يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

بطارية اختبار سلوكية لتكرار تقييم المهارات الحركية، والمزاج، والإدراك في الفئران

19.3K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/58973

⸱

مارس 2, 2019

 ,  , 
1Nanjing Key Laboratory of Pediatrics, Children's Hospital of Nanjing Medical University, 2Nanjing Key Laboratory of Pediatrics, Nanjing Medical University, 3Laboratory of Neurodegenerative Disease, Li Ka Shing Faculty of Medicine, University of Hong Kong, Pokfulam, Hong Kong Special Administrative Region (HK SAR)

في هذه المقالة

ملخص

بطارية اختبار سلوكية شاملة للمهارات الحركية، مزاج — بما في ذلك التفاعل الاجتماعي، والاكتئاب، والقلق – ويهدف الإدراك لتكرار تقييم التغييرات السلوكية المتصلة نيوروديجينيريشن في الفئران.

الملخص

تتطلب تحليلاً شاملا السلوكية في الفئران لأن الاختلالات الحركية واختلال في المزاج والإدراك المشترك الدراسات الدوائية والسمية في نيوروديجينيريشن وغالباً ما يشارك الأعراض في أمراض الأعصاب. يظهر هنا هو بطارية اختبار سلوكية للسيارات، والمزاج، والإدراك، الذي يمكن اختبار مرارا وتكرارا في دراسة طولية. هذه البطارية ويقيم النمط الظاهري عموما السلوكية في الفئران بفحص كل مجال من السلوك مع اثنين على الأقل من اختبارات مقبولة تماما مستقلة (أي، فتح حقل تجارب واختبار روتارود للوظيفة الحركية واختبار التفاعل الاجتماعي ومرتفعة بالإضافة إلى اختبار المتاهة، و اختبار السباحة القسري للدالة العاطفية، واختبار المتاهة المائية موريس والكائن رواية الاعتراف باختبار للوظائف المعرفية). ولذلك، هذه البطارية اختبار حساسية وشامل أداة قوية لدراسة السلوكية وتناوب في نيوروديجينيريشن.

المقدمة

أمراض الأعصاب ظهرت الأعراض السلوكية المدمرة، بما في ذلك ضعف الإدراك، واختلالات المزاج مثل القلق والاكتئاب، أو الخلل في السيارات1. الآلية المرضية لأنواع مختلفة من أمراض الأعصاب هو غير واضح2. وتشير الدراسات المتراكمة إلى أن قد تسهم كل العوامل الوراثية والبيئية للآلية المرضية لأمراض الأعصاب. تحديد عوامل الخطر من نيوروديجينيريشن يتطلب التحليل السلوكي. وبالرغم من أن كل نوع من أمراض الأعصاب في الأعراض السلوكية التوقيع (مثل مرض الزهايمر [م] ظهرت مع ضعف الإدراك ومرض باركنسون [PD] مع الخلل في السيارات). مع تطور المرض، تظهر المرضى comorbidity شذوذ سلوكية مختلفة3. على سبيل المثال، تظهر الإعلانية المرضى أعراض الخلل في مزاج في مرحلة متقدمة4،5. قد المرضى PD التقدم إلى الخرف المتعلقة بالمشتريات وتطوير ادراكية إضعاف6. استناداً إلى هذه الميزات، التحليل السلوكي في نماذج نيوروديجينيريشن عادة ما تكون شاملة ومتكررة.

ولتحقيق هذا الهدف، صمم بطارية التي تحتوي على الاختبارات السلوكية الكلاسيكية والمستخدمة على نطاق واسع بصحة ممتازة للتحليلات السلوكية في السيارات، والمزاج، والإدراك. يمكن اختبار الدالة السيارات7،فتح مجال الاختبار8 والاختبار روتارود المتسارع. خلل المزاج، بما في ذلك الخلل الاجتماعي، والاكتئاب، والقلق، تعتبر الأكثر شيوعاً في أمراض الأعصاب5. ومن ثم، يتضمن هذه البطارية تفاعل الاجتماعي الاجتماعية9، مرتفعة بالإضافة إلى اختبار المتاهة للقلق10، واختبار السباحة القسري للاكتئاب11. ضعف الإدراك أحد الأعراض الأكثر تميزا في أمراض الأعصاب مثل الإعلان و الخرف فصي فرونتوتيمبورال12. المجالات المعرفية، بما في ذلك الذاكرة على المدى القصير والذاكرة العرضية، وعرضه نيوروديجينيريشن13،،من1415. ولذلك، مدرجة المياه موريس المتاهة المكاني التعلم والذاكرة16 والاختبار كائن رواية الاعتراف ل الذاكرة قصيرة الأجل17 في البطارية. هذه الاختبارات متوافقة مع بعضها البعض. ترتيب الاختبارات وصمم لتحقيق أقصى قدر من التعود وإلى أدنى حد من التدخل، وزيادة التوافق داخل البطارية. حيث يتم اختبار كل دالة من اثنين على الأقل من اختبارات مستقلة مختلفة في المبدأ والأسلوب، نتائج كل اختبار يمكن كذلك التحقق من صحتها. وعلاوة على ذلك، يتم تمييز بروتوكولات لبعض الاختبارات للتجارب المتكررة، تيسير دراسة طولية لتطوير أمراض الأعصاب. ولذلك، بطارية اختبار السلوك هذه الدراسات نطاقات مختلفة من التغيرات السلوكية التي ينظر إليها في مراحل مختلفة من نيوروديجينيريشن بينما تكلف أقل عدد ممكن من الحيوانات. وقد استخدمت هذه البطارية في دراسة طولية وتقييم التغييرات السلوكية في الشباب البالغين (3 أشهر) C57BL/6N الفئران الذكور بعد تعرض الجهاز التنفسي لجسيمات نانوية والسليكا، خطر مهني هو عامل خطر محتمل نيوروديجينيريشن18. ومع ذلك، الأخرى سلالات أو النماذج، مثل الذين تتراوح أعمارهم بين الفئران والتلاعب وراثيا الفئران، قد تتصرف بشكل مختلف من الشباب C57BL/6N الفئران. ولذلك، يلزم توخي الحذر عند استخدام هذه البطارية في هذه الفئران.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

