مقالة منهجية

النهج الجراحي المجسمة للحقن المجهري لجذع الدماغ الذيلي والحبل الشوكي العنقي العلوي عبر Cisterna Magna في الفئران

11.8K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/63344

⸱

يناير 21, 2022

 ,  ,  , 
1Beth Israel Deaconess Medical Center, Harvard Medical School

في هذه المقالة

ملخص

عادة ما تنطوي الجراحة المجسمة لاستهداف مواقع الدماغ في الفئران على الوصول من خلال عظام الجمجمة وتسترشد بمعالم الجمجمة. هنا نحدد نهجا مجسما بديلا لاستهداف جذع الدماغ الذيلي والحبل الشوكي العنقي العلوي عبر الصهريج الكبير الذي يعتمد على التصور المباشر لمعالم جذع الدماغ.

الملخص

عادة ما تسترشد الجراحة المجسمة لاستهداف مواقع الدماغ لدى الفئران بمعالم الجمجمة. ثم يتم الحصول على الوصول عن طريق ثقوب لدغ حفر من خلال الجمجمة. يمكن أن يكون هذا النهج القياسي تحديا للأهداف في جذع الدماغ الذيلي والحبل العنقي العلوي بسبب التحديات التشريحية المحددة لأن هذه المواقع بعيدة عن معالم الجمجمة ، مما يؤدي إلى عدم الدقة. هنا نوجز نهجا مجسما بديلا عبر cisterna magna الذي تم استخدامه لاستهداف المناطق المنفصلة ذات الأهمية في جذع الدماغ الذيلي والحبل العنقي العلوي. يمتد الصهريج الضخم من العظم القذالي إلى الأطلس (أي العظم الفقري الثاني) ، ويمتلئ بالسائل الدماغي الشوكي ، وتغطيه الأم الجافية. يوفر هذا النهج طريقا قابلا للتكرار للوصول إلى هياكل مختارة من الجهاز العصبي المركزي (CNS) يصعب الوصول إليها بسبب الحواجز التشريحية. علاوة على ذلك ، فإنه يسمح بالتصور المباشر لمعالم جذع الدماغ على مقربة من المواقع المستهدفة ، مما يزيد من الدقة عند توصيل كميات حقن صغيرة إلى المناطق المقيدة ذات الأهمية في جذع الدماغ الذيلي والحبل العنقي العلوي. أخيرا ، يوفر هذا النهج فرصة لتجنب المخيخ ، والذي يمكن أن يكون مهما للدراسات الحركية والحسية الحركية.

المقدمة

عادة ما تتضمن الجراحة المجسمة القياسية لاستهداف مواقع الدماغ في الفئران1 تثبيت الجمجمة باستخدام مجموعة من قضبان الأذن وشريط الفم. ثم يتم تقدير الإحداثيات بناء على الأطالس المرجعية 2,3 ، ومعالم الجمجمة ، وهي bregma (النقطة التي تلتقي فيها خيوط العظام الأمامية والجدارية) أو lambda (النقطة التي تلتقي فيها خيوط العظام الجدارية والقذالية. الشكل 1 ألف، باء). من خلال ثقب لدغ في الجمجمة فوق الهدف المقدر ، يمكن بعد ذلك الوصول إلى المنطقة المستهدفة ، إما لتوصيل الحقن المجهرية أو الأجهزة باستخدام القنية أو الألياف البصرية. بسبب الاختلاف في تشريح هذه الغرز والأخطاء في توطين bregma أو lambda 4,5 ، يختلف موضع نقاط الصفر فيما يتعلق بالدماغ من إلى آخر. في حين أن الأخطاء الصغيرة في الاستهداف، التي تنتج عن هذا التباين، ليست مشكلة بالنسبة للأهداف الكبيرة أو القريبة، فإن تأثيرها أكبر بالنسبة للمناطق الأصغر ذات الأهمية البعيدة عن نقاط الصفر في المستويات الأمامية الخلفية أو الظهرية البطنية و / أو عند دراسة الحيوانات ذات الأحجام المتفاوتة بسبب العمر و / أو الإجهاد و / أو الجنس. هناك العديد من التحديات الإضافية الفريدة من نوعها للنخاع المستطيل والحبل العنقي العلوي. أولا ، ترتبط التغيرات الصغيرة في الإحداثيات الأمامية الخلفية بتغيرات كبيرة في الإحداثيات الظهرية البطنية بالنسبة إلى الجافية ، بسبب موقع وشكل المخيخ (الشكل 1Bi)2،6،7. ثانيا ، لا يوجد الحبل العنقي العلوي داخل الجمجمة2. ثالثا ، يجعل الوضع المائل للعظم القذالي والطبقة العلوية من عضلات الرقبة2 النهج المجسمة القياسي أكثر تحديا للهياكل الموجودة بالقرب من الانتقال بين جذع الدماغ والحبل الشوكي (الشكل 1Bi). أخيرا ، العديد من الأهداف ذات الأهمية في جذع الدماغ الذيلي والحبل العنقي صغيرة2 ، تتطلب حقن دقيقة وقابلة للتكرار 8,9.

نهج بديل من خلال cisterna magna يتحايل على هذه المشاكل. الصهريج الضخم هو مساحة كبيرة تمتد من العظم القذالي إلى الأطلس (الشكل 1 أ، أي العظم الفقري الثاني)10. وهي مليئة بالسائل الدماغي الشوكي وتغطيها الأم الجافية10. تفتح هذه المسافة بين العظم القذالي والأطلس عند ثني الرأس. يمكن الوصول إليه عن طريق التنقل بين البطون المقترنة المتراكبة لعضلة الرأس الطويلة ، مما يعرض السطح الظهري لجذع الدماغ الذيلي. ويمكن بعد ذلك استهداف المناطق ذات الأهمية استنادا إلى معالم هذه المناطق نفسها إذا كانت تقع بالقرب من السطح الظهري؛ أو باستخدام obex ، النقطة التي تفتح فيها القناة المركزية في البطين الرابع ، كنقطة صفر للإحداثيات للوصول إلى هياكل أعمق. تم استخدام هذا النهج بنجاح في مجموعة متنوعة من الأنواع ، بما في ذلك الفئران11 ، القط12 ، الفأر 8,9 ، والرئيسيات غير البشرية13 لاستهداف المجموعة التنفسية البطنية ، أو التكوين الشبكي الإنسي النخاعي ، أو نواة الجهاز الانفرادي ، أو منطقة ما بعد الريما ، أو النواة تحت اللسان. ومع ذلك ، لا يستخدم هذا النهج على نطاق واسع لأنه يتطلب معرفة علم التشريح ، ومجموعة أدوات متخصصة ، ومهارات جراحية أكثر تقدما مقارنة بالنهج التجسيمي القياسي.

هنا نصف نهجا جراحيا خطوة بخطوة للوصول إلى جذع الدماغ والحبل العنقي العلوي عبر الجذع العظمي ، وتصور المعالم ، وتعيين نقطة الصفر (الشكل 2) ، وتقدير وتحسين الإحداثيات المستهدفة للتوصيل المجسمي للحقن المجهري في مناطق جذع الدماغ والحبل الشوكي المنفصلة ذات الأهمية (الشكل 3). ثم نناقش المزايا والعيوب المتعلقة بهذا النهج.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

يعلن المؤلف أن البروتوكول يتبع المبادئ التوجيهية للجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها في مركز بيت إسرائيل ديكونيس الطبي.

1. إعداد الأدوات الجراحية والإطار المجسم.

ملاحظة: يتم إجراء الجراحة في ظل ظروف معقمة. يتم الحفاظ على العقم باستخدام تقنية الطرف المعقم.

  1. قم بتثبيت الذراع المجسمة باستخدام ماصة أو حقنة صغيرة مملوءة بحقن من اختيارك (فيروس مرتبط بالغدي (AAV) أو متتبع تقليدي) على الإطار المجسمي وقم بإعداد محول الماوس (الشكل 2A).
  2. تحضير الأدوات الجراحية المعقمة (جدول المواد) ووضعها على سطح معقم.

2. تحريض التخدير وإعداد الماوس

  1. قم بتشغيل O 2 عند 0.5 لتر / دقيقة واضبط مبخر الأيزوفلوران على 4.0 ، مع التأكد من أن تدفق O2 إلى صندوق الحث.
    تنبيه: تأكد من وضع صندوق تحريض الأيزوفلوران في غطاء محرك السيارة وأن الإيسوفلوران يتم مسحه بعيدا عن موقع الجراحة.
  2. ضع الماوس (ذكر C57BL/6J البالغ من العمر 10 أسابيع) في غرفة الحث.
  3. بمجرد أن يتباطأ التنفس ، افتح غرفة الحث ، وارفع الماوس قليلا. استخدم ماكينات قص الشعر لإزالة الشعر من الرأس إلى الكتفين.

3. وضع الماوس في الإطار المجسم.

  1. حرك الماوس إلى الإطار المجسم، وضع الأنف في مخروط أنف مرن. في هذه المرحلة ، تأكد من توجيه تدفق O2 الآن إلى مخروط الأنف.
  2. ضع الماوس في الإطار المجسمة باستخدام قضبان الأذن فقط.
    ملاحظة: تأكد من أن قضبان الأذن متساوية وأن الرأس مستو.
  3. Anteroflex رأس الماوس إلى زاوية 90 درجة عن طريق توجيه الأنف يدويا. لتأمين هذا الموضع ، ضع حاجزا بلاستيكيا بين أعمدة شريط الأذن لمحول الماوس ، بالتوازي مع الأعمدة. يعمل الجزء المسطح من الجمجمة كمرجع ، على غرار نهج الجمجمة المسطحة في الجراحة المجسمة التقليدية.
    ملاحظة: لا تقم بثني الرأس (أي أبعد من زاوية 90 درجة بين مستوى عظم الجمجمة الأمامي ومستوى سطح الطاولة) لأن هذا يعيق تدفق الهواء عبر مجرى الهواء العلوي. إذا تم إعاقة تدفق الهواء ، فقم بإعادة وضع الماوس ، مع التأكد من دعم الجسم أسفل الجذع وتعيين بطاقة بلاستيكية عند 90 درجة بين مستوى عظم الجمجمة الأمامي ومستوى سطح الطاولة كما هو موضح في الشكل 2A ، C.
  4. ضع وسادة التدفئة أسفل الماوس، ثم تأكد من وضع الرقبة وبقية الجسم على نفس المستوى (أي عند حوالي 180 درجة أو بالتوازي مع الطاولة). يمكن استخدام صندوق الأدوات الذي يحمل مقص الزنبرك لرفع الجسم إلى هذا الموقف.
    ملاحظة: هذه الخطوة مهمة لأن جذع الدماغ الذيلي والحبل العنقي العلوي يتحركان اعتمادا على الموضع ، على عكس الأجزاء الأكثر سطحية من الجهاز العصبي المركزي التي يتم تثبيتها في مكانها بواسطة الجمجمة.
  5. حقن جرعة واحدة من 4 ملغ / كغ ميلوكسيكام بطيئة الإطلاق (SR) تحت الجلد (s.c.) بحجم 2 ميكرولتر / غرام من وزن الجسم ووضع مواد التشحيم على العينين.
  6. نظف موقع الشق الجراحي أولا باستخدام وسادة إعداد الكحول بنسبة 70٪ ، ثم باستخدام وسادة إعداد البيتادين ، ثم مرة أخرى باستخدام وسادة إعداد الكحول واتركها تجف.
  7. ضع ستارة تحت الجسم.
  8. تطهير اليدين ووضع قفازات معقمة.
  9. ضع ستارة في موقع الجراحة.

4. جراحة للوصول إلى الصهريج ماجنا

  1. تأكد من تخدير الماوس بشكل مناسب عن طريق قرص أصابع القدم أو التحقق من رد فعل القرنية.
  2. تقليل الايسوفلوران إلى مستويات الصيانة (2.0).
  3. قم بعمل شق 1-1.2 سم باستخدام الشفرة الجراحية رقم 10 من حافة العظم القذالي باتجاه الكتفين في حركة واحدة سلسة.
  4. قم بعمل شق في خط الوسط لعضلة شبه منحرفة. هذا يكشف عضلات الرأس الطويلة المقترنة.
    ملاحظة: في الفئران ، تكون عضلة شبه منحرف عضلة رقيقة جدا وشفافة تقريبا. تأكد من البقاء في خط الوسط وعدم قطع العضلات الكامنة لأن هذا سوف يسبب نزيفا غير ضروري.
  5. ضع كلا خطافي التراجع بين عضلات التهاب الرأس الطويل المقترنة ، أحدهما موجه إلى اليسار والآخر إلى اليمين. يوفر وزن مرقئ الدم توترا لخطافات التراجع التي يمكن تعديلها عن طريق إعادة ضبط موضع مرقئات.
  6. ضع المجهر الجراحي في مكانه لتصور المجال الجراحي بشكل أفضل.
  7. استخدم ملقط استئصال الصفيحة الفقرية الحاد لفصل البطنين اليسرى واليمنى لعضلة الرأس الطويلة المقترنة ، بدءا من occiput ، حيث يكون خط الوسط مرئيا بسهولة. قم بتوجيه الملقط الحاد عبر عظم الأوكسيبوت في خط الوسط وصولا إلى حيث يلتقي بالأم الجافية الصهريجية ، ثم استمر عبر الأم الجافية إلى الأطلس.
    ملاحظة: ليست هناك حاجة لقطع عضلات الرأس الطويلة المقترنة حيث لا شيء يجمعها معا في خط الوسط. القيام بذلك سوف يسبب نزيفا لا لزوم له.
  8. إعادة وضع المنسحبين وضبط التوتر عن طريق إعادة وضع مرقئ الدم ، وفتح وجهة نظر سيسترنا ماجنا.
  9. استخدم ملقط استئصال الصفيحة الفقرية الحاد لفصل العضلات بشكل أكبر في خط الوسط للحصول على نافذة رؤية جيدة لجذع الدماغ والمخيخ.
  10. كرر الخطوات 4.7-4.9 حسب الحاجة حتى يظهر المخيخ وجذع الدماغ أسفل الجافية.
  11. باستخدام ملقط استئصال الصفيحة الفقرية الحاد ، قم بمسح جافا الخيوط الصغيرة للنسيج الضام عن طريق تحريك الملقط من خط الوسط في اتجاه جانبي ، حتى يكون هناك رؤية واضحة لجذع الدماغ وخلق مساحة جانبية أكبر ، حسب الحاجة للهدف.

5. فتح الغشاء الخزان

  1. استخدم ملقط Dumont ذو الزاوية (# 4/45) للاستيلاء على الجعة ، التي تمتد من العظم القذالي إلى الأطلس. أمسك الجافية بالقرب من العظم القذالي واستخدم مقص الزنبرك لعمل فتحة صغيرة (~ 0.5 إلى 1.5 مم) في الجافية.
    ملاحظة: في هذا الموقع على السطح ، تكون المسافة بين جذع الدماغ والجافية العلوية أوسع ، مما يوفر مساحة واسعة للتلاعب الآمن بالجافية.
  2. استخدم مقص الزنبرك لرفع الجافية وفتح الجافية أكثر. يعتمد حجم النافذة على الهدف.
    ملاحظة: ستكون هناك حاجة إلى نافذة أكبر عند إجراء حقن طولية متعددة أو حقن ثنائية. ستكون النافذة الصغيرة كافية عند إجراء حقن أحادية الجانب أو خط الوسط.
  3. بمجرد فتح الجافية ، قم بتصريف السائل الدماغي الشوكي الزائد بطرف جديلة معقم.

6. تحديد المعالم ونقطة الصفر

  1. شاهد السطح الظهري لجذع الدماغ مع معالم مفصلة من خلال الجافية المفتوحة. ال obex ، النقطة التي تفتح فيها القناة المركزية في البطين الرابع ، هي نقطة الصفر الأمامية والخلفية والمتوسطة.

7. إحداثيات الهدف

ملاحظة: بالنسبة لأهداف مختلفة، قمنا بتضمين قائمة بالإحداثيات القياسية مع الإحداثيات الخلفية الأمامية (AP) والمتوسطية (ML) بالنسبة لإحداثيات bregma ذات النقطة الصفرية وإحداثيات cisterna magna مع إحداثيات AP و ML بالنسبة إلى obex نقطة الصفر لتسهيل الانتقال بين المنهجيات (الجدول 1). الإحداثيات الظهرية البطنية (DV) هي نسبة إلى سطح الدماغ أو المخيخ (النهج القياسي) أو سطح جذع الدماغ أو الحبل العنقي العلوي (نهج الجذع العظمي) عند نقطة دخول AP و ML. يجب أن يتم التخطيط قبل الجراحة.

  1. استخدم المجموعات الثلاث من الإحداثيات لتحديد الهدف: AP و ML و DV. بسبب وضع الرأس ، يختلف الاتجاه النسبي لهياكل جذع الدماغ حسب الموقع.
    1. للمسافة المستهدفة >0.4 مم من الذيلي إلى obex (الشكل 1B ، الأخضر) قم بما يلي.
      1. AP: استخدم أي أطلس مرجعي مجسمة قياسي (على سبيل المثال ، Paxinos و Franklin Atlas2) أو سلسلة الأنسجة المقطوعة في المستوى العرضي لتقدير مسافة AP بين obex والهدف.
      2. ML: استخدم أي أطلس مرجعي مجسمة قياسي أو سلسلة أنسجة مقطوعة في المستوى العرضي لتقدير مسافة ML بين obex والهدف.
      3. DV: تقدير الإحداثيات المتعلقة بسطح الدماغ أو المخيخ عند نقطة الهدف AP و ML. استخدم أي أطلس مرجعي مجسمة قياسي أو سلسلة أنسجة مقطوعة في المستوى العرضي لتقدير المسافة بين سطح جذع الدماغ عند إحداثيات AP و ML المطلوبة والهدف.
    2. بالنسبة للمسافة المستهدفة <0.4 مم من الذيلية إلى obex (الشكل 1B ، برتقالي) ، قم بما يلي.
      1. AP: اضبط الإحداثيات لحساب الانثناء الأمامي لجذع الدماغ. بالنسبة للإحداثيات البطنية والسطحية ، ستكون نقطة دخول جذع الدماغ AP أكثر ذيلية بالنسبة لإحداثيات AP المستهدفة في المستوى القياسي.
      2. ML: اشتق إحداثيات الهدف من أطلس مرجعي مجسمة قياسي أو سلسلة أنسجة مقطوعة في المستوى المستعرض. ستكون الإحداثيات بالنسبة إلى خط الوسط المرئي على مستوى AP المستهدف.
      3. DV: تقدير الإحداثيات المتعلقة بسطح جذع الدماغ عند نقطة الهدف AP و ML. اضبط DV لحساب الانثناء الأمامي لجذع الدماغ. بالنسبة للإحداثيات البطنية والسطحية ، ستكون إحداثيات DV أكبر من المسافة من السطح الظهري لجذع الدماغ في المستوى القياسي.

8. حقن الهدف

  1. خفض الماصة أو المحقنة إلى الهدف باستخدام الذراع المجسمة وحقن الحل كما هو الحال بالنسبة للنهج المجسمة القياسية. اتركيه في مكانه لمدة 1-5 دقائق بعد الحقن ، لتجنب مسار الإبرة عند استخدام أحجام تتراوح بين 3-50 نانولتر. ثم ارفع الماصة أو المحقنة باستخدام الذراع المجسمة.
  2. كرر الخطوة 8.1. لأهداف متعددة.

9. إغلاق المجال الجراحي

  1. إزالة السنانير بعناية من المجال الجراحي. سوف تعود عضلات التهاب الرأس الطويل المقترنة إلى وضع محايد ، وتغطي بالكامل السيستيرنا ماجنا. لا تغلق عضلة شبه منحرف والأم الجافية في خط الوسط لأنها هشة للغاية بحيث لا يمكن الاحتفاظ بالغرز.
  2. أغلق الجلد بثلاث خيوط من النايلون أو البولي بروبيلين (5-0 أو 6-0).

10. رعاية ما بعد الجراحة

  1. قم بإيقاف تشغيل الأيزوفلوران وإزالة الماوس من الإطار المجسم. ضع الماوس في قفص نظيف على وسادة تدفئة وراقب حتى يستيقظ ويتحرك.
  2. مراقبة الحالة الصحية والوزن والغرز في أيام ما بعد الجراحة 1-3. قم بإزالة الغرز في اليوم 10 إذا لم تتم إزالتها بالفعل.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

يتيح نهج cisterna magna استهداف جذع الدماغ الذيلي وهياكل الحبل العنقي العلوي التي يصعب الوصول إليها عبر النهج المجسمة القياسية أو المعرضة للاستهداف غير المتسق. تتطلب الجراحة للوصول إلى الصهريج ماجنا شقوقا في الجلد ، وطبقة رقيقة من عضلة شبه منحرف ، وفتح الأم الجافية ، وبالتالي فهي جيدة التحمل من قبل الفئران. وهي فعالة بشكل خاص وأقل توغلا عند استهداف مواقع متعددة (مشتتة طوليا أو ثنائيا) ، لأنها لا تتطلب حفر ثقوب لدغ متعددة كما هو الحال في النهج المجسمة القياسية. في الفئران ، استهدفنا بشكل روتيني هياكل مثل النواة ت...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تعتمد الجراحة المجسمة القياسية عادة على معالم الجمجمة لحساب إحداثيات المواقع المستهدفة في الجهاز العصبي المركزي1. ثم يتم الوصول إلى المواقع المستهدفة عبر ثقوب لدغ التي يتم حفرها من خلال الجمجمة1. هذه الطريقة ليست مثالية لجذع الدماغ الذيلي حيث تقع المواقع المستهدفة بعيدا عن معالم الجمجمة في المستويين الأمامي الخلفي والظهري البطني2 وبما أن تشريح الجمجمة والعضلات العلوية تجعل الوصول صعبا6 (الشكل 1Bi<...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل من قبل R01 NS079623 و P01 HL149630 و P01 HL095491.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
وسادة الكحولMed-Vet Internationalرمز المنتج: تحضير MDS090735Zللجلد للوقاية من عدوى موقع الجراحة
ملقط بزاوية ، Dumont # 5/45FST11251-35فقط للاستيلاء على وسادة البيتادين الجافية
Med-Vet Internationalرمز المنتج: تحضير الجلد PVP-PADللوقاية من عدوى موقع الجراحة
الوحدة الفرعية لسم الكوليرا ب ، Alexa Fluor 488/594 مترافقثيرمو فيشر العلمي488: C34775 ، 594: C22842متتبع الفلورسنت
كليبرزWahlموديل MC3 ، 28915-10لحلاقة الفراء في موقع الجراحة
حامل قطب كهربائي مع مشبك زاويةKopf1770لحمل الماصة الزجاجية
مقياس الجريانأدوات جيلمونتموديل # 65 مملتنظيم تدفق الأيزوفلوران والأكسجين إلى الماوس على المستوى
الجراحيالكريات المجهرية الفلورية ، البوليسترينالحراري فيشر العلميF13080الفلورسنت
التتبع وسادة التدفئةStoelting53800Mغرفة الحث
مع مجموعة توصيل المنفذMidmark Inc93805107 92800131توفر التخدير الأولي
حقنة الأنسولينExelint International26028لإدارة المحلول الملحي والمسكن
IsofluraneMed-Vet Internationalكود التخزين التعريفي:RXISO-250مخدر مستنشق
Isoflurane Matrix VIP 3000 مبخرMidmark Incجهاز 91305430لتوصيل التخدير المستنشق
ملقط استئصال الصفيحة الفقرية ، Dumont # 2FST11223-20فقط لتنظيف الهواء
الطبي للجافية ،LindeUN 1002المضغوطتستخدم مع المحفز & PicoPump لتوفير الهواء لحقن المحلول الدقيق
Meloxicam SRZoo Pharm LLCLot # MSR2-211201مسكن
زجاج البورسليكات المجهري أنبوب شعري معاير مسبقاGlobe Scientific Inc51628لنقل المواد إلى الإحداثيات المعينة
محول الماوسStoelting0051625  ؛ تكييف الإطار التجسيمي للفئران لجراحة الفئران
حامل إبرة ، طالب Halsted- Hemostats البعوضFST91308-12لخياطة
منظم الأكسجينمنتجات دعم الحياةS / N 909328 ، الكثير 092109تنظيم مستويات الأكسجين من خزان الأكسجين
خزان الأكسجين ،LindeUSP UN 1072المضغوط المقدمة جنبا إلى جنب مع التخدير الأيزوفلوران
بطاقة بلاستيكيةلا ينطبقعلى أيبطاقة بلاستيكية ثابتة ، مقطوعة لتناسب الإطار التجسيمي (مثل بطاقة الهوية) مضخة
PicoPump الهوائية (أو ما شابه ذلك) الأدواتالدقيقة العالمية (WPI)SYS-PV820لحقن المحلول الملحي
،المعدات الطبية المعقمة على سفح الجبلH04888-10لاستبدال سوائل الجسم المفقودة أثناء الجراحة
مقبض مشرط ، # 3FST10003-12إلى عقد مقص مشرط
، WagnerFST14070-12لقطع خياطة البولي بروبلين
مقص زنبركي ، Vannas 2.5mm مع مقص FST15002-08فقط لفتح الجافية ، صندوق لرفع الجسم
مناور دقيق تجسيميKopf1760-61متصل بحامل القطب الكهربائي لضبط الموضع بناء على الإحداثيات
مجموعة الإطار التجسيمي "U" ولوحة القاعدة داخل الخلاياKopf1730-B ، 1711إطار للجراحة
أدوات تطبيق قطنية معقمة ذات رؤوسPuritan25-806 10WCتمتص الدم من المجال
الجراحي ستائر معقمة غير مثقبةHenry Schein9004686للمجال الجراحي
المعقم مرهم بصري معقمPuralubeP1490العين محفز زيوت التشحيم
& أدوات طبية للعشبS44لتوفير هواء متحكم فيه مسبقا لحقن المحلول الدقيق
شفرة جراحية # 10Med-Vet Internationalرمز المنتج: 10SSلشق الجلد
ملقط جراحي ، غرامة فائقةFST11153-10لتثبيت الجلد
قفازات جراحيةMSG2280Z Med-VetInternational للجراحة المثيرة للشكوك
المجهر الجراحيLeicaModel M320 / F12لتكبير 5X-40X للموقع
الجراحي خياطة 5-0 واحة البولي بروبيلينMV-8661لإغلاق الجلد
يوفر Tegaderm3M3M ID 70200749250حاجزا معقما
المشبك العالمي والوقوفآخر Kopf1725المرفق بإطار U التجسيمي ولوحة القاعدة داخل الخلايا
خطاف الجرح مع هارتمان هيموستاتFST18200-09 ، 13003-10لفصل العضلات وتوفير نافذة جراحية
المصاحب النعومة

