مقالة منهجية

استخدام المغلقة Y-متاهات لتقييم السلوك الكيميائي الحسي في الزواحف

7.5K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/61858

⸱

أبريل 7, 2021

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Biology, James Madison University, 2U.S. Geological Survey, Fort Collins Science Center, 3U.S. Department of Agriculture, National Wildlife Research Center, 4U.S. Geological Survey, Fort Collins Science Center

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

إشعار تصحيح

Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice

ملخص

تمكن متاهات Y الباحثين من تحديد أهمية المحفزات المحددة التي تدفع سلوك الحيوان ، وخاصة الإشارات الكيميائية المعزولة من مجموعة متنوعة من المصادر. يمكن أن يسفر التصميم والتخطيط الدقيق عن بيانات قوية (على سبيل المثال، التمييز، ودرجة الاستكشاف، والعديد من السلوكيات). هذا الجهاز التجريبي يمكن أن توفر نظرة قوية في المسائل السلوكية والبيئية.

الملخص

تستخدم الزواحف مجموعة متنوعة من الإشارات البيئية لإعلام ودفع سلوك الحيوان مثل مسارات الرائحة الكيميائية التي ينتجها الطعام أو التخصصات. فك تشفير السلوك الذي يتخلف عن الرائحة للفقاريات ، وخاصة الأنواع الغازية ، يمكن من اكتشاف الإشارات التي تحفز السلوك الاستكشافي ويمكن أن تساعد في تطوير أدوات بيولوجية أساسية وتطبيقية قيمة. ومع ذلك ، فإن تحديد السلوكيات التي تحركها العظة الكيميائية بشكل مهيمن مقابل الإشارات البيئية المتنافسة الأخرى يمكن أن يكون تحديا. Y-متاهات هي الأدوات الشائعة المستخدمة في أبحاث السلوك الحيواني التي تسمح كميا من السلوك الكيميائي الحسابات الفقارية عبر مجموعة من التصنيف. عن طريق الحد من المحفزات الخارجية، Y-متاهات إزالة العوامل المحيرة والحيوانات البؤرية الحالية مع خيار ثنائي. في دراساتنا Y-المتاهة، يقتصر الرائحة إلى ذراع واحدة من المتاهة لترك درب رائحة وإزالتها مرة واحدة وقد تم الوفاء المعلمات زرع الرائحة. ثم، اعتمادا على نوع المحاكمة، إما يسمح للحيوان البؤري في المتاهة، أو يتم إنشاء درب رائحة المتنافسة. والنتيجة هي سجل لاختيار الحيوان البؤري وسلوكه مع التمييز بين الإشارات الكيميائية المقدمة. هنا، يتم وصف جهازين Y-المتاهة مصممة لمختلف أنواع الزواحف الغازية: السحالي تيغو الأرجنتيني الأسود والأبيض(Salvator merianae)والثعابين البورمية (بيثونbivittatus)، وتحديد عملية وتنظيف هذهمتاهات Y. وعلاوة على ذلك، تم تلخيص مجموعة متنوعة من البيانات المنتجة، والعيوب والحلول التجريبية، وأطر تحليل البيانات المقترحة.

المقدمة

Y-متاهات شائعة، أدوات بسيطة في دراسات السلوك الحيواني التي تسمح لمجموعة متنوعة من الأسئلة التي يتعين معالجتها. بالإضافة إلى استخدامها على نطاق واسع في الدراسات المختبرية ، فإن متاهات Y متوافقة وظيفيا أيضا مع بيئات ميدانية مختلفة لدراسة الحيوانات البرية في بيئات نائية نسبيا. وقد درس الباحثون سلوكيات الفقاريات البرية باستخدام متاهات Y في مجموعة واسعة من التصنيف عبر تطبيقات ميدانية متنوعة بالمثل (على سبيل المثال، lampreys1؛ cichlid fish2؛ الضفادع السامة3؛ السحالي lacertid4؛ الثعابين الرباط5).

يركز العديد من الباحثين على كيفية و إلى أي درجة تقود الإشارات الكيميائية السلوكيات الحيوانية في البيئة الإنجابية والمكانية والأعلاف6. ويمكن اختبار مجموعة متنوعة من المحفزات الكيميائية في متاهات Y وعلى نطاقات دقيقة، مثل اثنين من المسارات الكيميائية التي تختلف قليلا فقط في التركيز7،أو القدرة على الكشف على أساس الحالة الإنجابية للأنواع المستهدفة8. يمكن إنشاء المسارات الكيميائية - التحفيز الرئيسي المستخدم في اختبارات متاهة Y - بشكل طبيعي عن طريق التحديدات أو وضعها على وجه التحديد في البيئة من قبل باحث باستخدام مصدر كيميائي محدد1،5. يمكن أيضا اختبار المحفزات في مجموعات فريدة لتحديد التأثير متعدد الوسائط للإشارات مثل تغيير سياقات عرض جديلة (مسارات المحمولة جوا مقابل الركيزة9؛ البصرية بالإضافة إلى الإشارات الكيميائية10). على الرغم من وجود العديد من الطرق الأخرى لتقييم الاستجابات الكيميائية الحسية في الزواحف (انظر قسم المناقشة) ، تسمح متاهات Y بتقييم سلوك البحث وعلى نطاقات زمنية ومكانية متعددة ، مما قد يؤدي إلى مستويات أعلى من الاستدلال السلوكي.

وقد تم اختبار الزواحف على نطاق واسع لاعتمادها على الإشارات الكيميائية في البيئة الإنجابية والأعلاف، وغالبا ما يستخدم الباحثون متاهات Y في هذه الدراسات11،12. لا تزال البيئة الكيميائية للزواحف يتم فك رموزها من خلال الدراسات التي تستخدم متاهات Y لمعالجة مجموعة متنوعة من الأسئلة التطورية والسلوكية التي هي قيمة لمديري الحياة البرية. على سبيل المثال، كشفت الاختبارات الأخيرة مع الأنواع الغازية الثعابين والسحلية أن الإشارات الكيميائية وحدها يمكن أن تؤثر على الاختيار وتخصيص الوقت داخل البيئة الجديدة من متاهة Y13،14،15.

يقتصر استخدام متاهات Y الكبيرة للحيوانات البؤرية متوسطة الحجم (مثل الزواحف ذات الجسم الكبير) بشكل عام على البيئات المختبرية حيث يمكن إيواء الحيوانات المحورية بسهولة على المدى الطويل ، ويمكن التحكم في العوامل التجريبية (مثل المناخ والضوء والمحفزات الخارجية) ، والوصول إلى البنية التحتية (على سبيل المثال ، الطاقة والمياه الجارية) غير محدود. غير أن الدراسات المتعلقة بالحيوانات البرية كثيرا ما تقتصر على مواقع محددة لأسباب مختلفة (مثل اللوجستيات والسماح بذلك). ونتيجة لذلك، تنشأ تحديات يجب التصدي لها من خلال إيجاد حلول مبتكرة للمشاكل وإجراء تعديلات منهجية للمحافظة على نتائج متسقة وقابلة للمقارنة.

هنا، وقد وصفت اثنين من الاجهزة التجريبية باستخدام متاهات Y وأدوات الرصد عن بعد لتقييم الإيكولوجيا الكيميائية الإنجابية من الزواحف سكوامات الغازية (أي الثعابين والسحالي) في سيناريوهات حقل مختلفة: البرية اشتعلت، أسيرة الأرجنتيني الأسود والأبيض tegu السحالي (Salvator ميريانيه) في غينسفيل، فلوريدا، والثعابين البورمية البرية اشتعلت(بيثون bivittatus)في ايفرجليدز الحديقة الوطنية، فلوريدا. كما يوحي اسمها ، فإن جهاز المتاهة Y يخلق بيئة تجريبية يدخل فيها ممر رئيسي (قاعدة Y ؛ "قاعدة") الذي يؤدي بعد ذلك إلى اثنين من الممرات المتباينة (أذرع Y; "الأسلحة"). في هذه التجارب، يتم استخدام نوعين من الحيوانات لتجربة واحدة: الحيوانات التي تضع الرائحة (توفير رائحة التحفيز في منطقة محظورة من المتاهة) والحيوانات المحورية (يتم جمع البيانات عن هذا الحيوان وهو يستكشف درب الرائحة).

كجهاز تجريبي في الدراسات الكيميائية الإيكولوجية ، يجب بناء أي متاهة Y بطريقة تسمح بإزالة الحيوان بسهولة داخل ويمكن تفكيكها لتنظيف شامل وإعادة تعيين. كما نوقشت القيود الملازمة لهذه البيئات الاختبار المختلفة (مثل الحيوانات النهارية مقابل الليلية، والاختلافات في البنية التحتية) التي أدت إلى تعديلات منهجية. على الرغم من أن التركيز كان على السحالي التيغو والثعابين البورمية، يمكن تطبيق هذه التصاميم على مجموعة واسعة من أنواع الزواحف. في هذا البحث على الزواحف الغازية، تستفيد متاهات Y من معدل ونطاق الاستدلال لأنها تمكن من جمع البيانات بسرعة لإعلام أهداف الإدارة التي تتحول في خطوة مع خطر الغزو الذي يشكله نوع معين. وعلى وجه الخصوص، فإن دراسة علم الأحياء الكيميائية للأنواع الغازية أمر بالغ الأهمية لتطوير أدوات فعالة للرقابة الكيميائية.

التمييز هو الملاحظة الرئيسية من الاختبارات التجريبية باستخدام متاهات Y حيث يختار الحيوان البؤري بين اثنين من المحفزات ويتم تقييم عملية صنع القرار. يمكن أيضا تسجيل مجموعة من السلوكيات في تجارب Y-maze أثناء التجربة نفسها (بث مباشر) أو بعد التجربة (فيديو) لتوسيع القوة الاستدلالية. إن تعقيد الأهداف المسبقة لدراسة معينة يملي ما إذا كانت المراقبة الحية أو التسجيلات المؤرشفة هي الأنسب للتصميم. هنا ، وقد وصفت أساليب Y - المتاهة بالتفصيل لمعالجة المسائل الكيميائية الإيكولوجية لإبلاغ الدراسات المستقبلية من قبل الباحثين المهتمين في أسئلة مماثلة حول سلوك الزواحف ، وخاصة في البيئة الكيميائية.

