مقالة منهجية

بروتوكول للعلاج Photobiomodulation Transcranial في الفئران

12.3K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/59076

⸱

نوفمبر 18, 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Neurosciences Research Center, Tabriz University of Medical Sciences, 2ProNeuroLIGHT LLC, 3LiteCure LLC, 4Department of Psychiatry, Harvard Medical School, 5Depression Clinical and Research Program, Department of Psychiatry, Massachusetts General Hospital, 6Center for Anxiety and Traumatic Stress Disorders, Department of Psychiatry, Massachusetts General Hospital, 7Research Institute for Applied Physics and Astronomy, University of Tabriz, 8Department of Medical Physics, Tabriz University of Medical Sciences, 9Department of Medical Bioengineering, Tabriz University of Medical Sciences, 10School of Medical Sciences, University of Aberdeen

في هذه المقالة

ملخص

العلاج فوتوبيومودوليشن هو طريقة noninvasive مبتكرة لمعالجة طائفة واسعة من الاضطرابات العصبية والنفسية، ويمكن أيضا تحسين وظيفة المخ السليمة. ويشمل هذا البروتوكول دليل خطوة بخطوة لأداء فوتوبيومودوليشن الدماغ في الفئران بتسليم transcranial الخفيفة، التي يمكن تكييفها للاستخدام في قوارض المختبرات الأخرى.

الملخص

Transcranial photobiomodulation نهج علاجي موسع مبتكرة محتملة لتحسين الاستقلاب الدماغ، وظيفة المخ في طائفة واسعة من الاضطرابات العصبية والنفسية، وتعزيز الذاكرة في انخفاض المعرفية المتعلقة بالسن وأمراض الأعصاب. يمكننا وصف بروتوكول مختبر للعلاج photobiomodulation transcranial (ببمت) في الفئران. العمر بالب/ج الفئران (18 شهرا) تعامل مع 660 نانومتر ليزر ترانسكرانيالي، مرة واحدة يوميا لمدة أسبوعين. وتبين البيانات منافذه الليزر أن حوالي 1% الضوء الأحمر الحادث في فروة الرأس تصل إلى عمق 1 مم من سطح القشرية، اختراق الحصين الظهرية. يتم تقييم نتائج العلاج بطريقتين: بارنز المتاهة الاختبار الذي تقييم مهمة الحصين-تعتمد على التعلم والذاكرة مكانية، وقياس مستويات ATP هيبوكامبال، الذي يستخدم كمؤشر الاستقلاب. إظهار النتائج من مهمة بارنز تعزيزا للذاكرة المكانية في الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين المعالجة بالليزر بالمقارنة مع العمر مطابقة عناصر التحكم. تحليل الكيمياء الحيوية بعد العلاج بالليزر يشير إلى زيادة هيبوكامبال ATP. نحن مسلمة أن تحسين أداء الذاكرة يحتمل أن تكون نتيجة لحدوث تحسن في التمثيل الغذائي هيبوكامبال الطاقة الناجمة عن العلاج بالليزر الأحمر. ويمكن تمديد الملاحظات في الفئران إلى نماذج حيوانية أخرى منذ هذا البروتوكول يمكن أن يحتمل أن يمكن تكييفه مع الأنواع الأخرى المستخدمة بكثرة في علم الأعصاب متعدية الجنسيات، مثل الأرنب أو القط أو الكلب أو القرد. فوتوبيومودوليشن Transcranial هو طريقة آمنة وفعالة من حيث التكلفة التي قد يكون نهج علاجية واعدة في الإعاقة المعرفية المتعلقة بالسن.

المقدمة

ببمت، أو العلاج بالليزر منخفض المستوى الضوء (للت)، هو مصطلح عام يشير إلى الأساليب العلاجية استناداً إلى تحفيز الأنسجة البيولوجية بالطاقة الضوئية من أشعة الليزر أو الضوء – ينبعث الثنائيات (LEDs). يتم تطبيق تقريبا جميع ببمت العلاج مع الأحمر بالقرب من الأشعة تحت الحمراء (الجرد) الضوء عند أطوال موجية من 600 إلى 1100 نانومتر، إنتاج طاقة تتراوح من 1 إلى 500 ميغاواط، وفلوينس تتراوح < 1 إلى > 20 ي/سم2 (انظر تشونغ et al.1).

