يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

البلعمه البلاعم السنخية وإزالة البكتيريا في الفئران

11.4K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/59088

⸱

مارس 2, 2019

 ,  ,  , 
1Department of Physiological Sciences, Eastern Virginia Medical School

في هذه المقالة

ملخص

هنا نحن تقرير الأساليب الشائعة لتحليل الدالة متجولة مورين البلاعم السنخية وإزالة البكتيريا من الرئة. دراسة هذه الأساليب البلعمه في المختبر من fluorescein isothiocyanate الخرز والمجراه في البلعمه من "بروتين فلوري أخضر" الزائفة الزّنجاريّة . كما يصف لنا طريقة لمسح P. الزّنجاريّة في الفئران.

الملخص

البلاعم السنخية (هيئة علماء المسلمين) حراسة الفضاء التهاب في الرئة. البلعمه بمقياس الدعم الكلي تلعب دوراً حاسما في الدفاع ضد غزو العوامل الممرضة، وإزالة الخلايا الميتة أو الجسيمات الأجنبية، وفي القرار الردود الملتهبة والأنسجة يعيد البناء، العمليات التي هي توسط المستقبلات السطحية المختلفة من هيئة علماء المسلمين. هنا، نحن التقرير أساليب لتحليل الدالة متجولة لمقياس الدعم الكلي باستخدام استراتيجيات تجريبية وفحوصات في المختبر والمجراه في التفريق بين نمط الاعتراف مستقبلات-وتكملة مستقبلات-، ونادي غاما بوساطة مستقبلات البلعمه. وأخيراً، نحن نناقش أسلوب لإنشاء ووصف نموذج P. الزّنجاريّة الالتهاب رئوي في الفئران لإزالة البكتيريا الحية في تقييم. هذه الاختبارات تمثل الأساليب الأكثر شيوعاً لتقييم وظائف صباحا ويمكن استخدامها أيضا لدراسة وظيفة بلعم وإزالة البكتيريا في الأجهزة الأخرى.

المقدمة

هيئة علماء المسلمين هي البالعات المقيم الرئيسي في الحويصلات الهوائية في مرحلة استراحة وواحدة من اللاعبين الرئيسيين من الاستجابات المناعية الفطرية من خلال الاعتراف واستيعاب استنشاق الجراثيم والجسيمات الأجنبية1،2. وذكر أن هيئة علماء المسلمين تعتبر أساسية للتخليص السريع من العديد من مسببات الأمراض الرئوية مثل P. الزّنجاريّة و الالتهاب الرئوي الكلبسيله3،4، حيث غالباً ما يؤدي نقص في البلعمه صباحا في الجهاز التنفسي التهابات، مثل الالتهاب الرئوي الحاد، مما يتسبب في ارتفاع معدلات الوفيات والاعتلال.

هيئة علماء المسلمين أيضا بدء الفطرية الردود التهاب في الرئة بإنتاج السيتوكينات والمستقطبات مثل تنف-α وايل-1β، الذي الحديث المتبادل مع الخلايا الأخرى للبيئة السنخية لإنتاج المستقطبات وتجنيد العَدلات التحريضية، وحيدات، و الخلايا المناعية التكيفية في الرئة5. على سبيل المثال، يساعد إيل-1β التي تنتجها هيئة علماء المسلمين رئيس الوزراء إطلاق سراح chemokine العَدلات CXCL8 من الخلايا الظهارية6. وعلاوة على ذلك، تسهم هيئة علماء المسلمين البلعمه من الكريات البيض النوى apoptotic (بمنس)، فشل الأمر الذي يؤدي إلى تسرب المطرد للإنزيمات داخل الخلايا من بمنس إلى الأنسجة المحيطة مما أدى إلى تلف الأنسجة والتهاب المطول 7 , 8 , 9.

