dong-Xiao Zhao; Jian-Bo Xue; Pu Feng; Robert F. Margolskee; Hong Wang; Liquan Huang

doi:10.3791/58668

يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

آثار الذوق مما يشير إلى إلغاء البروتين على التهاب الأمعاء في طراز ماوس مرض التهاب الأمعاء

8.4K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/58668

⸱

نوفمبر 9, 2018

Ya-Wen Du^*¹ , Qun Liu^*¹ , Xiao-Cui Luo¹ , Dong-Xiao Zhao¹ , Jian-Bo Xue¹ , Pu Feng² , Robert F. Margolskee² , Hong Wang² , Liquan Huang¹^,²

¹College of Life Sciences, Zhejiang University, ²Monell Chemical Senses Center

^* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

نقدم هنا بروتوكولا للتحقيق أثر إبطال الجينات المتعلقة جوستيشن على الاستجابات المناعية في ديكستران كبريتات صوديوم (DSS)-التي يسببها التهاب الأمعاء المرض (بنك التنمية بين الأمريكتين) طراز الماوس.

الملخص

مرض التهاب الأمعاء (بنك التنمية بين الأمريكتين) هو واحد من الاضطرابات المعوية المتصلة بجهاز المناعة، بما في ذلك التهاب القولون التقرحي وداء كرون، الذي يؤثر على نوعية حياة الملايين من الناس في جميع أنحاء العالم. وتشمل أعراض بنك التنمية بين الأمريكتين الأم في البطن وإسهال ونزيف المستقيم، التي قد تنجم عن التفاعلات بين الحجمية القناة الهضمية والمكونات الغذائية، والخلايا الظهارية المعوية، والخلايا المناعية. أنها ذات أهمية خاصة لتقييم كيفية تأثير كل الجينات الرئيسية المعرب عنها في الخلايا الظهارية والمناعة المعوية التهاب في القولون. ز مستقبلات الذوق إلى جانب البروتين، بما في ذلك ز البروتين الوحيدات α-جوستدوسين وغيرها من البروتينات إرسال الإشارات، وقد تم العثور عليها في الأمعاء. هنا، نحن نستخدم α-جوستدوسين كممثل ووصف ديكستران كبريتات صوديوم (DSS)-التي يسببها نموذج بنك التنمية بين الأمريكتين لتقييم أثر طفرات الجينات تطرب على حصانة المخاطي الأمعاء والتهاب. هذا الأسلوب يجمع بين تكنولوجيا الجينات خروج المغلوب مع نموذج بنك التنمية بين الأمريكتين المستحث كيميائيا، وهكذا يمكن تطبيقها لتقييم نتائج إبطال الجين تطرب، فضلا عن الجينات الأخرى التي قد تكون اكسبيريت أو تثبيط الاستجابة المناعية الناجمة عن مفاجآت في القولون. وتدار الفئران متحولة مع إدارة السلامة والأمن لفترة زمنية معينة ترصد وتسجل خلالها وزن الجسم، والبراز، ونزيف المستقيم. في تيميبوينتس مختلفة أثناء الإدارة، هي euthanized بعض الفئران، ثم يتم قياس الأحجام والأوزان الطحال والفواصل وأنسجة القناة الهضمية وتم جمعها وتجهيزها لغذائها وتحليل التعبير الجيني. تظهر البيانات أن النتائج خروج المغلوب α-جوستدوسين في فقدان الوزن الزائد والإسهال والنزيف المعوي، وتلف الأنسجة والتهاب مقابل الفئران البرية من نوع. نظراً لشدة التهاب المستحث يتأثر بسلالات الماوس والبيئة السكنية، والنظام الغذائي، الاستغلال الأمثل لمفاجآت صيف دبي مدة التركيز والإدارة في تجربة رائدة مهم بشكل خاص. عن طريق ضبط هذه العوامل، يمكن تطبيق هذا الأسلوب لتقييم الآثار التحريضية المضادة والمحترفين على حد سواء.

المقدمة

الأشكال الرئيسية اثنين من مرض التهاب الأمعاء (بنك التنمية بين الأمريكتين) وداء كرون (CD)، والتهاب القولون التقرحي (UC) تتميز بالأمراض المزمنة التحريضية تحويلات أو التدريجي من الأمعاء مع المسببات المتعددة العوامل¹^،². يعتمد تطوير بنك التنمية بين الأمريكتين على الوراثية وكذلك بعض العوامل البيئية مثل النظام الغذائي، استخدام المضادات الحيوية، والأهم من ذلك الالتهابات المسببة للمرض. ومع ذلك، لا تزال غير واضحة بالمسببات والآليات الجزيئية التنظيمية الأساسية لبنك التنمية بين الأمريكتين. ومن ثم، تم شيدت المستحث كيميائيا العديد من النماذج الحيوانية بنك التنمية بين الأمريكتين وتطبيقها لتحدد المرضية والآليات التنظيمية، وت....