ببمت Transcranial هو أسلوب تسليم خفيفة موسع يجري تشعيع الرأس باستخدام مصدر ضوء خارجي (الليزر أو المصابيح)2. للتطبيقات الحيوانية، ويتضمن هذا الأسلوب الاتصال أو التنسيب noncontact المسبار الصمام أو ليزر على رأس الحيوان. تبعاً لمنطقة الفائدة العلاجية، يمكن وضع مجس ضوء أما على الرأس كله (لتغطي جميع مجالات الدماغ) أو على جزء محدد من الرأس، مثل منطقة بريفرونتال أو أمامي أو الجدارية. نقل جزئي للضوء الأحمر/الجرد عن طريق فروة الرأس، الجمجمة، والأم الجافية يمكن أن تصل إلى مستوى السطح القشرية وتوفير كمية من الطاقة فوتون كافية لإنتاج الفوائد العلاجية. في وقت لاحق، أن نشر فلوينس الخفيفة تم تسليمها على مستوى القشرية في المسألة الدماغ الأبيض والرمادي حتى تصل إلى أعمق هياكل الدماغ3.

الضوء في النطاقات الطيفية في الأحمر لمنطقة استعملنا (600-680 nm) ونير المبكر (800 870 nm) يناظر طيف امتصاص الفسفرة التأكسدية، الإنزيم الطرفي من سلسلة التنفس المتقدرية4. هو الافتراض بأن ببمت في الطيف الأحمر/الجرد يسبب فوتوديسوسييشن أكسيد النيتريك (لا) من الفسفرة التأكسدية، أدى إلى زيادات في الميتوكوندريا الإلكترون النقل، وفي نهاية المطاف، زيادة توليد ATP5. فيما يتعلق بتطبيقات الخلايا العصبية، نيوروستيمولاتوري الفوائد المحتملة للدماغ ببمت استخدام التشعيع transcranial أبلغ الأساليب في مجموعة متنوعة من الدراسات السريرية، بما في ذلك نماذج القوارض من الدماغ إصابة (تبي)6، السكتة الدماغية الحادة7ومرض الزهايمر (AD)8، ومرض باركنسون (PD)9، والاكتئاب10، والشيخوخة11.

وتعتبر الشيخوخة الدماغ شرط العصبية التي تؤثر تأثيراً سلبيا على بعض الوظائف المعرفية، مثل التعلم والذاكرة12. الميتوكوندريا هي العضيات الرئيسية المسؤولة عن إنتاج ATP والاستقلاب العصبية. ومن المعروف خلل mitochondrial مرتبطة بالعجز المرتبطة بالسن في مناطق الدماغ التي ترتبط بالذاكرة التنقل المكاني، مثل الحصين13. لأن العلاج الجمجمة مع الأحمر/الجرد الضوء أساسا من الأفعال بتحوير الاستقلاب المتقدرية، يمكن أن يؤدي كافية الجرعة الخفيفة تم تسليمها إلى الحصين في تحسين الذاكرة المكانية نتائج14.

وهدف البروتوكول الحالي إظهار الإجراء ببمت transcranial في الفئران، باستخدام مستويات منخفضة من الضوء الأحمر. ويرد وصف القياسات نقل الضوء الليزر المطلوبة من خلال أنسجة الرأس من الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين. بالإضافة إلى ذلك، المتاهة بارنز، كتعلم تعتمد على الحصين مكانية والذاكرة المهمة، ومستويات ATP هيبوكامبال، كمؤشر الاستقلاب، وتستخدم لتقييم تأثير العلاج في الحيوانات.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

جميع الإجراءات نفذت وفقا للدليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية "معاهد الصحة الوطنية" (المعاهد الوطنية للصحة؛ تنقيح المنشور رقم 85-23، 1985) وأقرته لجنة الأخلاقيات الإقليمية من تبريز جامعة للعلوم الطبية.

تنبيه: هذا البروتوكول يتضمن تطبيق فئة 3B الليزر الصكوك وسوف تتطلب التدريب السليم والالتزام بإرشادات السلامة. فئة 3B أشعة الليزر يمكن أن يلحق بها ضررا بالغا العيون، ويمكن تسخين الجلد. ولا تعتبر فئة 3B الليزر خطرا على حرق. يجب ارتداء نظارات حماية العين في جميع الأوقات عند تشغيل جهاز الليزر.

