ويصف هذا البروتوكول إنتاج خيوط polycaprolactone (PCL) مع المضمنة polylactic حمض (جيش التحرير الشعبي) الجزئي المجالات الخرز الصغير التي تتضمن مصفوفات ديسيلولاريزيد (ألماني) للطباعة 3D من الأنسجة الهيكلية الهندسية بنيات.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
عملية جديدة للطباعة 3D ديسيلولاريزيد المصفوفات
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
بيوبرينتينج 3D يهدف إلى إنشاء مخصص السقالات النشيطة بيولوجيا واستيعاب الحجم المطلوب والهندسة. دعامة حرارية يمكن أن توفر الاستقرار ميكانيكية مشابهة للنسيج الأصلي بينما توفر العوامل البيولوجية العظة التركيبية للخلايا السلف، مما يؤدي إلى الهجرة والانتشار، والتمايز إلى إعادة تشكيل الأنسجة الأصلية/ أجهزة1،2. لسوء الحظ، العديد من متوافق مع 3D الطباعة، البوليمرات بيوريسوربابل (مثل حمض اللبنيك، جيش التحرير الشعبي الصيني) المطبوع في درجات حرارة 210 درجة مئوية أو أعلى--درجات الحرارة التي تضر بالبيولوجي. من ناحية أخرى، هو polycaprolactone (PCL)، نوع مختلف من البوليستر، بيوريسوربابل، ومواد للطباعة ثلاثية الأبعاد يحتوي على درجة حرارة طباعة الطف من 65 درجة مئوية. ولذلك، كان الافتراض بأنه المصفوفة خارج الخلية ديسيلولاريزيد (ألماني) الواردة ضمن حاجز جيش التحرير الشعبي الصيني حرارياً وقائي يمكن أن تكون طباعة داخل الشعيرة PCL والبقاء في أن تكيف وظيفي. في هذا العمل، كان إصلاح osteochondral التطبيق التي تم اختبار الفرضية. على هذا النحو، كان ديسيلولاريزيد الغضاريف الخنزير ومغلفة في polylactic حمض (جيش التحرير الشعبي) الجزئي المجالات الخرز الصغير الذي كان مقذوف ثم مع polycaprolactone (PCL) في خيوط لإنتاج 3D بنيات عبر تنصهر فيها ترسب النمذجة. بنيات مع أو بدون الجزئي المجالات الخرز الصغير (PCL/جيش التحرير الشعبي الصيني-مارك ألماني و PCL(-)، على التوالي) تم تقييم الفروق في السمات السطحية.
المقدمة
استخدام التقنيات الهندسية الأنسجة الحالية للتطبيقات السريرية مثل إعادة بناء العظام والغضاريف والاوتار والرباط السيارات--واللوجرافتس لإصلاح الأنسجة التالفة. كل من هذه التقنيات هو يؤديها بشكل روتيني ك "معيار الذهبي" في الممارسة السريرية أول حصاد الأنسجة المانحة سواء من المريض أو تطابق المأخوذة، وثم وضع الأنسجة المانحين إلى عيب الموقع2. ومع ذلك، تقتصر هذه الاستراتيجيات المانحة الموقع الاعتلال، ندرة موقع المانحة لعيوب كبيرة، خطر العدوى، وصعوبة العثور على الطعوم التي تطابق هندسة المرجوة. وباﻹضافة إلى ذلك، وقد أظهرت الدراسات أن اللوجرافتس المستخدمة لإعادة الإعمار قد خفضت الخصائص الميكانيكية والبيولوجية بالمقارنة مع الأنسجة الأصلية3<....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1-الحصول على وتجهيزها الجزئي المجالات الخرز الصغير
- تغليف المنتجات الجزئي المجالات الخرز الصغير مع المصفوفة المطلوبة (جيش التحرير الشعبي الصيني مارك ألماني)2.
