هنا، نحن نقدم نهجا مفيدا لدراسة آلية فشل البطين الأيمن. يتم تأسيس نهج أكثر ملاءمة وكفاءة لتضييق الشريان الرئوي باستخدام الأدوات الجراحية المصنوعة داخل المنزل. وبالإضافة إلى ذلك، يتم توفير طرق لتقييم نوعية هذا النهج عن طريق تخطيط صدى القلب والقسطرة.
مقالة منهجية
هنا، نحن نقدم نهجا مفيدا لدراسة آلية فشل البطين الأيمن. يتم تأسيس نهج أكثر ملاءمة وكفاءة لتضييق الشريان الرئوي باستخدام الأدوات الجراحية المصنوعة داخل المنزل. وبالإضافة إلى ذلك، يتم توفير طرق لتقييم نوعية هذا النهج عن طريق تخطيط صدى القلب والقسطرة.
تتطلب آلية فشل البطين الأيمن (RVF) توضيحًا بسبب التفرد، والاعتلال المرتفع، وارتفاع معدل الوفيات، والطبيعة الحرارية للحمى الأرفية. وقد تم وصف نماذج الفئران السابقة تقليد تطور RVF. بالمقارنة مع الفئران، الفئران هي أكثر سهولة، اقتصادية، وتستخدم على نطاق واسع في التجارب الحيوانية. لقد طورنا نهج انقباض الشريان الرئوي (PAC) الذي يتكون من ربط الجذع الرئوي في الفئران للحث على تضخم البطين الأيمن (RV). تم تصميم إبرة مزلاج جراحية خاصة تسمح بفصل أسهل للأبهر والجذع الرئوي. في تجاربنا، أدى استخدام هذه الإبرة المزلاجة الملفقة إلى تقليل خطر الإصابة بالشرايين وتحسين معدل النجاح الجراحي إلى 90%. استخدمنا أقطار إبرة الحشو مختلفة لخلق بالضبط انقباض الكمية، والتي يمكن أن تحفز درجات مختلفة من تضخم RV. لقد قدرنا درجة الانقباض من خلال تقييم سرعة تدفق الدم في السلطة الفلسطينية، والتي تم قياسها من خلال تخطيط صدى القلب عبر الصدر غير الغازية. تم تقييم وظيفة RV بدقة عن طريق قسطرة القلب اليمنى في 8 أسابيع بعد الجراحة. كانت الأدوات الجراحية المصنوعة داخل الشركة تتكون من مواد مشتركة باستخدام عملية بسيطة من السهل السيطرة عليها. ولذلك، فإن نهج PAC الموضح هنا من السهل تقليد باستخدام الأدوات المصنوعة في المختبر ويمكن استخدامها على نطاق واسع في مختبرات أخرى. تقدم هذه الدراسة نهج PAC المعدلة التي لديها معدل نجاح أعلى من النماذج الأخرى ومعدل البقاء على قيد الحياة بعد الجراحة 8 أسابيع من 97.8٪. ويوفر هذا النهج PAC تقنية مفيدة لدراسة آلية RVF وسيمكّن من زيادة فهم RVF.
ويرتبط الخلل RV (RVD)، التي تعرف هنا كدليل على هيكل RV غير طبيعي أو وظيفة، مع النتائج السريرية السيئة. RVF، كمرحلة نهاية وظيفة RV، هو متلازمة سريرية مع علامات وأعراض فشل القلب التي تنتج عن RVD التدريجي1. مع الاختلافات في الهيكل والوظيفة الفسيولوجية، فشل البطين الأيسر (LV) وRVF لها آليات باثوفسيولوجية مختلفة. وقد تم الإبلاغ عن عدد قليل من الآليات المرضية الفسيولوجية المستقلة في RVF، بما في ذلك الإفراط في التعبير عن مستقبلات β2 الأدرينالية إشارة2، التهاب3، إعادة عرض الأنابيب المستعرضة ، وCa2 + التعامل مع الخلل4 .