1-ليزر تجارب نقل الضوء

ملاحظة: يستخدم هنا كان عمره 18 شهرا ثلاثة ذكور الفئران بالب/ج الحصول من مرفق الحيوان من تبريز جامعة للعلوم الطبية. ليزر 60 ميغاواط (660 نانومتر) مع شعاع دائري الشكل من 2.5 ملم في القطر كمصدر الضوء. مصدر الليزر ينتج ضوء مستقطب دائريا مع ملف تعريف كثافة ضبابي وهو يعمل في وضع موجات مستمرة. مقياس طاقة الضوئي تجارية مع قرار nW 10 ومنطقة نشطة الضوئي2 مربع 1 سم، ونطاق استجابة طيفية من 400 إلى 1100 نانومتر يستخدم لقياس قوة الضوء المنقولة عن طريق العينات.

  1. إعداد نموذج
    1. من أجل الحصول على عينات جديدة، تخدير عميق الماوس مع خليط من الكيتامين (100 مغ/كغ) وإكسيلازيني (10 مغ/كغ).
    2. تشريح الرأس للماوس مع المقص المنتظمة، بدءاً من نقطة تقع فوق الأكتاف.
    3. استدارة الرأس حيث أن يواجه الجانب البطني من الفك. الشريحة مقص تشريح الزاوية بسلاسة من خلال تجويف الفم حتى هي لاحظت مقاومة مفرق الفك السفلي. قطع جميع عضلات كبيرة تربط بين عظم الفك السفلي للجمجمة وتجاهلها.
    4. إزالة العظام حنكي، استخدام مقص تشريح الزاوية.
    5. تجاهل جميع اللحم المحيطة الجمجمة، واستخدام الملقط منحنية.
    6. تشريح الجزء السفلي من الجمجمة، ومن ثم، بعناية اتخاذ الدماغ من عظم الجمجمة المتبقية، مع ملعقة منحنية.
    7. إصلاح أنسجة المخ سليمة في 2% [اغروس] هلام حيث ستكون مناسبة لتشريح الأنسجة.
      ملاحظة: بغية الحصول جمجمة سليمة بالإضافة إلى فروة الرأس عينة، أنسجة المخ يجب إزالة من الجانب البطني للرأس للحيوان دون أي ضرر على الجزء الظهرية للرأس.
  2. الدماغ التقطيع الداخلي
    1. انتشار قطره superglue (~0.05 مل) على السطح لمنع تصاعد فيبرتوم.
    2. عناية إرفاق الكتلة [اغروس] فيبرتوم تصاعد كتلة حيث يكون السطح البطني للدماغ فاسيدوون، وتعديل موقفها.
    3. قليلاً مباراة فيبرتوم النصل إلى السطح العلوي من الكتلة [اغروس] وسجل القيمة كتر كمستوى التعليم الابتدائي.
    4. ملء خزان فيبرتوم مع المحلول الملحي العادي المثلج.
    5. ضبط معلمات فيبرتوم (مثلاً، شريحة سمك [1 مم]، وسرعة [5 5 على جهاز وحدة]، وتواتر الاهتزاز [5 5 على جهاز وحدة]) للحصول على تشريح مرضية.
    6. قطع المخ العرض إلى شريحة مع سمك 1,000 ميكرومتر.
      ملاحظة: الشريحة هي جزء أنسجة المخ محدد بواسطة سطح القشرية وطائرة في وضع أدنى من السطح القشرية (الحصين الظهرية) 1,000 ميكرومتر.
    7. أضف قطره من الماء (~0.05 مل) على سطح الزجاج البصري ووضع شريحة الدماغ على أعلى من ذلك. ثم إضافة قطره من الماء على الدماغ شريحة ووضع بعناية على الزجاج البصري الثانية على أعلى من ذلك.
      ملاحظة: تضاف قطره الماء إلى حدود الزجاج عينة منعا لتجفيف الأنسجة وتناثر من الأسطح الخام الخفيف.
  3. قياس نقل الضوء من خلال أنسجة الرأس
    1. قم بإعداد المعدات البصرية، بما في ذلك جهاز الليزر، مما يعكس مرايا، ووحدة عداد الطاقة.
      تنبيه: وضعت على نظارات واقية العين قبل تشغيل الليزر.
    2. نظراً لغياب عينة على مقياس الطاقة، قم بتشغيل جهاز الليزر وتركيز شعاع الليزر على النسخة المتطابقة التي تقع على مسافة مناسبة لتوجيه شعاع عمودي على الضوئي منطقة نشطة.
      ملاحظة: يجب إجراء قياسات نقل الضوء في غرفة مظلمة في درجة حرارة الغرفة (23-25 درجة مئوية)، خلال 30 دقيقة بعد أن تم استخراج أنسجة الرأس.
    3. إجراء قياسات على أنسجة المخ شرائح.
      1. ضع النظارات البصرية فارغة اثنين على سطح مقياس الطاقة.
      2. قراءة السلطة الخفيفة المنقولة (أنا0) من مقياس الطاقة عرض الشاشة وسجل القيمة.
      3. بلطف ضع العينة الدماغ، التي تشمل باثنين من النظارات البصرية، على سطح مقياس الطاقة وتركيز الشعاع على الأنسجة منطقة كل منها، قراءة السلطة المنقولة، وسجل القيمة.
    4. إجراء القياسات في الجمجمة بالإضافة إلى فروة الرأس.
      1. ضع زجاج بصري فارغة على سطح مقياس الطاقة.
      2. قراءة السلطة الخفيفة المنقولة (أنا0) من مقياس الطاقة عرض الشاشة وسجل القيمة.
      3. طفيفة مكان زجاج بصري مع جمجمة جديدة بالإضافة إلى فروة الرأس الأنسجة على سطح مقياس الطاقة وتطابق شعاع الضوء على منطقة بريجما وقراءة السلطة المنقولة وسجل القيمة.
      4. من أجل تعظيم نسبة الإشارة إلى الضجيج، كرر قياس نقل الضوء على الأقل 3 x لجميع العينات.
        ملاحظة: يتم وضعها في منطقة بريجما في روسترال إلى خط مرسوم من خلال قاعدة الأمامي في آذان 3 مم تقريبا. سمك الأنسجة الجمجمة بالإضافة إلى فروة الرأس يقاس قدمه ذات الورنيّة قياسية.

