مقالة منهجية

نموذج حرق الفئران لدراسة الحروق الحرارية الجلدية كاملة السماكة والعدوى

6.9K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/64345

⸱

أغسطس 23, 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1UNC Eshelman School of Pharmacy, University of North Carolina at Chapel Hill, 2Department of Biochemistry & Pharmacology, School of Biomedical Sciences, Faculty of Medicine, Dentistry and Health Sciences, The University of Melbourne, 3Department of Microbiology & Immunology, University of North Carolina School of Medicine, 4Department of Surgery, University of North Carolina at Chapel Hill, 5Curriculum in Toxicology and Environmental Medicine, University of North Carolina at Chapel Hill, 6Department of Microbiology, Monash Biomedicine Discovery Institute, Monash University

في هذه المقالة

ملخص

يعد النموذج الذي يحاكي السيناريو السريري لإصابة الحروق والعدوى ضروريا لتعزيز أبحاث الحروق. يوضح البروتوكول الحالي نموذجا بسيطا وقابلا للتكرار لعدوى حرق الفئران يمكن مقارنته بنظيره الموجود في البشر. هذا يسهل دراسة الحروق والالتهابات بعد الحرق لتطوير علاجات المضادات الحيوية الموضعية الجديدة.

الملخص

يتم وصف منهجيات تحريض الحرق بشكل غير متسق في نماذج الفئران. يعد نموذج جرح الحروق الموحد ، الذي يمثل السيناريو السريري ، ضروريا لإجراء أبحاث الحروق القابلة للتكرار. يصف هذا البروتوكول طريقة بسيطة وقابلة للتكرار لإنشاء ~ 20٪ إجمالي مساحة سطح الجسم (TBSA) حروق كاملة السماكة في الفئران. هنا ، تم تطبيق قضيب نحاسي 22.89 سم2 (قطر 5.4 سم) تم تسخينه عند 97 درجة مئوية في حمام مائي على سطح جلد الفئران للحث على إصابة الحرق. كان قضيب النحاس ذو الموصلية الحرارية العالية قادرا على تبديد الحرارة بشكل أعمق في أنسجة الجلد لإحداث حرق كامل السماكة. يظهر تحليل الأنسجة البشرة الموهنة مع تلف تجلط الدم إلى المدى الكامل للسمك الكامل للأدمة والأنسجة تحت الجلد. بالإضافة إلى ذلك ، يمثل هذا النموذج الحالات السريرية التي لوحظت في مرضى الحروق في المستشفى بعد إصابة الحروق مثل عدم التنظيم المناعي والالتهابات البكتيرية. يمكن للنموذج تلخيص العدوى البكتيرية الجهازية بواسطة كل من البكتيريا إيجابية الجرام وسالبة الجرام. في الختام ، تقدم هذه الورقة نموذجا قويا وسهل التعلم لحرق الفئران يحاكي الحالات السريرية ، بما في ذلك عدم التنظيم المناعي والالتهابات البكتيرية ، وهو أمر ذو فائدة كبيرة لتطوير أدوية مضادات حيوية موضعية جديدة لجروح الحروق والالتهابات.

المقدمة

تعد إصابات الحروق من بين أكثر أشكال الصدمات تدميرا ، حيث تصل معدلات الوفيات إلى 12٪ حتى في مراكز الحروقالمتخصصة 1،2،3. وفقا للتقارير المنشورة مؤخرا ، ~ 486,000 مريض حروق يحتاجون إلى رعاية طبية سنويا في الولايات المتحدة ، مع ما يقرب من 3,500 حالة وفاة 1,2,3,4,5,6. تفرض إصابة الحروق تحديا كبيرا لجهاز المناعة لدى المرضى وتخلق جرحا مفتوحا كبيرا ، وهو بطيء الشفاء ، مما يجعلهم عرضة للاستعمار الجلدي والرئوي والجهازي ببكتيريا المستشفيات والانتهازية. يرتبط عدم التنظيم المناعي جنبا إلى جنب مع العدوى البكتيرية بزيادة المراضة والوفيات في مرضى الحروق7.