هو باعتراف مباشر بأنماط الجزيئية المرتبطة بالعوامل الممرضة في السطح الممرض المستقبلات التعرف على نمط (برس) من هيئة علماء المسلمين أو بواسطة الربط من مسببات الأمراض أوبسونيزيد مع مستقبلات المستجيب محصنة من هيئة علماء المسلمين وساطة البلعمه بهيئة علماء المسلمين 10-لهذا الأخير، مقياس الدعم الكلي يمكن التعرف على الأهداف التي أوبسونيزيد مع الغلوبولين المناعي (IgG) من خلال ما مستقبلات Fcγ (FcγR) أو مسببات الأمراض مغلفة بشظايا مكملاً، C3b و C3bi، من خلال مستقبلات تكمل بهم (CR)11. بين مستقبلات مكملاً، وأعرب عن الجمهورية التشيكية من فوق عائلة الغلوبولين المناعي (كريج) بشكل انتقائي في الأنسجة الضامة12، ونتيجة الأخيرة وأبرزت دور كريج في البلعمه صباحا في سياق P. الزّنجاريّة الالتهاب الرئوي 13.

العديد من الدراسات الأصلية استخدام أساليب تقييم بلعم البلعمه لوصف الآليات الجزيئية بلعم الدالة14،15. ومع ذلك، تتطلب أساليب مثل البلعمه المجراة في إجراء تقييم كمي دقيق البلعمه. وهنا، يمكننا تلخيص منهجية مفصلة البلعمه على حد سواء في المختبر والمجراه في استخدام fluorescein isothiocyanate (فيتك)-الزجاج الخرز والبروتين P. الزّنجاريّة أخضر نيون (التجارة والنقل)، على التوالي. علاوة على ذلك، يشرح لنا الطريقة للتفريق بين بر-والجمهورية التشيكية--و FcγR بوساطة البلعمه. وأخيراً، نحن تقرير طريقة تميز إزالة البكتيرية في الماوس فيما يتعلق بالتهاب رئوي P. الزّنجاريّة .

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

هذا البروتوكول يتبع المبادئ التوجيهية "رعاية الحيوان المؤسسية" واستخدام اللجنة (إياكوك) من مدرسة الطب في فيرجينيا الشرقية.