2-العلاج فوتوبيومودوليشن (ببمت)

ملاحظة: استخدمت خمسة وأربعون من ذكور الفئران بالب/ج المعينة لثلاث مجموعات من الفئران 15 كل. المجموعات التي تتألف من الشباب لمكافحة الفئران (2 أشهر من العمر) التي تلقت شام-ببمت، سن لمكافحة الفئران (18 شهرا) التي تلقت شام-ببمت، والمسنين-ببمت الفئران (18 شهرا) التي تلقت ببمت. علاج ببمت الشام تتكون من معاملة مماثلة ببمت المجموعة ولكن مع الليزر غير نشط. فئران تم الحصول عليها من مرفق الحيوان من تبريز جامعة للعلوم الطبية، ويقيمون في الحيوان عقد الوحدة من مركز أبحاث علوم الأعصاب (يجب) في 24-25 درجة مئوية ونسبة 55% من الرطوبة النسبية، مع الضوء ح 12 وكبيرة مظلمة ح 12. تم توفير الغذاء والمياه libitum الإعلانية. كانت أقلمة جميع الفئران لمدة أسبوع واحد على الأقل قبل العلاج.

  1. الليزر العلاج الداخلي
    ملاحظة: استخدمت ليزر صمام ثنائي جالس مع وضع موجات مستمرة في الطول الموجي نانومتر 660 transcranial ببمت العلاج. تم تشغيل جهاز الليزر إنتاج طاقة من 200 ± 2 ميغاواط والإشعاع 6.66 ث/سم2، مع حجم بقعة من 0.03 سم2. تم تسليمها فلوينس متوسط 99.9 ي/سم2 في كل دورة إلى سطح فروة الرأس لمدة 15 ثانية التشعيع. التشعيع كانت تدار 1 x يوميا لمدة أسبوعين على التوالي.
    1. جلب الفئران في اقفاصها المنزل إلى غرفة العلاج، حوالي 20 دقيقة قبل البدء في العلاج.
    2. قم بتوصيل حامي كهربائية مقبس الحائط.
    3. إدراج المكونات جهاز ليزر حامي كهربائية.
    4. تغطية غيض مسبار الليزر مع فيلم نايلون شفافة بغية منع أي خدش على السطح.
    5. بعناية قم بتوصيل المجس قناة جهاز الليزر.
    6. قم بتشغيل جهاز الليزر وانتظر بضع ثوان للاحماء.
    7. ضبط المعلمات/العلاج بالليزر، بما في ذلك وضع الوقت وعملية التشعيع.
    8. في غياب أي عينات، تحدد قوة الليزر متوسط عن طريق الاتصال غيض التحقيق إلى منطقة نشطة من مقياس الطاقة على جهاز الليزر. سجل القيمة.
    9. كرر عملية المعايرة (الخطوة 2.1.8) على الأقل 5 س، قراءة صلاحيات الحادث من عداد الطاقة لعرض الشاشة، وتسجيل القيم.
    10. بلطف اضغط ماوس بالجلد الظهرية من الرقبة للحيوان في كف اليد وشل برأسه.
      ملاحظة: في البروتوكول الحالي، يتم وضع مسبار الليزر في منطقة بريجما، وملم ~ 3 روسترال بخط بين القاعدة الداخلية للاذنين.
    11. طفيفة مكان غيض التحقيق مباشرة في فروة الرأس في خط الوسط، روسترال إلى خط مرسوم من خلال قاعدة الأمامي في آذان 3 مم تقريبا.
      ملاحظة: إجراء التحقيق في حوالي 45° زاوية لطائرة البطن.
    12. تفاديا للإشعاع المباشر لعيون الحيوان، أول اتصال غيض التحقيق على رأسه، وثم قم بتشغيل على جهاز الليزر.
    13. قم بتشغيل الليزر وثابت إجراء التحقيق حتى انتهاء التشعيع.
    14. بعد انتهاء العلاج، سحب مسبار الليزر من الرأس والعودة بلطف الماوس إلى قفصة.
    15. إيقاف تشغيل الجهاز الليزر وقطع المسبار من الجهاز.
    16. تنظيف مسبار الليزر مع نظافة بصرية مناسبة.
    17. نقل الفئران إلى مرفق الحيوان.

