في البشر ، وجود حصى في المرارة هو السبب الأكثر شيوعا لالتهاب البنكرياس بسبب انسداد الجزء النهائي من choledochal ، مما يقطع تدفق إفرازات البنكرياس ويسبب عملية التهابية مكثفة في البنكرياس ، مع زيادة في تركيز الإنزيمات الهضمية في المصل والوسطاء الالتهابيين1،2.
وقد اقترحت نظريتين مختلفتين لشرح تطور التهاب البنكرياس الحاد (ا ف ب). تشير نظرية "القناة الشائعة" إلى أن الأحجار الموجودة في المرارة تعوق نظام القناة الصفراوية المشتركة البعيدة ، مما يسمح للإفراز الصفراوي بالتدفق إلى الوراء في قناة البنكرياس. النظرية الثانية (نظرية "انسداد القناة") تشير إلى أن انسداد القناة البنكرياسية عن طريق حصى في المرارة الزائدة يسبب انسدادا في تدفق إفراز البنكرياس إلى الاثني عشر ، مما يسبب ارتفاع ضغط الدم القناة3. على الرغم من أن الآليات التي تؤدي إلى التهاب البنكرياس الصفراوي الحاد غير مفهومة تماما ، إلا أن النتيجة هي عملية التهابية مكثفة. يؤدي ثوران إنزيم الجهاز الهضمي والهضم الذاتي للبنكرياس إلى تغيرات في الهسطولوجيا ، وزيادة في السيتوكينات الالتهابية (IL-1β ، IL-6 ، TNF-α) في السائل المؤانس والمصل ، وزيادة في بروتينات المرحلة الحادة4،5،6.
التهاب البنكرياس الحاد الحاد هو حالة تستحق الاهتمام السريري بسبب مشاركة أعضاء متعددة وارتفاع خطر الوفيات. النماذج الحيوانية لتكاثر التهاب البنكرياس الحاد (AP) مهمة لأن هذه تشرح الآليات المرضية المرضية للمرض وتساعد في رصد تطور الأحداث الالتهابية ، بدءا من المراحل الأولية للمرض. هذا عادة غير ممكن في العيادات2,7. بالإضافة إلى ذلك ، فإن الوصول إلى أنسجة البنكرياس أمر سهل في الدراسات قبل السريرية ، ويفضل توضيح التغيرات المرتبطة بالظروف السريرية8 إلى جانب إمكانية العمل مع الأنواع متساوية المنشأ ، والقضاء على المتغيرات غير المرغوب فيها ، وعكس التشابه السريري مع النتائج الملاحظة في الحالة البشرية9.
وقد درست نماذج الصفراوية وغير الصفراوية لتحريض التهاب البنكرياس الحاد في الفئران والجرذان الأنواع في كثير من الأحيان في الأدبيات العلمية. وتشمل الأساليب غير الصفراوية للتحريض إعطاء جرعات تحفيز فوق ماكسيمال من المرارة سيكريتاغوجي أو cerulein10 التناظرية; إعطاء جرعات قاتلة تقريبا من ارجينين; أو إدارة نظام غذائي نقص الكولين تكملها ethionine11. على الرغم من أن هذه الأساليب سهلة التكاثر وتؤدي إلى التهاب البنكرياس ، إلا أنها لا تكرر الآليات التي تؤدي نظريا إلى AP (أي ارتجاع إفراز الصفراء في قناة البنكرياس). تعتمد التقنية التي تعالج النموذج الصفراوي على التسريب الرجعي للأحماض الصفراوية في قناة البنكرياس وتتطلب باحثين مدربين تدريبا جيدا لتنفيذ هذا البروتوكول. وقد نشرت عدة دراسات باستخدام هذه الطريقة في الفئران (لأسباب تقنية على ما يبدو لأن هذه التجارب تنطوي على العمليات الجراحية)12,13. ومع ذلك ، فإن النهج في الفئران قد يقدم نتائج أكثر إثارة للاهتمام في دراسة الالتهاب3،14،15. في هذه الدراسة، سوف نعرض قائمة مرجعية من الخطوات التي يتعين اتباعها لتكاثر التهاب البنكرياس الحاد الشديد عن طريق ضخ توروتشولات الصوديوم في الفئران المخدرة C57BL/6.
بالنسبة للأعمال التي تنطوي على الحاجة إلى تجارب مع الأجسام المضادة وتحليل التعبير الجيني والبروتيني ، فإن استخدام الفئران هو الأفضل بسبب الترسانة الأكبر من المواد لهذه الحيوانات وإمكانية العمل مع الأنواع المتساوية وال بالضربة القاضية ، من بين أمور أخرى يمكن استخدامها ذات الصلة بالدراسات16. الفئران C57BL/6 هو سلالة أصيلة من الفئران وضعت أصلا لدراسة نشاط مضاد للورم وعلم المناعة. ويفضل الباحثون هذه السلالة بشكل متزايد لكونها متساوية المنشأ، مما يسمح بإعادة إنتاج أكبر للنتائج، مما قد يعني استخدام عدد أقل من الحيوانات في تجربة وأقل تقلبا في النتائج بين نفس المجموعة 17,18.
بيريدس وآخرون (2010)14 نشر بروتوكولا للتحريض AP في الفئران عن طريق ضخ تاوروشولات الصوديوم. هنا نقوم بتحديث هذا النموذج باستخدام تركيز taurocholate الصوديوم أعلى (2.5٪) في الفئران C57BL/6، مع حجم محدد وسرعة التسريب (الشكل 1). يتم الوصول إلى المستوى الأقصى من الشدة في غضون 12 ساعة من التعريفي في الفئران. يرتبط ارتفاع تركيز IL-6 في كل من المصل وفي التجويف البريتوني مع تطور AP. مع الممارسة ، فإن إجمالي الوقت المقدر من تحريض التخدير إلى الانتهاء من التسريب ، هو 25 دقيقة لكل. من الضروري أن يقوم باحث مدرب بإجراء هذه التجربة. لضمان حقن المحلول بشكل صحيح في القناة الصفراوية الشائعة ، قم بإجراء العديد من الدورات التدريبية التجريبية باستخدام الميثيلين الأزرق بدلا من تاوروشولات الصوديوم.