هنا ، نصف تقنية التصوير في الجسم الحي باستخدام التصوير المقطعي للتماسك البصري لتسهيل التشخيص والقياس الكمي لاعتلال الشبكية في الفئران.
Method Article
هنا ، نصف تقنية التصوير في الجسم الحي باستخدام التصوير المقطعي للتماسك البصري لتسهيل التشخيص والقياس الكمي لاعتلال الشبكية في الفئران.
يقدم التصوير المقطعي للتماسك البصري (OCT) طريقة غير جراحية لتشخيص اعتلال الشبكية. يمكن لجهاز OCT التقاط صور مقطعية للشبكية يمكن من خلالها حساب سمك الشبكية. على الرغم من أن OCT يستخدم على نطاق واسع في الممارسة السريرية ، إلا أن تطبيقه في الأبحاث الأساسية ليس سائدا ، خاصة في الحيوانات الصغيرة مثل الفئران. نظرا لصغر حجم مقل العيون ، من الصعب إجراء فحوصات تصوير قاع العين في الفئران. لذلك ، يلزم وجود نظام متخصص لتصوير الشبكية لاستيعاب التصوير المقطعي المحوسب على الحيوانات الصغيرة. توضح هذه المقالة نظاما خاصا بالحيوانات الصغيرة لإجراءات فحص OCT وطريقة مفصلة لتحليل الصور. تم عرض نتائج فحص OCT في شبكية العين لمستقبلات البروتين الدهني منخفض الكثافة (Vldlr) والفئران C57BL / 6J. أظهرت صور OCT للفئران C57BL / 6J طبقات شبكية العين ، بينما أظهرت صور الفئران بالضربة القاضية Vldlr الأوعية الدموية الجديدة تحت الشبكية وترقق الشبكية. باختصار ، يمكن أن يسهل فحص OCT الكشف غير الجراحي وقياس اعتلال الشبكية في نماذج الفئران.
التصوير المقطعي للتماسك البصري (OCT) هو تقنية تصوير يمكن أن توفر في الجسم الحي تصويرا مقطعيا عالي الدقة وتصويرا مقطعيا للأنسجة1،2،3،4،5،6،7،8 ، خاصة للفحص غير الباضع في شبكية العين9،10،11،12 . يمكن استخدامه أيضا لتحديد بعض المؤشرات الحيوية المهمة ، مثل سمك الشبكية وسمك طبقة الألياف العصبية في شبكية العين. مبدأ OCT هو قياس انعكاس التماسك البصري ، والذي يحصل على معلومات الأنسجة المقطعية من تماسك الضوء المنعكس من عينة ويحولها إلى شكل رسومي أو رقمي من خلال نظام كمبيوتر7. يستخدم OCT على نطاق واسع في عيادات طب العيون كأداة أساسية للتشخيص والمتابعة والإدارة للمرضى الذين يعانون من اضطرابات الشبكية. يمكن أن يوفر أيضا نظرة ثاقبة على التسبب في أمراض الشبكية.
بالإضافة إلى التطبيقات السريرية ، تم استخدام OCT أيضا في الدراسات على الحيوانات. على الرغم من أن علم الأمراض هو المعيار الذهبي للتوصيف المورفولوجي ، إلا أن OCT يتمتع بميزة التصوير غير الجراحي في الجسم الحي والمتابعة الطولية. علاوة على ذلك ، فقد ثبت أن OCT يرتبط ارتباطا جيدا بعلم أمراض الأنسجة في النماذج الحيوانية لاعتلال الشبكية11،13،14،15،16،17،18،19،20. الفأر هو الحيوان الأكثر استخداما في الدراسات الطبية الحيوية. ومع ذلك ، فإن مقل العيون الصغيرة تشكل تحديا تقنيا لإجراء تصوير OCT في الفئران.
مقارنة ب OCT المستخدم لأول مرة لتصوير شبكية العين في الفئران21,22 ، تم الآن تحسين OCT في الحيوانات الصغيرة فيما يتعلق بأنظمة الأجهزة والبرامج. على سبيل المثال ، OCT ، بالاقتران مع المتعقب ، يقلل بشكل كبير من نسبة الإشارة إلى الضوضاء ؛ تسمح ترقيات نظام برنامج OCT باكتشاف المزيد من طبقات الشبكية تلقائيا ؛ ويساعد جهاز عرض DLP المدمج على تقليل عناصر الحركة.
