نقدم هنا، وضع بروتوكول لتنفيذ التعرض الأيروسول الخلوية المحمولة وقياس الاستجابة الخلوية. يستخدم الأسلوب الخلايا، نمت في واجهة الهواء السائل، ومحاكاة في فيفو فسيولوجيا. وقد لوحظ الاستجابة الخلوية للهباء الجوي نانوحبيبات النحاس الأكسدة عن طريق توليد أنواع الأكسجين التفاعلية وسيتوتوكسيسيتي كالإصدار نازعة لاكتات.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
جديدة محمولة في المختبر تعرض كاسيت لأخذ العينات الهباء الجوي
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
ويدخل هذا البروتوكول في المختبر تعرض نظام جديد، يمكن أن يجري البالية، بما في ذلك في توصيف والأداء. واجهة الهواء السائل (على) في المختبر التعرض النظم غالباً ما تكون كبيرة وضخمة، مما يجعل النقل الميدانية والعملية في المصدر الانبعاث أو داخل منطقة التنفس صعباً. عن طريق تصغير هذه النظم، يمكن أن يمثل المختبر إلى الميدان، وتعجيل وقت المعالجة وتوفير أنسب أسلوب تعرض لا يغير الأيروسول قبل الاتصال الخلايا. المحمولة في المختبر كاسيت التعرض (بيفيك) تكيف كاسيت تصفية 37 ملم للسماح للسمية في المختبر على اختبار خارج إعداد مختبر تقليدية. بيفيك تميزت باستخدام ثلاثة أحجام من جسيمات نانوية النحاس لتحديد كفاءة الترسيب استناداً إلى قياس الجاذبية وتحليل تركيز عدد الجسيمات. وأجريت التجارب الأولية سيتوتوكسيسيتي مع خلايا الرئة المعرضة لتحديد قدرة النظام على إيداع الجسيمات مع المحافظة على بقاء الخلية. بيفيك يوفر من ترسب مماثلة أو زيادة كفاءة عند مقارنة بتدفق عمودي متوفرة في المختبر أجهزة التعرض. وعلى الرغم من انخفاض الإنتاجية عينة، يعطي صغر حجم بعض المزايا للحالي في المختبر على نظم للتعرض. وتشمل هذه القدرة على أن ترتديه للرصد الشخصي، والتنقل من المختبر إلى مصدر للانبعاثات، والخيار لإنشاء أنظمة متعددة للقرار المكانية مع الحفاظ على مستخدم أقل تكلفة. بيفيك نظام قادر على جمع الهباء الجوي في الميدان وداخل منطقة التنفس على الهواء-ربطه، نموذجا في المختبر .
المقدمة
شخصية أخذ العينات باستخدام تقنيات في المختبر يمكن أن توفر معلومات شاملة بشأن الآثار البيولوجية للهباء الجوي في مكان العمل. 1 التعرض للملوثات في الهواء وتشمل التعرض لهذه المادة الكيميائية ذاتها، أن عينات الهواء التي تم جمعها، تحت ظروف المغمورة حيث عرض الغاز إلى تعليق خلية، التعرض المتقطع استخدام جهاز مثل الروك، أو مباشرة التعرض في واجهة الهواء السائل (على). 2 كثير من هذه التقنيات تجري مع الخلايا التي نمت في تعليق أو جمع العينات قبل التعرض، كل منها يمكن أن تؤثر على الدراسة السمية نظراً للتغيرات المحتملة في الأيروسول. 3 تجنب هذه التغييرات، المختبر يمكن نقله إلى الحقل باستخدام عدة في المخ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
مشغلي يجب ارتداء معدات الوقاية الشخصية (مثل مختبر معطف، قفازات، نظارات) عند تنفيذ الخطوات 1، 2، 3، 5 و 6.
1-إعداد المواد
-
إعداد مواد لنظام الجمعية والتعرض للتأكد من التكرار.
- تأكد من استخدام جديد أو الإيثانول 70 ٪ تنظيفها ¼ "القطر الداخلي موصلة الأنابيب و ¼" القطر الخارجي موصلات للجمعية النظام.
- تخزين مواد الاختبار بما في ذلك المرشحات ومكونات بيفيك، ملاقط ومساحيق الجسيمات في بيئة تسيطر عليها جيدا، وفيما يتعلق بدرجة الحرارة والرطوبة، على الأقل 24 ساعة قبل التجربة.