البروتوكول

تمت الموافقة على جميع الإجراءات التي تنطوي على استخدام الفقاريات الحية من قبل اللجان المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها التابعة لوزارة الزراعة الأمريكية وهيئة المسح الجيولوجي الأمريكية.

ملاحظة: نظرا لأن هذه الدراسات تركز على الفقاريات الغازية، يجب أيضا استيفاء الامتثال لمعايير الاحتواء، التي تفرض قيودا محددة على تصميم التجارب وتنفيذها. على الرغم من أن العديد من الطرق متشابهة بين موقعي الدراسة وتوقيت الدراسة النهارية مقابل الليلية ، فقد تم وصف طرق متميزة في كل من القسمين التاليين.

1. Y-المتاهة الإعداد والبروتوكول اليومي لوزارة الزراعة الأمريكية (وزارة الزراعة) دائرة التفتيش على صحة النباتات الحيوانية (APHIS) خدمات الحياة البرية المركز الوطني لأبحاث الحياة البرية فلوريدا محطة ميدانية: اختبار في الموقع من البرية اشتعلت، tegus الأسير

ملاحظة: يتم توفير خطط لكافة مكونات المتاهة Y وبنية الاحتواء في الملف التكميلي 1.

  1. أبعاد المتاهة Y والتصميم
    1. استخدم قطعة سفلي (1.22 متر × 2.44 متر من ألواح انحياز الأسمنت الليفي) لترسيخ متاهة Y. حفر ثقوب في الطبقة العليا للسماح البراغي النقل لتمرير صعودا لمرفق قطع المتاهة. للحصول على توجيهات محددة، راجع الملف التكميلي 1.
    2. بناء جدران المتاهة من لوحة تقليم PVC الأبيض. الأبعاد الداخلية للقاعدة هي 120 سم لتر (الجدران الجانبية) × 42 سم × 14 سم ه.
      ملاحظة: تم تصميم عرض الممر لاستيعاب عرض الحيوان البؤري 2x. عرض إضافي يسمح بالمرونة لاثنين، مسارات رائحة الحيوانات المودعة ليتم إنشاؤها.
    3. تأكد من أن الأبعاد الداخلية للأسلحة هي 120 سم لتر (الجدران الجانبية) × 40 سم × 14 سم ه.
    4. تجميع المتاهة باستخدام منفصلة أسفل، الجانب، والمكونات العليا المضمون معا قبل تشغيل المحاكمة. جعل الجزء العلوي من الاكريليك واضحة لتمكين التصور من الحيوانات داخل المتاهة. للحصول على توجيهات محددة، راجع الملف التكميلي 1.
      1. عند إنشاء درب رائحة واحدة، استخدم قسم داخلي في القاعدة لتقييد الوصول إلى الفضاء لtegu وضع رائحة. للحصول على توجيهات محددة، راجع الملف التكميلي 1.
      2. عندما يتم إيداع اثنين من مسارات رائحة من قبل الحيوانات المختلفة في تسلسل، واستخدام نظام من أقسام لمنع الأسلحة بالتناوب من المتاهة واستبعاد كل من أنصاف بالتناوب من القاعدة. للحصول على توجيهات محددة، راجع الملف التكميلي 1.
    5. استخدام صناديق للسماح بنقل وجمع الحيوانات المستخدمة في التجارب Y-المتاهة. تأكد من أن جميع الصناديق مبهمة ومزودة بأغطية قابلة للإزالة وأبواب أكريليك يمكن تأمينها بسهولة.
      1. تأكد من أن المربع الأساسي (109 سم L × 56 سم × 46 سم H) عند افتتاح قاعدة متاهة Y. استخدامه لنقل رائحة أو الحيوانات المحورية إلى المتاهة والتأقلم قبل فتح الباب والسماح بالوصول الطوعي للحيوانات في المتاهة.
      2. تأكد من أن صناديق الذراع (83 سم L × 50 سم W × 44 سم H) هي في نهايات المحطة الطرفية من أذرع المتاهة Y لتسهيل التقاط الحيوانات إما الرائحة أو التنسيق.
      3. للحصول على توجيهات محددة حول البناء والتجميع، راجع الملف التكميلي 1.
  2. إعداد الكاميرا لاكتساب الفيديو اليومي
    1. مواصفات الكاميرا: تأكد من أن كاميرات المشروع يمكنها تسجيل الفيديو المستمر في ظل ظروف الإضاءة المتغيرة ومناسبة للاستخدام في الهواء الطلق في ظل ظروف الحرارة والرطوبة السائدة.
      1. مع تركيب الكاميرا على الجانب السفلي من حاوية الدراسة ، تأكد من أنه يمكن التقاط متاهة Y بأكملها في مجال رؤية الكاميرا. اضبط العدسة أو ارتفاع الكاميرا لزيادة مجال الرؤية أو تقليله. عند تعيين مجال الرؤية، تأكد من إمكانية التقاط تفاصيل سلوكية كافية، مثل نقرات اللسان.
        ملاحظة: إذا تم إصلاح ارتفاع حاوية الدراسة (على سبيل المثال، 180 سم H) مما يحد من التعديلات على مجال الرؤية، يمكن استخدام كاميرات متعددة للحصول على تغطية كاملة من الداخل Y-المتاهة. تأكد من تعيين الكاميرات لتمكين "نطاق ديناميكي واسع" عند استخدامها في التطبيقات الخارجية.
    2. مواصفات الطاقة: تأكد من أن كل كاميرا لديها إمدادات طاقة كافية لتسجيل الفيديو المستمر طوال مدة التجربة المخطط لها (على سبيل المثال، استخدم مصدر طاقة غير قابل للانقطع (UPS) مع بطارية احتياطية مدمجة لضمان الطاقة المستمرة).
      ملاحظة: إذا لم يكن هناك مصدر طاقة التيار المتردد المتاحة، POE (السلطة عبر إيثرنت) الكاميرات يمكن أن تعمل بالطاقة عبر كابلات الشبكة متصلة مسجل الفيديو الرقمي (DVR) أو مفتاح POE حيث يتم استخدام مسجل فيديو الشبكة (NVR).
    3. مواصفات التسجيل: عند اختيار DVR أو NVR، تأكد من أنه يلبي متطلبات المشروع بما في ذلك سعة تخزين كافية وموصلات POE كافية (DVR) أو قنوات الكاميرا (NVR) لاستيعاب عدد الكاميرات المستخدمة. حدد معلمات التسجيل لتتناسب مع جودة الفيديو المطلوبة، مع الأخذ في الاعتبار حجم ملفات البيانات (على سبيل المثال، معدل ضغط H264 ومعدل صورة 10 إطارات في الثانية [FPS]).
    4. بروتوكول للحصول على الفيديو ومعالجته:
      1. ابدأ في تسجيل الفيديو من اللحظة التي يبدأ فيها الحيوان في دخول المتاهة إلى لحظة الالتقاط أو الإطار الزمني المحدد مسبقا (1.3.3.4).
      2. باستخدام البرامج التي يمكن تثبيتها على جهاز كمبيوتر واحد أو أكثر ويسمح بعرض الفيديو الحي أو المسجل ، وتصدير الملفات باستخدام تنسيق الفيديو المفضل.
      3. تأكد من تصدير نفس الوقت نافذة ومدة الفيديو لكل كاميرا تستخدم للسماح في وقت واحد استعراض يغذي متعددة.
      4. تأكد من تصدير البيانات بانتظام لأن العديد من الأنظمة سوف الكتابة فوق البيانات القديمة مع بيانات جديدة إذا كانت سعة تخزين الملفات DVR / NVR محدودة.
  3. بروتوكول لتشغيل الحيوانات التي تضع الرائحة
    1. تقييم التحيز
      1. قبل إجراء التجارب التجريبية، قم بتقييم متاهة Y للتحيز من خلال تجميع المتاهة، كما هو موضح أدناه، ولكن دون تقديم الرائحة على الورق. تأقلم الحيوان البؤري، وابدأ التجربة.
        ملاحظة: اعتمادا على تصميم الدراسة (على سبيل المثال، التدابير المتكررة باستخدام نفس الحيوانات البؤرية مقابل اختبار الحيوانات البؤرية الجديدة في كل مرة)، فإن تجارب التحيز ستثبت أن المتاهة نفسها، حسب التصميم، لا تحيز لاختيار محوري. تساهم العديد من العوامل في التحيز مثل الارتفاع وأشعة الشمس والعلامات البصرية.
      2. إذا لم تقم إعادة توجيه أو تعديل الجوانب المادية الأخرى للمتاهة بإزالة التحيز الجانبي ، فعشواية الذراع المخصصة لتلقي رائحة تجريبية في تجربة معينة.
        ملاحظة: على عدد محدد من التجارب، ينتج عن متاهة غير متحيزة احتمال اختيار 0.5 لأي من الذراعين، ويتم إجراء اختبار ثنائي الحدود(الشكل 2).
    2. إعداد المحاكمة وجمعية Y-maze
      1. ارتداء قفازات النتريل في جميع أنحاء عند التعامل مع أي الأسطح التي يمكن أن تستكشف الحيوان لتجنب التلوث رائحة. تغيير القفازات بين التجارب وضمن الإعداد للمحاكمة إذا يتم إنشاء مسارات رائحة متعددة.
      2. إعداد ورق جديد ونظيف للرائحة (ورق جزار أبيض، عرضه 61 سم كحد أدنى) على سطح نظيف. قطع إلى طول المناسبة بحيث ورقة لكل قسم يمكن أن تتداخل عند تقاطع Y وتمتد بعد نهايات القاعدة والذراعين لتناسب تحت مربعات.
      3. تمشيط الجزء السفلي من المتاهة ثم تغطية إما مع ورقة مباشرة أو مع طبقة الحدود بين الورق وأسفل (على سبيل المثال، الأغطية البلاستيكية) لتسهيل تنظيف إذا كان الحيوان يتغوط أو المسك في المتاهة.
      4. تأمين ورقة في مكان عن طريق ثقب ذلك مع البراغي النقل في الجزء السفلي، والعمل من نهاية واحدة إلى أخرى للحفاظ على سطح أملس. تداخل الأوراق عند التقاطع بحيث تكون الورقة الأساسية في الأعلى.
      5. وضع الجانبين من المتاهة في موقف على البراغي النقل، ولكن لا تأمين لهم إلى أسفل.
      6. أدخل القسم (الأقسام) اللازم لاختبار نوع التجربة وتأمينه (انظر التجربة ذات الرائحة المفردة 1.3.3 مقابل تجارب الرائحة المزدوجة 1.3.4).
      7. الشريحة قطع الاكريليك الأعلى إلى فتحات، وآمنة مع مسامير الرأس المسطحة.
      8. تأمين الجانبين إلى أسفل عن طريق تشديد المكسرات الجناح إلى البراغي النقل.
      9. وضع صناديق الذراع نظيفة في مكانها، وآمنة مع مسامير الإبهام. قم بتأمين غطاء الصندوق باستخدام روابط الكابلات. تأكد من إزالة الأبواب.
    3. تجارب ذات رائحة واحدة
      ملاحظة: الغرض من هذه التجارب هو تقديم درب رائحة واحدة في متاهة Y التي تمتد من القاعدة من خلال ذراع واحدة.
      1. قبل تركيب أعلى الاكريليك، تأمين القسم لمنع الذراع غير المعالجة. حدد الذراع المعطرة عشوائيا (على سبيل المثال، رمي العملة، مولد رقم عشوائي).
      2. ضع الحيوان الذي يضع الرائحة في صندوق القاعدة النظيف والجاف. تأمين غطاء مربع قاعدة (على سبيل المثال، العلاقات كابل، والبراغي) والباب (على سبيل المثال، المسمار الإبهام). نقل مربع عقد إلى الضميمة الدراسة، وتأمينه إلى نهاية قاعدة المتاهة Y مع مسامير الإبهام.
        ملاحظة: تأكد من أن باب المربع الأساسي في مكانه قبل تحميل الحيوان.
      3. تأقلم الحيوان في المربع لفترة ثابتة (على سبيل المثال، 60 دقيقة). إزالة باب مربع قاعدة، والسماح للحيوان لدخول المتاهة بحرية.
      4. مراقبة النشاط الحيواني عن بعد باستخدام تغذية الفيديو (انظر أدناه). بعد أن يسافر الحيوان من مربع القاعدة إلى صندوق الذراع ، قم بإزالة الحيوان من المتاهة مع اكتمال الرائحة.
        1. إذا كان الحيوان داخل أي مربع، إدراج وتأمين الباب القابلة للإزالة، وإزالة مربع، والعودة الحيوان إلى الضميمة.
        2. إذا عاد الحيوان إلى المتاهة، فانتظر بالقرب من المتاهة حتى يرى الحيوان وهو يعود إلى الصندوق، ثم أزل الصندوق.
          ملاحظة: السكوامات التبرز دفاعيا وخلق إشارات الإنذار التي تلوث رائحة يجري اختبارها، لذلك تجنب مذهلة الحيوان.
        3. إذا لم يعد الحيوان إلى صندوق ، فاقترب ببطء من المتاهة واستخدم الإشارات البصرية (على سبيل المثال ، التلويح اليدوي البطيء) لتشجيع الحيوان على الدخول إلى الصندوق ، ثم قم بإزالة الصندوق.
      5. تنظيف وتجفيف مربع الأساس (1.5.5).
      6. إذا حدث التغوط، وجمع واستيعاب قدر الإمكان مع منشفة ورقية، ولكن لا تمسح لمنع الانتشار.
      7. تفكيك جزئيا المتاهة للسماح إزالة القسم الداخلي، ومن ثم إعادة تجميع. تنظيف القسم (1.5.5).
      8. انتقل إلى القسم 1.4 للبروتوكول لتشغيل الحيوانات البؤرية.
    4. تجارب ذات رائحة مزدوجة
      ملاحظة: الغرض من هذه التجارب هو تقديم اثنين من مسارات رائحة مختلفة في وقت واحد في متاهة Y، مع كل من تشغيل من القاعدة من خلال ذراعكل منهما، اختار عشوائيا.
      1. قبل تركيب أعلى الاكريليك، وتأمين أقسام لمنع الذراع لم يتم اختيارها للرائحة الأولى ونصف القاعدة المقابلة للذراع المحظورة.
      2. اتبع الإجراءات الموضحة أعلاه لتجربة رائحة واحدة (1.3.3 إلى 1.3.3.8) باستثناء واحد. عند إزالة باب الاكريليك (1.3.3.3) ، أدخل باب نصف الحجم في الفتحة على الجانب الذي سيبقى مسدودا لضمان أن الحيوان المعطر يمكن أن يتحرك فقط في القسم المفتوح من المتاهة.
      3. تفكيك جزئيا المتاهة، وإزالة الأقسام، ونظيفة (1.5.5). الجافة مع مناشف نظيفة.
      4. إعادة تثبيت أقسام، ولكن الوجه لهم لمنع المنطقة المعطرة الآن من المتاهة. أعد تثبيت قمة الاكريليك.
      5. كرر الخطوة 1.3.4.2 للحيوان الثاني وضع الرائحة.
      6. تفكيك جزئيا المتاهة وإزالة الأقسام. إعادة تجميع المتاهة.
      7. انتقل إلى القسم 1.4 للبروتوكول لتشغيل الحيوانات البؤرية.
  4. بروتوكول لتشغيل الحيوانات المحورية خلال ساعات النهار
    1. اتبع الخطوات 1.3.3.2 إلى 1.3.3.3 مع الحيوان البؤري المخطط له في تلك التجربة.
    2. مراقبة النشاط الحيواني عن بعد باستخدام الفيديو. إذا كان يراقب أكثر من نافذة مجموعة من وقت الاستكشاف، بدء الموقت عندما خرج الحيوان تماما من مربع قاعدة.
    3. عند الانتهاء من التجربة، قم بإزالة الحيوان (1.3.3.4).
  5. انهيار وتنظيف
    1. فصل المربعات المتبقية من المتاهة وتفكيك جميع المربعات. ارتداء قفازات النتريل الطازجة في جميع أنحاء تفكيك والتنظيف.
    2. إزالة القطع الأعلى الاكريليك ووضعها جانبا في مكان آمن للتنظيف لتجنب الخدش أو تكسير. تأكد من تجنب خدش القطع عند إزالتها (يجب الحفاظ على مجال الرؤية الواضح لسلوك مراقبة الفيديو). تفكيك جانبي المتاهة ووضعها جانبا لتنظيف.
      ملاحظة: تقليل الخدوش وتدهور الأشعة فوق البنفسجية إلى مواد Y-maze عن طريق الاحتفاظ بها مظللة دائما.
    3. إزالة الورق (والبلاستيك) في حركة متسقة عن طريق المتداول عنه لتجنب تلوث القاع والتخلص منه.
    4. استخدم صابونا عديم الرائحة من الدرجة المختبرية وفرشاة فرك ناعمة أو أقمشة الألياف الدقيقة لتنظيف جميع أسطح قطع متاهة Y وجميع المربعات. تنظيف القطع العلوية الاكريليك والأبواب القابلة للإزالة مع نفس الصابون، ولكن مع الإسفنج الناعمة أو الملابس الألياف الدقيقة لمنع الخدش.
      ملاحظة: الإشارات الكيميائية المعروفة في الزواحف السكوامات هي مركبات قابلة للذوبان في الدهون، والغسيل مع المنظفات هو البروتوكول القياسي لتنظيف الإشارات الدهنية وغيرها من الروائح من الأجهزة القائمة على البوليمر في الدراسات الفقارية الأرضية11،12،21.
      ملاحظة: في التطبيقات الميدانية، قد تكون بروتوكولات الصرف الصحي مطلوبة. إذا كان الأمر كذلك، رش جميع الأسطح الداخلية للمتاهة (الكلمة والجدران والأقسام وقطع الاكريليك وصناديق) مع حل الصرف الصحي المناسب، والسماح لها الجلوس لمدة 10 دقيقة، ومن ثم مسح بقطعة قماش الألياف الدقيقة.
    5. شطف المكونات النظيفة بالماء عن طريق مسح الأسطح بمناشف نظيفة ورطبة، وتجنب السماح لبقايا الصابون بالجفاف قبل الشطف. لا تصب الماء في المتاهة.
    6. السماح للقطع للهواء الجاف أو بات لهم الجافة مع الملابس الألياف الدقيقة الطازجة.
    7. مرة واحدة جافة، وإعادة تجميع القطع المتاهة إذا تشغيل محاكمة أخرى على الفور.

2. إعداد Y-المتاهة وبروتوكول توقيت crepuscular للتجارب المسح الجيولوجي الأمريكي (USGS) بالتعاون مع دائرة المتنزهات الوطنية: اختبار عن بعد نسبيا من الثعابين البورمية البرية اشتعلت

ملاحظة: يتم توفير خطط لكافة مكونات المتاهة Y وبنية الاحتواء في الملف التكميلي 2.

  1. مكونات Y-maze والأساس المنطقي للتغييرات في تصميم وزارة الزراعة الأمريكية
    ملاحظة: تم تغيير متاهة Y الموصوفة بشكل كبير لتوسيع أنواع البحوث المحتملة وفي ظروف معزولة. تم زيادة العمق الرأسي لاستيعاب مجموعة متنوعة من الأنواع ، واستخدمت مواد وأساليب بناء مختلفة لتحسين المتانة والتنظيف في الهواء الطلق. انظر الشكل 1 للحصول على تصور للمتاهة المكتملة. للحصول على توجيهات محددة حول البناء والتجميع، راجع الملف التكميلي 2.
    1. قطع مكونات Y-المتاهة من البولي بروبلين الأبيض، والحرارة لحام جميع قطع القطع التي سيتم إصلاحها بشكل دائم (على سبيل المثال، متاهة أسفل والجدران الجانبية).
      1. مرساة الجزء السفلي من المتاهة Y (244 سم L × 122 سم W) مصنوعة من أوراق الخشب الرقائقي تثبيتها جنبا إلى جنب مع مسامير سطح السفينة، وإرفاقه عبر قوس زاوية الألومنيوم مثبتة على طول الجزء السفلي من الجدران الجانبية الخارجية للمتاهة.
      2. تأكد من أن قاعدة المتاهة Y هي 120 سم L × 42 سم W × 23 سم H، وأن كل جدار جانبي الذراع الخارجي هو 120 سم لتر، الجدار الجانبي الذراع الداخلي هو 108 سم لتر (لاتجاهات محددة، انظر الملف التكميلي 2).
      3. فتحة أعلى الاكريليك في مكان باستخدام زاوية الألومنيوم ثابتة على الجدران الجانبية مع مسامير كل 30 سم (لاتجاهات محددة، انظر الملف التكميلي 2).
        ملاحظة: مسامير وضعت على فترات منتظمة في الحافة العليا من الجدران الجانبية Y-المتاهة أيضا بمثابة علامات بصرية ثابتة عند تحليل الفيديو من التجارب وتوفير مقياس.
      4. تأكد من أن كل فتحة للمتاهة Y (القاعدة والذراعين) تحتوي على لوحة أساس إضافية (42 سم × 30 سم H) على نهاية الجدار الجانبي الذي يعلق على مربع بحيث إطارات لوحة الأساس فتحة مركزية (34 سم × 16 سم H؛ لاتجاهات محددة، انظر الملف التكميلي 2).
      5. استخدام قطعة التقسيم لتقييد الوصول إلى الحيوان المعطرة (للحصول على اتجاهات محددة، انظر الملف التكميلي 2). قم بتأمين لوحة حظر (46 سم × 22 سم ه) في مكانها باستخدام شريط السحاب. تثبيت القسم ولوحة باستخدام المرتجلة، والأوزان تنظيفها بسهولة (على سبيل المثال، إبريق من البلاستيك مليئة بالماء؛ 2.3.6؛ الشكل 1).
      6. تأكد من أن قطع الاكريليك تشكل الجزء العلوي من المتاهة (0.6 سم سميكة، واضحة). للحصول على توجيهات محددة، راجع الملف التكميلي 2.
    2. استخدام صناديق مبهمة مزودة باب انزلاق والأغطية التي يتم تأمينها بسهولة للسماح لنقل وجمع الحيوانات في التجارب Y-متاهة (الشكل 1).
      1. تعديل مربعات (21.6 سم لتر × 27.9 سم W) مع ثقوب استنزاف في الجزء السفلي، تناسب الأغطية مع مسامير صغيرة والمكسرات، وتوفير فتحة واحدة لingress / الخروج (الباب). للحصول على توجيهات محددة، راجع الملف التكميلي 2.
      2. ربط مربع إلى نهاية المتاهة Y عن طريق إرفاق لوحة الوجه مربع إلى لوحة الوجه Y-المتاهة باستخدام البراغي وwingnuts أو الأقفال.
        ملاحظة: عندما تكون في مكانها، ترسو المربعات أيضا على القطع العلوية من الأكريليك في مكانها.
  2. إعداد الكاميرا للحصول على الفيديو crepuscular: انظر الشكل 1 للحصول على لقطة من مجال الكاميرا للعرض.
    1. مواصفات الكاميرا: تأكد من أن كاميرا المشروع يمكن تسجيل الفيديو المستمر تحت ضوء متغير وظروف درجة الحرارة لاستيعاب أنواع الدراسة crepuscular و ليلية.
      1. مع كاميرا المشروع التي شنت على السقوف المتقاطعة من الضميمة، تأكد من أن كامل Y-المتاهة يمكن التقاطها داخل مجال الكاميرا للعرض. رفع أو خفض ارتفاع خيمة لزيادة أو تقليل مجال الرؤية (كاميرا المشروع التي شنت على ارتفاع ~ 3 م). تأكد من أن انعكاس ضوء الأشعة تحت الحمراء المنبعث من الكاميرا على قمة الاكريليك لا يحجب الأجزاء الحرجة من الإطارات في لقطات بين عشية وضحاها.
    2. مواصفات الطاقة: تأكد من أن كل كاميرا مشروع لديها إمدادات الطاقة الكافية لتسجيل الفيديو المستمر للتصوير بين عشية وضحاها (حوالي 20 ساعة).
      ملاحظة: إذا لم يكن هناك مصدر طاقة تيار متردد متاح، يمكن توفير الطاقة باستخدام بطاريات حمض الرصاص المغلقة ذات الدورة العميقة 12 فولت (على سبيل المثال، بطاريتين هلاميتين 12-V 20-Ah سلكيتين بالتوازي).
    3. مواصفات التسجيل: لتقليل حجم تخزين الملفات، سجل الفيديو الأقل جودة الذي لا يزال كافيا لتمكين عد نقرات اللسان في متاهة Y.
      ملاحظة: تتطلب اللقطات عالية الدقة وحدة تخزين كبيرة، ويعد خفض الدقة طريقة فعالة جدا لضمان أن أحجام الملفات يمكن التحكم فيها.
      1. الحد من معدل الإطارات (الإطارات في الثانية، FPS) لللقطات إلى الحد الأدنى اللازم للكشف عن نقرات اللسان (على سبيل المثال، دقة التسجيل 800 × 450 مع معدل إطارات أقصى يبلغ 25 إطارا في الثانية ينتج عنه حوالي.120 غيغابايت من اللقطات لكل تجربة).
    4. بروتوكول للحصول على الفيديو ومعالجته
      1. تسليح الكاميرا في بداية كل حدث الرائحة (2.3.10)، والسماح لها تسجيل باستمرار من خلال حتى نهاية الحدث المحوري (حوالي 20 ساعة).
      2. بعد اكتمال كل تجربة، قم بإيقاف تشغيل الكاميرا واسترجاع بطاقة SD (2.4.4). نقل لقطات إلى موقع التخزين المطلوب.
      3. كما بطاقات SD في كثير من الأحيان إجبار أجهزة التسجيل لتسجيل لقطات في مقاطع 5 دقائق، والجمع بين هذه المقاطع باستخدام برنامج معالجة الفيلم لسهولة المعالجة.
      4. راجع اللقطات باستخدام برنامج مراجعة ملف الوسائط الذي يسمح بسرعة تشغيل متغيرة وفواصل زمنية للأمام قابلة للتخصيص.
        ملاحظة: هذا يقلل وقت المراجعة من حوالي 20 ساعة إلى حد أقصى 1 ساعة إذا لم تكن الدقة الدقيقة مطلوبة أثناء معالجة الفيديو.
  3. بروتوكول لتشغيل الحيوانات التي تضع الرائحة
    ملاحظة: تستغرق الخطوات الواردة في هذا القسم حوالي 1.5 يوما لإكمالها بسبب فترات التكيف الأطول للزواحف البرية.
    1. انظر مقدمة التحيز في القسم 1.3.1 لضمان عدم وجود تحيز في المتاهة.
    2. ارتداء قفازات النتريل في جميع أنحاء عند التعامل مع أي أسطح أو دراسة الحيوانات لتجنب التلوث رائحة.
    3. ضع الحيوان المعطر أو البؤري في صندوقه قبل 24 ساعة على الأقل من التجربة للتأقلم.
      ملاحظة: لتقليل تأثيرات الإجهاد، يتم ترك المربع في منطقة مظللة أقرب إلى المتاهة قدر الإمكان دون أن يتم إزعاجه من قبل التنظيف أو الأنشطة الأخرى. تأكد من أن جميع الحيوانات التي تم اختبارها (الرائحة ، البؤرية) يتم تأقلمها بهذه الطريقة.
    4. إعداد ورق جديد ونظيف على سطح نظيف وطول كاف للتداخل عند تقاطع Y ، وتغطية السطح السفلي بأكمله (ورقتان ذراع = 121.9 سم ؛ ورقة أساس واحدة = 152.4 سم).
    5. تأمين نهايات الأوراق بالقرب من صناديق وY-تقاطع مع شريط اخفاء.
    6. تثبيت أقسام لمنع نصف الذراع الأساسية (الجانب الأيسر أو الأيمن) مع قسم طويل، ومنع مدخل الذراع المعاكس مع قسم قصير. عند تركيب الحواجز، لا مزق ورقة الرائحة. بالنسبة للحيوانات الكبيرة المعطرة، قم بلصق جسم ثقيل يمكن إزالته وتنظيفه بسهولة خلف الحاجز كدعامة لمنع فشل الحاجز (2.1.1.5).
      ملاحظة: يجب أن يبدأ درب الرائحة دائما على جانب واحد من القاعدة ، ثم يعبر إلى الذراع المقابل بحيث يكون اختيار الحيوان البؤري واضحا.
    7. حرك أعلى الاكريليك في مكانه، قسم واحد في وقت واحد، وتأكد من أن الزوايا تلبية تماما. استخدام الشريط البلاستيك واضحة لتغطية أي ثغرات.
    8. إرفاق كل من صناديق الذراع إلى المتاهة عن طريق ربط لوحات الوجه باستخدام wingnuts و / أو الأقفال، وضمان أن يتم تأمين الأبواب مفتوحة.
    9. قبل ساعتين من غروب الشمس، قم بإرفاق المربع الأساسي (الذي يحتوي على الحيوان المعطر)، وتأكد من أن جميع الحركات بطيئة وثابتة لتقليل الإجهاد إلى الحيوان.
    10. تسليح الكاميرا، وفتح الباب إلى مربع قاعدة، ويجري التأكد من أن مزلاج الباب في مكان باستخدام كل من أقفال الترباس برميل. البقاء بعيدا عن وجهة نظر الحيوان، والخروج من المنطقة.
    11. بعد 3 ساعة (1 ساعة بعد غروب الشمس)، لاحظ موقع الحيوان داخل المتاهة وكذلك الظروف المحيطة. إذا كان الحيوان في العبور، انتظر حتى يدخل مربع.
      1. إذا كان الحيوان في أي مربع، وإغلاق وتأمين باب الصندوق، وإزالة مربع، ومن ثم إزالة الحيوان، مع الحرص على منع ترسب رائحة دفاعية في المربع.
      2. إذا كان الحيوان بلا حراك داخل جسم المتاهة ، فاستخدم الإشارات البصرية (على سبيل المثال ، قضيب طويل أو لوح باليد) لتحفيز حركته في صندوق. إذا كان الحيوان لا يزال، وإزالة مربع الذراع (es) بحيث يمكن إزالة أعلى الاكريليك، ويمكن جمع الحيوان يدويا ونقلها إلى كيس.
        ملاحظة: معدات الحماية الشخصية المناسبة (PPE) دائما ما يتم ارتداؤها عند التعامل مع الحيوانات الكبيرة (مثل القفازات المقاومة للثقب وحماية العين).
    12. تفكيك جزئيا المتاهة للسماح إزالة الأقسام الداخلية (تجنب إزعاج ورقة رائحة) ومن ثم إعادة تجميع. إذا حدث التغوط، وجمع واستيعاب قدر الإمكان مع الملابس الألياف الدقيقة نظيفة، ولكن لا تغسل المنطقة.
    13. انتقل إلى القسم 2.4 للبروتوكول لتشغيل الحيوانات المحورية.
  4. بروتوكول لتشغيل الحيوانات البؤرية crepuscular
    ملاحظة: الخطوات في هذا المقطع سوف يستغرق حوالي 2 أيام لإكمال ويجب أن تبدأ في نفس الوقت تقريبا بدء المقطع 2.3.
    1. تأقلم الحيوان البؤري المجدول في الصندوق لمدة 24 ساعة على الأقل قبل تشغيله في متاهة.
      1. خلال الساعات الأخيرة من التأقلم البؤري للحيوانات، قم بتشغيل الحيوان الذي يضع الرائحة قبل الانتقال إلى الخطوة التالية (2.3.9).
        ملاحظة: الوقت خطوة زرع رائحة أقرب وقت ممكن إلى وقت إدخال الحيوان البؤري إلى المتاهة للحد من تدهور رائحة.
    2. إرفاق مربع قاعدة (تحتوي على الحيوان البؤري) باستخدام المكسرات الجناح و / أو الأقفال إلى قاعدة المتاهة Y. استخدام بطيئة، حركات ثابتة عند عقد / نقل مربع لتقليل التوتر إلى الحيوان البؤري.
      1. تأكد من أن كلا من أبواب صندوق الذراع مغلقة. بدء المحاكمة البؤرية عن طريق فتح وملتصق باب مربع قاعدة باستخدام البراغي برميل. البقاء بعيدا عن وجهة نظر الحيوان والخروج من المنطقة.
        ملاحظة: مع تجارب الزواحف الليلية البرية ، يتم إعطاء الحيوانات المحورية بين عشية وضحاها لاستكشاف المتاهة.
    3. بعد أربع ساعات من شروق الشمس، والعودة إلى المتاهة واتبع القسم 2.3.11.1 لإزالة الحيوان البؤري.
    4. جمع بطاقة SD الكاميرا وإعادة شحن البطاريات إذا لزم الأمر. تجاهل الورق المستعمل من المتاهة ثم انتقل إلى التنظيف (القسم 1.5).

figure-protocol-1
الشكل 1 - الأرقام 1- الأرقام 1 تخطيط متاهة USGS Y. على اليسار، يظهر التخطيطي مكونات متاهة Y مع شريط مقياس للمنظور. على اليمين، تظهر لقطة من كاميرا الفيديو مجال الرؤية للتسجيلات السلوكية. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

النتائج

يمكن تسجيل العديد من المتغيرات و/أو تسجيلها من تجارب Y-maze. وينبغي أن يكون تصميم الدراسة مدفوعا في المقام الأول بالنتائج/النتائج المرجوة. وعلاوة على ذلك، إذا كانت الدراسة تعتمد على تدابير متكررة (مثل الاستخدام المتكرر لنفس الحيوانات البؤرية)، فإن هناك حاجة إلى هياكل مناسبة للاختبار والتحليل. على سبيل المثال، بما أن تجارب وزارة الزراعة الأميركية اعتمدت على الاختبار المتكرر للتيغوس البؤري، فقد تم تخطيط التجارب التجريبية بشكل عشوائي تماما.

بيانات الاختيار: غالبية الدراسات باستخدام Y-mazes تقرير بيانات اختيار ثنائي بسيط وتحليل النتائج مع إحصاءات بارامترية مثل اختبار ثنائي الحدود. الحد الرئيسي هنا هو حجم العينة ، مما يؤثر بشكل مباشر على قوة أي تحليل إحصائي. في الشكل 2،يتم تصوير سلسلة من العتبات الإحصائية لكل حجم عينة دراسة توضح عدد "النجاحات" التي يجب أن تحدث لاختبار ثنائي الحدود معين لتحقيق نتائج ذات دلالة إحصائية. هذه مشتقة رياضيا وبالتالي قابلة للتعميم على أي اختبار Y-المتاهة. إحصاءات بينوميال سهلة لتوليد باستخدام مجانية على الانترنت. لحساب الاحتمالات، يتم استخدام التوزيعات ذات الذيل الواحد إذا تم إعطاء الأساس المنطقي المسبق؛ وإلا، يجب استخدام توزيع ذيلين.

غالبا ما يتم تحديد اختيار الذراع من خلال المسافة التي يتحرك بها الحيوان البؤري في ذراع معينة. أبسط طريقة لتعيين هذه العتبة هي عن طريق إنشاء معلم داخل المتاهة. بالنسبة لمعظم دراسات المتاهة Y، المعلم هو مدخل مربع الذراع. لأن الزواحف إجراء جميع التقييم الكيميائي الحسي مع أجهزة الاستشعار الكيميائية في المنطقة الأمامية من الرأس، والرأس هو النقطة المحورية خلال المحاكمة. على سبيل المثال ، لأن الثعابين البورمية غالبا ما تكون أطول من المتاهة بأكملها نفسها ، فإن الاختيار هو الأفضل والأكثر كفاءة تحدده حركة الرأس الماضي معلما بارزا. الخيارات الأخرى لتحديد الاختيار هي الوقت الذي يقضيه في الذراع والحركة الكاملة للحيوان البؤري في مربع. يتم تحديد الفشل من قبل محوري لا يتخذ خيارا في غضون فترة محددة.

يمكن اشتقاق المزيد من تحليلات الدقة الدقيقة من بيانات الاختيار في متاهة Y. على سبيل المثال ، يمكن للباحثين توليد درجة عقوبة الاختيار16. هنا ، يجب على الباحثين تتبع الدرجة التي استكشف بها الحيوان البؤري الذراع غير المستهدفة للمتاهة. يمكن تعريف عدم الهدف على أنه الذراع الذي يحدده الباحثون مسبقا بأن الحيوان البؤري لن يختار استنادا إلى الفرضية البديلة التي تم اختبارها. أبسط مثال على الذراع غير المستهدفة سيكون الذراع غير المعطر عندما يحتوي ذراع واحد فقط على رائحة الهدف. ومن الأمثلة الأكثر تعقيدا الاختيار بين اثنين من الروائح من نفس المصدر، ولكن قدمت بتركيزات مختلفة7. عندما يكون التصميم التجريبي متعدد المستويات و/أو عندما تتراوح البيانات من ثنائي إلى تدريجي، كما هو الحال مع عقوبة الاختيار، ينبغي استخدام نهج إحصائي مناسب مثل تحليل المقاييس المتكررة للتباين (ANOVA) أو الأساليب الأخرى المستخدمة مع مجموعات البيانات المستمرة أو المتناسبة.

السلوكيات: طوال مدة التجربة التي يتم فيها مراقبة الحيوانات البؤرية ، يمكن قياس مجموعة متنوعة من السلوكيات الفردية كميا. يمكن تحديد هذا العدد من المتغيرات إما قبل اعتمادا على ما هو معروف16 أو بعد مخصص بعد الملاحظات الأولية على مجموعة فرعية من البيانات14،15. تحدد أهداف الدراسة ودرجة دقتها التقييمات السلوكية التي يجب إجراؤها داخل المتاهة ، إن وجدت (أي ، في العديد من الدراسات ، يتم قياس بيانات الاختيار فقط17). يمكن تقييم السلوكيات في جميع أنحاء المتاهة، في أقسام، أو خلال فترات زمنية محددة. على سبيل المثال، قد تكون الأولوية السلوكيات ينظر فقط في قاعدة أو عند تقاطعالأسلحة 8. تسهل تسجيلات الفيديو تسجيل النقاط السلوكية، على الرغم من أنه يجب النظر في دقة الفيديو وطوله - العوامل التي تفرض قيودا على تخزين البيانات - قبل بدء التجريب.

المتغيرات الزمنية: كما هو الحال مع المتغيرات السلوكية ، يمكن قياس العديد من الجوانب الزمنية للأداء الحيواني خلال تجارب Y-maze. على سبيل المثال، يمكن للباحثين توقيت فترات الكمون (على سبيل المثال، الكمون للخروج من المربع8). ترتبط معظم المتغيرات الزمنية باستكشاف المتاهة مثل إجمالي الوقت أو الوقت الذي يقضيه في كل ذراع. عادة ما يتم تحليل هذه المتغيرات في تحليل متعدد العوامل مثل ANOVA متعددة الطرق.

تحيز المراقب: مع أي دراسات تنطوي على سلوك الحيوان ، والتحيز المراقب يؤثر بشكل كبير على جمع البيانات18. لذلك، يجب أن يكون المراقبون عميان عن العلاج الذي يتم اختباره. أبسط طريقة للقيام بذلك هي ترميز ملفات الفيديو رقميا ثم فرزها عشوائيا (على سبيل المثال ، مولد الأرقام العشوائي) قبل تعيينها للمراقبين. من الصعب التحكم في تحيز المراقبين عندما يكون جمع البيانات الحية هو الخيار الوحيد. وفي إطار ميداني، يتطلب ذلك تعاونين: مراقب أعمى عن العلاج ومنسق يقوم بإعداد التجربة. تلخص المراجعات الشاملة آثار تحيز المجرب على جمع البيانات وتفسيرها في الدراسات السلوكية والبيئية18و19.

figure-results-1
الشكل 2. أحجام العينة وقيم P للاختبارات الثنائية من نتائج Y-maze. يمثل كل حجم عينة معين عددا محددا من التجارب حيث يتم اختبار رائحة في ذراع واحدة من Y (الذراع المستهدفة) في حين أن الآخر يمكن أن يكون التحكم (غير الهدف). أعلى رقم فوق كل شريط هو واحد الذيل P-قيمة لهذا العدد من الخيارات الذراع الهدف، أسفل هو ذيلين. تمثل الأرقام الموجودة في الشريط العلوي الحد الأقصى لعدد الخيارات غير المستهدفة التي لا تزال ذات دلالة إحصائية تقليدية (P < 0.05). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الملف التكميلي 1. الرجاء الضغط هنا لتحميل هذا الملف. 

الملف التكميلي 2. الرجاء الضغط هنا لتحميل هذا الملف. 

المناقشة

في حين أن متاهات Y هي أدوات قوية للغاية للتحقيق في البيئة الكيميائية في الزواحف ، فإن تصميمها المحدود يمكن أن يحول دون سبل التحقيق الأخرى. ومع ذلك، مجموعة متنوعة من الخيارات الأخرىمتاحة 11،12،20،21،22. على سبيل المثال، المقايسات اللسان نفض الغبار هي أبسط لتنفيذ والسماح بتقييم متزامن للسلوكيات المعروضة على مجموعة من المحفزات الكيميائية بالنسبة للسيطرة على الروائح23،24،25،26. اختبارات الميدان المفتوح هي خيار آخر حيث يستكشف الحيوان البؤري بحرية الضميمة حتى يواجه مصدرا للإشارات الكيميائية ، ويتم تسجيل ردود فعله السلوكية لاحقا27،28. ويمكن أن تقيم توليفات من هذه النهج القدرات التمييزية للزواحف في سياقات مختلفة مثل تقديم مزيج من الروائح الاصطناعية والطبيعية جنبا إلى جنب مع refugia29. يمكن أيضا تعديل متاهات Y لتعريض الحيوانات للإشارات الكيميائية المحمولة جوا وحدها أو بالاشتراك مع الإشارات المحمولة على الركيزة16و30، ويمكن استخدام الاستدلال اللاحق لإعادة تصميم جمع البيانات إذا كانت بيانات الفيديو المؤرشفة متاحة31. وينبغي تصميم الأنظمة الحيوية لتبسيط جمع البيانات وتقليل المحفزات المتضاربة، لا سيما عندما يجري تقييم مصدر محدد للإشارات (مثل الإشارات الكيميائية21).

غالبا ما يراقب الباحثون في السلوك الحيواني الاستجابات الحيوانية المحورية في بيئات جديدة واصطناعية (على سبيل المثال، متاهة مغلقة ذات مناظر طبيعية عديمة المعالم)، وينبغي الحرص على تقييم ما إذا كان معين يظهر سلوكا طبيعيا واستكشافيا مقابل التجنب أو الهياج أو سلوكا حزينا مماثلا. ويعزى السلوك الحيواني المتعثر في الأجهزة التجريبية في المقام الأول إلى رهاب النيوفوبيا: الخوف من الجدة32. مثال على ذلك هو سلوك الهروب ، حيث يدفع الحيوان البؤري ضد المفاصل أو حواف الجهاز لتحقيق الخروج. مثال آخر هو الخجل ، حيث يظهر الحيوان البؤري التردد في دخول المتاهة ، والتي يمكن قياس درجة منها كميا عن طريق الكمون لدخول المتاهة. جهاز (إعادة) تصميم يمكن أن تسهل مشاركة الحيوان البؤري لتجنب هذه الآثار المحيرة من الضيق. النهج الأكثر شيوعا هو إدخال المتكررة من الحيوان البؤري للجهاز لإزالة الجدة للبيئة قبل بدء الاختبار، والنماذج الإحصائية المعاصرة (على سبيل المثال، نماذج مختلطة الخطية المعممة) تسمح للحيوانات اختبار لاستخدامها في تجارب متعددة. جانبا هاما ذات الصلة بالاعتبارات الإيكولوجية في الاختبار السلوكي هو أن يرتبط انخفاض رهاب النيوفوبيا مع نجاح الأنواع الغازية33. وهكذا، اعتمادا على معرفة مسبقة من الأنواع المعنية، قد يكون الخوف من الجدد أهمية متغيرة كنظر التصميم التجريبي.

يفرض الحصول على البيانات السلوكية من مقاطع الفيديو قيودا متعددة تصبح اختناقات رئيسية في الجداول الزمنية التجريبية. على سبيل المثال، يمكن أن يزيد طول التجربة المعطى من وقت استخراج البيانات بشكل كبير. الحل البديل هو تحليل السلوك فقط حتى يتم استيفاء عتبة (على سبيل المثال، إجمالي الوقت النشط). يمكن أن تستند العتبة إلى أطول فيديو متاح لتجربة معينة. وبدلا من ذلك، يمكن تطوير المراقبة الآلية (الذكاء الاصطناعي مثلا)، على الرغم من أن ذلك يستغرق وقتا طويلا ويتطلب جهدا كبيرا لمراقبة الجودة. وثمة مسألة أخرى هي إدارة البيانات: يجب أن تكون مقاطع الفيديو ذات جودة كافية لتمكين تسجيل النقاط والتقييم السلوكي، مما يؤدي إلى قيود على تخزين البيانات. في حين أن التخزين السحابي متاح الآن ، فإن معدلات التحميل / التنزيل غالبا ما تكون إشكالية ، خاصة عندما يحدث الحصول على البيانات في مواقع الحقول النائية. تظهر تحديات إضافية في قيود أدوات التسجيل التي تؤثر على سلامة الملاحظة السلوكية. من الضروري دائما مشاهدة سلوك الحيوان البؤري بشكل واضح ، ولكن الرؤية غالبا ما تعوقها عوامل لا يمكن السيطرة عليها (على سبيل المثال ، الرطوبة والحشرات وحركة الرياح). علاوة على ذلك ، عندما تأتي التسجيلات من منظور واحد (على سبيل المثال ، رؤية عين الطائر) ، يصعب تقييم السلوكيات التي تحدث في المستوى الرأسي (على سبيل المثال ، رفع الرأس14). الحل هو توفير زوايا الكاميرا متعددة لكل محاكمة. وأخيرا، يؤثر الوقت من اليوم بشكل كبير على التسجيل السلوكي. يتطلب التحليل السلوكي الليلي كاميرا مع وضع ليلي وإسقاط ضوء بسيط لتجنب الوهج الانسدادي على سطح متاهة Y أو جذب الحشرات التي يمكن أن تقطع تغذية الكاميرا. وبالنظر إلى ما سبق، فإن المعرفة المسبقة بموقع الدراسة أو بيولوجيا الأنواع يمكن أن تعلم القيود التي يحتمل أن تحدث مع أي تردد وبالتالي إبلاغ أحجام العينات المرغوبة.

ويقترن السلوك بإحكام مع علم وظائف الأعضاء، وقد ثبت فائدة Y-متاهات لتقييم الغدد الصماء السلوكية في مجموعة متنوعة من الأنواع. ومع ذلك، تؤكد هذه الورقة على بعض الاختلاف في تنفيذ هذه التجارب اعتمادا على الأنواع المستهدفة، والسؤال البحثي، والموارد المتاحة. ولذلك، ينبغي النظر بعناية في اختيار المواد والأبعاد لكل إعداد اختبار لتوسيع البحوث اللاحقة المحتملة. يصف القسم 2 التعديلات التي أجريت على المواد المبينة في القسم 1، والتي تم دمجها لاستيعاب التجارب السلوكية المستقبلية الأكثر تعقيدا مع tegus. وسيسمح العمق الرأسي المتزايد لمتاهات ايفرجليدز بالرد على أسئلة جديدة حول البيئة الكيميائية في تيغوس التي اشتعلت في البرية دون إطالة أمد تصميم المشروع وإعداده دون مبرر، مما يدل على إمكانية ترجمة هذا الجهاز التجريبي.

عند استخدام التقنيات المذكورة أعلاه في بيئة بعيدة نسبيا (انظر القسم 2)، هناك العديد من العوامل المقيدة التي يجب النظر فيها، وتخطيط المشاريع أمر بالغ الأهمية. اعتمادا على القوة الإحصائية اللازمة لتجربة العلاج الموصوفة والتوقيت البيولوجي للأنواع المستهدفة (على سبيل المثال، الموسمية)، ستتأثر الموارد والعمالة المطلوبة. علاوة على ذلك ، إذا كان الاستخدام الفردي أو المتكرر للحيوانات المحورية مرغوبا ، فمن الضروري إيلاء اهتمام دقيق للحد من الضغوطات المحتملة. كل من هذه العوامل إما تمديد الجدول الزمني للمشروع أو تتطلب زيادة العمالة والفضاء والمواد. على سبيل المثال، يعرض القسم 2 استخدام الثعابين الذكورية التي يتم صيدها في البرية كحيوانات محورية تتعقب مجموعة أخرى من الذكور الذين يتم صيدهم بالبراري والتلاعب بهم هرمونيا، وكلها تتطلب حوالي 24 ساعة من وقت التأقلم الهادئ في عقد صناديق لتقليل آثار الإجهاد. على الرغم من أن فترات التأقلم هذه مددت أوقات التجربة لأكثر من يومين ، إلا أن الإجهاد الناجم عن الأسر والمناولة يؤثر على سلوك الحيوانات البرية ويجب تقليله إلى الحد الأدنى لتوليد مجموعات بيانات نظيفة34و35.

وباختصار، فإن متاهات Y هي أدوات قوية وقابلة للتكيف يمكن استخدامها للتحقيق في البيئة الكيميائية للحياة البرية المتنوعة في ظل ظروف متغيرة على نطاق واسع، شريطة أن يكون هناك تخطيط مسبق يقظ. يجب النظر بعناية لاختيار الأسئلة المناسبة وتصميم الإعداد التجريبي المناسب لضرائب وشروط معينة. يمكن للباحثين والمديرين الاستفادة بشكل كبير من استخدام متاهات Y لفهم أفضل لبيولوجيا الحيوانات الكيميائية الحسية حيث تمكن هذه الأدوات التصاميم التجريبية المرنة التي توفر كميات كبيرة من البيانات السلوكية الدقيقة ، خاصة عندما يتم دمجها مع أدوات المراقبة عن بعد.

شكر وتقدير

تم دعم تطوير المتاهة Y الأولى من خلال اتفاقيات تعاونية (15-7412-1155-CA ، 16-7412-1269-CA ، و 17-7412-1318-CA) بين جامعة جيمس ماديسون (JMU) ودائرة فحص صحة الحيوان والنبات في وزارة الزراعة الأمريكية. تم تمويل تطوير متاهة Y في حديقة ايفرجليدز الوطنية من خلال اتفاق تعاوني (P18AC00760) بين JMU ودائرة المتنزهات الوطنية. نشكر ت. دين وب. فالك على تسهيلهما لهذا المشروع في ايفرجليدز NP والمساعدة في السماح والتمويل. نشكر و. كيلو على المساعدة في بناء متاهة USGS Y. وقدم جيم غرغوسا، ول. بونويل، و ر. ريد الدعم الإداري واللوجستي. نشكر المراجعين المجهولين اللذين قدموا تعليقات مفيدة. تم توفير التمويل لعمل Everglades والدعم العيني من قبل هيئة المسح الجيولوجي الأمريكية (USGS) برنامج علوم النظام الإيكولوجي الأكثر أولوية في Everglades ، وخدمة المتنزهات الوطنية (P18PG00352) ، وبرنامج الأنواع الغازية USGS. أي استخدام لأسماء التجارة أو الشركات أو المنتجات هو لأغراض وصفية فقط ولا يعني موافقة حكومة الولايات المتحدة. لم يتم نشر النتائج والاستنتاجات الواردة في هذا المنشور رسميا من قبل وزارة الزراعة الأمريكية ولا ينبغي تفسيرها على أنها تمثل تصميم وزارة الزراعة أو سياستها.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
1 "دعامة زاوية مطلية بالزنك الصلبEverbilt ، The Home Depot13619انظر الملف التكميلي 1 ، الخطوة 2.1 "دعامة زاوية فولاذية 90 درجة 2.5 سم"
121.92 سم عرض × 304.8 سم & nbsp ؛ L × 1.27 سم ارتفاع البولي بروبيلين الأبيض المدى الممتد لوح UHMW عالي الحرارةTIVARUHMNV SHانظر "2.1. مكونات المتاهة Y والأساس المنطقي للتغييرات في تصميم وزارة الزراعة الأمريكية "(الخطوة 2.1.1. "بولبروبيلين أبيض")
182.88 سم طول × 81.28 سم عرض × 0.64 سم 32032550912090 زجاج شبكي من ألواح الأكريليك الشفافة السميكةانظر "2.1. مكونات المتاهة Y والأساس المنطقي للتغييرات في تصميم وزارة الزراعة الأمريكية "(الخطوة 2.1.1.6. "قطع الأكريليك")
2.54 سم العرض × 2.54 سم الارتفاع × 243.84 سم L الألومنيوم ذو الزاويةالصلبة للصلب11354انظر "2.1. مكونات المتاهة Y والأساس المنطقي للتغييرات في تصميم وزارة الزراعة الأمريكية "(الخطوة 2.1.1.1. "قوس زاوية الألومنيوم")
بكرة 4.5 كجم من قضبان لحام البولي بروبلين المستديرة مقاس 5 ممHotAirToolsAS-PP5N10انظر "2.1. مكونات المتاهة Y والأساس المنطقي للتغييرات في تصميم وزارة الزراعة الأمريكية "(الخطوة 2.1.1. "اللحام الحراري")
مم مسامير الألومنيوم العاديالسهمRLA3 / 16IPانظر "2.1. مكونات المتاهة Y والأساس المنطقي للتغييرات في تصميم وزارة الزراعة الأمريكية "(الخطوة 2.1.1.1. "البرشام")
زاوية الألومنيوم ، 1.9 سمإيفربيلت ، 802527 هوم ديبوتانظر الملف التكميلي 1 ، الخطوة 1.2 "زاوية الألومنيوم (1.9 سم × 1.9 سم × 0.16 سم سميك)"
زاوية الألومنيوم ، 2.5 سمإيفربيلت ، هومديبوت 800057انظر الملف التكميلي 1 ، الخطوتان 1.2 و 2.2.2 "زاوية الألومنيوم (2.5 سم × 2.5 سم × 0.16 سم) "
زاوية الألومنيوم ، 3.2 سمإيفربيلت ، 800037 هوم ديبوتانظر الملف التكميلي 1 ، الخطوة 1.2 "زاوية الألومنيوم (3.2 سم × 3.2 سم × 0.16 سم سميكة) "
قضيب مسطح من الألومنيوم 1 بوصة × 1/8 بوصةإيفربيلت ، 801927 هوم ديبوتانظر الملف التكميلي 1 ، الخطوة 3.2.1 "حزام الألومنيوم"
أفيجيلون 2.0 النائب الكاميراأفيجيلون, شركة موتورولا سوليوشنز2.0C-H4SL-BO1-IRانظر "1.5 إعداد الكاميرا والحصول على الفيديو" (الخطوة 1.5.1 "أفيجيلون 2.0 النائب")
أفيجيلون NVRأفيجيلون, شركة موتورولا سوليوشنزHD-NVR3-VAL-6TB-NAانظر "1.5 إعداد الكاميرا والحصول على الفيديو" (الخطوة 1.5.3 "NVR")
لوح أكريليك شفاف (سمك 5.6 مم) شركةبلاستيك الولايات المتحدة.44363انظر الملف التكميلي 1 ، الخطوة 1.3 "لوح أكريليك شفاف" والخطوة 3.2.1 "باب أكريليك شفاف"
فوهة لحام فيليه 3/16 بوصة × 15/32 بوصة / 4.5 × 12 ممTRIAC107.139انظر "2.1. مكونات المتاهة Y والأساس المنطقي للتغييرات في تصميم وزارة الزراعة الأمريكية "(الخطوة 2.1.1. "اللحام الحراري") صندوق
مجلد الملفات المعلق18689004 التعقيمانظر "2.1. مكونات المتاهة Y والأساس المنطقي للتغييرات في تصميم وزارة الزراعة الأمريكية "(الخطوة 2.1.2.1. "الصناديق")
HardiePanel HZ10James Hardie Building Products9000525انظر الملف التكميلي 1 ، الخطوة 1.1 "انحياز الأسمنت الليفي"
مسدس اللحام الحراريTRIAC141.227انظر "2.1. مكونات المتاهة Y والأساس المنطقي للتغييرات في تصميم وزارة الزراعة الأمريكية "(الخطوة 2.1.1. "اللحام الحراري")
لفة ورق جزار كرافت ، 24 بوصةBryco Goods24 بوصة × 175 قدماانظر "بروتوكول 1.2 لتشغيل تيجوس لوضع الرائحة" (الخطوة 1.2.1.2 "ورق الجزار") لفة
ورق جزار كرافت ، بعرض 46 سمBryco GoodsBGKW2100انظر "2-3. بروتوكول لتشغيل الثعابين التي تضع الرائحة" (الخطوة 2.3.4. "ورق الرائحة")
محلول التنظيف المركز Micro-90 شركة المنتجات الدوليةM-9050-12انظر "1.4 الانهيار والتنظيف" (الخطوة 1.4.4 "صابون من الدرجة المختبرية") MKV
ToolNix - أدوات Matroska لنظام التشغيل Linux / Unix و WindowsMoritz Bunkusv.48.0.0انظر "2.2. إعداد الكاميرا والحصول على الفيديو" (الخطوة 2.2.4.2. "برنامج معالجة الأفلام")
محوركاميراالشبكة M3104-LVEانظر "2.2. إعداد الكاميرا والحصول على الفيديو" (الخطوة 2.2.1. "كاميرا المشروع")
مشروع العرضPVC 1/4 بوصة159841 بالرامانظر "2.1. مكونات المتاهة Y والأساس المنطقي للتغييرات في تصميم وزارة الزراعة الأمريكية "(الخطوة 2.1.2.3. "الواجهة ")
مشروع Palight PVC 1/8 "Palram 156249انظر "2.1. مكونات المتاهة Y والأساس المنطقي للتغييرات في تصميم وزارة الزراعة الأمريكية "(الخطوة 2.1.2.1. "الباب")
الزجاج الأمامي للخصوصية (أخضر)MacGregorليناسبانظر الملف التكميلي 1 ، الخطوة 4.2 "قماش الظل الأخضر شديد التحمل"
قفاز واقي ، ذراع بإصبعكاملأو يدHS1010-RGXLانظر "2.3. بروتوكول لتشغيل الثعابين التي تضع الرائحة" (الخطوة 2.3.11.2. ملاحظة: "قفاز مقاوم للثقب")
مطهر REScueVirox Animal Health44176انظر "1.5. الانهيار والتنظيف." (الخطوة 1.5.4. ملاحظة "حل الصرف الصحي")
تقليم PVC القابل للانعكاس ، 1/2 بوصة × 24 بوصةUFP Industries ،منتجات الشرفة الأرضيةH120XWS17 انظر الملف التكميلي 1 ، الخطوة 2.1 "قسم الألواح البلاستيكية" ، والخطوة 3.2.1 "ألواح تقليم PVC الرقيقة"
S4S / Veranda HP TRIMUFP INDUSTRIES ، منتجات الشرفةH190OWS4انظر الملف التكميلي 1 ، الخطوات 1.2 و 2.2.2 و 2.2.3 "لوحة PVC"
S4S / Veranda HP TRIM (1 × 8 بوصة اسمي)UFP Industries ، منتجات الشرفةالأرضية 827000005انظر الملف التكميلي 1 ، الخطوات 3.2.1 "لوحة تقليم PVC"
سكوتش بلو 24 بوصة. رسام مسجل مسبقا s بلاستيك3MPTD2093EL-24-Sانظر "بروتوكول 1.2 لتشغيل تيجوس لوضع الرائحة" (الخطوة 1.2.1.3 "الأغطية البلاستيكية") صندوق
حمل معقم سعة 114 لتراشركة SteriliteCompany 1919 ، فولاذانظر الملف التكميلي 1 ، الخطوة 3.2 "صندوق الذراع"
صندوق حمل Sterilite 189 LSterilite Company1849 ، التيتانيومانظر الملف التكميلي 1 ، الخطوة 3.2 "صندوق القاعدة"
Super Max CanopyShelterLogic25773انظر الملف التكميلي 1 ، الخطوة 4.3 "المظلة البيضاء"
VLC Media Player   ؛VideoLANv.3.0.11انظر "2.2. إعداد الكاميرا والحصول على الفيديو" (الخطوة 2.2.4.3. "برنامج مراجعة ملفات الوسائط")White
Pavilion TentKing CanopyBJ2PCانظر الملف الملحقة 2 "3. مواد الضميمة والاعتبارات" (الخطوة 3. "خيمة الجناح")
5 اتصالات حجم