يمكن أن يكون سبب RVF حجم أو الضغط الزائد من RV. وقد استخدمت النماذج الحيوانية السابقة SU5416 (مثبط قوي وانتقائي لمستقبلات عامل النمو بطانة الأوعية الدموية) جنبا إلى جنب مع نقص الأكسجة (سهإكس)5،6 أو مونوكروتالين7 للحث على ارتفاع ضغط الدم الرئوي، والتي النتائج في RVF الثانوية لأمراض الأوعية الدموية الرئوية2. ركز الباحثون الذين أجروا هذه الدراسات على الأوعية الدموية بدلاً من التقدم المرضي للحمى الأرفية. وعلاوة على ذلك, مونوكروتالين له آثار خارج القلب التي لا يمكن أن تمثل على وجه التحديد أمراض القلب. وقد استخدمت نماذج أخرى تحويلة الشريان الوريدي للحثعلى حجم الزائد وRVF 8. ومع ذلك، هذه الجراحة من الصعب إجراء وغير مناسبة للفئران، الذين يحتاجون إلى فترات تحريض طويلة لإنتاج RVF.
نماذج الفئران PAC باستخدام مقاطع النطاقات موجودة أيضا9،10. بالمقارنة مع الفئران، والفئران لديها العديد من المزايا كنماذج حيوانية لأمراض القلب، مثل سهولة التكاثر، واستخدام أكثر انتشارا، وانخفاض التكاليف، والوصول إلى تعديل الجينات11. ومع ذلك، فإن أقطار مقاطع النطاقات عادة ما تتراوح بين 0.5 مم إلى 1.0 مم، والتي هي كبيرة جدا للفئران9. وبالإضافة إلى ذلك، مقطع النطاقات من الصعب إنتاج، تقليد، وتعميم في مختبرات أخرى.
نحن نقدم بروتوكول لتطوير نموذج الماوس RVF الإنجابية المعدلة على أساس الدراسات المبلغ عنها، والذي يستخدم PAC لتقليد رباعية من متلازمة فالوت ونونان أو غيرها من أمراض ارتفاع ضغط الدم الشرياني الرئوي12،13، 14،15،16،17،18،19. يتم إنشاء هذا النهج PAC عن طريق ربط الجذع الرئوي للفئران باستخدام مزلاج وإبرة الحشو التي أدلى بها في المنزل للسيطرة على درجة الانقباض. تتكون إبرة المزلاج من حقنة حقن منحنية 90 درجة مع خياطة حريرية مضفرة تمر عبر الحقنة. الإبرة مصنوعة من مواد شائعة باستخدام عملية سهلة الإتقان. يتم انحناء إبرة الحشو 120 درجة من إبرة القياس. وتستخدم الإبر الحشو بأقطار مختلفة (0.6-0.8 ملم)، اعتمادا على وزن الفئران (20-35 غرام). بالإضافة إلى ذلك، نضع معيار تقييم لتحديد استقرار وجودة نموذج RVF عن طريق تخطيط صدى القلب وقسطرة القلب اليمنى. نحن نستخدم الفئران كالحيوان النموذجي بسبب استخدامها على نطاق واسع في تجارب أخرى. الإبر المصنوعة في المختبر سهلة التكاثر ويمكن استخدامها على نطاق واسع في مختبرات أخرى. توفر هذه الدراسة نهجا جيدا للباحثين للتحقيق في آلية RVF.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وقد أُجريت جميع الإجراءات وفقاً للمبادئ التوجيهية المؤسسية للبحوث الحيوانية، التي تتفق مع دليل رعاية واستخدام الحيوانات المختبرية الذي نشرته المعاهد الوطنية للصحة في الولايات المتحدة (منشور المعاهد الوطنية للصحة رقم 85-23، المنقح في عام 1996). C57BL/6 الفئران الذكور (8-10 أسابيع من العمر، وزنها 20-25 غرام) تم توفيرها من قبل مركز الحيوان في جامعة ساوث الطبية. بعد الوصول، تم إيواء الفئران تحت دورة 12/12 ساعة مظلمة / خفيفة، مع ما يكفي من الغذاء والماء.
1. إعداد الأدوات الجراحية وتصنيع الإبر
2. التحضير للجراحة
3. الجراحة
4. تقييم صدى القلب لوظيفة RV بعد الجراحة
ملاحظة: يمكن الكشف عن تغييرات صدى القلب بعد 3 أيام من الجراحة.