جميع الأساليب الموصوفة هنا أقرتها اللجنة المعنية "استخدام الحيوانات تعيش" في التدريس والبحوث (كولتر)، جامعة هونج كونج.

1. البروتوكول العام

ملاحظة: يستند هذا القسم إلى الشماس19.

  1. إعداد غرفة السلوكية
    1. التخلص من التحفيز/الهاء غير ذات صلة، بما في ذلك الضوء الساطع المباشر على جهاز تجريبي، ورائحة والضوضاء وغيرها من الحيوانات غير ذات صلة، في الغرفة السلوكية (التي ينبغي أن يكون حوالي 10 م2 مع قابل للتعديل الإضاءة و، يفضل أن يكون غرفة المدخل).
      ملاحظة: نظراً للماوس حيوان ليلى، والإضاءة تحت لوكس 15 في الاختبار، وفتح المجال الكائن رواية الاعتراف، واختبار التفاعل الاجتماعي يمكن تقليل التدخل/الإجهاد من الضوء وتساعد الماوس للتركيز على الاختبار.
    2. ضبط الكاميرا لتسجيل مالا يقل عن 1.5 متر فوق الأرض، ضمان أن تكون بعيداً عن الأنظار للماوس اختبار الفيديو.
  2. الإسكان والتعود
    1. مجموعة دار الفئران في وحدة حيوانات تحت المراقبة (مثلاً، المجموعة-الإسكان لا يزيد عن أربعة الكبار الفئران).
      ملاحظة: واستخدمت هنا، عمره 3 أشهر ذكور الفئران C57BL/6N، ويوجد في قفص 1144B. يستبعد من المرضى أو الجرحى أو شدة أكد الفئران. قد تؤثر على تجارب من الجوع أو العطش، أو تعرضهم لأداء الماوس.
    2. ترتيب لنفس معالج الحيوان لإجراء كافة الاختبارات السلوكية، للتقليل من التباين. القيام بالنقل والمناولة، والتجربة خلال دورة خفيفة من 07:00 ص إلى 07:00 م إذا كان ذلك ممكناً، ترتيب كافة الأخرى معالجة، مثل إدارة أي المخدرات/السمية (مثلاً، داخل الآنف تقطير من جسيمات نانوية السليكا) أو تنظيف القفص، بعد انتهاء الاختبار.
    3. ريلابيل الأقفاص مع أرقام عشوائية للمكفوفين المجرب قبل كل تجربة. روض الفئران للبيئة التجريبية في الغرفة السلوكية لمدة 15 إلى 30 دقيقة في اقفاصها المنزل. تبقى أقفاص منزلية في الغرفة السلوكية خلال التجربة بأكملها.
    4. قبل البدء التجربة، وضعت ماوس C57BL/6N نونيكسبيريمينتال في الجهاز حيث أن الشرط التجريبي للماوس أول هو نفسه بالنسبة لبقية. ثم، تنظيف الجهاز كما يلي: إزالة البول والبراز مع منشفة ورقية نظيفة وتنظيف الجهاز التجريبي بماء الصنبور ثم تغطي رائحة خلفها الماوس بمسح الجهاز مع منشفة ورقية رش طفيفة مع الإيثانول 70%.
    5. لتقليل الهاء الناجمة المجرب، اسأل المجرب مغادرة الغرفة السلوكية أثناء تسجيل الفيديو، أو البقاء وراء الستار أثناء اختبار المتاهة المائية موريس.
  3. ترتيب اختبار سلوكية
    1. ترتيب اختبار سلوكية بالترتيب كما هو موضح في الشكل 1A. خطة لإجراء اختبارات متباعدة واسطة 24 ح، باستثناء مرتفعة بالإضافة إلى اختبار المتاهة.
      ملاحظة: يتطلب الإجراء بأكمله تصل إلى 2 أسابيع، تبسيط البطارية عن طريق اختيار بين تجارب مماثلة قبل التطبيق في دراسة الحادة أو قصيرة الأجل.
      تنبيه: ويضمن الاختبار الميدانية المفتوحة يوم 2 التعود السليم لاختبار التعرف على وجوه جديدة. اختبار آخر اختبار سباحة القسري كما أنها قد تسبب الإجهاد في الفئران C57BL/6N.

