الهدف من هذه المخطوطة هو تقديم طريقة تعتمد على السونوغرافيا تسمح في التصوير الحي لتدفق الدم في الشرايين الدماغية في الفئران. نحن نظهر تطبيقه لتحديد التغيرات في سرعات تدفق الدم المرتبطة vasospasm في نماذج مورين من نزيف تحت العنكبوتية (SAH).
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
الهدف من هذه المخطوطة هو تقديم طريقة تعتمد على السونوغرافيا تسمح في التصوير الحي لتدفق الدم في الشرايين الدماغية في الفئران. نحن نظهر تطبيقه لتحديد التغيرات في سرعات تدفق الدم المرتبطة vasospasm في نماذج مورين من نزيف تحت العنكبوتية (SAH).
توسع الأوعية الدماغية الذي يحدث في الأسابيع التي تلت بعد نزيف تحت العنكبوتية, نوع من السكتة الدماغية النزفية, يساهم في تأخر نقص التروية الدماغية. مشكلة واجهت في الدراسات التجريبية باستخدام نماذج مورين من SAH هو أن أساليب الرصد في الجسم الحي من vasospasm الدماغي في الفئران تفتقر. هنا، ونحن نظهر تطبيق الموجات فوق الصوتية عالية التردد لإجراء فحوص السونوغرافيا المزدوجة عبر الجمجمة على الفئران. باستخدام هذه الطريقة، يمكن التعرف على الشرايين السباتية الداخلية (ICA). تسارعت سرعات تدفق الدم في ICAs داخل الجمجمة بشكل كبير بعد تحريض SAH ، في حين ظلت سرعات تدفق الدم في ICAs خارج الجمجمة منخفضة ، مما يشير إلى زيادة الأوعية الدماغية. في الختام، فإن الطريقة التي أظهرت هنا يسمح وظيفية، غير الباضعة في رصد الجسم الحي من vasospasm الدماغي في نموذج SAH مورين.
نزيف تحت العنكبوتية العفوي (SAH) هو شكل من أشكال السكتة الدماغية النزفية الناجمة في الغالب عن تمزق تمدد الأوعية الدموية داخل الجمجمة1. تتأثر النتيجة العصبية بشكل رئيسي بعاملين: إصابة الدماغ المبكرة (EBI) ، والتي تسببها آثار النزيف وما يرتبط به من نقص التروية الدماغية الدماغية العالمية العابرة ، وتأخر نقص التروية الدماغية (DCI) ، والذي يحدث خلال الأسابيع التالية للنزيف2،3. وأفادت التقارير DCI تؤثر على ما يصل إلى 30٪ من المرضى SAH2. الفيزيولوجيا المرضية من DCI ينطوي على الأوعية الدموية الدماغية، دوران الأوعية الدقيقة المضطربة الناجمة عن microvasospasms وmicrothrombosis، والاكتئاب انتشار القشرية، والآثار الناجمة عن التهاب4. لسوء الحظ، لا يزال الفيزيولوجيا المرضية الدقيقة غير واضحة ولا يوجد علاج متاح يمنع بشكل فعال DCI3. لذلك، يتم التحقيق DCI في العديد من الدراسات السريرية والتجريبية.
في الوقت الحاضر، معظم الدراسات التجريبية على SAH استخدام نماذج الحيوانات الصغيرة، وخاصة في الفئران5،6،7،8،9،10،11،12،13. في مثل هذه الدراسات، يتم التحقيق في كثير من الأحيان فصام الأوعية الدماغي كنقطة نهاية. ومن الشائع تحديد درجة من vasospasm ex vivo. وذلك لأن الأساليب غير الباضعة لفحص الأوعية الدموية الدماغية في الجسم الحي التي تتطلب وقتا قصيرا للتخدير وفرض القليل من الضيق على الحيوانات غير موجودة. ومع ذلك ، فإن فحص الأوعية الدموية الدماغية في الجسم الحي سيكون مفيدا. وذلك لأنه سيسمح الطولية في الدراسات الحية على vasospasm في الفئران (أي تصوير الأوعية الدموية الدماغية في نقاط زمنية مختلفة خلال الأيام التي تلت تحريض SAH). ومن شأن ذلك أن يعزز إمكانية مقارنة البيانات المكتسبة في نقاط زمنية مختلفة. وعلاوة على ذلك، فإن استخدام تصميم دراسة طولية هو استراتيجية للحد من أعداد الحيوانات.
هنا نحن نثبت استخدام الموجات فوق الصوتية عبر الجمجمة عالية التردد لتحديد تدفق الدم في الشرايين الدماغية في الفئران. نظهر أنه ، على غرار السونوغرافيا دوبلر عبر الجمجمة (TCD) أو السونوغرافيا المزدوجة المرمزة بالألوان عبر الجمجمة (TCCD) في الممارسة السريرية14و15و16و17و18، يمكن استخدام هذه الطريقة لمراقبة انسداد الأوعية الدماغية عن طريق قياس سرعات تدفق الدم للشرايين داخل الجمجمة بعد تحريض SAH في نموذج المورين.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت الموافقة على التجارب الحيوانية من قبل لجنة رعاية الحيوان المسؤولة (Landesuntersuchungsamt راينلاند-بفالز) وأجريت وفقا لقانون رعاية الحيوان الألماني (TierSchG). واتبعت جميع المبادئ التوجيهية الدولية والوطنية والمؤسسية المعمول بها لرعاية الحيوانات واستخدامها. في هذه الدراسة، قمنا بإجراء قياسات لسرعات تدفق الدم من الشرايين داخل الجمجمة وخارج الجمجمة في الفئران C57BL/6N الإناث الذين تتراوح أعمارهم بين 11-12 أسبوعا مع وزن الجسم بين 19-21 غرام. الفئران تعرضت إما لتحريض SAH أو جراحة صورية ، والتي تم وصفها بالتفصيل في مكان آخر10،12،13.
