هنا نقدم بروتوكول للحث علي الاكتئاب بعد السكتة الدماغية في الفئران عن طريق انسداد الشريان الدماغي الأوسط عن طريق الشريان السباتي الداخلي. نحن نستخدم Porsolt اختبار السباحة القسري واختبار تفضيل السكروز لتاكيد وتقييم امزجه الاكتئاب المستحث.
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
هنا نقدم بروتوكول للحث علي الاكتئاب بعد السكتة الدماغية في الفئران عن طريق انسداد الشريان الدماغي الأوسط عن طريق الشريان السباتي الداخلي. نحن نستخدم Porsolt اختبار السباحة القسري واختبار تفضيل السكروز لتاكيد وتقييم امزجه الاكتئاب المستحث.
الاكتئاب بعد السكتة الدماغية (PSD) هو الأكثر تكرارا من جميع المضاعفات النفسانية الناجمة عن السكتة الدماغية. اغلبيه أكبر (حوالي 60%) من جميع المرضي السكتة الدماغية تعاني من PSD, اضطراب يعتبر ان يكون السلائف السكتة الدماغية ذات الصلة لزيادة الموت وتدهور في الصحة. الفيزيولوجيا المرضية من PSD لا تزال غامضه. لدراسة اليه التنمية وحدوث مزيد من شعبه القطاع الخاص ، ولمعرفه العلاج ، حاولنا وضع بروتوكول جديد يتطلب انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCA) عبر الشريان السباتي الداخلي (ICA) في الفئران. يصف هذا البروتوكول نموذجا لل PSD المستحثة في الفئران من خلال انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO). تستخدم أيضا في التجربة هي Porsolt القسري اختبار السباحة واختبار تفضيل السكروز لتاكيد وتقييم المزاج الاكتئاب من الفئران تحت التحقيق. بدلا من إدخال القسطرة من خلال الشريان السباتي الخارجي (ECA) ، كما هو منصوص عليه في الاجراء الأصلي ، فان تقنيه MCAO هذه لديها الحيدة التي تمر مباشره عبر ICA. وقد وضعت هذه التقنية MCAO قبل بضع سنوات ، ويؤدي إلى انخفاض في معدل الوفاات والتقلبات. ومن المقبول عموما ان المعايير المستخدمة مفضله في اختيار النماذج البيولوجية. وتبين البيانات التي تم الحصول عليها مع هذا البروتوكول ان هذا النموذج من MCAO يمكن ان يكون وسيله للحث علي PSD في الفئران ، ويمكن ان يؤدي إلى فهم الفيزيولوجيا المرضية والتنمية في المستقبل من الادويه الجديدة وغيرها من عوامل نيوروبروتكتيف.
السكتة الدماغية هي الرابعة علي قائمه الامراض التي ترتكب الموت في الولايات المتحدة1،2،3، في حين انها تسبب معظم الإعاقات لدي البالغين في البلدان المتقدمة4؛ هذا يجعل السكتة الدماغية المنافس الرئيسي بين القضايا الصحية الأكثر اهميه في العالم. الحياة الطبيعية في المرضي الناجيين من السكتة الدماغية نادره ، مع حوالي 15 ٪-40 ٪ من ضحايا البقاء علي قيد الحياة يعانون من العجز الدائم ، 20 ٪ تتطلب الرعاية المؤسسية 3 أشهر بعد بداية السكتة الدماغية5، وحوالي ثلث الناجيين 6 أشهر الذين يحتاجون إلى الآخرين لمساعدههم من خلال كل يوم6. وتفيد التقارير بان السكتة الدماغية تمثل أيضا ارتفاع النفقات الصحية الوطنية7. التقديرات من جمعيه القلب الامريكيه لديها التكاليف المتعلقة بالسكتة الدماغية في الولايات المتحدة في أكثر من $50,000,000,000 في 20108.
ليس فقط السكتة الدماغية تسبب الاضرار الطويلة الأجل للافراد ، ولكن بعض الناجيين يميلون إلى المعاناة من الاضطرابات العاطفية والسلوكية ، مثل الخرف ، والتعب ، والقلق ، والاكتئاب ، والهذيان ، والعدوان9،10،11 ،12،13،14. تتمه النفسانية الأكثر تكرارا بعد السكتة الدماغية هو الاكتئاب بعد السكتة الدماغية (PSD) ، تشخيص في حوالي 40 ٪-50 ٪ من الناجيين15،16،17. يؤدي الاكتئاب الناجم عن السكتة الدماغية إلى زيادة المراضه والوفاات18، 19،20،21،22. لا يعرف الفيزيولوجيا المرضية من PSD تماما ، ولكن يبدو انه ناجم عن عوامل متعددة ويرتبط بالاعاقه ، والضعف المعرفي ، وموقع آلافه23.
نموذج الفئران من الاسكيميه الدماغ البؤري ، التي انشاتها mcao ، هو النموذج الحيواني الأكثر انتشارا من السكتة الدماغية24،25،26،27. وفي إثبات التحريض علي المديرية العامة لقطاع الطرق في الجرذان عن طريق انسداد MCA عبر التحالف ، تستخدم التقنيات التي تقلل إلى ادني حد من الوفاات والتغير في نموذج MCAO28.
والهدف الرئيسي من هذا البروتوكول هو تحديد الخطوات اللازمة لحمل المديرية العامة في الفئران عن طريق انسداد MCA عبر التحالف الكتروني الخاص ، وهو نموذج معدل من MCAO ، مما يقلل من معدل الوفاات ونتيجة التغير28. وتشمل الأهداف المحددة أداء الفحوص العصبية والنسيجية (تحديد درجه الخطورة العصبية [NSS] ، وحجم منطقه الاحتشاء ، وذمه الدماغ) للتحقق من فعاليه MCAO واستخدام الاختبارات السلوكية لفحص تاثير هذا الاجراء MCAO علي تطوير الاضطرابات العاطفية ، وأساسا PSD.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وافقت اللجنة المعنية برعاية الماشية في جامعه بن غوريون في النقب علي جميع إجراءات العلاج والاختبار المستخدمة في هذا البروتوكول.
1. اعداد الفئران للإجراءات التجريبية
ملاحظه: حدد الذكور الكبار Sprague-Dawley الفئران وزنها 300-350 ز.
2. اعداد الفئران للجراحة
3. الجراحة (تقنيه MCAO)
ملاحظه: اجراء عمليه جراحيه علي النحو الموصوف من قبل Boyko et al.28 واستخدام الاداات التي قدمها ماكغاري وآخرون29 و اولتش وآخرون30.
4. التعافي بعد الجراحة
5. الخطورة العصبية نقاط31
ملاحظه: يتم تنفيذ هذا الاجراء من قبل اثنين من المراقبين الذين لا يشاركون في الإجراءات الجراحية. يختبرون العجز العصبي والعجز الحركي الصف علي النتيجة التراكمية 0-432. ويمكن اجراء تقييم هذه النتيجة في فترات زمنيه مختلفه ؛ في هذا التحقيق ، تم تنفيذه 50 دقيقه ، 24 ساعة ، 7 ، 15 ، و 30 يوما بعد الجراحة. تجد أدناه الخطوات اللازمة لتقييم NSS. علي الرغم من ان ليست ضرورة في هذه الحالة ، مطلوب هذه النتيجة للتاكد من السكتة الدماغية في القوارض من أجل أداره العلاج.
6. تحديد حجم الاحتشاء (الفحص النسيجي)
7. قياس وذمه الدماغ38
ملاحظه: وقد تم قياس وذمه الدماغ 24 ساعة بعد MCAO الماضي. موت ببطء الحيوانية مع العجز العصبي الشديد التدخل في الأكل و/أو الشرب لمده ثلاثه أيام علي الأقل ، وأكثر من 20 ٪ من فقدان الوزن ، الهيبليجيا أو النوبات.
8. النماذج السلوكية
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
كشفت النتائج النسيجية (الجدول 1) عن حجم احتشاء كبير إحصائيا كنسبه مئوية من إجمالي المخ (p < 0.0001) بعد mcao بالمقارنة مع الماشية في مجموعه السيطرة علي الشام. وذكر أيضا ان وذمه الدماغ ذات دلاله احصائيه عندما تم وضع التقييم من المجموعة التجريبية (p < 0.0003) جنبا إلى جنب مع ان من مجموعه السيطرة الشام.
وتظهر درجات NSS التي تم الحصول عليها ، كما هو ممثل في الجدول 2، انخفاض ا...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
واحده من الطرق التي التقنية MCAO المقدمة هنا يمكن ان تعتبر أكثر أمانا من نموذج MCAO الأصلي ويتضح من حقيقة ان اللجنة الاقتصادية لافريقيا وفروعها ، بما في ذلك الشريان القذالي ، محطه اللغة ، والشريان الفكي العلوي ، لا تتعرض للخطر عندما انسداد ال [MCA] عن طريق ال [أيكا]. أزاحه نموذج MCAO الأصلي للجنة الاقتصادية لافريقيا (وفروعها) ، من خلال تشريح وتخثر لهم46، يسبب ضعف التسمم ، وذلك بسبب حل وسط لإمدادات الاوعيه الدموية إلى العضلات mastication47. قد يؤدي تدمير العضلات في نهاية الم...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وليس لدي المؤلفين ما يفصحون عنه.
نشكر البروفيسور أولينا سفيافنوفسكا من قسم علم وظائف الأعضاء ، كليه البيولوجيا والإيكولوجيا والطب ، جامعه يول هوتشار دنيبرو ، دنيبرو ، أوكرانيا علي دعمها وإسهاماتها المفيدة في مناقشاتنا. البيانات التي تم الحصول عليها هي جزء من اطروحه دكتوراه R.K..
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| وسادة ماصة | - | -- | |
| صندوق برسبيكس أسود بدون لمعان | - | (120 سم ومرات ؛ 60 سم & مرات ؛ 60 سم) ، مقسمة إلى منطقة مركزية بنسبة 25٪ والمنطقة الحدودية المحيطة | |
| زجاجات | Techniplast | ACBT0262SU | سعة 150 مل مملوءة ب 100 مل من الماء و 100 مل محلول السكروز 1٪ (وزن / حجم) |
| الصدمات | الحرارية الكهربائية Ultasonic Inc. | - | |
| Horizon-XL | Mennen Medical Ltd | ||
| نظام التصوير | Kodak | - | للتصوير والقياس |
| الكمي Monofilament | - | -- | |
| المناشف الورقية | الصيدلية | - | المناشف الجافة المستخدمة للحفاظ على جفاف الفئران بعد غمرها في الماء |
| أسطوانة Pexiglass | - | أسطوانة بطول 100 سم وقطرها 40 سم تستخدم لإجراء اختبار السباحة القسري | |
| Purina Chow | Purina Purina | 5001 | طعام مختبر القوارض الذي يعطى للفئران والفئران والهامستر هو تغذية دورة الحياة التي تم استخدامها في البحث الطبي الحيوي لأكثر من 5 عقود. تم توفيره للفئران في هذه التجربة |
| أقفاص الفئران | Techniplast | 2000P | السكن التقليدي للقوارض. تم استخدامه لإسكان الفئران طوال التجربة |
| Scanner | Canon CanoScan | 4200F-كاميرا | |
| فيديو | ETHO-VISION (Noldus) | - | كاميرا فيديو رقمية لتسجيل عالي الوضوح لسلوك الفئران تحت اختبار المجال المفتوح |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذنAn erratum was issued for: A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats. The Authors section was updated.
One of the author names was updated from:
Dmitri Frank
to
Dmitry Frank