3-السلوكية المهام

  1. فتح حقل تجارب
    1. تقييم الحركي النشاط لكل ماوس من المسافة الإجمالية سافر أثناء إجراء اختبار حقل مفتوح، كما هو موضح مسبقاً15.
  2. مهمة المتاهة بارنز
    1. جهاز
      ملاحظة: يتم تنفيذ مهمة التعلم والذاكرة المكانية في متاهة بارنز16. جهاز يستخدم لهذه المهمة السلوك العصبي ويتكون من منصة دائرية مصنوعة من الخشب الأسود (95 سم في القطر) مع 20 مسافة واحدة، 5 سم-قطر دائري الثقوب الموجودة على النظام الأساسي أو 3 سم من المحيط. الجهاز ارتفاع 50 سم من الكلمة لمنع الحيوان من التسلق إلى أسفل. مربع هروب بلاستيك أسود منقولة (20 سم × 15 سم × 5 سم) يوضع تحت الحفرة الهروب. متاهة أسود يستخدم لاختبار الفئران البيضاء، وحصيرة أسود ينبغي أن توضع تحت المتاهة عندما يتم استخدام برمجيات تتبع النظام.
      1. ضع جهاز المتاهة، في وسط الغرفة هادئة مع الإضاءة الساطعة في النفقات العامة.
      2. ضع علامة على "عدم دخول" خارج باب الغرفة المهمة.
      3. إرفاق منبهات البصرية-المكانية على الجدران المحيطة.
      4. ضع كاميرا فيديو رقمية فوق منصة المتاهة.
      5. تنظيف سطح منصة المتاهة مع الإيثانول 70% لإزالة الإشارات حاسة الشم غير المرغوب فيها.
      6. إضافة كمية صغيرة من الفراش من قفص الحيوان المنزلية إلى داخل مربع الهروب بمثابة جديلة حاسة الشم.
    2. دورة التكيف
      1. جعل الماوس كل دقيقة الغرفة ما يقرب من 30 مهمة قبل بداية التجربة، من أجل الماوس لتصبح اعتادوا.
      2. إزالة الماوس من قفصة ومكان الحيوان برفق في المربع الهروب لمدة 1 دقيقة.
    3. دورة تدريبية
      ملاحظة: يتم تكرار الدورة التدريبية لكل الماوس على 4 أيام متتالية.
      1. إزالة الماوس من مربع الهروب بلطف.
      2. ضع الماوس في وسط الساحة؛ ثم، ضع الدائرة ابدأ على رأس الماوس.
      3. إزالة الدائرة ابدأ بعد 10 ثانية، والسماح بالماوس لاستكشاف الساحة لمدة 3 دقائق.
      4. حرك بهدوء إلى مجال الكمبيوتر ووضعت على سماعات إلغاء الضوضاء.
      5. يؤدي حافز سمعي سلبية تتكون من ضجيج أبيض مرتفع حوالي 80 ديسيبل على المستوى الأساسي والبدء في التصوير بالفيديو الماوس.
      6. إيقاف الضوضاء البيضاء وإيقاف تسجيل الفيديو عند إدخال الماوس مربع الهروب. تسمح للحيوان أن يبقى دون عائق في المربع ل 1 دقيقة.
      7. إزالة الماوس من مربع الهروب ووضعه مرة أخرى في قفصة.
      8. كرر الخطوات 3.4.2 من خلال رقم 3.4.7 x 4 يوميا، مع فترات 3 دقيقة بين التجارب المتكررة.
        ملاحظة: بين جميع المحاكمات، إزالة أي البول أو البراز من على سطح الساحة وتنظيف المتاهة مع الإيثانول 70%.