يعد نموذج حرق الحيوانات والعدوى ضروريا لدراسة التسبب في الالتهابات البكتيرية بعد تلف الجلد وقمع المناعة المرتبط بصدمة الحروق. تتيح هذه النماذج تصميم وتقييم طرق جديدة لعلاج الالتهابات البكتيرية لدى مرضى الحروق. تشترك الفئران والبشر في خصائص فسيولوجية ومرضية جلدية متشابهة تم توثيقها مسبقا8. بالإضافة إلى ذلك ، فإن الفئران أصغر حجما ، مما يجعلها أسهل في التعامل معها ، وبأسعار معقولة ، وأسهل في الشراء والصيانة من النماذج الحيوانية الكبيرة.

هذه الخصائص تجعل الفئران حيوانا نموذجيا مثاليا لدراسة الحروق والالتهابات9. لسوء الحظ ، فإن تقنية تحريض الحرق غير متسقة وغالبا ما يتم وصفها بالحد الأدنى10،11،12،13،14. تم تصميم البروتوكول الحالي لتطوير إجراء بسيط وفعال من حيث التكلفة وقابل للتكرار لإنشاء إصابة حروق كاملة السماكة متسقة في نموذج الفئران الذي يحاكي السيناريو السريري ويمكن استخدامه لتقييم قمع المناعة والعدوى البكتيرية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على جميع الإجراءات من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات (IACUC) بجامعة نورث كارولينا وتم إجراؤها وفقا لإرشاداتها المعمول بها. تم استخدام ذكور وإناث فئران Sprague Dawley (250-300 جم) الذين تتراوح أعمارهم بين 7-9 أسابيع في التجارب. تم إيواء جميع الحيوانات في دورة 12 ساعة: 12 ساعة من الضوء والظلام مع حرية الوصول إلى الطعام والماء حسب الحاجة. اعمل دائما مع طبيبك البيطري المؤسسي حول خطة مسكنة قبل بدء الدراسة.

1. تحضير الفئران لإصابة الحروق

  1. تحضير الحيوانات لإصابة الحروق قبل 24 ساعة من الحرق.
  2. تخدير الفئران بنسبة 5٪ إيزوفلوران في أكسجين 100٪ في غرفة الحث لمدة 5 دقائق (معدل التدفق: 2 لتر / دقيقة) حتى يتباطأ التنفس.
  3. بمجرد تخدير الجرذ بعمق (لا يستجيب لقرصة إصبع القدم على جميع الأطراف) ، انقل الجرذ إلى وسادة تدفئة في وضع الانبطاح وقلل الأيزوفلوران إلى 1.5٪ في الأكسجين للصيانة من خلال مخروط الأنف.
  4. لمنع جفاف القرنية بعد التخدير وأثناء العملية ، ضع مادة تشحيم العين على قرنيات كلتا العينين باستخدام قضيب ذو رأس قطني.
  5. حلق المنطقة الظهرية للفأر باستخدام مقص كهربائي (انظر جدول المواد) وقم بإزالة أكبر قدر ممكن من الشعر في مستطيل كبير من لوحي الكتف وصولا إلى قاعدة الذيل (الشكل 2 أ).
  6. نظف المنطقة المحلوقة بمنديل منقوع في محلول ملحي لمسح الشعر المتساقط. ضعي غسول إزالة الشعر على المنطقة المحلوقة باستخدام قضيب برأس قطني واتركيه لمدة ~ 3 دقائق.
    ملاحظة: تطبيق غسول إزالة الشعر المشار إليه لأكثر من 3 دقائق سيؤدي إلى ظهور طفح جلدي أحمر على الجلد.
  7. امسح المنطقة بإسفنجة شاش مبللة مرتين لإزالة المستحضر ومنع تهيج الجلد.
  8. قم بإيقاف تشغيل isoflurane ، وإزالة مخروط الأنف ، ووضع الفئران في قفص الانتعاش.
    ملاحظة: ضع وسادة تدفئة في قفص الاسترداد.
  9. نقل الحيوان المستعاد إلى قفص سكن نظيف لإجراء الحرق في اليوم التالي (قد يستغرق الأمر ~ 10-15 دقيقة حتى يتعافى الجرذ من التخدير).

2. إحداث إصابة الحروق في الفئران

  1. في يوم الحرق ، اضبط درجة حرارة حمام الماء على 97 درجة مئوية وضع جميع قضبان النحاس الأربعة (420 جم لكل منها ؛ الشكل 1) في حمام مائي 1 ساعة قبل تجربة الحرق للسماح للقضبان بالتسخين بشكل موحد.
    ملاحظة: يجب غمر القضبان في الماء. تحقق من دقة عرض درجة الحرارة الرقمية باستخدام مقياس حرارة قبل التجربة.
  2. تخدير الفئران كما هو مذكور في القسم 1.
  3. بمجرد أن لا يستجيب الجرذ لقرصة إصبع القدم على جميع الأطراف ، ضعه على وسادة تدفئة في وضع الانبطاح مع 1.5٪ إيزوفلوران في الأكسجين للصيانة (الشكل 2 أ).
  4. حقن المورفين (20 ملغ/كغ من وزن الجسم) عبر الطريق داخل الصفاق (i.p.) للتحكمفي الألم 6.
  5. تحقق من درجة حرارة الماء في حمام مائي. قم بإعداد المؤقت وارتداء القفازات المقاومة للحرارة.
  6. أخرج قضيبا نحاسيا ساخنا من الحمام المائي ولمسه على المنطقة الظهرية للفأر لمدة 7 ثوان للحث على الحرق.
    ملاحظة: حافظ على مسافة لا تقل (10-15 سم) بين الحمام المائي والحيوان لتقليل فقد الحرارة ، ولا تضغط على القضبان أثناء إحداث الحرق (أي يجب الحفاظ على التلامس عن طريق الجاذبية).
  7. ضع أربعة حروق ، باستخدام قضيب واحد لكل موقع حرق ، واحدا تلو الآخر مباشرة لإنتاج ما يقرب من 20٪ من حرق TBSA كامل التلامس (الشكل 2 ب).
  8. بعد الحرق ، إنعاش الحيوان عن طريق حقن i.p. من محلول رينغر المرضع (0.1 مل / غرام من وزن الجسم).
    ملاحظة: استخدم محلول رنين الرضاعة المعدل بدرجة حرارة الجسم لإنعاش الفئران.
  9. قم بإيقاف تشغيل isoflurane ، وإزالة مخروط الأنف ، ووضع الفئران على حصيرة الحرارة للتعافي.

3. إعداد اللقاح البكتيري والعدوى

  1. قم بخط العينة المجمدة من Pseudomonas aeruginosa PAO1 والمكورات العنقودية الذهبيةATCC25923 على ألواح Muller Hinton Agar (MHA) ، قبل يومين من تجربة الحرق.
  2. في اليوم التالي ، حدد مستعمرة واحدة من البكتيريا المزروعة من اللوحة ، وباستخدام حلقة التلقيح ، كشطها قليلا من اللوحة. ثم ضعه في أنبوب الاستزراع لتلقيح 10 مل من مرق مولر هينتون (MHB) واستزراعه طوال الليل عند 37 درجة مئوية في شاكر حاضنة.
  3. في يوم الحرق والعدوى ، أجهزة الطرد المركزي الثقافة في 4000 × غرام لمدة 5 دقائق. اغسل الحبيبات بمحلول ملحي عادي (محلول كلوريد الصوديوم 0.9٪).
  4. أعد تعليق الحبيبات البكتيرية في محلول ملحي وقم بتخفيفها حتى 0.1 OD600nm (الكثافة البصرية عند 600 نانومتر). قم بتخفيف اللقاح البكتيري عن طريق أخذ 200 ميكرولتر من هذا المعلق البكتيري وخلطه مع 800 ميكرولتر من المحلول الملحي للحصول على اللقاح البكتيري المطلوب من 2 × 107 CFU / mL.
  5. حقن 50 ميكرولتر من لقاح P. aeruginosa أو S. aureus المحضر في الخطوة السابقة (جرعة العدوى 1 × 106 CFU) في الجرذ المخدر بعد 15 دقيقة من الحرق ، باستخدام إبرة 29 G تحت الجلد بالقرب من جرح الحرق قدر الإمكان.
  6. بعد إصابة جرح الحرق ، ضع الفئران على وسادة التدفئة للتعافي. بمجرد أن يتعافى الحيوان (~ 15-20 دقيقة) ، ضعه في قفص نظيف.
    ملاحظة: بعد إصابة الحرق ، قم بإيواء فأر واحد لكل قفص. استخدم كريات الطعام الرطبة بالماء لسهولة المضغ وضعها على أرضية القفص لسهولة الوصول إليها.
  7. املأ زجاجات المياه في القفص بالماء المسنن بالمورفين (0.4 مجم / مل) لإدارة الألم.
    ملاحظة: يعكس المورفين الفموي الحالة السريرية مع مرضى الحروق البشرية. استخدمت هذه الدراسة المورفين عن طريق الفم للحفاظ على هذه التجارب قابلة للمقارنة مع مرضى الحروق البشرية بعد التشاور مع الطاقم البيطري في مناسبات عديدة. تم الحفاظ على سجلات الشرب والوزن طوال التجربة. استخدم نفس نظام الشرب خلال جميع الإجراءات. يمكن إعطاء المسكنات الأخرى ، مثل البوبرينورفين ، تحت الجلد / داخل الصفاق وفقا للإرشادات المؤسسية لرعاية الحيوانات.
  8. املأ قائمة مراجعة المراقبة وراقب الحيوانات عن كثب بحثا عن الضيق أو المرض طوال مدة التجربة.

