$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
وافق جميع الدراسات والبروتوكولات التجريبية، وامتثالا للمبادئ التوجيهية التي وضعتها الجامعة في بافالو وخامساً غرب نيويورك رعاية الحيوان واستخدام اللجان.
1-تجربة الإعداد والمشورة العامة
ملاحظة: واستخدمت مجموعة الأربعة والعشرين الفئران الإناث على خلفية C57BL/6J في هذا البروتوكول بدءاً من 23 شهرا عمر. الفئران التي سرتلوكسب-exon4-لوكسب طفرة شرطي29، ولكن هذا لا حملت في هذه التجربة.
- ضمان أن الفئران تتلقى معرفات الدائمة مثل العلامات الإذن، ورقائق RFID، أو ذيل الوشم.
ملاحظة: من المستحسن أيضا استخدام علامات مؤقتة (مثل علامة دائمة وضع علامة على ذيول) لتحديد سريع خلال فترات التقييم.
- تنظيف المطحنة مع 0.25-0.5% التبييض (v/v) أو الإيثانول 70% (v/v) في نهاية اليوم أو لإزالة البراز أو البول بين التجارب الاختبارية. حلول جافة تماما قبل الشروع في محاكمة جديدة.
ملاحظة: قد تزيد من الإيثانول ارتداء حزام حلقة مفرغة. من المستحسن أن يتم تنظيف حلقة مفرغة بين كل تشغيل إذا كان يعمل مع فريق يضم الفئران الذكور بغية التقليل إلى أدنى حد في قفص القتال. من المستحسن القيام بتقييمات المطحنة اليوم عند كل نقطة الوقت في الدراسات الطولية30،،من3132وفي الوقت نفسه، وإذا كانت تنفذ عمليات التقييم الأخرى، الأمر ينبغي أن يظل نفس. كما ينبغي أن المحقق بتشغيل التجربة العمياء لتسميات مجموعة من الفئران.
2-تتأقلم الفئران إلى جهاز المطحنة
ملاحظة: بدء تأقلم الفئران 1 شهر قبل التجارب الأساس.
-
قم بإعداد برنامج التدريب الأولى على استخدام البرمجيات المطحنة (v3.4.7) في الوضع اليدوي (الشكل 1 والجدول 1).
- قم بفتح البرنامج حلقة مفرغة. ثم، انقر على الملف وفتح التجربة.
- إدخال القيم المبينة في الجدول 1 في علامة التبويب الدليل تحت التأقلم(الشكل 1).
- إدخال رقم الدورة ك 1 وعدد القنوات النشطة ك 1 إلى 6 اعتماداً على عدد الفئران، وعدد الزيارات إلى الشبكة ك 10 والعدد من الصدمات ك 20.
ملاحظة: يتم تعيين شدة الصدمة لهذا التشغيل الأولية على المستوى 1 (0.46 mA).
- تعيين ميل المطحنة 0° (مسطحة).
- عقد الفئران من ذيله عند وضع في حلقة مفرغة ومكان الفئران مباشرة على الحزام تجنب بدء الفئران على الشبكة صدمة.
- استخدام فرشاة أو خافضة اللسان لإبقاء الفئران بعيداً عن الشبكة صدمة عندما يبدأ التدريب أو التقييم. دفع الفئران بدء تشغيل لتجنب الصدمات غير مقصودة.
- بعد أن يتم إعطاء كل الماوس برنامج التدريب الأولى، كرر البرنامج كما هو وارد أعلاه مع شدة الصدمة ارتفع إلى مستوى 2 (0.59 mA) مع 15 دقيقة على الأقل بين الدورات التدريبية.
-
يوم أو يومين بعد برنامج التدريب الأولى على إدارة تأقلم شاقة حلقة مفرغة.
- قم بفتح البرنامج حلقة مفرغة. ثم انقر فوق الملف، ثم قم بفتح هذه التجربة.
- إدخال القيم في علامة التبويب الأساسية كما هو مبين في الجدول 2 تحت التأقلم.