1. فلوري الخرز البلعمه

  1. Euthanize الماوس (C57BL/6J، 6 أسابيع من العمر، أنثى) CO2 خنقاً وفقا لبروتوكولات IACUC للقتل الرحيم الأخلاقية للحيوانات ب.
  2. وضع الفأرة أعلى البطن على لوحة تشريح مغطاة بالمناشف الورقية. دبوس الكفوف باستمرار مع أطرافه في سبريديجلي وربط سلسلة تحت الأسنان الأمامية لسحب رأسه إلى الوراء حيث أن القصبة الهوائية هي في وضع مستقيم ومستوى.
  3. ويت الحلق والصدر والبطن مع الإيثانول 70% لتطهير ومنع الفراء من التمسك الأدوات الماوس.
  4. استخدام الملقط العادية، سحب ما يصل إلى الجلد في خط الوسط للجسم، وقطع بالمقص الجراحي تصل خط الوسط إلى الجزء العلوي من الحلق.
  5. استخدام نهاية حادة مقص جراحي القياسية، بعناية الابتعاد بالعضلات والأنسجة الضامة في الحلق واستخدام مقص الربيع (ميكروسسيسورس) لفضح القصبة الهوائية.
  6. تجتاح عصابة غضروف مع الملقط، بعناية إجراء شق صغير (~1.5 ملم)، باستخدام ميكروسسيسورس، في مواجهة بطين من القصبة الهوائية وإدراج قنية ز 18 في القصبة الهوائية.
  7. الغسل بلطف 3 مل من الفوسفات مخزنة المالحة (PBS)، 1 مل في وقت واحد. في كل مرة بلطف سحب السائل في المحاقن ورينفوسي مرة أخرى في الرئة، س 3 على التوالي. وبعد جمع بالف، أداء التفكك عنق الرحم التأكد من القتل الرحيم. نقل برنامج تلفزيوني المجمعة (مل ~2.8)، وسائل الغسل للفيسيولوجيا (بالف)، إلى أنبوب الطرد المركزي في غ س 1,000 لمدة 10 دقائق، وجمع بيليه. أضف 1 مل من برنامج تلفزيوني جديد للأنبوب وأجهزة الطرد المركزي في 1,000 س ز لمدة 10 دقيقة ليغسل الأنقاض وجمع الضامة السنخية الأعلاف.
  8. ريسوسبيند بيليه في 2 مل من المتوسطة تعديل النسر دولبيكو (دميم) مع 10% معطل nonheat الجنيني البقري المصل (FBS) وثقافة الضامة السنخية الأولية في نفس الوسائط لمدة يومين على طبق زجاج لأسفل عند 37 درجة مئوية في جو هوميديفيد.
  9. نضح وسائط الإعلام القديمة وغسله مع 1 مل من برنامج تلفزيوني، وإضافة 2 مل وسائط جديدة. إضافة الخرز فيتك (كاربوكسيلاتيد مطاط الخرز، 2 ميكرومتر في القطر، والخرز 50/خلية) واحتضانها ح 1 في 37 درجة مئوية في جو هوميديفيد.
  10. أغسل على نطاق واسع مع برنامج تلفزيوني (1 مل في وقت، لما مجموعة خمسة يغسل) لإزالة حبات خارج الخلية. صورة الخلايا 100 عشوائياً وحساب الخلايا مع الخرز داخل الخلايا (488 نانومتر).
    ملاحظة: فهارس Phagocytic هي عدد حبات بلعها مقسوماً على العدد الكلي الضامة؛ النسبة المئوية للخلايا البلعمية هو عدد الضامة الذي يبتلع حبة واحدة على الأقل مقسوماً على العدد الكلي الضامة16.
    1. وبدلاً من ذلك، بعد حضانة ح 1 مع الخرز، تغسل الخلايا مع 3 مل من برنامج تلفزيوني وعملية لهم للتدفق الخلوي للتحديد الكمي البلعمه. وبالمثل، عملية هيئة علماء المسلمين دون الخرز كخلايا أونستاينيد أو خلايا عنصر التحكم. حساب الإيجابية النسبة المئوية ويعني كثافة الأسفار، واستخدام البرمجيات التدفق الخلوي، بتحديد هذه الخيارات في البرنامج.

2-البلعمه FcγR والجمهورية التشيكية-بوساطة

  1. ل opsonization، احتضان 2 x 108 الأغنام خلايا الدم الحمراء (سربكس) مع 50 ميليلتر من الأرانب المضادة-مخمدة-IgM أو 50 ميليلتر من الأرانب المضادة-مخمدة-مفتش لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة11.
  2. احتضان سربكس أوبسونيزيد IgM مع 50 ميليلتر من المصل الإنسان تفتقر إلى C5 (C5D) لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية لإصلاح أجزاء مكملة C3b و C3bi على سربكس المغلفة IgM.
  3. البذور بلعم مورين الخلايا (خلايا MH-S) (10,000 الخلايا أيضا) في لوحة 96-جيدا واحتضان بين عشية وضحاها الحصول على التقاء ~ 70%. إضافة 100 ميليلتر من/mL 1 × 107أوبسونيزيد سربكس لكل بئر من الخلايا MH-S واحتضانها ح 1 في 37 درجة مئوية. المياه والصرف الصحي غير منضم سربكس بسرعة كبيرة (~ 1 دقيقة) مع 100 ميليلتر من المخزن المؤقت لتحلل البوتاسيوم كلوريد الأمونيوم (ACK).
  4. الخلايا مع الحزب الديمقراطي الصربي 0.1% وإضافة 50 ميليلتر من 2, 7-ديامينوفلوريني (DAF) التي تحتوي على 3% بيروكسيد الهيدروجين واليوريا م 6. قياس امتصاص لتشكيل الهيموغلوبين حفزت فلوريني الأزرق في 620 نانومتر.
  5. تحديد عدد سربكس باستخدام منحنى قياسي في شمال البحر الأبيض المتوسط 620 امتصاص القيم مع عدد معروف من سربكس. وبالمثل، المحتضنة الخلايا عملية MH-S مع سربكس نونوبسونيزيد لاستخدامها كعناصر سلبية.

