تركيبات مسحوق جاف للاستنشاق لديها إمكانات كبيرة في علاج أمراض الجهاز التنفسي. قبل الدخول في الدراسات البشرية ، من الضروري تقييم فعالية تركيبة المسحوق الجاف في الدراسات ما قبل السريرية. يتم تقديم طريقة بسيطة وغير باضعة لإدارة مسحوق جاف في الفئران من خلال الطريق داخل التراكشي.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الإدارة داخل الراشية لصياغة مسحوق جاف في الفئران
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
في تطوير تركيبات مسحوق جاف قابل للاستنشاق ، من الضروري تقييم أنشطتهم البيولوجية في نماذج الحيوانات قبل السريرية. تقدم هذه الورقة طريقة غير باضعة لتوصيل مسحوق جاف داخل التراكي في الفئران. يتم تقديم جهاز تحميل مسحوق جاف يتكون من هلام 200 ميكرولتر تحميل تلميح ماصة متصلة حقنة 1 مل عن طريق stopcock ثلاثية. يتم تحميل كمية صغيرة من مسحوق جاف (1-2 ملغ) في طرف ماصة وتفرقت من قبل 0.6 مل من الهواء في الحقنة. لأن نصائح ماصة هي المتاح وغير مكلفة، تركيبات مسحوق جاف مختلف يمكن تحميلها في نصائح مختلفة مقدما. ويمكن تقييم تركيبات مختلفة في نفس التجربة الحيوانية دون تنظيف الجهاز وإعادة ملء الجرعة، وبالتالي توفير الوقت والقضاء على خطر التلوث المتبادل من مسحوق المتبقية. يمكن فحص مدى تشتت المسحوق من خلال كمية المسحوق المتبقية في طرف ماصة. يتم تضمين بروتوكول التنبيب في الماوس مع مصدر ضوء حسب الطلب وقنية إرشادية. التنبيب السليم هو واحد من العوامل الرئيسية التي تؤثر على تسليم داخل التراكشية من تركيبة مسحوق جاف إلى منطقة الرئة العميقة من الماوس.
المقدمة
يوفر مسار الإدارة الرئوي فوائد مختلفة في تقديم العلاجات لكل من الإجراءات المحلية والنظامية. لعلاج أمراض الرئة ، يمكن تحقيق تركيز المخدرات المحلية العالية عن طريق الولادة الرئوية ، وبالتالي تقليل الجرعة المطلوبة وخفض حدوث الآثار الجانبية الجهازية. وعلاوة على ذلك، فإن الأنشطة الأنزيمية منخفضة نسبيا في الرئة يمكن أن تقلل من التمثيل الغذائي للدواء قبل الأوان. الرئتين هي أيضا فعالة لامتصاص المخدرات للعمل الجهازية بسبب مساحة سطح كبيرة وجيدة التغلغل، وطبقة الخلايا الظهارية رقيقة للغاية وارتفاع حجم الدم في الشعيرات الدموية الرئوية1.
وقد تم على نطاق واسع استنشاق تركيبات مسحوق جاف للوقاية والعلاج من مختلف الأمراض مثل الربو، مرض الانسداد الرئوي المزمن، مرض السكري والتطعيم الرئوي2،3،4. الأدوية في الحالة الصلبة هي عموما أكثر استقرارا مما كانت عليه في شكل سائل، وأجهزة استنشاق مسحوق جاف هي أكثر المحمولة وسهلة الاستخدام من البخاخات5،6. في تطوير تركيبات مسحوق جاف استنشاقه، والسلامة، وملامح الدوائية والفعالية العلاجية تحتاج إلى تقييم في نماذج الحيوانات قبل السريرية بعد الإدارة الرئوية7. على عكس البشر الذين يمكن أن يستنشق مسحوق جاف بنشاط، تسليم الرئوية من مسحوق جاف للحيوانات الصغيرة يشكل تحديا. من الضروري وضع بروتوكول فعال لتوصيل مسحوق جاف إلى رئتي الحيوانات.