4. تقييم إصابة الحروق

  1. تقييم إصابة حروق الجلد شكليا من حيث اللون والهامش مباشرة بعد إصابة الحرق.
  2. قم بتلطيخ الجلد المحروق بالهيماتوكسيلين ويوزين (H&E) لتصور بنية جرح الحرق والفجوة الظهارية15 (انظر الخطوة 5.6 لمعالجة العينات).

5. المعالجة اللاحقة لعينات الفئران والتعداد البكتيري

  1. القتل الرحيم للفأر في 24 و 48 و 72 ساعة بعد الحرق بجرعة زائدة من التخدير.
  2. سحب عينات الدم من الفئران عن طريق ثقب القلب وجمعها في أنبوب جمع صغير.
    1. تحليل تعداد الدم الكامل من عينات الدم لتحديد تأثير تحريض الحرق على الجهاز المناعي المضيف.
  3. حصاد الجلد والأنسجة تحت الجلد والعضلات والرئة والطحال في وقت القتل الرحيم.
    ملاحظة: احتفظ بجزء واحد (~ 1 سم × 1 سم ؛ يزن ~ 200-300 مجم) من الجلد لتلطيخ H& E وجزء آخر للتعداد البكتيري.
  4. اجمع الأنسجة في أنبوب تجميع سعة 10 مل وضعها في محلول ملحي طبيعي على الثلج لتعداد البكتيريا.
  5. تطبيع وزن الأنسجة بالمحلول الملحي الطبيعي وتجانس العينات باستخدام خالط الأنسجة (انظر جدول المواد).
    1. تمييع تسلسليا تجانس الأنسجة في المياه المالحة العادية.
    2. صفيحة 100 ميكرولتر من التجانس غير المخفف وجميع التخفيفات لكل عينة من الأنسجة على ألواح أجار السيتريميد للعينات التي تم جمعها من الفئران المصابة ب P. aeruginosa.
      ملاحظة: استخدم ألواح مانيتول أجار لطلاء العينات التي تم جمعها من الفئران المصابة بالمكورات العنقودية الذهبية.
    3. احتضان لوحات في 37 درجة مئوية في حاضنة لمدة 16-18 ساعة.
    4. في اليوم التالي ، عد المستعمرات البكتيرية على الألواح ، واضربها في نسبة التخفيف للحصول على عدد CFU / mL ، وقم بتطبيعها مع وزن الأنسجة لحساب أنسجة CFU / g.
    5. استخدام برامج تحليل البيانات لرسم الأعداد البكتيرية في الأعضاء المختلفة في نقاط زمنية مختلفة لأخذ العينات.
  6. قم بإجراء تلطيخ H& E للجلد المحروق لتصور بنية الجرح والفجوة الظهارية.
    1. باستخدام المقص والملقط المسنن ، قم بقطع رقعة جلدية بحجم 1 سم × 1 سم من منطقة الحرق واغمرها في مثبت (10٪ فورمالين محايد ، NBF) لمدة 48 ساعة في درجة حرارة الغرفة.
      ملاحظة: قم بتدوير الحاوية لضمان غمر جميع الأنسجة تماما في المثبت ، مع حجم المثبت 30x حجم الأنسجة.
    2. تجفيف أنسجة الجلد بنسبة 70٪ (v / v) من الإيثانول لمدة 72 ساعة في درجة حرارة الغرفة.
    3. قم بمعالجة العينات المجففة في كتل البارافين لقطع الأقسام وتلطيخها باستخدام H&E15.
    4. قم بتصوير الشرائح الملطخة رقميا في ماسح ضوئي للشرائح (انظر جدول المواد) باستخدام هدف 40x.
    5. تحليل الصورة الممسوحة ضوئيا باستخدام البرنامج (انظر الملف التكميلي 1 لمعالجة الصورة للتحليل؛ انظر جدول المواد).
    6. فحص جميع مجالات قسم الجلد الملون لتقييم حالة البشرة والأدمة والأنسجة تحت الجلد والعضلات الهيكلية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