1. إعداد المواد
2. التخدير
3. تحديد سرعات تدفق الدم من الشرايين السباتية الداخلية داخل الجمجمة مع السونوغرافيا المزدوجة عبر الجمجمة عالية التردد
4. تحديد سرعات تدفق الدم من الشرايين السباتية الداخلية خارج الجمجمة مع السونوغرافيا المزدوجة عالية التردد
5. معالجة بيانات التصوير التكسوني الفائق
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في 6 فئران، تم حث 3 منها SAH باستخدام نموذج ثقب خيوط الأوعية الدموية الداخلية في حين حصل 3 على جراحة صورية، وتم تحديد سرعات تدفق الدم في الشريان السباتي الداخلي داخل الجمجمة (ICA) وICA خارج الجمجمة قبل يوم واحد من الجراحة، وبعد 1 و 3 و 7 أيام من الجراحة. تم إجراء القياسات كجزء من فحوصات تخطيط صدى القلب لدراسة أخرى تحت التخدير مع isoflurane مع الحفاظ على درجة حرارة الجسم عند 37 درجة مئوية19.
قبل الجراحة، كانت سرعات تدفق الدم خارج وداخل الجمجمة، وكذلك حاصلات تدفق الدم داخ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
على حد علمنا، هذه الدراسة هي الأولى لتقديم بروتوكول لرصد vasospasm الدماغي في نموذج مورين من SAH مع ارتفاع وتيرة عبر الجمجمة اللون المرمزة الموجات فوق الصوتية المزدوجة. نظهر أن هذه الطريقة يمكن قياس زيادة في سرعات تدفق الدم داخل الجمجمة بعد التعريفي SAH في الفئران. في الطب البشري هذه الظاهرة معروفةجيدا 3،15. وقد أظهرت العديد من الدراسات السريرية أن ارتفاع سرعات تدفق الدم من الشرايين داخل الجمجمة الكبيرة و حاصل مرتفع من سرعات تدفق الدم داخل وخارج الجمجمة هي نتيجة ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ولا يعلن صاحبا البلاغ عن وجود مصالح متنافسة.
ويود المؤلفان أن يشكرا ستيفان كيندل على إعداد الرسوم التوضيحية في الفيديو. وقد تم دعم PW وMM وSHK من قبل الوزارة الاتحادية الألمانية للتعليم والبحث (BMBF 01EO1503). وقد تم دعم العمل بمنحة كبيرة للأجهزة من مؤسسة البحوث الألمانية (DFG INST 371/47-1 FUGG). وقد تم دعم MM بمنحة من ال Else Kröner-Fresenius-Stiftung (2020_EKEA.144).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| باليا كريم إزالة الشعر | باليا. ألمانيا | ASIN B0759XM39V | كريم إزالة الشعر |
| C57BL / 6N الفئران | Janvier ؛ Saint-Berthevin Cedex, France | n.a.mice | |
| Corneregel | Bausch& لومب. روتشستر ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية | المرجع | مرهم العين ، |
| مسحات قطن التشحيم | Hecht Assistent ؛ Sondenheim vor der Rö hn ، ألمانيا | REF 44302010 | مسحات القطن |
| Ecco-XS ماكينة حلاقة | Tondeo. سوليجن ، ألمانيا | DE 28693396 | القطب الكهربائي الحلاقة |
| GE ؛ بوسطن ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية | المرجع | معجون موصل | |
| لوحة تسخين | Medax ؛ Kiel, Germany | 2005-205-01 | |
| Isoflurane | Abvie; فيسبادن ، ألمانيا | n.a.التخدير | المتطاير |
| Leukofix | BSN الطبية. هامبورغ ، ألمانيا | REF 02137-00 | شريط |
| ذراع ميكانيكي + معالج دقيق | VisualSonics ؛ فوجي فيلم ، تورنتو ، كاليفورنيا | P / N 11277 | |
| أنسجة ميكروباك | بول هارتمان إيه جي ؛ هامبورغ ، ألمانيا | REF 981387 | الأنسجة المضادة للميكروبات |
| MZ400 ، محول صفيف خطي 38 ميجاهرتز | VisualSonics. فوجي فيلم ، تورنتو ، كاليفورنيا | REF 51068-30 | محول طاقة بالموجات فوق الصوتية |
| Sonosid | ASID Bonz GmbH ؛ هيرينبرغ ، ألمانيا | REF 782010 | هلام الموجات فوق الصوتية |
| منصة الموجات فوق الصوتية مع لوحة تسخين وتسجيل تخطيط القلب | VisualSonics. فوجي فيلم ، تورنتو ، كاليفورنيا | P / N 11179 | |
| UniVet-Porta | Groppler. Oberperasberg ، ألمانيا | S / N BKGM0437 | مبخر الأيزوفلوران |
| Vevo3100 | VisualSonics ؛ FujiFilm ، تورنتو ، كاليفورنيا | REF 51073-45 | جهاز الموجات فوق الصوتية |
| VevoLab برنامج | VisualSonics. FujiFilm ، تورنتو ، كاليفورنيا | برنامج تقييم n.a. |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.