2-بيهافيورالتيست البروتوكول

  1. فتح مجال الاختبار8،18،،من1920
    1. إجراء اختبار حقل مفتوح في 60 سم (الطول [ل]) × 60 سم (عرض [ث]) × 40 سم (ارتفاع [ح]) غير الشفافة الساحة بلاستيكية بيضاء.
      ملاحظة: يمكن استخدام الساحات متعددة إلى زيادة إنتاجية الاختبار.
    2. بدء تسجيل الكاميرا ووضع الماوس بجوار منتصف جدار من الساحة، التي تواجه هذا الجدار نفسه بلطف. سجل سلوك الماوس لمدة 10 دقائق قبل إعادته إلى القفص المنزل. قم بتنظيف الجهاز كما هو موضح في الخطوة 1.2.4.
      ملاحظة: يمكن أيضا أن تكون نقطة البدء في فتح مجال الاختبار وسط الساحة. تكون متسقة بين الفئران.
    3. كرر حتى تنتهي جميع الفئران في البروتوكول. موازنة النظام الاختبار بين المجموعات.
    4. القيام بتحليل البيانات على النحو التالي.
      1. تقسيم الساحة إلى المربعات الأربعة بأربعة مربعات (شبكة وهمية) على شاشة الكمبيوتر. تقييم الدالة الحركي، عد عدد الأسطر التي عبرت بالماوس في الساحة19.
        ملاحظة: التعريف "عبور خط" عند كل أطرافه هند عبوره. هذا التعريف ينطبق أيضا على مرتفعة بالإضافة إلى اختبار المتاهة.
      2. قم بقياس الوقت الذي يقضيه في المنطقة الوسطى كمؤشر للقلق. المنطقة الوسطى من المربعات الأربعة في وسط الساحة.
        ملاحظة: معلمات إضافية، مثل تربية (سواء الجبهة آثار أقدام بعيداً عن الأرض، مع آثار أقدام الجبهة ضد الجدار أو دائمة)، تبين الكمون للخلفية الأولى، والاستمالة وتجميد الانفعالية للماوس.
      3. بدلاً من ذلك، استخدام برمجيات تتبع، كما هو موضح بالتفصيل سيبينهينير وتن8، لقياس المسافة التي سافر والسرعة، والوقت الذي يقضيه في منطقة مركز.
  2. تسريع روتارود اختبار18
    1. أداء اليوم 3 تدريب روتارود تسارع اختبار قبل أي علاج للمخدرات أو السمية/النمذجة/بداية المرض واختبار وظيفة المحرك لمدة يوم واحد، كما هو مخطط لها في الشكل 1A.
      ملاحظة: الماوس ويتلقى ثلاث محاكمات يوميا أثناء التدريب والاختبار. يبدأ مع تناوب القضيب كل محاكمة وينتهي بقطرة الماوس.
    2. ضع جهاز روتارود على مقاعد البدلاء في الغرفة السلوكية. تجنب الإضاءة المباشرة للمعدات. برنامج المعدات ابتداء من 4 لفة في الدقيقة، والتعجيل بلفة في الدقيقة 40 ضمن 5 دقائق.
    3. في كل محاكمة، وضع الماوس على قضيب ثابت، يواجه جدار الجهاز. بدء تشغيل الجهاز عندما تتم تسوية الماوس. إيقاف الجهاز بمجرد قطرات الماوس وتسجيل الوقت الذي يقضيه الماوس على القضيب. كرر فورا لمحاكمتين أخريين قبل أن تعود الماوس مرة أخرى إلى القفص المنزل.
    4. تكرار الإجراء على الفئران الأخرى.
    5. قياس متوسط الوقت المستغرق في القضيب من ثلاث محاكمات خلال اختبار لتقدير دالة موتور.
      ملاحظة: متوسط الوقت على القضيب خلال اليوم الثالث من التدريب هو الخط الأساسي للوظيفة الحركية.
  3. اختبار التفاعل الاجتماعي18
    1. لاختبار التفاعل الاجتماعي، استخدام ساحة الميدان مفتوح مع دائرتي شفافة مطابقة (8 سم [ل] x 6 سم [ث] × 12 سم [ح]) مع ثقوب على السطح – وماوس رواية (مساعد) وهو نفس الجنس كونسبيسيفيك الأحداث التي لم يجر أي اتصال السابقة مع الماوس هذا الموضوع. ويبين الشكل 1B مخطط الإجراء. تنظيف الساحة والدوائر كما هو موضح في الخطوة 1.2.4.
      ملاحظة: لا يمكن أن يكون الماوس رواية رفيقه ليتيرماتي أو قفص من الماوس هذا الموضوع. ويضم مجموعة وصحية. روض الماوس الرواية إلى غرفة السلوكية لمدة 15 إلى 30 دقيقة كما هو موضح في الخطوة 1.2.3.
