مقالة منهجية

دراسة إعادة عرض عكس البطين الأيسر عن طريق إزالة النطاق الأبهري في القوارض

DOI:

10.3791/60036

⸱

يوليو 14, 2021

 ,  ,  , 
1Unidade de Investigação Cardiovascular, Departamento de Cirurgia e Fisiologia, Faculdade de Medicina, Universidade do Porto

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هنا نصف بروتوكول خطوة بخطوة من إزالة ربط الشريان الأورطي الجراحي في نموذج الفئران الراسخة من انقباض الأبهر. هذا الإجراء لا يسمح فقط دراسة الآليات الكامنة وراء إعادة عرض عكس البطين الأيسر والتراجع من تضخم ولكن أيضا لاختبار الخيارات العلاجية الجديدة التي قد تسرع الانتعاش عضلة القلب.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لفهم أفضل لإعادة عرض البطين الأيسر (LV) العكسي (RR) ، نصف نموذج القوارض حيث ، بعد إعادة عرض LV الناجم عن النطاق الأبهري ، تخضع الفئران ل RR عند إزالة الانقباض الأبهري. في هذه الورقة، نقوم بوصف إجراء خطوة بخطوة لإجراء إزالة ربط الأبهر الجراحية طفيفة التوغل في الفئران. تم استخدام تخطيط صدى القلب في وقت لاحق لتقييم درجة تضخم القلب والخلل الوظيفي أثناء إعادة عرض LV وRR وتحديد أفضل توقيت لإزالة النطاق الأبهري. وفي نهاية البروتوكول، أجري تقييم ديناميائي نهائي لوظيفة القلب، وتم جمع عينات للدراسات النسيجية. أظهرنا أن يرتبط debanding مع معدلات البقاء على قيد الحياة الجراحية من 70-80٪. وعلاوة على ذلك، بعد أسبوعين من إزالة النطاق، يؤدي الانخفاض الكبير في الحمل البطيني إلى تراجع تضخم البطين (~20٪) والتليف (~ 26٪)، واستعادة الخلل الانبساطي كما تم تقييمها من خلال تطبيع ملء البطين الأيسر والضغوط الانبساطية النهائية (E/e' وLVEDP). إزالة النطاق الأبهري هو نموذج تجريبي مفيد لدراسة LV RR في القوارض. مدى الانتعاش عضلة القلب متغير بين المواضيع, ولذلك, محاكاة تنوع RR التي تحدث في السياق السريري, مثل استبدال الصمام الأبهري. نستنتج أن نموذج النطاقات الأبهري / debanding يمثل أداة قيمة لكشف رؤى جديدة في آليات RR ، وهي تراجع تضخم القلب وانتعاش الخلل الانبساطي.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

انقباض الشريان الأورطي العرضي أو التصاعدي في الماوس هو نموذج تجريبي يستخدم على نطاق واسع لضغط تضخم القلب الناجم عن الحمل الزائد ، والخلل الانبساطي والانقباضي وفشل القلب1،2،3،4. تضيق الأبهر يؤدي في البداية إلى تضخم البطين الأيسر التعويضي (LV) متحد المركز لتطبيع الإجهادالجداري 1. ومع ذلك ، في ظل ظروف معينة ، مثل الحمل الزائد للقلب لفترات طويلة ، فإن هذا الضمور غير كاف لتقليل إجهاد الجدار ، مما يؤدي إلى خلل انبساطي وانقباضي (تضخم مرضي)5. بالتوازي، تؤدي التغيرات في المصفوفة خارج الخلية (ECM) إلى ترسب الكولاجين والربط المتقاطع في عملية تعرف باسم التليف، والتي يمكن تقسيمها إلى تليف بديل وتليف تفاعلي. التليف هو، في معظم الحالات، لا رجعة فيه والتنازلات الانتعاش عضلة القلب بعد الإغاثة الزائد6،7. ومع ذلك، كشفت دراسات التصوير بالرنين المغناطيسي القلب الأخيرة أن التليف التفاعلي قادر على التراجع على المدى الطويل8. بالإجمال، التليف، تضخم وخلل القلب هي جزء من عملية تعرف باسم إعادة عرض عضلة القلب التي تتقدم بسرعة نحو فشل القلب (HF).

أصبح فهم ميزات إعادة عرض عضلة القلب هدفا رئيسيا للحد من تطوره أو عكسه ، وهذا الأخير يعرف باسم إعادة عرض عكسي (RR). ويشمل مصطلح RR أي تغيير عضلة القلب عكس مزمن من قبل تدخل معين، مثل العلاج الدوائي (على سبيل المثال، الأدوية الخافضة للضغط)، جراحة الصمام (على سبيل المثال، تضيق الأبهر) أو أجهزة مساعدة البطين (على سبيل المثال، HF المزمن). ومع ذلك، غالبا ما تكون RR غير مكتملة بسبب تضخم السائدة أو الانقباضي / الانبساطي الخلل الوظيفي. وبالتالي ، فإن توضيح الآليات الأساسية لRR والاستراتيجيات العلاجية الجديدة لا يزال مفقودا ، ويرجع ذلك في الغالب إلى استحالة الوصول إلى أنسجة عضلة القلب البشرية ودراسةها أثناء RR في معظم هؤلاء المرضى.

للتغلب على هذا القيد ، لعبت نماذج القوارض دورا كبيرا في تعزيز فهمنا لمسارات الإشارات المشاركة في تطور HF. على وجه التحديد، يمثل إزالة ربط الأبهر للفئران مع انقباض الأبهر نموذجا مفيدا لدراسة الآليات الجزيئية الكامنة وراء LV السلبية إعادة عرض9 و RR10،11 لأنها تسمح بجمع عينات عضلة القلب في نقاط زمنية مختلفة في هاتين المرحلتين. وعلاوة على ذلك، فإنه يوفر بيئة تجريبية ممتازة لاختبار الأهداف الجديدة المحتملة التي يمكن أن تعزز / تسريع RR. على سبيل المثال، في سياق تضيق الأبهر، قد يوفر هذا النموذج معلومات حول الآليات الجزيئية المشاركة في التنوع الهائل للاستجابة عضلة القلب الكامنة وراء (في) اكتمال RR6،12، وكذلك ، التوقيت الأمثل لاستبدال الصمام ، والذي يمثل عيبا كبيرا في المعرفة الحالية. والواقع أن التوقيت الأمثل لهذا التدخل هو موضوع نقاش، ويرجع ذلك أساسا إلى أنه محدد على أساس حجم التدرجات الأبهرية. العديد من الدراسات الدعوة إلى أن هذه النقطة الزمنية قد يكون متأخرا جدا لانتعاش عضلة القلب والتليف والخلل الانبساطي وغالبا ما تكون موجودة بالفعل12.

على حد علمنا، هذا هو النموذج الحيواني الوحيد الذي يلخص عملية إعادة عرض كل من عضلة القلب وRR تجري في ظروف مثل تضيق الأبهر أو ارتفاع ضغط الدم قبل وبعد استبدال الصمام أو بداية الأدوية المضادة لارتفاع ضغط الدم، على التوالي.

سعيا إلى التصدي للتحديات الموجزة أعلاه، فإننا نصف نموذجا جراحيا للحيوانات يمكن تنفيذه في الفئران والجرذان على حد سواء، ومعالجة الاختلافات بين هذين النوعين. نحن نصف الخطوات والتفاصيل الرئيسية التي ينطوي عليها تنفيذ هذه العمليات الجراحية. وأخيرا، فإننا نبلغ عن أهم التغييرات التي تحدث في LV مباشرة قبل و طوال RR.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وتمتثل جميع التجارب على الحيوانات لدليل رعاية واستخدام المختبرات (منشور المعاهد القومية للصحة رقم 85-23، المنقح لعام 2011) والقانون البرتغالي بشأن رعاية الحيوان (DL 129/92، DL 197/96؛ P 1131/97). ووافقت السلطات المحلية المختصة على هذا البروتوكول التجريبي (018833). تم الحفاظ على الفئران C57B1/J6 الذكور البالغ من العمر سبعة أسابيع في أقفاص مناسبة ، مع بيئة دورة خفيفة داكنة منتظمة 12/12 ساعة ، ودرجة حرارة 22 درجة مئوية ورطوبة 60٪ مع إمكانية الحصول على الماء ونسبة قياسية من الحمية الإعلانية libitum.

1. إعداد المجال الجراحي

  1. تطهير موقع العملية مع الكحول 70٪ ووضع غطاء طاولة غرفة العمليات المتاح على المنطقة الجراحية.
  2. تعقيم جميع الأدوات قبل الجراحة.
    ملاحظة: يتطلب هذا الإجراء مقص جراحي صغير، 2 ملقط منحني ناعم، 3 ملقط مستقيم ناعم، مشرط، ملقط صغير، مقص تشريح الزاوية، حامل إبرة، مساعدة ربط فائق الدقة، 2 hemostats، وأخيرا، ينصح بشدة نظام سحب المثبت المغناطيسي(الشكل 1A).
  3. منحنى غيض من إبرة 26 G حاد إلى 90 درجة لنهج أسهل إلى الشريان الأورطي. وهناك إبرة 26 G خلق تضيق الأبهر قطرها 0.45 ملم (الشكل 1B).
  4. ضبط درجة حرارة وسادة التدفئة إلى 37 ± 0.1 درجة مئوية.

2. إعداد الفئران والتنبيب

  1. تخدير الفئران C57B1/J6 الشباب (20-25 غرام) عن طريق استنشاق 8٪ sevoflurane مع 0.5 - 1.0 لتر / دقيقة 100٪ O2 في أنبوب مخروط.
  2. تحقق من عمق التخدير باستخدام إصبع القدم قرصة الانسحاب منعكس.
  3. ضع الماوس في شغل الظهر على لوحة مائلة والمضي قدما في التنبيب orotracheal.
  4. حرك الماوس إلى لوحة التدفئة واربط أنبوب القصبة الهوائية بجهاز التنفس الصناعي بسرعة لبدء التهوية الميكانيكية.
  5. ضبط معلمات جهاز التنفس الصناعي إلى تردد 160 نفسا / دقيقة وحجم المد والجزر من 10 مل / كغ.

3. التحضير لعملية جراحية (لكل من العصابات وإزالة ربط العصابات العمليات الجراحية)

  1. حلاقة وتطبيق كريم إزالة الشعر من خط العنق إلى مستوى منتصف الصدر من الفئران.
  2. ضعي جل العيون على عيون الحيوانات لمنع جفاف القرنية.
  3. ضع مسبار المستقيم ومقياس الأوكسيمتر في مخلب أو ذيل لرصد درجة الحرارة وأوكسجين الدم، ومعدل ضربات القلب، على التوالي.
    ملاحظة: التخدير يحفز انخفاض حرارة الجسم كبيرة، لذلك، من المهم للحفاظ على درجة حرارة الجسم الطبيعية أثناء الجراحة لتجنب انخفاض سريع في معدل ضربات القلب.
  4. الحفاظ على التخدير مع سيفوفلوران (2.0 - 3.0٪). تحقق من المستوى الصحيح للتخدير بسبب عدم وجود منعكس إصبع القدم قرصة.
  5. ضع الفئران في الطيات الجانبية اليمنى على وسادة التدفئة وتأمين الأطراف إلى نظام تراجع المثبت المغناطيسي بشريط للحفاظ على الحيوان في الوضع الصحيح أثناء الجراحة (الشكل 2، الشكل 3A).
  6. تطهير الصدر الماوس مع الكحول 70٪ تليها محلول بروفيدون اليود.

4. تصاعدي جراحة النطاقات الأبهري

ملاحظة: للحصول على وصف مفصل للبروتوكول،راجع 2و3و4و13.

  1. باستخدام شفرة يمكن التخلص منها، قم بإجراء شق جلدي صغير (~0.5 سم) على الجانب الأيسر أسفل مستوى المحور مباشرة وتشريح الجلد.
  2. تشريح بلطف وفصل عضلات الصدر وغيرها من طبقات العضلات حتى تصبح الأضلاع مرئية. استخدام ملقط ناعم وتجنب قطع العضلات.
  3. تحت المجهر، حدد المساحات الوربية وافتح شقا صغيرا بين المساحة الوربية الثانيةوالثلاثة مع ملقط ناعم.
  4. تراجع عن الأضلاع عن طريق وضع الصدر الناسح (الشكل 2A).
  5. استخدم ملقط صغير لتشريح الفصوص الصدغية وفصلها برفق حتى يصبح الشريان الأورطي الصاعد مرئيا.
    ملاحظة: يجب أن تكون محفزات القطن مفيدة في حالة النزيف. يجب إعطاء المالحة المعقمة الدافئة تحت الجلد في حالة حدوث نزيف كبير (على سبيل المثال ، الشريان الثديي).
  6. استخدام ملقط صغير لتشريح بلطف الشريان الأورطي.
    ملاحظة: يعتبر الشريان الأورطي أن تشريح عندما لا يكون هناك الدهون أو الالتصاقات الأخرى حوله وأنه من الممكن لتطويق بسهولة السفينة مع ملقط منحنى صغير.
  7. بعد تشريح الأبهر، ضع ربط البولي بروبلين 7-0 حول الشريان الأورطي باستخدام مساعدات الربط والملقط المنحني(الشكل 2B).
  8. موقف إبرة 26 G حاد موازية إلى الشريان الأورطي (تلميح وأشار نحو رأس الفئران) (الشكل 2B). للفئران وزنها 20-25 غرام، هذه الإبرة يحفز انقباض الأبهر 65-70٪ قابلة للاستنساخ.
  9. جعل 2 عقدة فضفاضة حول الشريان الأورطي وإبرة 26 G مع مساعدة من 2 ملقط (الشكل 2B).
  10. تشديد عقدة1 st و، بسرعة بعد، عقدة2. تأكد لفترة وجيزة من تحديد المواقع الصحيحة للانقباض وإزالة الإبرة بسرعة لاستعادة تدفق الدم الأبهري. وأخيرا، جعل عقدة3 rd (مجموعة BA).
  11. إعادة وضع الغدة الصعترية والعضلات في وضعها الأولي.
  12. إجراء صوري مطابق لإجراء الانقباض ولكن الحفاظ على خياطة فضفاضة حول الشريان الأورطي (مجموعة شام).
  13. قطع نهايات خياطة وإزالة الصدر النازل.
    ملاحظة: قد تزيد نهايات الخياطة القصيرة من احتمال تخفيف العقدة مع الضغط الأبهري ، في حين أن النهايات الطويلة تجعل إجراء إزالة النطاقات أكثر خطورة حيث يمكن أن تحدث الالتصاقات بين الغرز والأذين الأيسر.
  14. أغلق جدار الصدر باستخدام خياطة البولي بروبلين 6-0 مع خياطة بسيطة متقطعة أو مستمرة باستخدام أقل عدد ممكن من الغرز. تشديد عقدة الصدر الماضي مع الرئتين تضخم في نهاية الإلهام عن طريق مقروص قبالة تدفق جهاز التنفس الصناعي لمدة 2S لإعادة تضخيم الرئتين.
  15. أغلق الجلد بخياطة حرير/بولي بروبلين 6-0 في نمط خياطة مستمر.
    ملاحظات: إذا تم استخدام جهاز التنفس الصناعي أحدث، فمن الممكن برمجته لوقفة في الإلهام (الإعداد المتقدمة وقفة إلهام)

5. الرعاية بعد العملية الجراحية

  1. تطبيق محلول بروفيدون اليود على موقع خياطة الجلد.
  2. للحصول على مسكن مناسب ، يمكنك إعطاء البوبرينورفين تحت الجلد 0.1 ملغ / كجم ، مرتين يوميا ، حتى يتعافى الحيوان تماما (عادة بعد 2-3 أيام من الجراحة).
  3. حقن المحلول الملحي المعقم intraperitoneally لمنع الجفاف في حالة حدوث نزيف كبير أثناء الجراحة.
  4. إيقاف التخدير (دون deintubating الماوس) والانتظار حتى الحيوان استرداد ردود الفعل (حركات شعيرات هي إشارة الصحوة) ويبدأ في التنفس تلقائيا.
  5. إزالة قنية القصبة الهوائية.
  6. دع الحيوان يتعافى في حاضنة عند 37 درجة مئوية.
  7. عودة الحيوان إلى غرفة دورة ضوء / الظلام 12 ساعة بعد الشفاء التام.

6. جراحة إزالة النطاق الأبهري

  1. بعد سبعة أسابيع ، قم بإزالة ربط الشريان الأورطي في نصف BA وإزالة الغرز الفضفاض من نصف فئران SHAM ، مما أدى إلى مجموعتين جديدتين - debanding (DEB) وdebanding SHAMA (DESHAM) ، على التوالي. يمثل DESHAM عنصر التحكم لمجموعة DEB(الشكل 4).
  2. كرر جميع الخطوات 2.1 إلى 3.6 المذكورة أعلاه.
  3. تشريح بلطف الأنسجة والالتصاقات والتليف حول الشريان الأورطي حتى يصبح انقباضه مرئية.
  4. تشريح بعناية الشريان الأورطي وفصل خياطة من الشريان الأورطي. قطع خياطة مع الزاوية مقص الربيع واحد بحث(الشكل 3باء).
  5. أغلق جدار الصدر باستخدام خياطة البولي بروبلين 6-0 مع خياطة بسيطة متقطعة أو مستمرة باستخدام الحد الأدنى من الغرز الممكنة.
    ملاحظة: حاول شد آخر خياطة في الصدر عندما يتم نفخ الرئتين لتجنب استرواح الصدر.
  6. أغلق الجلد بخياطة حرير/بولي بروبلين 6-0 في نمط خياطة مستمر.
  7. إجراء جميع إجراءات الرعاية بعد العملية الجراحية كما هو مذكور في 5.
  8. التضحية بالحيوانات بعد أسبوعين.

7. تخطيط صدى القلب لتقييم وظيفة القلب وتضخم البطين الأيسر في الجسم الحي

  1. إجراء فحص صدى القلب كل 2-3 أسابيع لمتابعة تطور تضخم ووظيفة القلب.
  2. تخدير الحيوانات ، كما هو موضح ، عن طريق استنشاق 5 ٪ من sevoflurane مع مخروط الأنف. ضبط مستوى التخدير عن طريق خفضه إلى 2.5٪.
  3. حلاقة وتطبيق كريم إزالة الشعر من خط العنق إلى مستوى منتصف الصدر.
  4. ضع الحيوان على وسادة التدفئة ووضع أقطاب تخطيط القلب. ضمان تتبع تخطيط القلب جيدة والحفاظ على معدل ضربات القلب بين 300 و 350 نبضة / دقيقة.
  5. مراقبة درجة الحرارة (~ 37 °C).
  6. تطبيق هلام صدى ووضع الحيوان في ديكوبيتوس الجانبي الأيسر.
  7. بدء تخطيط صدى القلب وضبط الإعدادات.
  8. وضع مسبار الموجات فوق الصوتية على الصدر.
  9. تقييم تدرج الضغط عبر النطاقات في 7 و 2 أسابيع بعد جراحة الربط وإزالة النطاقات، على التوالي. ضع المسبار في المحور الطويل LV وضع الحزمة فوق الشريان الأورطي. اضغط على زر PW لتنشيط موجة نبضية Doppler تخطيط صدى القلب. بعد سبعة أسابيع من النطاقات، سيتم >25 مم زئبق في الحيوانات النطاقات.
  10. سجل الصور الموجهة ثنائية الأبعاد من الشريان الأورطي تظهر وجود أو عدم وجود انقباض الشريان الأورطي الصاعد لتصور تشريحيا فعالية النطاقات وإزالة النطاقات.
    ملاحظة: من الممكن تصور التدفق المضطرب عند مستوى الانقباض إذا كان وضع اللون متوفرا.
  11. تقييم تضخم عن طريق وضع المسبار في محور قصير LV، على مستوى العضلات الحليمية، واضغط M-وضع تتبع لتصور الجدار الأمامي LV (LVAW)، قطر LV (LVD) والجدار الخلفي LV (LVPW) في دياسول (D) والسول (S) (الشكل 5).
  12. تقييم الدالة الانقباضية، وحساب كسر القذف وتقصير كسور كما هو موضح سابقا14،15.
  13. تقييم الوظيفة الانبساطية بمقدار 1) تحديد ذروة دوبلر الموجة النبضية لسرعة التدفق التاجي المبكر والمتأخر (موجات E و A، على التوالي) باستخدام منظر apical من 4 غرف فوق المنشورات التاجية مباشرة؛ 2) تسجيل السرعات التاجية الجانبية الحلقية الشغافية في وقت مبكر (E') وسرعات الانقباضي الذروة (S') باستخدام نبض-TDI وعرض apical 4-غرفة apical(الشكل 5).
  14. تسجيل نبضات القلب المتتالية ثلاثة على الأقل إلى كل تقييم المعلمة. سيتم حساب متوسط هذه القيم لاحقا.

8. تقييم الهمودية

  1. في نهاية البروتوكول(الشكل 4)،إجراء تخطيط صدى القلب النهائي، كما هو موضح في 7، قبل تقييم الديناميكا الدموية الطرفية.
  2. كرر الخطوات من 2.1 إلى 3.6.
  3. كانول الوريد الوريدي الأيمن وثقب المالحة العقيمة في 64 مل / كغ / ساعة.
  4. تدوير قليلا الحيوان إلى الجانب الأيسر وجعل شق الجلد على مستوى الزائدة الدودية xiphoid.
  5. فصل الجلد من العضلات مع ملقط أو مع مقص.
  6. إجراء شق الجانبي بين الأضلاع اليسرى في مستوى الزائدة الدودية xiphoid.
  7. إجراء استئصال الصدر الجانبي الأيسر لفضح القلب بالكامل.
    ملاحظة: لتجنب النزيف وتلف الرئة، أدخل مسحة قطنية في تجويف الصدر وادفع الرئة برفق أثناء إدخال اثنين من الهموستات على الجانب الأيمن والأيسار من المكان لقطعها.
  8. سخني مسبقا القسطرة الحلقية P-V في حمام مائي عند 37 درجة مئوية.
  9. معايرة القسطرة (الإعداد، إعداد القناة، اختار القناة الصحيحة للضغط والحجم، وحدات).
  10. أدخل قسطرة بشكل واضح في LV و تأكد من وضع مستشعرات الصوت بين الصمام الأبهري والقمة. يمكن تقييم المجلدات حسب تخطيط صدى القلب(الشكل 5). التصور من حلقات حجم الضغط يساعد على تأكيد تحديد المواقع الصحيح للقسطرة (الشكل 6).
  11. السماح للحيوان لتحقيق الاستقرار 20-30 دقيقة دون تغييرات كبيرة في شكل حلقات حجم الضغط.
  12. مع التهوية علقت في نهاية انتهاء الصلاحية، والحصول على تسجيلات خط الأساس (الشكل 6). الحصول على البيانات باستمرار في 1000 هرتز ليتم تحليلها في وقت لاحق خارج الخط من قبل البرامج المناسبة.
  13. حساب التوصيل المتوازي بعد بولوس المالحة فرط الطنين (10٪، 10 ميكرولتر).
  14. في حين تخدير، التضحية الحيوان عن طريق exsanguination، وجمع والطرد المركزي الدم.
  15. وأخيرا، المكوس وجمع القلب. وزن القلب واليسار والبطين الأيمن بشكل منفصل وعلى الفور تخزين العينات في النيتروجين السائل أو الفورالين للدراسات الجزيئية أو النسيجية اللاحقة، على التوالي.

9. إجراء ربط / إزالة النطاقات الأبهري في الفئران

  1. أداء ربط الأبهر في الشاب Wistar (70-90 غرام) باستخدام إبرة 22 G وربط البولي بروبلين 6-0 لتضييق الشريان الأورطي.
  2. ضمان إجراء التخدير والمسكنات المناسبة مع 3-4٪ من سيفوفلوران و 0.05 ملغم / كغ من البوبرينورفين، على التوالي.
  3. أثناء تخطيط صدى القلب، وضمان معدل ضربات القلب دائما فوق معدل 300 / دقيقة (من الناحية المثالية بين 300 و 350).
  4. قبل الخطوة 8.9، تشريح بلطف الشريان الأورطي الفئران، ووضع مسبار تدفق حوله لقياس الناتج القلبي. استخدام مسبار التدفق الأبهري هو الإجراء القياسي الذهبي للفئران.
  5. لتقييم الدورة الدموية، يمكن إعادة ترقيم الوريد الوداجي أو الفخذي لإدارة السوائل (32 مل/كغ/ساعة).
  6. استبدل القسطرة بحجم الضغط SPR-1035 ب SPR-847 أو SPR-838، والتي تناسب أحجامها الأبعاد البطينية للفئران بشكل أفضل.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ما بعد العملية الجراحية والبقاء على قيد الحياة في وقت متأخر
البقاء على قيد الحياة من أجل الجراحة من الإجراء النطاقات هو 80٪ والوفيات خلال الشهر الأول هو عادة <20٪. كما ذكر سابقا، نجاح جراحة إزالة النطاق يعتمد اعتمادا كبيرا على كيفية الغازية كانت الجراحة السابقة. بعد منحنى التعلم، يبلغ معدل الوفيات أثناء إجراءات إزالة النطاق حوالي 25٪. لهذا الوفيات حسابات معظمها وفيات أثناء إجراء الجراحة، بما في ذلك الشريان الأورطي أو تمزق الأذين الأيسر (في الفئران، ومعدل البقاء على قيد الحياة أعلى في كل من العمليات...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

النموذج المقترح هنا يحاكي عملية إعادة عرض LV وRR بعد النطاقات الأبهري وإزالة النطاقات ، على التوالي. لذلك ، فإنه يمثل نموذجا تجريبيا ممتازا لتعزيز معرفتنا بالآليات الجزيئية المشاركة في إعادة عرض LV السلبية واختبار استراتيجيات علاجية جديدة قادرة على تحفيز تعافي عضلة القلب لهؤلاء المرضى. هذا البروتوكول تفاصيل الخطوات حول كيفية إنشاء نموذج القوارض من النطاقات الأبهري وإزالة النطاقات مع تقنية جراحية طفيفة التوغل ومحافظة للغاية للحد من الصدمة الجراحية.