مستقبلات البروتين الدهني منخفضة الكثافة (Vldlr) هي بروتين عبر الغشاء في الخلايا البطانية. يتم التعبير عنه على الخلايا البطانية الوعائية في شبكية العين ، والخلايا الظهارية الصبغية في شبكية العين ، وحول الغشاء الخارجيالمحدد 23,24. الأوعية الدموية تحت الشبكية هي النمط الظاهري لفئران Vldlr بالضربة القاضية23. لذلك ، يتم استخدام فئران Vldlr بالضربة القاضية للتحقيق في التسبب في المرض والعلاج المحتمل للأوعية الدموية تحت الشبكية. توضح هذه المقالة تطبيق التصوير المقطعي المحوسب للكشف عن آفات الشبكية في فئران Vldlr بالضربة القاضية ، على أمل توفير بعض المراجع الفنية لأبحاث اعتلال الشبكية في نماذج الحيوانات الصغيرة.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
تم إجراء العمليات بعد بيان استخدام الحيوانات في أبحاث العيون والرؤية من جمعية أبحاث الرؤية وطب العيون. تمت الموافقة على التصميم التجريبي من قبل لجنة أخلاقيات الحيوان المؤسسية (لجنة الأخلاقيات الطبية في JSIEC ، EC 20171213 (4) -P01). تم استخدام الفئران C57BL / 6J البالغة من العمر شهرين وفئران Vldlr بالضربة القاضية في هذه الدراسة. كان هناك 7 فئران في كل مجموعة ، وكلها من الإناث ووزنها 20 جم إلى 24 جم.
1. الظروف التجريبية
2. سجلات المعلومات
3. بدء تشغيل الأداة واختبارها
4. التخدير
5. تطبيق قطرات حدقة العين
6. وضع الماوس
7. منظار العين بالليزر المسح البؤري (cSLO)
8. التصوير المقطعي للتماسك البصري (OCT)
9. نهاية التجربة (بعد فحص OCT)
10. تحليل الصور
11. تصحيح التقسيم الطبقي للشبكية
12. سمك تصفيح الشبكية
13. قياس سمك الشبكية الكامل
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
بفضل عمليات المسح عالية الدقة ل OCT ، يمكن ملاحظة طبقات شبكية العين ، ويمكن تحديد الانعكاسات غير الطبيعية ومواقعها الدقيقة. تمت مقارنة صور OCT الشبكية لفئران Vldlr بالضربة القاضية والفئران C57BL / 6J في هذه الدراسة. أظهرت صور OCT لجميع الفئران C57BL / 6J طبقات شبكية مختلفة ذات انعكاسية مختلفة ، وكان الترسيم واضحا (الشكل 8D). في المقابل ، أظهرت جميع فئران Vldlr بالضربة القاضية آفات غير طبيعية ومفرطة الانعكاس على صور OCT (الشكل 8B).
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
في هذه الدراسة ، تم تطبيق التصوير المقطعي المحوسب باستخدام نظام تصوير شبكية العين للحيوانات الصغيرة لتقييم تغيرات الشبكية في فئران Vldlr بالضربة القاضية ، والتي تظهر انفصالا زجاجيا خلفيا غير مكتمل ، والأوعية الدموية تحت الشبكية ، وترقق سمك الشبكية. OCT هي طريقة تصوير غير جراحية لفحص حالة شبكية العين في الجسم الحي. تم تصميم معظم أجهزة OCT لفحص العين البشرية. يعتمد حجم الأجهزة ، وتحديد البعد البؤري ، وإعداد معلمات النظام ، ومتطلبات تحديد المواقع للممتحن على العين البشرية. يلزم إجراء تعديلات على العدسة وإع...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
يعلن المؤلفون عدم وجود تضارب محتمل في المصالح.
مصدر المشروع: مؤسسة العلوم الطبيعية بمقاطعة قوانغدونغ (2018A0303130306). يود المؤلفون أن يشكروا مختبر أبحاث العيون ومركز شانتو الدولي المشترك للعيون بجامعة شانتو والجامعة الصينية في هونغ كونغ على التمويل والمواد.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| عدسات لاصقة 100-Dpt | Volk Optical,Inc, Mentor, OH | ملحق ينتمي إلى RETImap | |
| عدسة زجاجية شبه كروية مزدوجة 60-Dpt | Volk Optical، Inc، Mentor، OH | ملحق ينتمي إلى RETImap | |
| بطانية التدفئة الكهربائية | POPOCOLA | CW-DRT-01 | 50 × 35 سم |
| حقنة حقن (1 مل) | Kaile | 0.45 x 16RWLB | |
| جل العين ليفوفلوكساسين هيدروكلوريد | EBE PHARMACEUTICAL Co.LTD | 5 جم: 0.015 جرام | |
| جل هيالورونات الصوديوم الطبي | Alcon | 16H01E | |
| محاقن Microliter | شنغهاي عالية الحمام للصناعة والتجارة المحدودة | Q31 / 0113000236C001-2017 | 50 & micro ؛ L |
| بوفيدون محلول اليود | قوانغدونغ medihealth المستحضرات الصيدلانية المحدودة | 100 مل | |
| RETImap | ROLAND CONSULT | 19-99_50-2.1_1.2E | cSLO / ERG / VEP / FA / OCT / GFP |
| ترصيع أذن الصغيرة | OSMO POCKET OT110 | INS1005-1S | |
| تروبيكاميد فينيليفرين قطرات العين | Santen Pharmaceutical Co.، LTD | 5 مجم / مل | |
| Xylazin | سيجما | X1251-5G | 5 جم |
| زولتيل 50 | فيرباك إس إيه | 7 فربا | تيلتامين 125 مجم + زولازيبام 125 مجم |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission