تتطلب إدارة ذبول الفيوزاريوم للبطيخ معرفة الأجناس المسببة للأمراض الموجودة. هنا ، نصف تراجع الجذر ، وبذر النواة الموبوءة ، وطرق التلقيح المعدلة بالدرج لإثبات فعاليتها في كتابة العرق للفطريات المسببة للأمراض Fusarium oxysporum f. sp niveum (Fon).
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تباين بين ثلاث تقنيات تلقيح تستخدم لتحديد جنس الفيوزاريوم أوكسيسبوروم f.sp غير المعروف. نيفيوم يعزل
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
عاد ذبول البطيخ الفيوزاريوم (Citrullus lanatus) ، الناجم عن Fusarium oxysporum f. sp. niveum (Fon) ، إلى الظهور كقيد إنتاج رئيسي في جنوب شرق الولايات المتحدة الأمريكية ، وخاصة في فلوريدا. ويتطلب نشر استراتيجيات الإدارة المتكاملة للآفات، مثل الأصناف المقاومة الخاصة بالعرق، معلومات عن تنوع العامل الممرض وكثافته السكانية في حقول المزارعين. على الرغم من إحراز بعض التقدم في تطوير أدوات التشخيص الجزيئي لتحديد عزلات مسببات الأمراض، فإن تحديد العرق غالبا ما يتطلب نهج الفحص البيولوجي.
تم إجراء كتابة السباق عن طريق التلقيح الجذري ، وطريقة بذر النواة الموبوءة ، وطريقة غمس الدرج المعدلة مع كل من فروق البطيخ الأربعة (Black Diamond ، Charleston Grey ، Calhoun Grey ، Plant Introduction 296341-FR). يتم تعيين العزلات تسمية سباق عن طريق حساب حدوث المرض بعد خمسة أسابيع من التلقيح. إذا كان أقل من 33٪ من النباتات لصنف معين من الأعراض ، فقد تم تصنيفها على أنها مقاومة. واعتبرت تلك الأصناف التي يزيد معدل حدوثها عن 33٪ عرضة للإصابة. تصف هذه الورقة ثلاث طرق مختلفة للتلقيح للتأكد من العرق ، وتراجع الجذر ، والنواة الموبوءة ، والتلقيح المعدل بالدرج ، والتي تختلف تطبيقاتها وفقا للتصميم التجريبي.
المقدمة
الفطريات المنقولة بالتربة التي تشكل مركب أنواع Fusarium oxysporum (FOSC) هي مسببات أمراض نباتية نصف حيوية مؤثرة يمكن أن تسبب مرضا خطيرا وفقدان الغلة في مجموعة متنوعة من المحاصيل1. ذبول الفيوزاريوم من البطيخ ، الناجم عن F. oxysporum f. sp. niveum (Fon) ، يزداد في النطاق والإصابة والشدة في جميع أنحاء العالم في العقود القليلة الماضية 2,3. في الشتلات ، غالبا ما تشبه أعراض ذبول الفيوزاريوم التخميد. في النباتات القديمة ، تصبح أوراق الشجر رمادية وكلوروتيكية ونخرية. في نهاية المطاف ، يتطور ذبول النباتات إلى انهيار النبات بالكامل والموت4
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. تحديد العرق عن طريق طريقة الجذر تراجع (RDM)
- إعداد البيئة التجريبية
- نظرا لأن التعبير عن الأعراض يعتمد بشكل كبير على الظروف البيئية ، حافظ على النباتات في منطقة خاضعة للرقابة. راقب الرطوبة النسبية ودرجة الحرارة والفترة الضوئية وشدة الضوء (الشكل 1).
- اضبط درجة الحرارة على 26-28 درجة مئوية ، والرطوبة النسبية على 50-75٪ ، وقم بتعيين فترة ضوئية لمدة 16 ساعة لضمان نمو النبات وصحته بشكل كاف.