3-بوساطة بر البلعمه

  1. اتبع الخطوات 1.1-1.9 للعزلة واستزراع للماوس البلاعم السنخية الأولية.
  2. بعد يومين، قم بإزالة الوسائط وتغسل الخلايا مع 1 مل من برنامج تلفزيوني، وإضافة 500 ميليلتر الطازجة الوسائط التي تحتوي على فلور أليكسا-488-مترافق بيوبارتيكليس زيموسان-أ (100 الجسيمات في الطبق).
  3. احتضانها ح 1 في 37 درجة مئوية. تتوقف البلعمه بإضافة 500 ميليلتر من برنامج تلفزيوني المثلج.
  4. تغسل الخلايا على نطاق واسع مع برنامج تلفزيوني (1 مل في وقت، لما مجموعة خمسة يغسل). إصلاح الخلايا مع بارافورمالدهيد 4% لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة.
  5. تغسل الخلايا على نطاق واسع مع برنامج تلفزيوني (1 مل في وقت، لما مجموعة خمسة يغسل) وإبقاء الخلايا في 500 ميليلتر من برنامج تلفزيوني.
  6. صورة الخلايا تحت التباين التدخل التفاضلية وقناة فلورسنت في 488 نانومتر. حساب مقياس الدعم الكلي التي تحتوي على بيوبارتيكليس زيموسان-أ وتحديد النسبة مئوية البلعمه.

4. في فيفو البلعمه البلاعم السنخية

ملاحظة: تطعيم P. الزّنجاريّة بروتينات فلورية خضراء على طبق أجار مغذيات واحتضان لوحة عند 37 درجة مئوية بين عشية وضحاها. في اليوم التالي، تطعيم مستعمرة واحدة إلى 2 مل مرق المغذيات وتنمو البكتيريا في 37 درجة مئوية بين عشية وضحاها.

  1. وفي اليوم التالي تخدير الفئران مع إدارة داخل xylazine الكيتامين و 10 مغ/كغ 100 مغ/كغ. تأكيد أنيسثيتيزيشن السليم عن طريق عدم الاستجابة إلى رشة أخمص القدمين.
  2. وضع الماوس على لوحة مسطحة مع شريط المطاطي عبر القواطع العلوية ووضعه في موقف سيميريكومبينت (45°) مع السطح البطني والمنصة التي تواجه التصاعدي. استخدام الملقط المنحنية، جزئيا بسحب اللسان. استخدام ميكروسبرايير، إينتراتراتشيلي إدارة 50 ميليلتر (5 × 106 مستعمرة تشكيل وحدات [زيمبابوي])17 من P. الزّنجاريّة بروتينات فلورية خضراء في رئات الفئران أنيسثيتيزيد.
  3. بعد 1 ساعة إصابة، اتبع الخطوات 1، 1، 1-7.
  4. ريسوسبيند الخلايا في برنامج تلفزيوني وسيتوسينتريفوجي لهم (1,000 س ز، 1 دقيقة في درجة حرارة الغرفة) إلى شريحة زجاج.
  5. خلطات وصمة عار الشرائح سيتوسبين البلاعم السنخية والعدلات واللمفاويات، وفقا لإرشادات الشركة المصنعة.
  6. حدد مقياس الدعم الكلي 100 عشوائياً، حساب مقياس الدعم الكلي التي تحتوي على البكتيريا داخل الخلايا، وتحديد النسبة مئوية البلعمه.

5. في فيفو "استخدام إزالة البكتيريا" P. الزّنجاريّة

  1. تطعيم P. الزّنجاريّة على طبق أجار عزلة P. الزّنجاريّة واحتضان لوحة عند 37 درجة مئوية بين عشية وضحاها. تطعيم مستعمرة واحدة إلى 2 مل مرق ليسوجيني (رطل) وتنمو البكتيريا في 37 درجة مئوية بين عشية وضحاها. حساب زيمبابوي، باستخدام الصيغة التالية.