    4. التحقيق في جلسة المحاكمة
      1. عقب المحاكمة التدريب الأخير، إزالة 24 ساعة في وقت لاحق، مربع الهروب من منصة المتاهة وكرر الخطوات 3.4.2 عن طريق 3.4.5.
      2. وبعد 3 دقائق، إيقاف الضجيج الأبيض والتوقف عن التصوير بالفيديو. إزالة الماوس من الساحة المتاهة ووضعه مرة أخرى في قفصة.
      3. بعد أن تم اختبار جميع الحيوانات، تنظيف منصة المتاهة والدائرة ابدأ. إطفاء الأنوار الغرفة وإزالة علامة "عدم دخول" من الباب.
      4. تخزين تسجيلات الفيديو من دورات الاختبار إلى محرك قرص الثابت خارجي لمزيد من التحليل.
      5. قم بإعداد برنامج التعقب بالفيديو واستخراج معلمات الفائدة من أشرطة الفيديو المسجلة، بما في ذلك وقت الكمون لإيجاد ثقب الهدف خلال 4 أيام دورات التدريب والوقت ينفق في رباعي المستهدفة خلال جلسة المحاكمة التحقيق.

4-التقييم الكيمياء الحيوية

  1. مستويات ATP في الحصين
    1. تخدير عميق كل الفأرة مع حقن داخل خليط من الكيتامين (ملغ 100 جرام من وزن الجسم) وإكسيلازيني (ملغ 10 جرام من وزن الجسم).
    2. قطع رأس الحيوان وسرعة إزالة أنسجة المخ من الجمجمة.
    3. تشريح خارجاً الحصين ومجانسة الأنسجة في عينة المثلج المخزن المؤقت (المقدمة من المجموعة) مع الخالطون أنسجة.
    4. فورا الطرد المركزي هوموجيناتي في 2,000 س ز لمدة 3 دقائق في 4 درجات مئوية.
    5. نقل المادة طافية إلى أنبوب نظيفة.
    6. تقييم مستويات ATP هيبوكامبال، في سبيكتروفوتوميتريك باستخدام الأسلوب كما هو موضح سابقا11.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

التحليلات الإحصائية

وقد تم تحليل التحليل الإحصائي للبيانات التي تم الحصول عليها من الدورات التدريبية بارنز باتجاهين ANOVA؛ أجريت الاختبارات السلوكية وتحليل مستويات ATP هيبوكامبال بين المجموعات الأخرى من قبل ANOVA أحادي الاتجاه، تليها الاختبار في توكي المخصص بعد. جميع البيانات يتم التعبير عن وسيلة ± الخطأ المعياري للوسط (SEM)، باستثناء البيانات نقل الليزر، والتي تظهر بشكل يعني ± الانحراف المعياري (SD). تم تعيين م...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

يمكننا وصف بروتوكول للقيام بإجراء ببمت transcranial في الفئران. هذا البروتوكول هو موجهة خصيصا لمختبرات علم الأعصاب تؤدي البحوث فوتوبيومودوليشن التي ركزت على القوارض. ومع ذلك، يمكن تكييفها هذا البروتوكول للحيوانات المختبرية الأخرى التي تستخدم بشكل متكرر في مجال علم الأعصاب، مثل الأرنب أو القط أو الكلب أو القرد.