ملاحظة: لمنع نقص الأكسجة و/أو ذبول الشتلات و/أو تعفن البذور، لا تفرط في الماء أو تسمح بالمياه الراكدة حول الشتلات. - استخدم مصباحين من أنابيب الفلورسنت، لكل منهما 1850 لومن على الأقل من الضوء ودرجة حرا....
- اضبط درجة الحرارة على 26-28 درجة مئوية ، والرطوبة النسبية على 50-75٪ ، وقم بتعيين فترة ضوئية لمدة 16 ساعة لضمان نمو النبات وصحته بشكل كاف.
- نظرا لأن التعبير عن الأعراض يعتمد بشكل كبير على الظروف البيئية ، حافظ على النباتات في منطقة خاضعة للرقابة. راقب الرطوبة النسبية ودرجة الحرارة والفترة الضوئية وشدة الضوء (الشكل 1).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تساعد هذه التجارب في تحديد المقاومة النسبية للأصناف المزروعة بشكل شائع (الجدول 1). ويمكن بعد ذلك استخدام هذه المعلومات لتوجيه توصيات الإدارة استنادا إلى مجموعات فون. بمعنى آخر ، إذا كان من المعروف أن العرق 0 أو 1 موجود في حقل تجاري ، فقد يميل المزارع إلى زراعة مجموعة متنوعة "مقاومة" مثل Calhoun Gray أو Sunsugar أو ما يعادلها. تظهر نتائج المقايسات الحيوية باستخدام جميع الطرق أنه عندما أصيبت الشتلات بعزل Race 1 ، مات صنفا Black Diamond و Charleston Grey أو أظهرا أعراضا خطيرة ، في حين أظهر صنفا Calhoun Grey.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
تم تقديم ثلاث طرق لكتابة العرق. كل من هذه الطرق هي الأنسب لأسئلة معينة وظروف تجريبية. ربما تكون طريقة تلقيح النواة الموبوءة (الإصابة بالتربة) أبسط وأكثر وضوحا ، مما يجعلها مفيدة بشكل خاص لتقييم الإمراض30. يعد استخدام هذه الطريقة لكتابة السباق البسيطة فعالا للغاية. ومع ذلك ، فإن تطبيق الطريقة لتحديد مقاومة صنف معين قد يكون تحديا ، بالنظر إلى أن كل نبات قد لا يواجه نفس الدرجة من العدوى أو التعرض ، وقد تكون هناك حاجة إلى مستويات عالية من المرض لاختبار مقاومة الأصناف ذات الاهتمام. هذا هو الحال لأن الت.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ويعلن صاحبا البلاغ أنه ليس لديهما مصالح مالية منافسة.
شكر وتقدير
نود أن نشيد بالدكتور علي ومختبر التشخيص الجزيئي النباتي وكذلك الدكتور بينغشنغ جي في جامعة جورجيا ، الذي ساعدت قيادته ودعمه في إنشاء برنامج Fon الخاص بنا.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 100٪ أكمل" s الأرض | سيجما ألدريتش | F200-5KG | |
| 1 لتر زجاج Erlenmeyer قارورة | PYREX | 4980-1L | |
| 15 مل أنابيب الصقر | فيشر Scientific | 14-959-49B | |
| 50 مل أسطوانة متدرجة | مختبر السلامة | 41121805 | |
| 50 مل أنابيب Eppendorf المخروطية | فيشر Scientific | 05-413-921 | |
| غلاف | رقائق الألومنيومرينولدز راب | 720 | |
| مبيض | وول مارت | 587192290 | |
| بنسن الموقد | فيشر ساينتفيك | 03-391-301 | |
| CaCO3< / sub> | sigma-Aldrich | موزعات خلايا 239216 | |
| فيشر ساینتفيك | 08-100-11 | ||
| خدمات القماش القطني | ليونز ، إنك | 8305-01-125-0725 | |
| أطباق بلاستيكية | شفافة Visions Wave | 999RP6CLSS | ~ 15 سم قطر |
| فينيل شفافة لمشابك كيس الفطر Shroom | Supply | 6 "للحقيبة الصغيرة ، 8" للحقيبة المتوسطة ، 10 "للحقيبة | |
| الكبيرة كرات القطن | Fisherbrand | 22-456-885 | معقم |
| الإيثانول | فيشر الكيميائية | A4094 | 100٪ ، ثم امزجها مع الماء لصنع 70٪ للاستخدام |
| أضواء أنبوب فلورسنت | MaxLume | Model T5 | 2800 K درجة حرارة اللون ، 24 بوصة أو 48 بوصة |
| طويلة حبيبات أجار | VWR International | 90000-786 | |
| زجاجة رذاذ محمولة باليد | واحدة | 24122002 | ~ 0.95 لتر |
| مقياس الدم | فيشر Scientific | 02-671-55A | صواني |
| مختبر مقياس الدم ذات غرفتينفيشر ساينتفيك | 15-236-2A | ||
| أكياس بلاستيكية كبيرة وقابلة للغلق | Ziploc | 430805 | 38 سم × 38 سم |
| مستر / علبة سقي | Bar5F | B10H22 | |
| كيس فطر مشبك | Shroom Supply | 6 "للحقيبة الصغيرة ، 8" للحقيبة المتوسطة ، 10 "للحقيبة الكبيرة | |
| قفازات النتريل | فيشر Scientific | 19-130-1597D | |
| عضوي | توريد | Shroom أكياس 0.5 جالون أو 25 رطلا | |
| P1000 ماصة ونصائح | فيشر ساينتفيك | 14-388-100 | |
| أطباق بتري | فيشربراند | FB0875713 | دائري ، قطر 100 مم ، ارتفاع 15 مم |
| وسائط زراعة | جولي جاردنر | برو لاين إبريق بلاستيكي C / B | |
| العلامة التجاريةTech | UX0600850 | 1 لتر أو أكبر | |
| أواني زراعة بلاستيكية | Neo / SCI | 01-1177 | ~ 15 سم قطرها وارتفاع ~ 10 سم |
| صندوق بلاستيكي آمن للأوتوكلاف | Thermo Scientific | UX0601022 | 3 لتر |
| ربع قوة البطاطس سكر العنب أجار وسائل الإعلام | Cole-Parmer | UX1420028 | استخدم المسحوق مع وصفة مقياس التوازن العلمي QPDA |
| ، بالقياس بغرام | Ohaus | 30208458 | أي مقياس دقيق يمكنه حمل وقياس 200 جرام سيعمل |
| بحجم # 4 تجويف الفلين | Cole-Parmer | NC9585352 | |
| كيس نمو الفطر الصغير | Shroom Supply | 0.5 ميكرون مرشح ، يأتي أيضا بأحجام متوسطة وكبيرة | |
| مجرفة التربة | وول مارت | 563876946 | |
| شقق الستايروفوم (6 × 12 خلية) | Speedling | Model TR72A | |
| الستايروفوم (8 × 16 الخلايا) | حقنة Speedling Model TR128A | ||
| (5 أو 10 مل) مؤقت | فيشر Scientific | 14-829-19C | |
| Walmart | TM-01 | ||
| V8 عصير خضروات أصلي 100٪ | وول مارت | 564638212 | |
| دوامة | فيشر Scientific | 02-215-418 | |
| بذور البطيخ - بلاك دايموند | ويلهايت سيد 17 | ||
| بذور البطيخ - شركة كالهون جراي | هولمز للبذور | 4440 | |
| بذور البطيخ - نباتات تشارلستون جراي | بوني | 7.15339E + 11 | |
| بذور البطيخ - PI 296341-FR | اتصل بالمؤلفين | اتصل بالمؤلفين | |
| حبات القمح (ماكسي فار.) (اختياري) تغذية | مقاطعة ألاتشوا & بذرة |
المراجع
- Edel-Hermann, V., Lecomte, C. Current status of Fusarium oxysporum formae speciales and races. Phytopathology. 109 (4), 512-530 (2019).
- Everts, K. L., Himmelstein, J. C. Fusarium wilt of watermelon: Towards sustainable management of a re-emerging plant dise....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