وتستخدم الفئران على نطاق واسع كنماذج حيوانية بحثية لأنها اقتصادية وتتكاثر بشكل جيد. كما أنها سهلة التعامل معها والعديد من نماذج المرض راسخة. هناك نهجان رئيسيان لإدارة المسحوق الجاف لرئة الفأر: الاستنشاق والإدارة داخل التراكشي. للاستنشاق ، يتم وضع الماوس في غرفة الجسم كله أو الأنف فقط حيث يتم الهباء الجوي مسحوق جاف والحيوانات تتنفس في الهباء الجوي دونتخدير 8،9. المعدات باهظة الثمن مطلوبة وكفاءة توصيل الأدوية منخفضة. في حين أن غرفة الجسم كله قد تكون أقل تحديا من الناحية الفنية ، فإن غرفة التعرض للأنف فقط يمكن أن تقلل من تعرض الأدوية لسطح الجسم. بغض النظر عن ذلك، فإنه لا يزال من الصعب السيطرة بدقة وتحديد الجرعة التي يتم تسليمها إلى الرئتين. يتم إيداع المسحوق الجاف بشكل رئيسي في منطقة البلعوم الأنفي حيث يكون إزالة المخاطية بارزا10. وعلاوة على ذلك، الفئران داخل الغرفة تتعرض لضغوط كبيرة خلال عملية الإدارة لأنها مقيدة ومحرومة من إمدادات الغذاء والمياه11. بالنسبة للإدارة داخل التراكشي ، فإنه يشير بشكل عام إلى إدخال المادة مباشرة إلى القصبة الهوائية. هناك تقنيتان مختلفتان لتحقيق ذلك: استئصال القصبة الهوائية والتنبيب القصبي. الأول يتطلب إجراء جراحيا يجعل شق في القصبة الهوائية، وهو الغازية ونادرا ما تستخدم لإدارة مسحوق. يتم وصف التقنية الثانية فقط هنا. بالمقارنة مع طريقة الاستنشاق ، فإن الإدارة داخل الوتر هي الطريقة الأكثر شيوعا للتسليم الرئوي في الماوس بسبب كفاءتها العالية في التسليم مع الحد الأدنى من فقدان الدواء12،13. بل هو وسيلة بسيطة وسريعة لتقديم بدقة كمية صغيرة من مسحوق في غضون بضعة ملليغرام إلى الماوس. على الرغم من أن الماوس هو تشريحيا وفسيولوجيا متميزة للبشر والتخدير مطلوب أثناء عملية التنبيب، والإدارة داخل التراتشي يتجاوز الجهاز التنفسي العلوي ويقدم وسيلة أكثر فعالية لتقييم الأنشطة البيولوجية لصياغة مسحوق جاف مثل امتصاص الرئة، والتوافر البيولوجي والآثار العلاجية14،15.
لإدارة مسحوق جاف intratracheally، يجب أن يتم تنبيب الماوس، والتي يمكن أن تكون صعبة. في هذه الورقة ، يتم وصف تصنيع مسحوق جاف مصنوع خصيصا وجهاز تنبيب. يتم توضيح إجراءات التنبيب وخنق المسحوق الجاف في رئة الفأر.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
وقد وافقت لجنة استخدام الحيوانات الحية في التدريس والبحث، جامعة هونغ كونغ، على التجارب التي أجريت في هذه الدراسة. تركيبات مسحوق جاف أعدت عن طريق رذاذ تجميد التجفيف (SFD) التي تحتوي على 0.5٪ من لوسيفيراز رسول الجيش الملكي النيبالي (ميرنا)، 5٪ الببتيد الاصطناعي PEG12KL4 و 94.5٪ من مانيتول (ث / ث) وتستخدم في هذه الدراسة لإثبات التعبير ميرنا في الرئة16. يبلغ متوسط القطر الأيرودينامية (MMAD) من مسحوق SFD 2.4 ميكرومتر. يستخدم مسحوق مانيتول المجفف بالرذاذ (SD) للتحقيق في تأثير حجم الهواء المستخدم في تشتت المسحوق16. وMMAD من مسحوق SD هو 1.5 ميكرومتر.
1. تصنيع مسحوق جاف insufflator وتحميل مسحوق جاف
- (اختياري) تحييد التهم ثابتة من مسحوق جاف (في قارورة) و200 ميكرولتر غير مرشح جولة هلام تحميل ماصة تلميح. استخدام بندقية مضادة للساكنة أو التوازن مع وظيفة deionizing وفقا لتعليمات الشركة المصنعة.