وهناك حاليا اهتماما متزايداً بالتحقيق transcranial ببمت مع الليزر الأحمر/الجرد والمصابيح. من أجل النجاح في تنفيذ إجراءات العلاج الكامل في القوارض، وهناك بضع خطوات أساسية للنظر.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

المرتب P.C. لتدعمها إدارة الطب النفسي جامعة هارفارد (زمالة ارن دوبون وجائزة ليفينغستون)، الدماغ و "مؤسسة أبحاث السلوك" (جائزة المحقق الشاب نارساد)، وشركة فوتوثيرا غير مقيد منحة. وجاء التبرع بالمخدرات من تيفا. وجاء رد السفر من فارماسيا وآبجون. تلقت P.C. رسوم التشاور من يانسن للبحث والتنمية. وقد قدم P.C. العديد من براءات الاختراع المتعلقة باستخدام الضوء القريبة من الأشعة تحت الحمراء في الطب النفسي. فوتوميديكس، وشركة إمداد الأجهزة الأربعة لدراسة سريرية. وقد تلقي P.C. التمويل غير المقيد من شركة ليتيكوري إجراء دراسة بشأن photobiomodulation transcranial لعلاج اضطرابات الاكتئاب الرئيسية وإجراء دراسة بشأن مواضيع صحية. P.C. تأسيسه شركة (نركس الضوء المداواة) وركزت على تطوير طرائق جديدة للمعاملة القائمة على ضوء القريبة من الأشعة تحت الحمراء؛ وأيضا خبير استشاري للشركة نفسها. P.C. تلقت تمويلاً من "العلوم الدماغية" إجراء دراسة بشأن photobiomodulation transcranial لاضطراب القلق العام. مؤلفين آخرين قد لا يوجد تضارب في الكشف عن.

شكر وتقدير

يؤيد هذا العمل بمنحه من تبريز جامعة للعلوم الطبية (منح رقم 61019) إلى س. س.-هاء ومنحة منشور من ليتيكوري LLC، نيوآرك، دي، الولايات المتحدة الأمريكية إلى L.D.T. الكتاب يود أن يشكر إدارة علم المناعة ومركز تطوير التعليم (EDC) من تبريز جامعة للعلوم الطبية على مساعدتهم الطيبة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
كيتامينالفسان# 1608234-01
زيلازينألفاسان# 1608238-01
أغاروزسيجما#A4679
SuperglueQuickstar
VibratomeCampden Instruments#MA752-707
ماركة شراعزجاجي بصري# 7102
قوة مترمختبرات ثور#PM100D
كاشف الثنائي الضوئيمختبراتثور #S121C
الفرجاربيتسبرغ
GaAlAs ليزرثور للطب
Etho VisionNoldus
الطرد المركزيFroilabo#SW14R
أغطية الأذن النسرالأزرق
الكاميرا الرقميةVisionlite#VCS2-E742H
مكبر للصوت Sterioسوني
الإيثانولHamonteb# 665.128321
بارنز متاهةمجموعة فحص ATP المصنوعة من صنع
سيجما#MAK190
إليسا قارئالوعي#Stat فاكس 2100
الضوئيكوستوم