    زيمبابوي/مل = (عدد المستعمرات × معامل التخفيف)/حجم لوحة الثقافة.

    تمييع الثقافة مع برنامج تلفزيوني للحصول على المطلوب زيمبابوي/مل.
  2. في المحاكمة الأولى، إينتراتراتشيلي بحقن جرعة ~2.5 x 105 مليلتر زيمبابوي P. الزّنجاريّة المقاسة تخديره البرية من نوع (WT) و TRIM72كو الفئران، كما ذكر في الخطوة 4، 2. قياس وزن الجسم يوميا لمدة 6 أيام.
  3. في 2 المحاكمة، حقن جرعة ثانية من P. الزّنجاريّة (5 × 105 زيمبابوي/mL) في الفئران التي نجت في 1 المحاكمة وقياس وزن الجسم لمدة 4 أيام.
  4. وفي 3 للمحاكمة، باستخدام مجموعة مختلفة من الفئران، حقن الفئرانكو WT و TRIM72 بجرعة قاتلة (3 × 107 زيمبابوي/mL) من P. الزّنجاريّة وتسجيل الوفيات خلال يومين حقن. سيتم تقييم الحيوانات تظهر علامات الإجهاد الشديد مثل هيئة هامة لتخفيف الوزن، متحدب مرة أخرى، وفقدان الشهية، أو ضيق التنفس من الأطباء البيطريين الذين حضروا. سيتم التضحية بالحيوانات غير قابل للعلاج فورا.
  5. أما في القتل أو بعد القتل الرحيم في اليوم الثاني بعد الحقن، جمع أنسجة الرئة الجامع للتحديد الكمي لعبء الرئة البكتيري في ذروة الإصابة.
  6. لاختبار عبء الرئة البكتيري وإضافة 200 ميليلتر من المحلول الملحي العادي إلى أنسجة الرئة وتجانسه، استخدام أحد إعدادات مجربة سابقا في الخالطون إلكترونية أن يعطل تماما أنسجة الرئة دون كسر البكتيريا. ضبط الحجم الإجمالي هوموجيناتي الرئة إلى ميليلتر 100 مل 1 ولوحة الرئة على ألواح أجار العزلة Pseudomonas في تخفيف المسلسل إذ.
  7. احتضان اللوحات في 37 درجة مئوية ح 24 وعدد المستعمرات البكتيرية لتحديد زيمبابوي في الرئة كاملة.

6. التحليل الإحصائي

  1. استخدام الطالب t-اختبار لتحديد الدلالة الإحصائية للفرق بين المجموعتين. تنظر فرق يعتد به إحصائيا عند 0.05 < p . يتم عرض كافة البيانات يعني ± الخطأ المعياري للوسط (SEM).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

أجرينا أول تجربة لتحليل البلعمه بالماوس مقياس الدعم الكلي الأساسي. طوال جميع التحليلات، قارنا AMs المعزولة من الفئران WT و TRIM72كو . كما هو مبين في الشكل 1ألف، كشف الفحص المجهري الأسفار أن البلعمه من حبات الزجاج فيتك بالماوس مقياس الدعم الكلي الأساسي يحدث بعد ح 1 من الحضانة. الشكل 1 ب يبين تحليل البلعمه بالتدفق الخلوي. التحديد الكمي البلعمه تقاس بالفحص المجهري ويمثل التدفق الخلوي في <...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

بينما تؤدي وظيفة تبادل غازات، يواجه الرئة إصرار الجسيمات الأجنبية ومسببات الأمراض والمواد المسببة للحساسية. مقياس الدعم الكلي توفر الخط الأول للدفاع بحكم وظيفتها الرئيسية، إلا وهي البلعمه. هيئة علماء المسلمين أيضا بتنسيق مع سائر الخلايا المناعية في تدمير مسببات الأمراض، وفي القرار من التهاب. هنا، يمكننا وصف أساليب تقييم البلعمه بمقياس الدعم الكلي المعزولة من الرئة الماوس على وجه التحديد. البروتوكول قدم في هذه المخطوطة يفسر دراسة مفصلة من البلعمه في الحية سواء في المختبر، التي يمكن استخدامها أيضا لدراسة وظيفة بلعم وإزالة ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

شكر وتقدير

ويدعم هذا العمل منحة R01HL116826 إلى X. Zhao.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
18-G إبرةنيبرو الطبية CI + 1832-2Cالبيولوجيا الجزيئية الصف
2،7-ديامينوفلورين (DAF)سيجما ألدريتشD17106علم الأحياء الجزيئي
الصف 70٪ الإيثانولديكون لابس إنك.18C27Bالصف التحليلي
96 بئرلوحة Corning3603بيولوجيا الخلية الصف
ACK تحلل عازلةLife TechnologiesA10492درجة البيولوجيا الجزيئية
Alexa fluor-488 Zymosan-A-bioparticleThermofisher ScientificZ23373البيولوجيا الجزيئية الصف
C5 مصل نقص  سيجما ألدريتشC1163كاشف
حيوي جهاز طرد مركزيLabnet InternationalC0160-R
Cytospin 4 جهاز طرد مركزي خلويThermofisher A78300101 العلميالعدد 11
DMEM Cell Culture MediaGibco11995-065درجة بيولوجيا الخلية
FBSAtlanta BiologicalsS11550تدفق درجة بيولوجيا الخلية
مقياس الخلويBD BiosciencesFACSCalibur
Flow Jo SoftwareFlowJo، LLC
ملقطدومون0508-SS / 45-PS-1مناسب لتشريح المختبر
حبات اللاتكس ذات الكربوكسيل FITCSigma-AldrichL4530درجة بيولوجيا الخلية
GFP-P. aeruginosa< / em>ATCC101045GFPمناسب ل  فحوصات عدوى الخلية
القاع الزجاجيMatTek Corp.P35G-0.170-14-Cحقنة بيولوجيا الخلية
عالية الضغطبنسلفانيا القرنFMJ-250مناسبة للاستخدام في المختبر
الخالطأومني إنترناشيونالTH-01
بيروكسيد الهيدروجينسيجما ألدريتشH1009
مجهر مضان مقلوبالتحليلية أوليمبوسIX73
كيتامين هيدروكلوريدHospiraCA-2904الصيدلانية
Shandon Kwik-Diff StainsThermofisher Scientific9990700Cell Biology الصف
LB AgarFisher ScientificBP1425علم الأحياء الجزيئي درجة
LB مرقفيشر ScientificBP1427البيولوجيا الجزيئية الصف
MicroSspray AerosolizerPenn-CenturyIA-1Cمناسبة للاستخدام في المختبر
ParaformaldehydeSigma-AldrichP6148كاشف
الصف PBSGibco20012-027أرنب من فئة بيولوجيا الخلية
مضاد ل SRBC-IgG & nbsp ؛MP Biomedicals55806مناسبة للمقايسات
المناعية للأرانب المضادة ل SRBC-IgM & nbsp ؛مختبرات سيدارلاينCL9000-Mمناسبة لمقص المقايسات المناعية
Miltex5-2مناسب لتشريح المختبر
منظار الحنجرة الحيوانيالصغير Penn-CenturyLS-2مناسب للاستخدام في المختبر
كبريتات دوديسيل الصوديوم (SDS)BioRad1610301من الدرجة التحليلية
(Med)أدوات العلوم الدقيقة15012-12مناسب لتشريح المختبر
مقص زنبركي (صغير)أدوات العلوم الدقيقة91500-09مناسبة لتشريح
المختبر خلايا الدم الحمراء للأغنام (SRBCs)   ؛MP Biomedicals55876مغسولة ، محفوظة SRBCs
اليورياسيجما-ألدريتشU5378درجة البيولوجيا الجزيئية
Xylazine  ؛أكورن لصحة59399-110-20الصيدلانية
كيميائي طبق من الدرجة مقص زنبركي