المراجع

  1. JoVE. Rodent Stereotaxic Surgery. JoVE Science Education Database. , Neuroscience (2021).
  2. Paxinos, G., Franklin, K. B. J. The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. , Academic Press. (2001).
  3. Lein, E. S., et al. Genome-wide atlas of gene expression in the adult mouse brain. Nature. 445 (7124), 168-176 (2007).
  4. Rangarajan, J. R., et al. Image-based in vivo assessment of targeting accuracy of stereotactic brain surgery in experimental rodent models. Scientific Reports. 6 (1), 38058(2016).
  5. Blasiak, T., Czubak, W., Ignaciak, A., Lewandowski, M. H. A new approach to detection of the bregma point on the rat skull. Journal of Neuroscience Methods. 185 (2), 199-203 (2010).
  6. Popesko, P., Rajtova, V., Horak, J. A Colour Atlas of the Anatomy of Small Laboratory Animals, Volume 2: Rat, Mouse and Golden Hamster. 2, Wolfe Publishing Ltd. (1992).
  7. Allen Mouse Brain Atlas. Allen Institute for Brain Science. , Available from: https://mouse.brain-map.org/experiment/thumbnails/100042147?image_type=atlas (2004).
  8. Vanderhorst, V. G. J. M. Nucleus retroambiguus-spinal pathway in the mouse: Localization, gender differences, and effects of estrogen treatment. The Journal of Comparative Neurology. 488 (2), 180-200 (2005).
  9. Yokota, S., Kaur, S., VanderHorst, V. G., Saper, C. B., Chamberlin, N. L. Respiratory-related outputs of glutamatergic, hypercapnia-responsive parabrachial neurons in mice. Journal of Comparative Neurology. 523 (6), 907-920 (2015).
  10. Anselmi, C., et al. Ultrasonographic anatomy of the atlanto-occipital region and ultrasound-guided cerebrospinal fluid collection in rabbits (Oryctolagus cuniculus). Veterinary Radiology & Ultrasound. 59 (2), 188-197 (2018).
  11. Herbert, H., Moga, M. M., Saper, C. B. Connections of the parabrachial nucleus with the nucleus of the solitary tract and the medullary reticular formation in the rat. The Journal of Comparative Neurology. 293 (4), 540-580 (1990).
  12. Vanderhorst, V. G., Holstege, G. Caudal medullary pathways to lumbosacral motoneuronal cell groups in the cat: evidence for direct projections possibly representing the final common pathway for lordosis. The Journal of Comparative Neurology. 359 (3), 457-475 (1995).
  13. Vanderhorst, V. G., Terasawa, E., Ralston, H. J., Holstege, G. Monosynaptic projections from the nucleus retroambiguus to motoneurons supplying the abdominal wall, axial, hindlimb, and pelvic floor muscles in the female rhesus monkey. The Journal of Comparative Neurology. 424 (2), 233-250 (2000).
  14. Wall, N. R., Wickersham, I. R., Cetin, A., De La Parra, M., Callaway, E. M. Monosynaptic circuit tracing in vivo through Cre-dependent targeting and complementation of modified rabies virus. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (50), 21848-21853 (2010).
  15. Krashes, M. J., et al. Rapid, reversible activation of AgRP neurons drives feeding behavior in mice. The Journal of Clinical Investigation. 121 (4), 1424-1428 (2011).
  16. Ganchrow, D., et al. Nucleus of the solitary tract in the C57BL/6J mouse: Subnuclear parcellation, chorda tympani nerve projections, and brainstem connections. The Journal of Comparative Neurology. 522 (7), 1565-1596 (2014).
  17. Ung, K., Arenkiel, B. R. Fiber-optic implantation for chronic optogenetic stimulation of brain tissue. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (68), e50004(2012).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

ventral medial

مقالات ذات صلة