- إعداد ورقة وزن بحجم حوالي 4 سم × 4 سم. أضعاف ورقة في نصف قطريا ومن ثم تتكشف عليه.
- تزن 1-2 ملغ من مسحوق جاف على ورقة الوزن.
- ملء تلميح ماصة هلام التحميل مع مسحوق من خلال فتح أوسع من طرف. اضغط برفق لحزم المسحوق حتى يشكل المسحوق تجمعات فضفاضة بالقرب من الطرف الضيق للطرف(الشكل 1A). تجنب التعبئة مسحوق بإحكام جدا لأنها قد تعوق تشتت مسحوق.
- قم بتوصيل الطرف المحمل بالمسحوق بحقنة 1 مل من خلال stopcock ثلاثي الاتجاه(الشكل 1B). يمكن تغيير حجم الحقنة وفقا لحجم الهواء المستخدم لتفريق المسحوق. عقد طرف والمحاقن عموديا أثناء الاتصال لمنع تسرب مسحوق. إذا لم يتم إجراء الإدارة على الفور، استخدم البارافيلم لإغلاق فتحات الطرف وتخزينه مؤقتا تحت شرط مناسب حتى الإدارة.
2. تصنيع جهاز التنبيب
- مصدر الضوء (الشكل 2)
- إعداد مصدر ضوء حسب الطلب مع ضوء الصمام الثنائي المنبعث (LED) الشعلة والألياف البصرية مرنة مع قطرها 0.8-1 ملم.
- جعل فتحة تركزت على عدسة واضحة من الشعلة LED مع حفر اليد أو بت الحفر بحيث الألياف البصرية يمكن أن تمر بالكاد من خلال.
- أدخل الألياف البصرية من خلال فتحة. قم بتشغيل مصباح LED لضبط موضع وعمق الإدخال للحصول على أقصى قدر من السطوع في الطرف الآخر من الألياف البصرية.
- لصق الألياف البصرية في موقف مع الغراء الايبوكسي واضحة.
- القنية التوجيهية (الشكل 3)
- اتخاذ 1 مل البلاستيك باستور ماصة (الشكل 3A) وعقد ماصة في كلا الطرفين.
- استخدام مصباح الكحول (أو مصادر الحرارة الأخرى في المختبر مثل الموقد Bunsen) لتسخين منتصف ماصة عن طريق وضعه في 5-10 سم فوق اللهب(الشكل 3B). تدوير ماصة للتأكد من تسخينها بالتساوي.
- عندما يصبح البلاستيك لينة وتشوه، نقل ماصة بعيدا عن اللهب وتمتد ماصة بلطف.
- قطع ماصة امتدت في الوسط مع زوج من مقص في الجزء A والجزء باء (الشكل 3C-E). استخدام الجزء A كما ماصة تلميح غرامة والجزء باء كقنية توجيهية. لزيادة فرصة التنبيب الناجح مع القنية التوجيهية ، قم بعمل شطبة (ليست حادة للغاية مما قد يزيد من خطر إصابة الحيوان) في نهاية الجزء B(الشكل 3F). عندما يتم إدخال 200 ميكرولتر هلام تحميل ماصة تلميح (لتحميل مسحوق) في القنية التوجيهية، فإنه ينبغي أن تبرز القنية من قبل 1-2 ملم.
ملاحظة: يمكن أن يكون للقنية التوجيهية (الجزء B) ذات البعد المناسب (القطر الداخلي والخارجي) للتنبيب إبرة قياس 21 تناسب داخلها في حين أنها يمكن أن تناسب أيضا داخل إبرة قياس 17. قد تكون هناك حاجة إلى محاولات متعددة في تمديد ماصة لتحقيق البعد المناسب. - (اختياري): قطع فتحة صغيرة في الطرف الأوسع من cannula التوجيهية لجعلها أكثر مرونة بحيث يكون من الأسهل لعقد الألياف البصرية(الشكل 3F). هذا الافتتاح يسمح أيضا تركيب microsprayer لإدارة الهباء الجوي السائل.
3. التنبيب
- تخدير الماوس (BALB / c ، 7-9 أسابيع) مع الكيتامين (100 ملغ / كجم) وزين (10 ملغ / كجم) عن طريق الحقن داخل الصفاق.
- إعداد منصة مصنوعة من زجاج شبكي وجبل على موقف مع المشبك(الشكل 4A). ضع الماوس المخدر على المنصة (عند حوالي 60 درجة من الميل) في وضع ية. يمكن تعديل ارتفاع وزاوية الميل للمنصة من خلال وضع المشبك على الحامل.
- تعليق الماوس عن طريق ربط القواطع على خيط النايلون(الشكل 4B). تأمين موضع الماوس بقطعة من الشريط أو شريط مطاطي.
- أدخل الألياف البصرية في القنية التوجيهية قبل التنبيب مع غيض من مستوى الألياف مع فتح القنية التوجيهية. قم بتشغيل مصباح LED للإضاءة.
- تبرز بلطف لسان الفأرة مع زوج من ملقط لفضح القصبة الهوائية.
- استخدام اليد الأخرى لعقد cannula التوجيهية مع الألياف البصرية في الداخل. أدخلها من خلال تجويف الفم. مع الإضاءة من الألياف البصرية ، يمكن تصور فتح القصبة الهوائية كمبرر بين الحبال الصوتية.
- محاذاة شطبة من cannula التوجيهية نحو خط الوسط من افتتاح (الشكل 5A). intubate بلطف cannula التوجيهية مع الألياف البصرية في القصبة الهوائية من خلال توجيه خيرة غيض من القنية في افتتاح القصبة الهوائية.
- عند التنبيب، وإزالة بسرعة الألياف البصرية وترك القنية التوجيهية داخل القصبة الهوائية(الشكل 5B). وينبغي ملاحظة التنفس الطبيعي.
- عقد ماصة طرف غرامة (الجزء A) في افتتاح cannula التوجيهية و insufflate نفخة صغيرة من الهواء (حوالي 0.2 مل) في الرئة من الماوس. يشير التضخم الطفيف في صدر الفأر إلى التنبيب السليم. إزالة ماصة طرف غرامة قبل إدارة مسحوق.
4. إدارة مسحوق
- عقد مسحوق محملة تلميح التي ترتبط بحقنة كما هو موضح في الخطوة 1.5. تأكد من قطع تدفق الهواء بين الحقنة والطرف.
- سحب المكبس حقنة إلى الوراء لسحب 0.6 مل من الهواء.
ملاحظة: يعتمد حجم الهواء المستخدم لتفريق المسحوق على خصائص المسحوق وكمية المسحوق المحملة. ويرد وصف آخر لذلك في قسم النتائج. - بدوره صمام stopcock ثلاثية لربط تدفق الهواء بين الحقنة والطرف مسحوق محملة.
- إدراج تلميح مسحوق محملة في القنية التوجيهية التي وضعت بالفعل في القصبة الهوائية من الماوس(الشكل 5C). عقد cannula التوجيهية ودفع المكبس حقنة بقوة في عمل واحد مستمر لتفريق مسحوق والهباء الجوي في الرئة.
ملاحظة: يجب تقليل أي حركة أمامية للجهاز لتجنب إصابة الحيوان. - قم بإزالة الطرف وتحقق مما إذا كان المسحوق داخل الطرف قد تم إفراغه. إذا لم يكن كذلك، كرر الخطوة 4.1 إلى 4.4.
ملاحظة: إذا كان المسحوق معبأ بإحكام شديد بسبب الإفراط في التنصت، فقد لا يتم تفريقه بشكل صحيح. - بمجرد اكتمال الإدارة ، قم بإزالة القنية المرشدة من القصبة الهوائية.
- السماح للفأر لاسترداد عن طريق وضعه أفقيا في موقف supine مع لسانه نصف جاحظ لتجنب الحصار على الشعب الهوائية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
عندما يتم استخدام مسحوق جاف insufflator لتوصيل مسحوق الهباء الجوي إلى الرئة من حيوان، وحجم الهواء المستخدم أمر بالغ الأهمية لأنه يؤثر على السلامة، فضلا عن كفاءة تشتت مسحوق. لتحسين الطريقة ، تم استخدام كميات مختلفة من الهواء (0.3 مل ، 0.6 مل و 1.0 مل) لتفريق المسحوق الجاف (1 ملغ من مانيتول المجفف بالرذاذ) وتم رصد وزن الفئران لمدة 48 ساعة بعد الإدارة(الشكل 6). استخدام 0.3 مل و 0.6 مل من الهواء لم يسبب فقدان وزن الفئران تصل إلى 48 ساعة بعد الإدارة. فض مسحوق مع 1 مل من الهواء أدى إلى أكثر من 5٪ ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
في هذه الورقة، يتم تقديم أجهزة مصنوعة خصيصا لخنق مسحوق جاف والتنبيب داخل الوتر. في خطوة تحميل مسحوق، يتم تحميل مسحوق جاف في 200 ميكرولتر هلام تحميل ماصة تلميح. من المهم الاستفادة بلطف من طرف للسماح التعبئة فضفاضة من مسحوق في نهاية ضيقة من طرف. ومع ذلك، إذا كانت معبأة مسحوق بإحكام جدا، وسوف تتعثر في الطرف ولا يمكن تفريقها بشكل صحيح. من المستحسن تحييد الشحنات الثابتة للمسحوق وطرف المصصة من أجل تسهيل تحميل المسحوق ، خاصة بالنسبة للمسحوق ذو الكثافة المنخفضة والرطوبة النسبية المنخفضة. القنية التوجيهية هي مكون حاسم للجهاز. يتم...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ولا يوجد لدى صاحبي البلاغ تضارب في المصالح يكشفان عنه.
شكر وتقدير
ويود أصحاب البلاغ أن يشكروا السيد راي لي والسيد إتش سي ليونغ والسيد والاس سو على مساعدتهم الكريمة في جعل مصدر الضوء ومسحوق النازح؛ ومرفق الكلية الأساسي للمساعدة في تصوير الحيوانات. وقد دعم هذا العمل مجلس منح البحوث، هونغ كونغ (17300319).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| BALB / c فأر | أنثى. 7-9 أسابيع; وزن الجسم 20-25 جم | ||
| CleanCap Firefly Luciferase mRNA | TriLink Biotechnology | L-7602 | |
| مسحوق جاف Insufflator | PennCentury | Model DP-4M | |
| Ketamine 10٪ | Alfasan International B.V. | الصمام | |
| الثنائي الباعث للضوء (LED) شعلة | Unilite Internation | PS-K1 | |
| Mannitol (Pearlitol 160C) | Roquette | 450001 | |
| ماصة تحميل هلام دائري غير مرشح (200 وميكرو ؛ L) | Labcon | 1034-800-000 | |
| خيط تنظيف النايلون | تصل | إلى 30017050 | |
| حقنة واحدة مليلتر بدون إبرة | Terumo | SS-01T | |
| الألياف | OMPF1000 | ||
| الببتيد PEG12KL4 | EZ Biolab | (PEG12) -KLLLLLLLLLLKLLLLLLLLKLLKLLK-NH2 | |
| ماصة بلاستيك باستور ذات طرف ناعم | ألفا لابوتاتوريز | LW4061 | |
| محبس ثلاثي الاتجاهات | براون | D201 | |
| زيلازين 2٪ | الفسان انترناشيونال بي في | NA | |
| Zerostat 3 بندقية مضادة للكهرباء الساكنة | MILTY | 5036694022153 |
المراجع
- Newman, S. P. Drug delivery to the lungs: challenges and opportunities. Therapeutic Delivery. 8 (8), 647-661 (2017).
- Setter, S. M., et al. Inhaled dry powder insulin for the treatment of diabetes mellitus. Clinical Therapeutics. 29 (5), 795-813 (2007).
- Muralidharan, P., Hayes, D., Mansour, H. M. Dry powder inhalers in COPD, lung inflammation and pulmonary infections. Expert Opinion on Drug Delivery. 12 (6), 947-962 (2015).
- de Boer, A. H., et al. Dry powder inhalation: past, present and future. Expert Opinion on Drug Delivery. 14 (4), 499-512 (2017).
- Das, S., Tucker, I., Stewart, P. Inhaled dry powder formulations for treating tuberculosis. Current Drug Delivery. 12 (1), 26-39 (2015).
- Okamoto, H., et al. Stability of chitosan-pDNA complex powder prepared by supercritical carbon dioxide process. International Journal of Pharmaceutics. 290 (1-2), 73-81 (2005).
- He, J., et al. Evaluation of inhaled recombinant human insulin dry powders: pharmacokinetics, pharmacodynamics and 14-day inhalation. Journal of Pharmacy and Pharmacology. 71 (2), 176-184 (2019).
- Durham, P. G., Young, E. F., Braunstein, M. S., Welch, J. T., Hickey, A. J. A dry powder combination of pyrazinoic acid and its n-propyl ester for aerosol administration to animals. International Journal of Pharmaceutics. 514 (2), 384-391 (2016).
- Phillips, J. E., Zhang, X., Johnston, J. A. Dry powder and nebulized aerosol inhalation of pharmaceuticals delivered to mice using a nose-only exposure system. JoVE (Journal of Visualized Experiments). (122), e55454(2017).
- Nahar, K., et al. In vitro, in vivo and ex vivo models for studying particle deposition and drug absorption of inhaled pharmaceuticals). European Journal of Pharmaceutical Sciences. 49 (5), 805-818 (2013).
- Price, D. N., Muttil, P. Delivery of Therapeutics to the Lung. Methods in Molecular Biology. 1809, 415-429 (2018).
- Chang, R. Y. K., et al. Proof-of-Principle Study in a Murine Lung Infection Model of Antipseudomonal Activity of Phage PEV20 in a Dry-Powder Formulation. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 62 (2), (2018).
- Ito, T., Okuda, T., Takayama, R., Okamoto, H. Establishment of an Evaluation Method for Gene Silencing by Serial Pulmonary Administration of siRNA and pDNA Powders: Naked siRNA Inhalation Powder Suppresses Luciferase Gene Expression in the Lung. Journal of pharmaceutical sciences. 108 (8), 2661-2667 (2019).
- Patil, J. S., Sarasija, S. Pulmonary drug delivery strategies: A concise, systematic review. Lung India. 29 (1), 44-49 (2012).
- Ihara, D., et al. Histological Quantification of Gene Silencing by Intratracheal Administration of Dry Powdered Small-Interfering RNA/Chitosan Complexes in the Murine Lung. Pharmaceutical Research. 32 (12), 3877-3885 (2015).
- Qiu, Y., et al. Effective mRNA pulmonary delivery by dry powder formulation of PEGylated synthetic KL4 peptide. Journal of Controlled Release. 314, 102-115 (2019).
- Pfeifer, C., et al. Dry powder aerosols of polyethylenimine (PEI)-based gene vectors mediate efficient gene delivery to the lung. Journal of Controlled Release. 154 (1), 69-76 (2011).
- Kim, I., et al. Doxorubicin-loaded highly porous large PLGA microparticles as a sustained- release inhalation system for the treatment of metastatic lung cancer. Biomaterials. 33 (22), 5574-5583 (2012).
- Tonnis, W. F., et al. A novel aerosol generator for homogenous distribution of powder over the lungs after pulmonary administration to small laboratory animals. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 88 (3), 1056-1063 (2014).
- Hoppentocht, M., Hoste, C., Hagedoorn, P., Frijlink, H. W., de Boer, A. H. In vitro evaluation of the DP-4M PennCentury insufflator. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 88 (1), 153-159 (2014).
- Liao, Q., et al. Porous and highly dispersible voriconazole dry powders produced by spray freeze drying for pulmonary delivery with efficient lung deposition. International Journal of Pharmaceutics. 560, 144-154 (2019).
- Ito, T., Okuda, T., Takashima, Y., Okamoto, H. Naked pDNA Inhalation Powder Composed of Hyaluronic Acid Exhibits High Gene Expression in the Lungs. Molecular Pharmaceutics. 16 (2), 489-497 (2019).
- Chaurasiya, B., Zhou, M., Tu, J., Sun, C. Design and validation of a simple device for insufflation of dry powders in a mice model. European Journal of Pharmaceutical Sciences. 123, 495-501 (2018).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