المراجع

  1. Hussell, T., Bell, T. J. Alveolar macrophages: plasticity in a tissue-specific context. Nature Reviews Immunology. 14, 81-93 (2014).
  2. Belchamber, K. B. R., Donnelly, L. E. Macrophage Dysfunction in Respiratory Disease. Results and Problems in Cell Differentiation. 62, 299-313 (2017).
  3. Broug-Holub, E., et al. Alveolar macrophages are required for protective pulmonary defenses in murine Klebsiella pneumonia: elimination of alveolar macrophages increases neutrophil recruitment but decreases bacterial clearance and survival. Infection and Immunity. 65, 1139-1146 (1997).
  4. Knapp, S., et al. Alveolar macrophages have a protective antiinflammatory role during murine pneumococcal pneumonia. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 167, 171-179 (2003).
  5. Bhatia, M., Zemans, R. L., Jeyaseelan, S. Role of chemokines in the pathogenesis of acute lung injury. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 46, 566-572 (2012).
  6. Marriott, H. M., et al. Interleukin-1beta regulates CXCL8 release and influences disease outcome in response to Streptococcus pneumoniae, defining intercellular cooperation between pulmonary epithelial cells and macrophages. Infection and Immunity. 80, 1140-1149 (2012).
  7. Greenlee-Wacker, M. C. Clearance of apoptotic neutrophils and resolution of inflammation. Immunological Reviews. 273, 357-370 (2016).
  8. Haslett, C. Granulocyte apoptosis and its role in the resolution and control of lung inflammation. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 160, 5-11 (1999).
  9. Cox, G., Crossley, J., Xing, Z. Macrophage engulfment of apoptotic neutrophils contributes to the resolution of acute pulmonary inflammation in vivo. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 12, 232-237 (1995).
  10. Groves, E., Dart, A. E., Covarelli, V., Caron, E. Molecular mechanisms of phagocytic uptake in mammalian cells. Cellular and Molecular Life Sciences. 65, 1957-1976 (2008).
  11. Mosser, D. M., Zhang, X. Measuring Opsonic Phagocytosis via Fcγ Receptors and complement receptors on macrophages. Current Protocols in Immunology. , CHAPTER: Unit-14.27 (2011).
  12. He, J. Q., Wiesmann, C., van Lookeren Campagne, M. A role of macrophage complement receptor CRIg in immune clearance and inflammation. Molecular Immunology. 45, 4041-4047 (2008).
  13. Nagre, N., et al. Inhibition of Macrophage Complement Receptor CRIg by TRIM72 Polarizes Innate Immunity of the Lung. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 58 (6), 756-766 (2018).
  14. Miksa, M., Komura, H., Wu, R., Shah, K. G., Wang, P. A Novel Method to Determine the Engulfment of Apoptotic Cells by Macrophages using pHrodo Succinimidyl Ester. Journal of Immunological Methods. 342 (1-2), 71-77 (2009).
  15. Su, H., Chen, H., Jen, C. J. Severe exercise enhances phagocytosis by murine bronchoalveolar macrophages. Journal of Leukocyte Biology. 69, 75-80 (2001).
  16. Amiel, E., Lovewell, R. R., O'Toole, G. A., Hogan, D. A., Berwin, B. Pseudomonas aeruginosa. evasion of phagocytosis is mediated by loss of swimming motility and is independent of flagellum expression. Infection and Immunity. 78, 2937-2945 (2010).
  17. Giannoni, E., Sawa, T., Allen, L., Wiener-Kronish, J., Hawgood, S. Surfactant Proteins A and D Enhance Pulmonary Clearance of Pseudomonas aeruginosa. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 34, 704-710 (2006).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

مقايسة البلعمةالتصفية البكتيريةنموذج الفأرP aeruginosaالإيصال عبر الرغاميغسيل القصبات والأسناخقياس التدفق الخلويالمجهر الفلوريمستقبل المتممة
البلعمه البلاعم السنخية وإزالة البكتيريا في الفئران
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.