ملاحظة: ينبغي أن تكون درجة الحرارة القرب من درجة حرارة الغرفة، حوالي 20 درجة مئوية، مع الرطوبة النسبية أقل من 35%. وهذا مهم جداً لت....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
علم السموم المهنية في المختبر ينطوي على الحفاظ على استمرارية الخلوية أثناء أداء التعرض الهباء الجوي. ويرد النظام بيفيك في الشكل 2، بما في ذلك درجة الحرارة والرطوبة المراقبة بيفيك البالية. وأبقى درجة الحرارة باستخدام سخان مقاوم البطارية وزيادة الأيروسول هوميديفيد باستخدام الترطيب الطبيعية عن طريق أنبوب المليئة بالثغرات، وترطب. في الهباء الجوي الخاضعة للرقابة وضع داخل مختبر، يمكن بيفيك الإعداد للتعرض هو مبين في الشكل 1. تو.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
أشرطة الكاسيت تصفية توفر طريقة بسيطة وغير مكلفة لجمع الهباء الجوي في منطقة التنفس؛ غير أن الهباء الجوي العينات المستخرجة من المرشحات تمثل الأيروسول كاملة (أي غازات والتطاير والجسيمات) وبالتالي الحد من تقييم الآثار البيولوجية ذات الصلة. استخدام التصميم الأولى للكاسيت تصفية 37 ملم، بيفيك يهدف إلى الحفاظ على قابلية وتقليد في فيفو ترسب الجسيمات من استنشاق. بيفيك أصغر بكثير من النظم الحالية على التعرض، بحجم مربع الأنسجة مع مراقبة درجة الحرارة والرطوبة وشملت تقريبا. الحجم مشابه لتتالي شخصية الرواطم حين تقدم البيانات ف.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
انتماء الكتاب كما موضح في صفحة الغلاف. الكتاب معتمدة ماليا بجامعة فرجينيا كومنولث، حيث اكتمل العمل في ريتشموند، فرجينيا. المؤلفين قد المسؤولية الوحيدة لكتابة ومضمون هذه الورقة. الكتاب يعلن أن هناك لا تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
المؤلف يود أن يشكر سولومونوف بوريس وفرجينيا كومنولث الابتكار آلة متجر للحصول على تعليمات النماذج الأولية السريعة الجهاز. الكتاب أيضا يود أن يشكر كريستيان روميرو-فوينتيس الفريق ليونسكي والدكتور فيتالي أفروتين، الدكتور ديمتري بيستوف، وفرجينيا كومنولث المواد النانوية الأساسية توصيف مرفق لمساعدتهم مع توصيف الجسيمات. وأيد هذا العمل بدء التشغيل الأموال المقدمة للدكتور ليونسكي من كلية الهندسة في جامعة فرجينيا كومنولث.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| مسح حجم الجسيمات المتحركة (SMPS) | TSI, Inc. | 3910 | NanoSMPS |
| حجم الجسيمات البصرية (OPS) TSI | ، Inc. | 3330 | |
| أنابيب الفولاذ المقاوم للصدأ ، 4 "طويل | McMaster-Carr | 4830K116 | الجدار القياسي 304 / 304L ، مترابطة على كلا الطرفين ، 1/8 حجم الأنبوب |
| صمام كروي نحاسي مع مقبض ذراع | McMaster-Carr | 4112T12 | تصنيف الضغط العالي المضغوط ، 1/8 NPT |
| أنبوب فولاذي أنثوي ، 2 "طويل | McMaster-Carr | 7753K121 | الجدار القياسي ، مترابطة من طرف واحد ، 1/8 حجم الأنبوب |
| HEPA مرشح | GE Healthcare | 09-744-12 | HEPA-Cap مولد فراغ كبسولة تنقية الهواء القابل للتصرف |
| PISCO USA | VCH10-018C | ||
| PIVEC | VCU | للتصميم يرجى الاتصال بالمؤلفين | |
| سخان | |||
| 1/4 "موصلات شائكة | Zefon International، Inc. | 459743 | |
| مسامية | Scientific Commodities، Inc. | BB2062-1814A | ماء 10 أم المسام |
| طاقة | |||
| إدراج ثقافة الخلية | فيشربراند | 353095 | 24 إدراج لوحة بئر |
| ملقط | مرشح فيشربراند | 09-753-50 | |
| نقل ماصة | ThermoScientific | 13-711-27 | |
| مرشحات الألياف الزجاجية | SKC | 225-7 | نوع خال من الموثق فلتر AE 37 مم 1.00 um pore |
| Ultra Micro Balance | A & D | BM-22 | موجود في غرفة بيئية |
| كاسيت مرشح 37 مم | SKC | 225-3250 | كاسيت مرشح فارغ ، 37 مم ، |
| مضخة تفريغ الستايرين ذات التدفق المتغير | الشفاف SKC | 220-5000TC | AirChek TOUCH ، 5 إلى 5000 مل / دقيقة |
| جزيئات النحاس | الأمريكية للمواد البحثية ، Inc. | US1090 | 40 نانومتر |
| جزيئات النحاس | الأمريكية مواد البحوث ، Inc. | 1088 | 100 نانومتر |
| جزيئات النحاس | الأمريكية مواد البحوث ، Inc. | US1117M | 800 نانومتر |
المراجع
- Lewinski, N. A., Secondo, L. E., Ferri, J. K. Enabling Real-Time Hazard Assessment at the Workplace Enabling Real-Time Hazard Assessment at the Workplace. 14th Global Congress on Process Safety. , 1-9 (2018).
- Bakand, S., Winder, C., Khalil, C., Hayes, A.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