    2. ضع كل على حدة المجلسين في وسط الجدارين المتقابلة في الساحة. إدخال الماوس الموضوع في الساحة كما هو موضح في الخطوة 2.1.2 وهو مبين في الشكل 1 باء، الاستكشاف 3 دقيقة. العودة الماوس الموضوع إلى القفص المنزل وإزالة أي البول أو البراز في الساحة.
    3. وضع المساعد في إحدى الدوائر. إعادة إدخال الماوس الموضوع إلى الساحة وسجل ل 3 كحد أدنى وبعد عودة كل الفئران إلى كل من أقفاص المنزلية الخاصة بهم. تكرار الإجراءات مع الفئران هذا الموضوع الأخرى كما هو موضح أعلاه.
      ملاحظة: موازنة الجانب المساعد أو تعيينها عشوائياً داخل المجموعة.
    4. من شريط الفيديو، تقدير المعلمة تصف نشاط التفاعل الاجتماعي من الفئران تيمساعد/tفارغة، مما يعني أن نسبة الوقت التفاعل مع الدائرة مساعد (تيمساعد) وإفراغ واحدة (تيفارغة)، أو استخدام الاعتراف بمؤشر تيمساعد/(تيمساعد + tفارغة).
      ملاحظة: ويعرف تفاعل بين موضوع الماوس والدائرة عندما يكون الآنف الماوس داخل سم 2 من الدائرة والإشارة نحو ذلك.
  4. مرتفعة بالإضافة إلى اختبار المتاهة 10
    1. القيام رفع بالإضافة إلى متاهة الاختبار في نفس اليوم بعد أن يتم اختبار جميع الفئران في التجارب الميدانية المفتوحة. قم بتنظيف الجهاز كما هو موضح في الخطوة 1.2.4.
      ملاحظة: التكوين مرتفعة بالإضافة إلى متاهة "+"--الشكل. فقد اثنين من الأسلحة مفتوحة (30 سم × 5 سم × 0.5 سم) مقابل بعضها البعض وعمودي لاثنين من الأسلحة مغلقة (30 × 5 × 16 سم) مع منصة مركز (5 سم × 5 سم × 0.5 سم). المتاهة ارتفاع 40 سم من الأرض.
    2. ضع الماوس على مفترق الأسلحة المفتوحة والمغلقة، التي تواجه الذراع المفتوحة التي عكس المجرب (الشكل 1). سجل السلوك لمدة 5 دقائق قبل أن تعود الماوس إلى القفص المنزل. كرر حتى يتم اختبار جميع الفئران.
      ملاحظة: دخول المتاهة مع وجهها بذراع مفتوحة يمكن زيادة استكشاف الماوس ذراع مفتوحة.
    3. قياس الوقت الذي تستغرقه الماوس بأذرع مفتوحة (تيفتح)، وفي الأسلحة مغلقة (تيإغلاق) استناداً إلى شريط الفيديو: تيفتح/tإغلاق تشير إلى مستوى القلق.
  5. اختبار السباحة القسري11
    1. جهاز لاختبار السباحة القسري هو خزان أسطواني بارتفاع 30 سم وقطرها 20 سم. ملء الخزان عال مع الاستفادة من المياه في درجة حرارة الغرفة (23-25 درجة مئوية) يصل إلى 15 سم.
      ملاحظة: استخدام المياه العذبة لكل الماوس.
    2. بدء تسجيل الفيديو ووضع الماوس برفق في الماء، وفي وسط الجهاز. تسجيل الفيديو لمدة 6 دقائق قبل وضع الماوس مرة أخرى في قفصة المنزل تحت ضوء الأشعة تحت الحمراء.
      ملاحظة: عدم الإزعاج الماوس بالغرق أو التواء ذيله.
    3. قياس الوقت الجمود في آخر 5 دقيقة من الفيديو المسجل. التنقل يعني أي تحركات غير تلك اللازمة لتحقيق التوازن بين الجسم وإبقاء رأسه فوق الماء.
  6. اختبار التعرف على كائن رواية17،18
    1. إعداد الاختبار التعرف على وجوه جديدة لتضمين 2 يوما تعود، يوم 1 من التعريف، ويوم واحد للتجارب (الشكل 1)؛ كل دورة 10 دقيقة للماوس، والفترة الزمنية الفاصلة بين الدورتين 24 ساعة.