المراجع

  1. Fine, J. M., Vrieze, L. A., Sorensen, P. W. Evidence that petromyzontid lampreys employ a common migratory pheromone that is partially comprised of bile acids. Journal of Chemical Ecology. 30 (11), 2091-2110 (2004).
  2. Hesse, S., Bakker, T. C., Baldauf, S. A., Thünken, T. Kin recognition by phenotype matching is family-rather than self-referential in juvenile cichlid fish. Animal Behaviour. 84 (2), 451-457 (2012).
  3. Forester, D. C., Wisnieski, A. The significance of airborne olfactory cues to the recognition of home area by the dart-poison frog pumilio. Journal of Herpetology. 25 (4), 502-504 (1991).
  4. Khannoon, E. R., El-Gendy, A., Hardege, J. D. Scent marking pheromones in lizards: cholesterol and long chain alcohols elicit avoidance and aggression in male Acanthodactylus boskianus (Squamata: Lacertidae). Chemoecology. 21 (3), 143-149 (2011).
  5. Parker, M. R., Mason, R. T. How to make a sexy snake: estrogen activation of female sex pheromone in male red-sided garter snakes. Journal of Experimental Biology. 215 (5), 723-730 (2012).
  6. Wyatt, T. D. Pheromones and animal behavior: chemical signals and signatures. , Cambridge University Press. (2014).
  7. Smith, T. L., Bevelander, G. S., Kardong, K. V. Influence of prey odor concentration on the poststrike trailing behavior of the Northern Pacific Rattlesnake. Herpetologica. 61 (2), 111-115 (2005).
  8. Yosuke, K., Akira, M. Active foraging for toxic prey during gestation in a snake with maternal provisioning of sequestered chemical defences. Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences. 282, 20142137(2015).
  9. Parker, M. R., Kardong, K. V. The role of airborne and substrate cues from non-envenomated mice during rattlesnake (Crotalus oreganus) post-strike trailing. Herpetologica. 61 (4), 349-356 (2006).
  10. Bezzina, C. N., Amiel, J. J., Shine, R. Does invasion success reflect superior cognitive ability? A case study of two congeneric lizard species (Lampropholis, Scincidae). PLoS ONE. 9 (1), 86271(2014).
  11. Mason, R. T., Parker, M. R. Social behavior and pheromonal communication in reptiles. Journal of Comparative Physiology A. 196 (10), 729-749 (2010).
  12. Parker, M. R., Mason, R. T. Pheromones in snakes: history, patterns and future research directions. Reproductive Biology and Phylogeny of Snakes. Aldridge, R. D., Sever, D. M. , CRC Press. 563-584 (2011).
  13. Greene, M. J., Stark, S. L., Mason, R. T. Pheromone trailing behavior of the brown tree snake, irregularis. Journal of Chemical Ecology. 27 (11), 2193-2201 (2001).
  14. Richard, S. A., Tillman, E. A., Humphrey, J. S., Avery, M. L., Parker, M. R. Male Burmese pythons follow female scent trails and show sex-specific behaviors. Integrative Zoology. 14 (5), 460-469 (2019).
  15. Richard, S. A., et al. Conspecific chemical cues facilitate mate trailing by invasive Argentine black and white tegus. PLoS ONE. 15 (8), 0236660(2020).
  16. Parker, M. R., Kardong, K. V. Airborne chemical information and context-dependent post-strike foraging behavior in Pacific Rattlesnakes (Crotalus oreganus). Copeia. 105 (4), 649-656 (2017).
  17. Lutterschmidt, D. I., Maine, A. R. Sex or candy? Neuroendocrine regulation of the seasonal transition from courtship to feeding behavior in male red-sided garter snakes (Thamnophis sirtalis parietalis). Hormones and Behavior. 66 (1), 120-134 (2014).
  18. Burghardt, G. M., et al. Perspectives-minimizing observer bias in behavioral studies: a review and recommendations. Ethology. 118 (6), 511-517 (2012).
  19. Holman, L., Head, M. L., Lanfear, R., Jennions, M. D. Evidence of experimental bias in the life sciences: why we need blind data recording. PLoS Biology. 13 (7), 1002190(2015).
  20. Mason, R. T. Reptilian pheromones. Biology of the Reptilia: Hormones, brain, and behavior. Gans, C., Crews, D. 18, University of Chicago Press. 114(1992).
  21. Mason, R. T., Chivers, D. P., Mathis, A., Blaustein, A. R. Bioassay methods for amphibians and reptiles. Methods in Chemical Ecology. Haynes, K. F., Millar, J. G. 2, Springer Science & Business Media. 271-325 (1998).
  22. Martín, J., López, P. Pheromones and chemical communication in lizards. Reproductive biology and phylogeny of lizards and tuatara. Rheubert, J. L., Siegel, D. S., Trauth, S. E. , CRC Press. 43-77 (2014).
  23. Smith, K. P., Parker, M. R., Bien, W. F. Behavioral variation in prey odor responses in northern pine snake neonates and adults. Chemoecology. 25 (5), 233-242 (2015).
  24. Parker, M. R., Patel, S. M., Zachry, J. E., Kimball, B. A. Feminization of male Brown Treesnake methyl ketone expression via steroid hormone manipulation. Journal of Chemical Ecology. 44 (2), 189-197 (2018).
  25. Cooper, W. E. Evaluation of swab and related tests as a bioassay for assessing responses by squamate reptiles to chemical stimuli. Journal of Chemical Ecology. 24 (5), 841-866 (1998).
  26. Goetz, S. M., Godwin, J. C., Hoffman, M., Antonio, F., Steen, D. A. Eastern indigo snakes exhibit an innate response to pit viper scent and an ontogenetic shift in their response to mouse scent. Herpetologica. 74 (2), 152-158 (2018).
  27. Clark, R. W. Timber rattlesnakes (Crotalus horridus) use chemical cues to select ambush sites. Journal of Chemical Ecology. 30 (3), 607-617 (2004).
  28. Martín, J., López, P. Supplementation of male pheromone on rock substrates attracts female rock lizards to the territories of males: a field experiment. PLoS ONE. 7 (1), 30108(2012).
  29. Downes, S., Shine, R. Sedentary snakes and gullible geckos: predator-prey coevolution in nocturnal rock-dwelling reptiles. Animal Behaviour. 55 (5), 1373-1385 (1998).
  30. Parker, M. R., Kardong, K. V. Rattlesnakes can use airborne cues during post-strike prey relocation. Chemical Signals in Vertebrates 10. LeMaster, M. P., Mason, R. T., Muller-Schwarze, D. , Springer. 397-402 (2005).
  31. Parker, M. R., Young, B. A., Kardong, K. V. The forked tongue and edge detection in snakes (Crotalus oreganus): an experimental test. Journal of Comparative Psychology. 122 (1), 35-40 (2008).
  32. Greggor, A. L., Thornton, A., Clayton, N. S. Neophobia is not only avoidance: improving neophobia tests by combining cognition and ecology. Current Opinion in Behavioral Sciences. 6, 82-89 (2015).
  33. Candler, S., Bernal, X. E. Differences in neophobia between cane toads from introduced and native populations. Behavioral Ecology. 26 (1), 97-104 (2015).
  34. Currylow, A. F., Louis, E. E., Crocker, D. E. Stress response to handling is short lived but may reflect personalities in a wild, Critically Endangered tortoise species. Conservation Physiology. 5 (1), (2017).
  35. Currylow, A. F., et al. Comparative ecophysiology of a critically endangered (CR) ectotherm: Implications for conservation management. PLoS ONE. 12 (8), 0182004(2017).

إعادة الطباعة والأذونات

تصحيح


Formal Correction: Erratum: Using Enclosed Y-Mazes to Assess Chemosensory Behavior in Reptiles
Posted by JoVE Editors on 7/27/2021. Citeable Link.

An erratum was issued for: Using Enclosed Y-Mazes to Assess Chemosensory Behavior in Reptiles. An author name was updated.

The name of the tenth author was updated from:

Amy Y. Yackel Adams

to

Amy A. Yackel Adams

الوسوم

متاهة Yسلوك الزواحفأثر الرائحةالاختيار الثنائيالتحليل السلوكيتسجيل الفيديوتعمية الملاحظالجهاز التجريبيتحليل البيانات
استخدام المغلقة Y-متاهات لتقييم السلوك الكيميائي الحسي في الزواحف
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.