5. القسطرة القلب الأيمن لتقييم وظيفة RV
ملاحظة: تم إجراء قسطرة القلب اليمنى بعد 8 أسابيع من الجراحة لتقييم وظيفة RV، وذلك باستخدام قسطرة 1.0 F ونظام مراقبة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في هذه الدراسة، تم تعيين الفئران عشوائيا ً إلى مجموعة PAC (n = 9) أو مجموعة عمليات الشام (n = 10). تم إجراء تخطيط صدى القلب في 1 و 4 و 8 أسابيع بعد الجراحة. بعد ثمانية أسابيع من الجراحة، وبعد آخر تقييمات تخطيط صدى القلب والقسطرة، تم قتل الفئران، وتم حصاد قلوبهم لتقييم المورفولوجية والهيستولوجيا.
تسبب انقباض الجذع الرئويفي تضخم RV (الشكل 2). بالمقارنة مع مجموعة الشام، كانت سرعة الذر...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الزيادات المرضية في ضغط ملء RV يؤدي إلى تحول إلى اليسار من الحاجز، والتي يمكن أن تغير هندسة LV21. هذه التغييرات تسهم في انخفاض إخراج القلب وكسر طرد LV (LVEF)، والتي يمكن أن تسبب اضطراب الهيموديناميفية في نظام الدورة الدموية22. ولذلك، فإن وجود نموذج فعال ومستقر واقتصادي لدراسة آلية RVF هو نموذج قيّم.
قمنا بتطوير نهج أكثر فعالية واستنساخا للغاية إلى PAC باستخدام مزلاج وإبرة الحشو المصنوعة في المنزل. مزلاج داخل يسمح لفصل أسهل من الشريان الأبهر والجذ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.
وقد تم دعم هذا العمل بمنح من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81570464، 81770271؛ إلى الدكتور لياو) ومشاريع التخطيط البلدي للتكنولوجيا العلمية في قوانغتشو (201804020083) (إلى الدكتور لياو).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| جهاز التنفس الصناعي ALC-V8S | شنغهاي ALCOTT التكنولوجيا الحيوية CO | ALC-V8S | مساعد التهوية |
| جهاز التنفس الصناعي الصغير للحيوانات | Haverd | Type 845 | Assist تهوية |
| نظام الموجات فوق الصوتية للحيوانات VEVO2100 | Visual Sonic | & nbsp ؛ VEVO2100 | تخطيط صدى |
| القلب إضاءة الضوء البارد | أوليمبوس | ILD-2 | وسادة حرارية |
| خفيفة - نظام جراحي ثرموستاتي (ALC-HTP-S1) | شنغهاي & nbsp ؛ ALCOTT التكنولوجيا الحيوية CO | ALC-HTP-S1 | التدفئة |
| Isoflurane | RWD علوم الحياة | R510-22 | التخدير المستنشق |
| Matrx VIP 3000 Isofurane Vaporizer | Midmark Corporation | VIP 3000 | التخدير |
| خياطة الحرير المضفر الطبي (6-0) | شركة شنغهاي بودونغ جينهوان للمستلزمات الطبية. | 6-0 | |
| خياطة نايلون طبية ربط (5-0) | نينغبو الطبية للإبرة | 5-0 | خياطة |
| قسطرة ميلار (1.0 فهرنهايت) | أدوات AD | 1.0F | لقسطرة القلب الأيمن |
| ملح الصوديوم Pentobarbital | Merck | 25MG | التخدير |
| PowerLab نظام التسجيل الفسيولوجي متعدد الاتجاهات | AD | 4/35 | سجل نتيجة قسطرة القلب الأيمن |
| التوازن الإلكتروني الدقيق | أداة دنفر | TB-114 | مستشعر الوزن |
| مزلاج ذاتية الصنع | افصل الشريان الأورطي والجذع الرئوي | ||
| إبرة حشو ذاتية الصنع ؛ | انقباض | ||
| التنبيب الرغامي عصامي التنبيب | الرغامي | ||
| معدات الجراحة المجهرية للحيوانات الصغيرة | Napox | MA-65 | الأدوات الجراحية |
| نقل هلام | Guang Gong pai | 250ML | تخطيط صدى القلب |
| كريم إزالة الشعر | Reckitt Benchiser | RQ / B 33 النوع 2 | إزالة شعر الفئران |
| عمودي التلقائي الضغط الكهروحراري معقم البخار | Hefei Huatai المعدات الطبية المحدودة. | LX-B50L | تنظيف تلقائي للأدوات الجراحية |
| مجهر جراحة الصغيرة العمودي | بصرية Yihua | Y-HX-4A | لقسطرة القلب الأيمن |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن