$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تعتمد طرق الكشف عن البكتيريا باستخدام MNP على الاعتراف الجزيئي للأجسام المضادة ، aptamers ، البروتين الحيوي ، الكربوهيدرات المترافقة مع MNP بواسطة البكتيريا المسببة للأمراض1. مع الأخذ في الاعتبار أن يتم التعرف على siderophores من قبل مستقبلات محددة على الغشاء الخارجي للبكتيريا، فإنها يمكن أن ترتبط أيضا إلى MNP لزيادة خصوصيتها2. Siderophores هي الجزيئات العضوية الصغيرة المشاركة في Fe3 + امتصاص البكتيريا3،4. لم يتم بعد الإبلاغ عن إعداد الترافق بين siderophores و MNP جنبا إلى جنب مع تقييمها لالتقاط وعزل البكتيريا.
واحدة من الخطوات الحاسمة في تركيب جسيمات نانوية مغناطيسية مع جزيئات صغيرة هي اختيار نوع الرابطة أو التفاعل بينها لضمان أن يتم إرفاق الجزيء الصغير على سطح MNP. لهذا السبب، كان تركيز الإجراء لإعداد الترافق بين الجسيمات النانوية المغناطيسية و فيروكزامين -siderophore المعترف بها من قبل Yersinia enterocolitica- في توليد سطح قابل للتعديل من MNP للسماح لها ربط بتكهوري إلى siderophore بواسطة الكيمياء كاربودييميد. من أجل الحصول على جسيمات نانوية موحدة المغنطيسية (MNP) وتحسين التحكم في التنوية والحجم ، تم إجراء تفاعل تحلية مع الكحول البنزيل في كتلة حرارية دون أن تهتز5. ثم، تم إنشاء طلاء السيليكا من قبل طريقة Stöber لمنح الحماية وتحسين استقرار تعليق الجسيمات النانوية في وسائل الإعلام مائي6. مع الأخذ في الاعتبار هيكل الفلوكسامين ، وإدخال مجموعات أمين ضروري لإنتاج الجسيمات النانوية المناسبة (MNP@SiO2@NH2) أن تكون مترافقة مع siderophore. وقد تحقق ذلك عن طريق التكثيف من (3-aminopropyl) ثلاثية الأيثوكسيسيلين (APTES) مع مجموعات الكحول الموجودة على سطح الجسيمات النانوية المعدلة السيليكا (MNP@SiO2) باستخدام طريقة سول جل7.
في موازاة, تم إعداد فيروكسيمين الحديد (III) مجمع من قبل تعقيد من deferoxamine المتاحة تجاريا مع أسيتونات أسيتيل الحديد في محلول مائي. N-succinylferoxamine، تحمل مجموعات السوتشينيل التي سوف تعمل كربطات، تم الحصول عليها من قبل رد فعل فيروكسيمين مع أنهيدريد succinic.
تمت عملية الاقتران بين MNP@SiO2@NH2 وN-succinylferoxamine لإعطاء MNP@SiO2@NH@Fa من خلال كيمياء كاربوديميد باستخدام الكواشف اقتران benzotriazole-1-yl-ox y-tris-(dimethylamino)-فوسفونيوم سداسي فلوريفوروفوسفات (BOP) و 1-هيدروكسي بنزوزيرول (HOBt) في وسائل الإعلام الأساسية لينة لتنشيط مجموعة حمض المحطة الطرفية في N-succinylferoxamine8. N
وبمجرد أن تم وصف MNPs ، قمنا بتقييم قدرات الجسيمات النانوية المغناطيسية العارية والمزملة لالتقاط النوع البري (WC-A) ومتحول من Y. enterocolitica تفتقر إلى مستقبلات الفلوكسامين FoxA (FoxA WC-A 12-8). وسمح لأعضاء البرلمان الوطنيين العاديين والنواب المُمَنَاة الوظيفية وأعضاء البرلمان الوطني MNP@SiO2@NH@Fa بالتفاعل مع كل سلالة من سلالة Y. enterocolitica. تم فصل المجاميع البكتيريا- مترافق من تعليق البكتيريا عن طريق تطبيق حقل مغناطيسي. تم شطف المجاميع المنفصلة مرتين مع المالحة الفوسفاتية المخزنة (PBS) ، وإعادة تعليقها في PBS لإعداد عمليات التخفيف التسلسلية ثم ، كانت مطلية لعد المستعمرة. يوضح هذا البروتوكول كل خطوة من توليف MNP@SiO2@NH@Fa، والتوصيف الهيكلي لجميع الوسيطات والمقارنات، ومقايسة التقاط البكتيريا كوسيلة سهلة لتقييم خصوصية المترافق فيما يتعلق بالمتوسطات. 9