      ملاحظة: ويتم التعود استخدام اختبار حقل فتح كما هو موضح في البند 2-1. الماوس يتفاعل مع كائنين متطابقة (الكائنات القديمة) في التعريف. في الاختبار، والماوس يتفاعل مع أحد الكائنات القديمة وكائن جديد، سواء وضعها في نفس المكان كالكائنات في التعريف. ويشمل جهاز لاختبار التعرف على وجوه الرواية ساحة الميدان فتح ومجموعتين من الكائنات. تحتوي كل مجموعة على كائنين متطابقة (الكائنات A و A وب وب). الكائنات A و B مماثلة في الحجم ولكنها مختلفة في نسيج (الزجاج/البلاستيك/الورق) والشكل (المائدة المستديرة/مكعب) واللون (مشرق/الظلام). يجب أن تكون الكائنات كبيرة بما يكفي للماوس لاستكشاف حدود 10 دقيقة وخالية من رائحة. الحجم المناسب للكبار C57BL/6N الفئران هو 8 سم و 5 سم واسعة في القطر.
    2. وضع علامة على مواقف الكائنين في التعريف والاختبار، و 5 سم بعيداً عن الجانب و 7 سم بعيداً عن أعلى على الساحة.
      ملاحظة: وضع علامة على موضع في المساء قبل التعرف تجنب رائحة العلامة.
    3. في التعريف، والماوس يتفاعل مع مجموعة واحدة من الكائنات المتطابقة. تنظيف الساحة والكائنات كما هو موضح في الخطوة 1.2.4 قبل وضع الماوس على الساحة، التي تواجه في منتصف الجدار كما هو مبين في الشكل 1. سجل لمدة 10 دقيقة قبل أن تعود الماوس إلى القفص المنزل. كرر حتى الانتهاء من جميع الفئران وإرجاع جميع الأقفاص للوحدة الحيوانية.
      ملاحظة: موازنة الكائنات المستخدمة في التعريف داخل الفريق للتقليل من التحيز (مثل الفئران رقم 1 و 2 استكشاف الكائنات، والفئران رقم 3 و 4 استكشاف الكائنات ب وب؛ وبهذه الطريقة، رواية الكائن هو الكائن ب للفئران رقم 1 و 2 والكائن A للفئران لا 3 و 4).
    4. إجراء اختبار 24 ساعة بعد التعريف. استخدام نفس الإجراء فيما يتعلق بالتعريف، باستثناء استبدال أحد الكائنات مع واحد من مجموعة أخرى (الشكل 1). كرر حتى جميع الفئران بإجراء الاختبار، وبعد ذلك، عودة جميع الأقفاص للوحدة الحيوانية.
      ملاحظة: موازنة الجانب الكائن الجديد ضمن المجموعة للتقليل من التحيز (مثلاً، إدخال الفئران رقم 1 و 3 إلى كائنات أ وب، والفئران رقم 2 و 4 إلى كائنات B و A). وبهذه الطريقة، يظهر الكائن الرواية في الجانب الأيمن للفئران رقم 1 و 4، وفي الجانب الأيسر للفئران رقم 2 و 3. هنا، هو الجانب الأيمن الجانب الأيسر المجرب عندما تواجه على الساحة.
    5. قياس الوقت بكل الماوس يتفاعل مع الكائن الجديد (تيالجديدة) والكائن القديم (تيالقديمة) بشكل منفصل، من لقطات الفيديو في مرحلة الاختبار. يرد وصف تفاعل بين الكائن والحيوان في المذكرة في أعقاب الخطوة 2.3.4. حساب الذاكرة الماوس كتفضيل للكائن رواية = tالجديدة/tالقديمة؛ أو تيالجديدة/(تيالجديدة + تيالقديمة).
      ملاحظة: تيالجديدة/tالقديمة يساوي 1 أو تيالجديدة/(تيالجديدة + تيالقديمة) يساوي 0.5 يعني الماوس لديه أي تفضيل للكائن رواية (أي، ضعف الذاكرة). يمكن أن تكون وقت التفاعل مع الكائنات في التعرف عنصر تحكم من التجربة. الوقت الإجمالي يشير إلى نشاط الاستكشاف من الماوس، وتقترح تيالأيسر/tالحق التحيز المكانية.
  7. اختبار المتاهة المائية موريس16
    1. قم بإعداد الجهاز كما يلي.
      1. وضع المتاهة المائية وبركة دائرية (من 120 سم وعمق 60 سم)، في وسط الغرفة السلوكية، ووضع علامة على موضع المتاهة لضمان الموقف لا يزال هو نفسه خلال التجربة بأكملها.
      2. تقسيم المتاهة إلى أربعة أجزاء متساوية وهمي. تعليق الإشارات المرئية (مثلدائرة، مربع، مثلث والبنتاجون) في وسط كل رباعي، 130 سم فوق الأرض و 53 سم بعيداً عن جدار المتاهة.
        ملاحظة: المتاهة والرمز يجب أن تبقى في نفس الموقف أثناء اختبار كامل، حيث الماوس يمكن أن تشكل الذاكرة المكانية دقيقة.
      3. وضع منصة 25 سم بعيداً عن الجدار، في منتصف الربع الرابع، ووضع علامة على موضع. منهاج الماوس 10 سم في القطر.