وتتعلق الخطوة الأكثر أهمية في البروتوكول بدرجة...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ولا يوجد تضارب في المصالح بين صاحبي البلاغ.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يشكر المؤلفون المؤسسة البرتغالية للعلوم والتكنولوجيا والاتحاد الأوروبي وكوادرو دي Referência Estratégico Nacional (QREN) و Fundo Europeu de Desenvolvimento Regional (FEDER) و Programa Operacional Factores de Competitividade (COMPETE) لتمويل وحدة البحوث UnIC (UID/IC/00051/2013). ويدعم هذا المشروع من قبل فيدر من خلال المنافسة 2020 - Programa أوبراسيونال Competitividade E Internacionalização (POCI)، مشروع DOCNET (NORTE-01-0145-FEDER-000003)، بدعم من برنامج نورتي البرتغال التشغيلي الإقليمي (NORTE 2020)، بموجب اتفاقية الشراكة البرتغالية لعام 2020، من خلال الصندوق الأوروبي للتنمية الإقليمية (ERDF)، مشروع NETDIAMOND (POCI-01-0145-FEDER-016385)، بدعم من الصناديق الهيكلية والاستثمارية الأوروبية، وهو البرنامج التشغيلي الإقليمي في لشبونة 2020. دانييلا ميراندا سيلفا وباتريشيا رودريغز ممولتان من صندوق الفقرة A Ciência e Tecnologia (FCT) من منح الزمالة (SFRH/BD/87556/2012 وSFRH/BD/96026/2013 على التوالي).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
امتصاص الرماحFST18105-03لامتصاص السوائل أثناء الجراحة
شفراتFST10011-00لإجراء شق الجلد
بوبرينورفينبوبريفين دواءتسكين
الكاغذيةFST18010-00لمنع الاستغناء
CatuteryF.S.T18010-01للوقاية مسحة قطنية exsanguination
Johnson'sلامتصاص السوائل أثناء الجراحة
كريم إزالة الشعرVeetلإزالة
غطاء طاولة غرفة العمليات القابل للتصرفMEDKINEDYND4030SBلتغطية المنطقة الجراحية
مسبار الصدىSiemensSequoia 15L8Wالحصول على إشارة الموجات فوق الصوتية
تخطيط صدى القلبSiemensAcuson Sequoia C512الحصول على إشارة الموجات فوق الصوتية
نهاية المد والجزر CO2< / sub> مراقبةKent ScientificCapnoStatللتحكم في تشبع غاز الزفير
Plump / TweezersF.S.T11255-20لتشريح الأنسجة والشريان الأورطي
ملقط /FST11272-30لتشريح الأنسجة والشريان الأورطي
ملقط / ملاقطFST11151-10لتشريح الأنسجة والشريان الأورطي
ملقط / ملاقطFST11152-10لتشريح الأنسجة والشريان الأورطي
نظام الغازPenlon Sigma Deltaللتخدير والتهوية الميكانيكية
HemostatsF.S.T13010-12لتثبيت الخيط قبل إحكام الشريان الأورطي
HemostatsFST13011-12لتثبيت الخيط قبل إحكام الشريان الأورطي
، يساعدالشريان الأورطي FST18062-12لوضع خياطة حول الشريان الأورطي
الضام المغناطيسيFST18200-20للمساعدة في الحفاظ على في الوضع المناسب
حامل الإبرةFST12503-15لخياطة الإبرة الحيوانية
26 جمB-BRUNلتكون بمثابة قالب من قطر انقباض الأبهر
سائلهواء الأكسجينللتخدير والتهوية الميكانيكية
خياطة PolipropileneVycrilW8304 / W8597لخياطة والقيام بمحلول انقباض
بوفيدون اليودBetadine& reg ؛ < / sup>مطهر للجلد
PowerLabMillar أدواتML880 PowerLab 16/30PV حلقة إشارة
التأكسج النبضيKent ScientificMouseStatللتحكم في معدل ضربات القلب وتشبع الدم
برنامج PVANMillar Instrumentsلتحليل بيانات الهيموديناميكية
الكهروضوئية حلقة الكاثيثرMillar instrumentsSPR-1035. 1.4 FPV حلقة إشارة
المياه ضامFST17000-01لتقديم نظرة عامة أفضل على مقبض الشريان الأورطي
ScalpetFST10003-12لإجراء شق الجلد
مقصFST15070-08لقطع الخيط في جراحة فك الغبار
مقصFST14084-09لقطع مواد أخرى أثناء الجراحة مثل الخياطة ، بابر
سيفوفلورانباكستر533-CA2L9117
وحدة التحكم في درجة الحرارةكينت العلميةالصحيحة لدرجة الحرارةللتحكم في درجة حرارة الجسم الحيواني
جهاز التنفسكينت العلميةفيزيوسويتلتهوية
حمام مائيحراري علمي & تجارة ؛TSGP02للحفاظ على درجة حرارة الماء كافية لتسخين قطط حلقة PV
نصائح ملاقط ربط 4665457 مقياس مسح الصناعي

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Arany, Z., et al. Transverse aortic constriction leads to accelerated heart failure in mice lacking PPAR-gamma coactivator 1alpha. Proceedings of the National Academy of Science U. S. A. 103 (26), 10086-10091 (2006).
  2. Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi, P., Gassmann, M., Frossard, N. Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy. Journal of Visualized Experiment. (127), e56231(2017).
  3. Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. K., Chow, B. K. Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice. Journal of Visualized Experiment. (121), e55293(2017).
  4. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proceedings of the National Academy of Science. 88 (18), 8277-8281 (1991).
  5. Koide, M., et al. Premorbid determinants of left ventricular dysfunction in a novel model of gradually induced pressure overload in the adult canine. Circulation. 95 (6), 1601-1610 (1997).
  6. Rodrigues, P. G., Leite-Moreira, A. F., Falcao-Pires, I. Myocardial reverse remodeling: how far can we rewind. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 310 (11), 1402-1422 (2016).
  7. Weidemann, F., et al. Impact of myocardial fibrosis in patients with symptomatic severe aortic stenosis. Circulation. 120 (7), 577-584 (2009).
  8. Bing, R., et al. Imaging and Impact of Myocardial Fibrosis in Aortic Stenosis. JACC Cardiovascular Imaging. 12 (2), 283-296 (2019).
  9. Conceicao, G., Heinonen, I., Lourenco, A. P., Duncker, D. J., Falcao-Pires, I. Animal models of heart failure with preserved ejection fraction. Netherlands Heart Journal. 24 (4), 275-286 (2016).
  10. Weinheimer, C. J., et al. Load-Dependent Changes in Left Ventricular Structure and Function in a Pathophysiologically Relevant Murine Model of Reversible Heart Failure. Circulation Heart Failure. 11 (5), 004351(2018).
  11. Bjornstad, J. L., et al. A mouse model of reverse cardiac remodelling following banding-debanding of the ascending aorta. Acta Physiologica (Oxford). 205 (1), 92-102 (2012).
  12. Yarbrough, W. M., Mukherjee, R., Ikonomidis, J. S., Zile, M. R., Spinale, F. G. Myocardial remodeling with aortic stenosis and after aortic valve replacement: mechanisms and future prognostic implications. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 143 (3), 656-664 (2012).
  13. deAlmeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse aortic constriction in mice. Journal of Visualized Experiment. (38), 1729(2010).
  14. Hamdani, N., et al. Myocardial titin hypophosphorylation importantly contributes to heart failure with preserved ejection fraction in a rat metabolic risk model. Circulation: Heart Failure. 6 (6), 1239-1249 (2013).
  15. Li, L., et al. Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging. Journal of Visualized Experiment. (112), e54101(2016).
  16. Lygate, C. A., et al. Serial high resolution 3D-MRI after aortic banding in mice: band internalization is a source of variability in the hypertrophic response. Basic Research in Cardiology. 101 (1), 8-16 (2006).
  17. Platt, M. J., Huber, J. S., Romanova, N., Brunt, K. R., Simpson, J. A. Pathophysiological Mapping of Experimental Heart Failure: Left and Right Ventricular Remodeling in Transverse Aortic Constriction Is Temporally, Kinetically and Structurally Distinct. Frontiers in Physiology. 9, 472(2018).
  18. Garcia-Menendez, L., Karamanlidis, G., Kolwicz, S., Tian, R. Substrain specific response to cardiac pressure overload in C57BL/6 mice. American Journal of Physiology-Heart and Circulation Physiology. 305 (3), 397-402 (2013).
  19. Melleby, A. O., et al. A novel method for high precision aortic constriction that allows for generation of specific cardiac phenotypes in mice. Cardiovascular Research. 114 (12), 1680-1690 (2018).
  20. Li, Y. H., et al. Effect of age on peripheral vascular response to transverse aortic banding in mice. The Journal of Gerontology. Series A, Biological Sciences and Medical Sciences. 58 (10), 895-899 (2003).
  21. Ruppert, M., et al. Myocardial reverse remodeling after pressure unloading is associated with maintained cardiac mechanoenergetics in a rat model of left ventricular hypertrophy. American Journal of Physiology-Heart and Circulation Physiology. 311 (3), 592-603 (2016).
  22. Treibel, T. A., et al. Reverse Myocardial Remodeling Following Valve Replacement in Patients With Aortic Stenosis. Journal of the American College of Cardiology. 71 (8), 860-871 (2018).
  23. Dadson, K., et al. Cellular, structural and functional cardiac remodelling following pressure overload and unloading. International Journal of Cardiology. 216, 32-42 (2016).
  24. Krayenbuehl, H. P., et al. Left ventricular myocardial structure in aortic valve disease before, intermediate, and late after aortic valve replacement. Circulation. 79 (4), 744-755 (1989).
  25. McCann, G. P., Singh, A. Revisiting Reverse Remodeling After Aortic Valve Replacement for Aortic Stenosis. Journal of the American College of Cardiology. 71 (8), 872-874 (2018).
  26. Miranda-Silva, D., et al. Characterization of biventricular alterations in myocardial (reverse) remodelling in aortic banding-induced chronic pressure overload. Science Reports. 9 (1), 2956(2019).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Aortic DebandingLeft Ventricular RemodelingReverse RemodelingEchocardiography AssessmentHemodynamic EvaluationHistological StudiesSurgical ProcedureCardiac HypertrophyDiastolic FunctionRodent Model

مقالات ذات صلة