ملاحظة: لا بد أن الجزئي المجالات الخرز الصغير ذات حجم موحد. لهذا السبب، من الضروري النخل الجزئي المجالات الخرز الصغير مسبقة لاستخدام. على الرغم من أن قد تم التفصيل مصفوفة ديسيلولاريزيشن والتغليف في المنشورات السابقة2، فيما يلي ملخص موجز للعملية.- أولاً، الحصاد المقابس الغضروف من الخنزير هند أطرافه. ديسيلولاريزي الغضروف في سلسلة من يغسل مع 0.05% التربسين/0.5 مم صوديوم حمض الإيثيلين (يدتا)، تعديل دولبيكو النسر حمض الاستيك المتوسطة (دميم)، و 1.5% و ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
بعد النخل، ينبغي أن تظهر موحدة الجزئي المجالات الخرز الصغير وتكون خالية من المجاميع. تحت وزارة شؤون المرأة، ينخل الجزئي المجالات الخرز الصغير قد المسام الصغيرة على سطحها، ولكن خلاف ذلك تكون كروية والسلس، كما هو مبين في الشكل 1. ينبغي أن تكون جميع خيوط مقذوف قطرها موحد وشريحة دائرية. خيوط تحتوي على الجزئي المجالات الخرز الصغير (PCL/جيش التحرير الشعبي الصيني-مارك ألماني) سوف يكون ماتي أكثر قليلاً الانتهاء بينما PCL فقط (خيوط PCL(-)) تبدو أكثر لامعة. كما سيشعرون.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
كلا ديسيلولاريزيد المصفوفات وأظهرت 3D السقالات PCL المطبوعة بشكل مستقل للسماح بإصلاح التصاق وتكاثر الخلايا، والتحقق من استخدامها ل osteochondral10،،من1112. استخدام مصفوفة ديسيلولاريزيد في النهج الهندسية لإصلاح الأنسجة كان موضوعا للكثير من الاهتمام والنجاح في2،3،،من1415الأخيرة. وقد لاحظنا سابقا زيادة ال.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
شكر وتقدير
تم تمويل هذا المشروع جزئيا بمنحه من طب تقويم العظام المجتمع من أمريكا الشمالية (بوسنا) و "المعاهد الوطنية للصحة" منح نيبيب R21EB025378-01 (منحة بحثية الهندسة الحيوية الاستكشافية).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| آلة الغربال | هافر & أمبير Boecker Tyler | Ro-Tap RX 29-E Pure | |
| Sieve 90 um | Fisherbrand | 170328156 | رقم 170 |
| غربال 53 um | Fisherbrand | 162513588 | رقم 270 |
| غربال 106 um | Fisherbrand | 162018121 | رقم 140 |
| Sputter coater | Leica | n / a | |
| مجهر إلكتروني ماسح | هيتاشي ، الولايات المتحدة الأمريكية | غير متوفرة | |
| Filabot EX2 | Filabot.com | FB00061 | |
| Filabot Spooler | Filabot.com | FB00073 | |
| CAPA 6506 | Perstorp | 24980-41-4 | |
| محلول ملحي مخزن بالفوسفات ، PBS | Gibco | 10010023 | |
| 6 | "منطقة راحة المروحة ، حمام مائي بالموجات فوق الصوتية Amazon | N / A | |
| كول بارمر | SK-08895-13 | ||
| Dreamer | FlashForge | n / a | |
| Drum Mixer | مصنوع حسب الطلب | N / A | قطعة مماثلة من المعدات: https://www.coleparmer.com/i/argos-technologies-flexiroll-digital-tube-roller-shaker-120-vac/0439744?PubID=UX&persist=true&ip = no & gclid = CjwKCAjw- dXaBRAEEiwAbwCi5khGDMz0 dTjsraEsBGfhMEH7ytx LQWGUPNgUJYQ1p3vj_yxkYoI_ ixoC9GwQAvD_BwE |
| Micro Balance | Mettler Toledo، Fisher Scientific | 01-913-851 | |
| Simplify3D | Simplify3D | n / a | |
| SolidWorks | SolidWorks SolidWorks | n / a | |
| المجهرية | المنتجة داخليا ، انظر بشكل متزامن قدمت JoVE تقديم | ||
| فوسفات p-nitrophenyl ، ملح ثنائي الصوديوم ، سداسي هيدرات | Millipore | 4876-5GM | |
| فوسفاتيز ، قلوي | Roche Diagnostics GmbH | 10 713 023 001 | |
| قارئ الامتصاص | Tecan | Sunrise | |
| Tris-HCl Buffer | Sigma-Aldrich | T6455-100ML | |
| شاكر ساخن | جديد برونزويك العلمي | إكسيلا E24 |
المراجع
- Hutchmaker, D., Teoh, S., Zein, I., Ng, K. W., Schantz, J. -T., Leahy, J. C. Design and Fabrication of a 3D Scaffold for Tissue Engineering Bone. Synthetic Bioabsorbable Polymers and Implants. 15 (2), 845-847 (1988).
- Ghosh, P., Gruber, S. M. S., Lin, C. -Y., Whitlock, P. Microspheres containing decellularized cartilage induce chondrogenesis and remain functional after incorporation within a poly(caprolactone) filament useful for fabricating a 3D scaffold. Biofabrication. , (201....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