المراجع

  1. Chung, H., et al. The nuts and bolts of low-level laser (light) therapy. Annals of Biomedical Engineering. 40 (2), 516-533 (2012).
  2. Salehpour, F., et al. Brain Photobiomodulation Therapy: a Narrative Review. Molecular Neurobiology. , 1-36 (2018).
  3. Hamblin, M. R. Shining light on the head: photobiomodulation for brain disorders. BBA Clinical. 6, 113-124 (2016).
  4. Karu, T. I., Pyatibrat, L. V., Kolyakov, S. F., Afanasyeva, N. I. Absorption measurements of a cell monolayer relevant to phototherapy: reduction of cytochrome c oxidase under near IR radiation. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 81 (2), 98-106 (2005).
  5. de Freitas, L. F., Hamblin, M. R. Proposed mechanisms of photobiomodulation or low-level light therapy. IEEE Journal of Selected Topics in Quantum Electronics. 22 (3), 348-364 (2016).
  6. Xuan, W., Vatansever, F., Huang, L., Hamblin, M. R. Transcranial low-level laser therapy enhances learning, memory, and neuroprogenitor cells after traumatic brain injury in mice. Journal of Biomedical Optics. 19 (10), 108003(2014).
  7. DeTaboada, L., et al. Transcranial application of low-energy laser irradiation improves neurological deficits in rats following acute stroke. Lasers in Surgery and Medicine: The Official Journal of the American Society for Laser Medicine and Surgery. 38 (1), 70-73 (2006).
  8. De Taboada, L., et al. Transcranial laser therapy attenuates amyloid-β peptide neuropathology in amyloid-β protein precursor transgenic mice. Journal of Alzheimer’s Disease. 23 (3), 521-535 (2011).
  9. Oueslati, A., et al. Photobiomodulation suppresses alpha-synuclein-induced toxicity in an AAV-based rat genetic model of Parkinson’s disease. PloS One. 10 (10), e0140880(2015).
  10. Xu, Z., et al. Low-level laser irradiation improves depression-like behaviors in mice. Molecular Neurobiology. 54 (6), 4551-4559 (2017).
  11. Salehpour, F., et al. Transcranial low-level laser therapy improves brain mitochondrial function and cognitive impairment in D-galactose–induced aging mice. Neurobiology of Aging. 58, 140-150 (2017).
  12. Grady, C. The cognitive neuroscience of ageing. Nature Reviews Neuroscience. 13 (7), 491(2012).
  13. Beal, M. F. Mitochondria take center stage in aging and neurodegeneration. Annals of Neurology. Official Journal of the American Neurological Association and the Child Neurology Society. 58 (4), 495-505 (2005).
  14. Lu, Y., et al. Low-level laser therapy for beta amyloid toxicity in rat hippocampus. Neurobiology of Aging. 49, 165-182 (2017).
  15. Seibenhener, M. L., Wooten, M. C. Use of the open field maze to measure locomotor and anxiety-like behavior in mice. Journal of Visualized Experiments. (96), e52434(2015).
  16. Rosenfeld, C. S., Ferguson, S. A. Barnes maze testing strategies with small and large rodent models. Journal of Visualized Experiments. (84), e51194(2014).
  17. Huang, Y. Y., Chen, A. C. H., Carroll, J. D., Hamblin, M. R. Biphasic dose response in low level light therapy. Dose Response. 7 (4), 358-383 (2009).
  18. Mohammed, H. S. Transcranial low-level infrared laser irradiation ameliorates depression induced by reserpine in rats. Lasers in Medical Science. 31 (8), 1651-1656 (2016).
  19. Zhang, Y., Zhang, C., Zhong, X., Zhu, D. Quantitative evaluation of SOCS-induced optical clearing efficiency of skull. Quantitative Imaging in Medicine and Surgery. 5 (1), 136(2015).
  20. Shaw, V. E., et al. Neuroprotection of midbrain dopaminergic cells in MPTP-treated mice after near-infrared light treatment. Journal of Comparative Neurology. 518 (1), 25-40 (2010).
  21. Moro, C., et al. Photobiomodulation inside the brain: a novel method of applying near-infrared light intracranially and its impact on dopaminergic cell survival in MPTP-treated mice. Journal of Neurosurgery. 120 (3), 670-683 (2014).
  22. Reinhart, F., et al. The behavioural and neuroprotective outcomes when 670 nm and 810 nm near infrared light are applied together in MPTP-treated mice. Neuroscience Research. 117, 42-47 (2017).
  23. Sadowski, M., et al. Amyloid-β deposition is associated with decreased hippocampal glucose metabolism and spatial memory impairment in APP/PS1 mice. Journal of Neuropathology and Experimental Neurology. 63 (5), 418-428 (2004).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

ATP

مقالات ذات صلة