        ملاحظة: موقف وقطرها منهاج تحديد صعوبة المهمة. أقرب هو إلى جدار المتاهة، أو أكبر من النظام الأساسي، فمن الأسهل المهمة.
      4. تعبئة المتاهة المائية بالمياه (مع درجة حرارة من 23 إلى 25 درجة مئوية، الملونة إلى الأبيض وأدلى معتمة بتبييض مسحوق الحليب المجفف للأغذية) حتى مستوى الماء أعلى من المنصة 1 سم. إحضار الفئران إلى الغرفة السلوكية لمدة 15 إلى 30 دقيقة من التعود كما هو موضح في الخطوة 1.2.3 وتشغيل ضوء الأشعة تحت الحمراء فوق الأقفاص، التي سيتم استخدامها الجاف للفئران.
        ملاحظة: تغطية الجزء العلوي من المنصة بالقماش الأبيض والصافي حتى يمكن بسهولة تسلق الماوس على ذلك. تأكد من أن هناك لا إضاءة مباشرة فوق الماء.
    2. إجراء مرحلة التدريب على النحو التالي.
      1. مرحلة التدريب يستغرق 5 أيام، أربع تجارب في اليوم الواحد. شبه عشوائي ترتيب نقاط الانطلاق في كل يوم كما هو موضح في الأدب16. يمنع هذا الجهد إنشاء ذاكرة النقابي، وهي الطريقة الأكثر شيوعاً ل "الغش" في الاختبار الماوس.
      2. في بداية كل محاكمة، بدء تسجيل الفيديو ووضع الماوس برفق في المتاهة.
        ملاحظة: عدم إفلات الماوس في الخزان أو تحريف ذيله، مما قد يسبب إجهاد إضافي والارتباك.
      3. اسأل المجرب البقاء بعيداً عن الأنظار للماوس والعودة إلى اتخاذ الماوس مرة أخرى إلى قفصة المنزل عند أي مما يلي يحدث: (ط) الماوس لا يمكن تحديد موقع المنصة في غضون 60 ثانية؛ (ثانيا الماوس) يرى المنهاج ضمن 60 ثانية ويبقى عليه لمدة 10 ق. في ظرف (ط)، اسأل المجرب ضع الماوس على المنصة والسماح لها بالبقاء هناك لمدة 10 ق.
        ملاحظة: نقطة (الثاني) يعني الماوس الموقع بنجاح منهاج العمل.
      4. إيقاف الفيديو ووضع الماوس مرة أخرى في قفص المنزل تحت ضوء الأشعة تحت الحمراء.
        ملاحظة: الحفاظ على درجة حرارة الجسم في الفئران حاسم بالنسبة لأدائها نظراً لانخفاض درجة حرارة الجسم ويشدد على الفئران وقد تؤثر على الاختبارات التالية.
      5. كرر الإجراء مع ماوس آخر.
      6. استناداً إلى شريط الفيديو، يقوم بتحديد موقع سجل الكمون الهروب، وهي فترة الماوس تنفق في المتاهة، من دخول المتاهة حتى هذه اللحظة فإنه بنجاح منهاج العمل. إذا كان الماوس لا يمكن العثور على منصة أو يبقى هناك لأقل من 10 ثانية في 60 ثانية، استتار الهروب يعد بمثابة مؤامرة س 60 منحنى التعلم ضد أيام التدريب مع الهروب متوسط زمن الوصول لليوم الواحد.
        ملاحظة: لا تتضمن الكمون الهروب 10 s تنفق على المنصة.
    3. نفذ في مرحلة التحقيق على النحو التالي.
      1. في اليوم السادس لاختبار المتاهة المائية موريس، إعداد الجهاز كما هو موضح في الخطوة 2.7.1.، تأخذ صورة المتاهة لتسجيل الموقف من النظام الأساسي، ثم قم بإزالة النظام الأساسي من الخزان.
      2. بدء تسجيل الفيديو، ووضع الماوس برفق في المتاهة في رباعي قطرياً مقابل رباعي الهدف.
      3. اسأل المجرب البقاء بعيداً عن الأنظار للماوس أثناء تسجيل الفيديو 1 دقيقة. بعد ذلك، يكون المجرب اتخاذ الماوس خارج المتاهة ووضعها مرة أخرى في قفص المنزل.
      4. استخدام الصورة في الخطوة 2.7.3.1. كمرجع لقياس مدة أي عبور منصة. الوقت مدة يبقى الماوس في رباعي المستهدفة (تيالمستهدفة)، وفقا لشريط الفيديو. الوقت الإجماليمجموعتي. قياس تفضيل لرباعي المستهدفة تيالهدف /tالمجموع.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

تم تصميم هذه البطارية اختبار سلوكية للتحليل السلوكي شاملة وصالحة للسيارات، والمزاج، والإدراك، التي تتأثر بشكل شائع في نيوروديجينيريشن5. وقد طبقنا هذه البطارية دراسة التغيرات السلوكية في الفئران C57BL/6N البالغين الشباب بعد تعرض الجهاز التنفسي لجسيمات نانوية السليكا ل مدة شهر وشهرين18. وكشفت النتائج أن C57BL/6N الفئران المعرضة إلى جسيمات نانوية والسليكا أظهرت مختلف التغيرات السلوكية بعد التعرض مختلفة الأوقات18. بإيجاز،...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

التحليل السلوكي للفئران أمر بالغ الأهمية للبحوث نيوروديجينيريشن. بينما الوظائف المعرفية هو غالباً المجال الأكثر عرضه للسلوك تؤثر في أمراض الأعصاب، خلل المزاج، مثل الاكتئاب، والقلق، وهو غالباً ما المرضية. وعلاوة على ذلك، كثيرا ما الدالة السيارات يؤثر على تفسير النتائج في بعض الاختبارات، مثل في رواية كائن الاعتراف، مرتفعة بالإضافة إلى اختبار المتاهة، والاختبار التفاعل الاجتماعي. وبناء على هذه الأفكار، مطلوب بطارية اختبار سلوكية شاملة لإجراء تقييم شامل ودقيق للسلوكيات.

الخطوة الأولى هي اختيار الا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

شكر وتقدير

يشكر المؤلفون الدكتور كورا سويسري لأي من مدرسة "العلوم الطبية"، جامعة هونغ كونغ للإقراض مرتفعة بالإضافة إلى اختبار المتاهة، وقسم التخدير من جامعة هونغ كونغ لإقراض جهاز اختبار روتارود.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
الغرف في اختبار التفاعل الاجتماعيصنعمنزلي (8 سم (طول) × 6 سم (عرض) × 12 سم (ارتفاع)) ، شفافة مع ثقوب ،
خزانات أسطوانية بلاستيكية تستخدم في اختبار السباحة القسريمصنوعةبارتفاع 30 سم ، أقطار 20 سم ، زجاج
مرتفع بالإضافة إلى متاهةمحلية الصنعأذرع مفتوحة (30 سم × 5 سم × 0.5 سم) ، أذرع مغلقة (30 سم × 5 سم × 16 سم) ، منصة مركزية (5 سم × 5 سم × 0.5 سم) ، طول 40 سم. البلاستيك غير الشفاف
IITC Roto-Rod ApparatusIITC Life Science Inc.755 ، سلسلة 8
ساحة مفتوحةالمنزل60 سم (طول) × 60 سم (عرض) × 40 سم (ارتفاع) ، بلاستيك ،
متاهة مائيةمصنوعةبقطر 120 سم ، عمق 60 سم ، فولاذ
منزليا في غير شفافة منزليا

المراجع

  1. Baquero, M., Martin, N. Depressive symptoms in neurodegenerative diseases. World Journal of Clinical Cases. 3 (8), 682-693 (2015).
  2. Brown, R. C., Lockwood, A. H., Sonawane, B. R. Neurodegenerative Diseases: An Overview of Environmental Risk Factors. Environmental Health Perspectives. 113 (9), 1250-1256 (2005).
  3. Bossy-Wetzel, E., Schwarzenbacher, R., Lipton, S. A. Molecular pathways to neurodegeneration. Nature Medicine. 10, S2-S9 (2004).
  4. Cummings, J. L., Diaz, C., Levy, M., Binetti, G., Litvan, I. I. Neuropsychiatric Syndromes in Neurodegenerative Disease: Frequency and Signficance. Seminars in Clinical Neuropsychiatry. 1 (4), 241-247 (1996).
  5. Levenson, R. W., Sturm, V. E., Haase, C. M. Emotional and behavioral symptoms in neurodegenerative disease: a model for studying the neural bases of psychopathology. Annual Review of Clinical Psychology. 10, 581-606 (2014).
  6. Kehagia, A. A., Barker, R. A., Robbins, T. W. Neuropsychological and clinical heterogeneity of cognitive impairment and dementia in patients with Parkinson's disease. Lancet Neurology. 9 (12), 1200-1213 (2010).
  7. Gould, T. D., Dao, D. T., Kovacsics, C. E. The Open Field Test. Mood and Anxiety Related Phenotypes in Mice. Gould, T. D. , Humana Press. Totowa, NJ. 1-20 (2009).
  8. Seibenhener, M. L., Wooten, M. C. Use of the Open Field Maze to measure locomotor and anxiety-like behavior in mice. Journal of Visualized Experiments. (96), e52434(2015).
  9. Kaidanovich-Beilin, O., Lipina, T., Vukobradovic, I., Roder, J., Woodgett, J. R. Assessment of social interaction behaviors. Journal of Visualized Experiments. (48), e2473(2011).
  10. Walf, A. A., Frye, C. A. The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents. Nature Protocols. 2 (2), 322-328 (2007).
  11. Can, A., et al. The mouse forced swim test. Journal of Visualized Experiments. (59), e3638(2012).
  12. Veerappan, C. S., Sleiman, S., Coppola, G. Epigenetics of Alzheimer's disease and frontotemporal dementia. Neurotherapeutics. 10 (4), 709-721 (2013).
  13. Kirova, A. M., Bays, R. B., Lagalwar, S. Working memory and executive function decline across normal aging, mild cognitive impairment, and Alzheimer's disease. Biomed Research International. 2015, 748212(2015).
  14. Draganski, B., Lutti, A., Kherif, F. Impact of brain aging and neurodegeneration on cognition: evidence from MRI. Current Opinion in Neurology. 26 (6), 640-645 (2013).
  15. Schliebs, R., Arendt, T. The cholinergic system in aging and neuronal degeneration. Behavioural Brain Research. 221 (2), 555-563 (2011).
  16. Vorhees, C. V., Williams, M. T. Morris water maze: procedures for assessing spatial and related forms of learning and memory. Nature Protocols. 1 (2), 848-858 (2006).
  17. Leger, M., et al. Object recognition test in mice. Nature Protocols. 8 (12), 2531-2537 (2013).
  18. You, R., et al. Silica nanoparticles induce neurodegeneration-like changes in behavior, neuropathology, and affect synapse through MAPK activation. Particle and Fibre Toxicology. 15 (1), 28(2018).
  19. Housing Deacon, R. M. husbandry and handling of rodents for behavioral experiments. Nature Protocols. 1 (2), 936-946 (2006).
  20. Poon, D. C., et al. PKR deficiency alters E. coli-induced sickness behaviors but does not exacerbate neuroimmune responses or bacterial load. Journal of Neuroinflammation. 12, 212(2015).
  21. O'Leary, T. P., Gunn, R. K., Brown, R. E. What are we measuring when we test strain differences in anxiety in mice? Behavior Genetics. 43 (1), 34-50 (2013).
  22. Can, A., et al. The tail suspension test. Journal of Visualized Experiments. (59), e3769(2012).
  23. Angoa-Perez, M., et al. Mice genetically depleted of brain serotonin do not display a depression-like behavioral phenotype. ACS Chemical Neuroscience. 5 (10), 908-919 (2014).
  24. Blazquez, G., Canete, T., Tobena, A., Gimenez-Llort, L., Fernandez-Teruel, A. Cognitive and emotional profiles of aged Alzheimer's disease (3xTgAD) mice: effects of environmental enrichment and sexual dimorphism. Behavioural Brain Research. 268, 185-201 (2014).
  25. Gimenez-Llort, L., et al. Modeling behavioral and neuronal symptoms of Alzheimer's disease in mice: a role for intraneuronal amyloid. Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 31 (1), 125-147 (2007).
  26. Lad, H. V., et al. Behavioural battery testing: evaluation and behavioural outcomes in 8 inbred mouse strains. Physiology & Behavior. 99 (3), 301-316 (2010).
  27. Powell, T. R., Fernandes, C., Schalkwyk, L. C. Depression-Related Behavioral Tests. Current Protocols in Mouse Biology. 2 (2), 119-127 (2012).
  28. Paylor, R., Spencer, C. M., Yuva-Paylor, L. A., Pieke-Dahl, S. The use of behavioral test batteries, II: effect of test interval. Physiology & Behavior. 87 (1), 95-102 (2006).
  29. Lee, K. M., Coehlo, M., McGregor, H. A., Waltermire, R. S., Szumlinski, K. K. Binge alcohol drinking elicits persistent negative affect in mice. Behavioural Brain Research. 291, 385-398 (2015).
  30. Shiotsuki, H., et al. A rotarod test for evaluation of motor skill learning. Journal of Neuroscience Methods. 189 (2), 180-185 (2010).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

بطارية اختبار سلوكية لتكرار تقييم المهارات الحركية، والمزاج، والإدراك في الفئران
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.