Method Article

الحصول على البيانات وتحليلها في الدماغ أثار استجابة القياس السمعي في الفئران

DOI:

10.3791/59200

⸱

May 10th, 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Experimental Neuropsychopharmacology, Federal Institute for Drugs and Medical Devices, 2KBRwyle GmbH, 3Cognitive Neurophysiology, Department of Psychiatry and Psychotherapy, Faculty of Medicine, University of Cologne, 4Molecular and Cellular Cognition, German Center for Neurodegenerative Diseases (DZNE), 5Institute of Neurophysiology, Faculty of Medicine, University of Cologne, 6Federal Institute for Drugs and Medical Devices (BfArM), 7Thescon GmbH

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الدماغ أثار استجابة القياس السمعي هو أداة هامة في علم وظائف الأعضاء العصبية السريرية. في الوقت الحاضر، يتم تطبيق الدماغ أثار استجابة القياس السمعي أيضا في العلوم الأساسية والدراسات ما قبل السريرية التي تنطوي على كل من النماذج الحيوانية الدوائية والوراثية. نقدم هنا وصفًا مفصلًا لكيفية تسجيل الاستجابات السمعية للجذع الدماغي وتحليلها بنجاح في الفئران.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

[برينستم] يستحضر استجابة علم سمعيّ ([بيرا]) ذو أهمية مركزية في الفيزيولوجيا عصبيّة سريريّة. كما التقنيات المحتملة الأخرى التي أثيرت (EP)، مثل الإمكانات التي أثيرت بصريا (VEPs) أو الإمكانات الحسية الجسدية التي أثيرت (SEPs)، يتم تشغيل الإمكانات السمعية التي أثيرت (AEPs) من خلال العرض المتكرر للمحفزات متطابقة، و استجابة الدماغ الكهربائي (EEG) التي يتم متوسطها في وقت لاحق مما أدى إلى انحراف إيجابي متميز (ع) وسلبي (ن). في البشر، يمكن استخدام كل من السعة والكمون من القمم الفردية لتوصيف التعديلات في التزامن وسرعة التوصيل في الدوائر العصبية الكامنة. والأهم من ذلك، يتم تطبيق هذه التقييمات أيضاً في العلوم الأساسية وما قبل السريرية لتحديد وتوصيف الوظيفة السمعية في النماذج الدوائية والحيوانية الوراثية. وحتى أكثر من ذلك، يتم استخدام النماذج الحيوانية جنبا إلى جنب مع الاختبارات الدوائية للتحقيق في الفوائد المحتملة في علاج فقدان السمع الحسي العصبي (على سبيل المثال، العجز في السمع الناجم عن العمر أو الضوضاء). نقدم هنا وصفًا تفصيليًا ومتكاملًا لكيفية تسجيل الاستجابات السمعية التي تثيرها جذع الدماغ (ABRs) في الفئران باستخدام تطبيق النقر والاندفاع النغمة. وينصب تركيز هذا البروتوكول بشكل خاص على الإسكان الحيواني قبل التجريبية، والتخدير، وتسجيل ABR، وعمليات تصفية ABR، وتحليل وظيفة نمو السعة الآلية القائمة على الموجة، والكشف عن الكمون.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

جانب مركزي من علم وظائف الأعضاء في الدماغ هو قدرته على معالجة المعلومات البيئية مما يؤدي إلى مختلف الناتج الجوهرية أو الخارجية، مثل التعلم، والذاكرة، وردود الفعل العاطفية، أو الاستجابات الحركية. ويمكن استخدام مختلف النهج التجريبية والتشخيصية لتوصيف الاستجابة الكهرولوجية لأنواع الخلايا العصبية الفردية أو مجموعات /مجموعات من الخلايا العصبية داخل الدوائر العصبية ذات الصلة التحفيز. هذه التقنيات الكهرولوجية تغطي أبعاد مختلفة spatiotimeعلى الجزئي، والمتوسط، والكلي 1. ويشمل مستوى الميكروسك التجانب والنهج الحالية المشبك في مختلف وسائط التصحيح المشبك باستخدام، على سبيل المثال، الخلايا العصبية المستزرعة أو المنفصلة بشكل حاد1. هذه ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تنفيذ جميع الإجراءات الحيوانية وفقا للمبادئ التوجيهية للمجلس الألماني لرعاية الحيوان وتمت الموافقة على جميع البروتوكولات من قبل اللجنة المؤسسية والوطنية المحلية لرعاية الحيوانات (Landesamt für Natur, Umwelt, und Verbraucherschutz, State مكتب شمال الراين وستفاليا، وزارة الطبيعة والبيئة والاستهلاكية [LANUV NRW]، ألمانيا). كما يشهد المؤلفان بأن جميع التجارب على الحيوانات قد أجريت وفقاً للدليل الوطني للمعاهد الصحية لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية (منشورات المعاهد القومية للصحة رقم 80-23) المنقحة لعام 1996 أو قانون الحيوانات في المملكة المتحدة (الإجراءات العلمية) 1986 والمبادئ التوجيهية المرتبطة بها، أو توجيه مجلس الجماعات الأوروبية المؤرخ 24 نوفمبر 1986 (86/609/EEC....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يمكن استخدام تسجيلات ABR التي تثيرها علامة النقر والنغمة لتقييم الاختلافات في عتبة السمع، ووظيفة نمو السعة، ومقارنة زمن الوصول. يتم تصوير ABRs التي تم استحضارها في وضع زيادة SPL في الشكل 1 للتحكم واثنين من خطوط الماوس المتحولة النموذجية التي تعاني من نقص في قناة Cav3.2 T-type الجهد المسور Ca2+ (أي Cav3.2+/- و Ca v3.2 المسوخ فارغة [Cav3.2-/-]). وكما هو مبين أعلاه، يوصى عموما بإجراء تح.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يقدم هذا البروتوكول وصفًا مفصلًا ومتكاملًا لكيفية تسجيل استجابات جذع الدماغ السمعية في الفئران. وهو يركز بشكل خاص على المعالجة المسبقة للحيوانية، والتخدير، والعوامل المنهجية المربكة المحتملة. وتشمل هذه الأخيرة، في سبيل أمور منها نوع الجنس، وخط الماوس، والعمر، وظروف السكن. وتجدر الإشارة إلى أن جميع هذه العوامل يمكن أن يكون لها تأثير على فقدان السمع الحسي العصبي والجوانب الأساسية لمعالجة المعلومات السمعية. وبالتالي، فإن التقسيم الطبقي المناسب لدراسات التنميط السمعي إلزامي.

وقد تطورت أجهزة تسجيلا.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويود المؤلفان أن يشكرا الدكتورة كريستينا كولب (المركز الألماني للأمراض العصبية) والدكتور روبرت ستارك (DZNE) على مساعدتهما في تربية الحيوانات والرعاية الصحية الحيوانية. وقد تلقى هذا العمل دعما ماليا من المعهد الاتحادي للأدوية والأجهزة الطبية.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
برنامج AEP / OAE ل RZ6 (برنامج BioSigRZ)Tucker-Davis Technologies (TDT)BioSigRZ
مجهر التكبير الجراحي ذوالعينين Zeiss Stemi 20000000001003877 ، 4355400000000 ، 0000001063306 ، 4170530000000 ، 4170959255000 ، 4551820000000 ، 4170959040000 ، أقفاص 4170959050000
(ماكرولون)Techniplast1264C ، 1290D
Carprox vet ، 50 مجم / mlVirbac Tierarzneimittel GmbHPZN 11149509
مصدر الضوء الباردSchott KL2500 LCD9.705 202
قضيب طرف قطني (معقم) CarlRothEH12.1
قفص فاراداي معدني متشابك مصنوع حسب الطلب (الفولاذ المقاوم للصدأ ، سمك 2 مم ، حجم شبكة 1 سم)مصنوع حسب الطلب
5٪ Dexpanthenole (كريم العين والأنف Bepanthen)باير Vital GmbHPZN: 01578681
أقطاب كهربائية من الفولاذ المقاوم للصدأ تحت الجلد يمكن التخلص منها
، 27GA ، 12 مم		Rochester Electro-Medical، Inc.S03366-18
صفائح الستارة الجراحية (معقمة)HartmannPZN 0366787
الإيثانول ، 70٪Carl Roth9065.5
1/4 '' مجموعة ميكروفون قياس المجال الحرTucker-Davis Technologies (TDT) قفازاتPCB-378C0
(معقمة)Unigloves1570
Graefe ملقط منحني ،FST مسنن11052-10
برنامج GraphPad Prism 6 ، V6.07GraphPad Prism Software، Inc.https://www.graphpad.com/
معقم الأدوات الجراحية القائمة على الحرارةFST18000-50
Homeothermic
تسخين فارغ		ThermoLux461265 / -67
Ketanest S (كيتامين) ، 25 مجم / ملPfizerPZN 08707288
Ringer ' الحل (معقم)B.BraunPZN 01471434
برنامج MatlabMathWorks، Inc.https://de.mathworks.com/products/matlab.html
Medusa 4 قنوات منخفضة معوقة. HeadstageTucker-Davis Technologies (TDT)RA4LI
Medusa 4-Channel Pre-amp / DigitizerTucker-Davis Technologies (TDT)RA4PA
MicrophonePCB Pieztronics378C01
مكبر صوت متعدد المجالات - StereoTucker-Davis Technologies (TDT)MF1-S
راسم الذبذباتTektronixDPO3012
بطاقة PC1 سريعة بصرية لواجهة Optibit) أنظمةتاكر ديفيس (TDT)PO5e
وسادات أسكينا براوسيل(وسادات امتصاص السليلوز)B.BraunPZN 8473637
مضخمالصوت المسبق ثنائي الفينيل متعدد الكلور Pieztronics480C02
RZ6 نظام معالج الإدخال / الإخراج المتعدد (BioSigRZ)تقنياتتاكر ديفيس (TDT)RZ6-A-PI
0.9٪ محلول ملحي (كلوريد الصوديوم ، معقم)ب. BraunPZN: برنامج 8609255
SigGenRZTucker-Davis Technologies (TDT)https://www.tdt.com/
Software R (الإصدار 3.2.1) + Reshape 2 (الإصدار 1.4.1) + ggplot 2 (الإصدار 1.0.1) + جدول البيانات (الإصدار 1.9.4) ، + gdata (الإصدار 2.13.3) ، + pastecs (الإصدار 1.3.18) ، + waveslim (الإصدار 1.7.5) ، + MassSpecWavelet (الإصدار 1.30.0) TheR Foundation ، R Core Team 2015برنامج مفتوح المصدر (قابل للتوزيع مجانا)
مقصورة مخففة للصوتAssociates Inc.ملقط نمط قياسي ENV-018V
، طول 12 سم و 14.5 سمFST11000-12 ، 11000-14
شريط ليوكوسيلكBSN medical GmbH & Co. KGPZN ملقط أنسجة 00397109
- أسنان 1x2 12 سمFST11021-12
خزانة تهوية Uniprotectتهوية BioscapeTHF3378
خزانة تهويةTecniplast9AV125P
زيليازين (رومبون) ، 2٪Bayer Vital GmbHPZN 1320422
Med خزانة

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Sporns, O., Tononi, G., Kotter, R. The human connectome: A structural description of the human brain. PLOS Computational Biology. 1 (4), e42(2005).
  2. Bebarova, M. Advances in patch clamp technique: towards higher quality and quantity. Ge....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Auditory Brainstem ResponseBrainstem Evoked Response AudiometryClick Tone Burst StimulationAutomated Wavelet AnalysisABR Threshold DetectionABR Latency AnalysisMouse Auditory ProfilingSound Attenuating CubicleSubdermal Electrode PlacementPre amplifier Calibration

Related Articles