- تحت صدمة الكشف، إدخال رقم الدورة ك 1 وعدد القنوات النشطة ك 1 إلى 6 اعتماداً على عدد الفئران، وعدد الزيارات إلى الشبكة ك 10 والعدد من الصدمات ك 20.
- انقر فوق علامة التبويب وضع الشخصية (الشكل 2)، والمدخلات للخطوة 1، 0 م/دقيقة بسرعة بدء ونهاية بسرعة 5 م/دقيقة مع فترة من 5 s.
- إضافة الاحماء في الخطوة 2 مع سرعة بدء سرعة 5 م/دقيقة ونهاية 5 م/دقيقة لمدة 30 ثانية. إضافة خطوة انتقال التي تبدأ في 5 م/دقيقة ونهاية بسرعة 6 م/دقيقة 5 ثانية.
- إضافة خطوة اختبار سرعة الذي يبدأ في 6 م/دقيقة وينتهي عند 6 م/دقيقة لإضافة س. 20 خطوة انتقال الذي يبدأ في 6 م/دقيقة وينتهي عند 5 م/دقيقة.
- إضافة فاصل انتعاش الذي يبدأ في 5 م/دقيقة وينتهي عند 5 م/دقيقة 20 ثانية (الشكل 2).
- كرر الخطوة 2.6.4 إضافة خطوات اختبار السرعة كما هو مبين في الجدول 2 تحت التأقلم.
- تستمر أسبوعين قبل تقييمات خط الأساس، تأقلم بتوفير تقييمات القدرات الهوائية شقة المطحنة اثنين كما هو موضح في القسم 3، نظراً لأيام متتالية.
- تقدم يوم أو يومين بعد تدريب التحمل الثانية، هما تقييم القدرات اللاهوائية شاقة حلقة مفرغة كما هو موضح في القسم 4، تعطي في اليوم نفسه مع حد أدنى من 30 دقيقة بين الدورات التدريبية.
3-تقييم المطحنة المستمرة مسطح
- إنشاء برنامج حلقة مفرغة كما هو موضح في الخطوة 2، 1، تستخدم القيم المشار إليها في الجدول 1 تحت التقييم. تحت صدمة الكشف، بتعيين عدد الدورة 1 والعدد من القنوات النشطة ك 1 إلى 6 اعتماداً على عدد الفئران، وعدد الزيارات إلى الشبكة ك 10 والعدد من الصدمات ك 20.
- مراقبة الفئران طوال المحاكمة وإزالة الفئران من الصك الذي يصل إلى معايير نقطة النهاية.
ملاحظة: هذه الخطوة لتجنب الفئران دون قصد لمس الشبكة صدمة المجاورة الفئران والتي تؤثر على البيانات. تتضمن معلمات الوقت الإجمالي في الحزام، والمسافة، والصدمات بنسبة الزيارات. من المستحسن القيام بتقييمات اثنين في كل نقطة من الزمن، مفصولة بيوم واحد على الأقل بين التقييمات.
4-شاقة الفاصل الزمني المطحنة التقييم
- إنشاء برنامج حلقة مفرغة كما هو موضح في الخطوة 2، 6، باستخدام القيم المبينة في الجدول 2 تحت التقييم. تحت صدمة الكشف، بتعيين عدد الدورة 1 والعدد من القنوات النشطة ك 1 إلى 6 اعتماداً على عدد الفئران، وعدد الزيارات إلى الشبكة ك 5 والعدد من الصدمات ك 10.
- تعيين حقل الفاصل الزمني في البرنامج حلقة مفرغة إلى 0.5.
ملاحظة: وهذا يسمح لنقاط البيانات التي يتعين جمعها كل ثانية بدلاً من كل دقيقة، مما يساعد في تحديد السرعة عند نقطة النهاية لكل الماوس. سيتم تلقائياً بإيقاف البرنامج بعد مرحلة 50 م/دقيقة بسبب قيود البرمجيات. تتضمن معلمات الوقت على الحزام والمسافة وسرعة اختبار المرحلة الأخيرة أنجزت بنجاح قبل نقطة النهاية. يستخدم هذا الأخير لتحديد كثافة الأساس لنظام HIIT هو موضح في الخطوة 5. من المستحسن القيام بتقييمات اثنين لكل نقطة الوقت، مفصولة عن 30 دقيقة على الأقل.
5-قصيرة الدورة "عالية الكثافة الفاصلة التدريب"
- تعيين المطحنة شاقة (25 درجة مئوية) وإزالة الغطاء من البلاستيك.
- تحديد الكثافة لكل الماوس. استخدام سرعة أنجزت بنجاح المرحلة الأخيرة (الخطوة 4، 5) والعثور على مجموعة كثافة والمقابلة قاعدة، و السباق، و اندفاعه بسرعة باستخدام الجدول 3.
-
فتح برنامج حلقة مفرغة، وانقر فوق الملف إنشاء برنامج جديد.
- انقر فوق علامة التبويب وضع الشخصية والخطوة 1، إدخال بسرعة ابدأ 0 م/دقيقة وعلى سرعة إنهاء كما هو مبين تحت قاعدة السرعة كما هو مبين في الجدول 3 بمدة 5 ق.
- إضافة الاحماء في الخطوة 2 مع سرعة بدء في قاعدة السرعة وسرعة إنهاء سرعة قاعدة ل 180 s.
- إدخال 3 فترات كل مع 1) خطوة انتقالية أن يذهب من قاعدة العدو 5 ق، 2) خطوة في سباق السرعة ل 60s، 3) خطوة انتقالية أن يذهب من "العدو" إلى قاعدة أكثر من 5 s، و 4) خطوة لفترة استرداد في < c15 > قاعدة السرعة عن 60 ثانية.
- إضافة خطوة انتقالية أن يذهب من قاعدة لسرعة السباق أكثر من 5 s وخطوة أخيرة أن يذهب من السباق اندفاعه بسرعة ما يزيد على 60 ثانية.
ملاحظة: يمكن حفظ البرامج وتعديل وإعادة شحنها.
- تؤدي ممارسة ثلاثة أيام في الأسبوع بيوم واحد على الأقل من الراحة بين الدورات (أي، الاثنين، الأربعاء، الجمعة).
- إعادة كتابة برامج التدريب لزيادة قاعدة، و السباق، و اندفاعه بسرعة 1 م/دقيقة كل أسبوعين.
ملاحظة: يتم إعطاء لا صدمات كهربائية أثناء الممارسة.
- تحفيز الفئران لتشغيل باستخدام فرشاة ماكياج (مستحسن) أو خافضة اللسان لتحفيز الفئران التي تقع بالقرب أو في الشبكة صدمة طفيفة. إذا كان ماوس لا يستجيب إعادة المحاولة في 5 s، ثم s 10، وثم إعادة المحاولة كل 30 s أو خلال فترة انتعاش حتى نهاية الدورة.
ملاحظة: النظر في إزالة الفئران من الدراسة التي لم تقم بتشغيل في حلقة مفرغة في أي كثافة أو غير قادر على إكمال الفترات الثلاث الأولى في كثافة المعرفة لمجموعة أقل كثافة (الجدول 3)
- نقل الفئران التي لا يمكن أن يكون الدافع لإكمال الفترات الثلاث الأولى في دورتين متتاليتين ممارسة لخفض كثافة المجموعات (الجدول 3).
- نقل الفئران التي لا تتطلب الدافع في دورتين متتاليتين ممارسة لأعلى كثافة المجموعات (الجدول 3).
- أن الفئران التحكم المستقرة في مكان الأقفاص بجوار المطحنة أثناء تشغيله. وبدلاً من ذلك، يمكن وضع الضوابط المستقرة في الممرات من حلقة مفرغة غير المتحركة لمدة 10 دقائق.