البروتوكول المقدم هنا قابل للتكرار بدرجة كبيرة وأدى إلى إصابة حروق كاملة السماكة من الدرجة الثالثة في الفئران. يظهر جرح الحرق أبيض شمعي بعد تحريض الحرق (الشكل 2 ب). تغير لون إصابة الحرق من الأبيض إلى البني على مدار 72 ساعة بعد الحرق (الشكل 2B-E).

أكد التحليل النسيجي وجود حرق كامل السماكة (عمق >2.61 مم عند 24 ساعة بعد الحرق. الشكل 3 ب). مقارنة بالجلد السليم غير المحترق ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تم تقديم العديد من نماذج الحروق لدراسة الفيزيولوجيا المرضية لإصابة الحروق8،12،16،17. في الدراسة الحالية ، استخدمنا نموذجا للفئران لتطوير بروتوكول بسيط وقابل للتكرار للحث على حرق كامل السمك متبوعا بعدوى بكتيرية لمحاكاة صدمة حروق مصابة في المرضى. يعتمد اختيار الجرذ كنموذج حيواني لتقليد الظروف البشرية على توازن التكلفة وسهولة الاستخدام وقابلية التكاثر وموثوقية البيانات. يتميز نموذج الفئران المستخد...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للكشف عنه.

شكر وتقدير

يشكر المؤلفون قسم الطب المقارن في جامعة نورث كارولينا على توفير الحيوانات ورعايتها. نشكر لورين رالف وميا إيفانجليستا في مركز خدمات علم الأمراض للمساعدة الفنية المتخصصة في علم أمراض الأنسجة / علم الأمراض الرقمي ، بما في ذلك تقسيم الأنسجة والتصوير. تم دعم هذا البحث بمنحة بحثية من وزارة الدفاع (رقم الجائزة W81XWH-20-1-0500 ، GR والتلفزيون).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
1 مل حقنةBD ، الولايات المتحدة الأمريكية309597تستخدم لحقن مسكن
1.7 مل MicrotubeOlympus ، الولايات المتحدة الأمريكية24-282تستخدم لحمل المورفين
10٪ NBFVWR ، الولايات المتحدة الأمريكية16004-115تستخدم لإصلاح قطعة الجلد لتلوين
30 مل حقنةBD ، الولايات المتحدة الأمريكية302832تستخدم لحقن محلول جرس اللاكتات
70٪ كحول إيثيليفيشر Scientific, USABP28184
Aperio AT2 Digital Pathology  الماسح الضوئي للشرائح مع برنامج ImageScopeAperio, Technologies Inc., Vista, CA, USAn / Aمسح H & شرائح وتحليل E
ألواح أجارسيتريميد BD ، الولايات المتحدة الأمريكية285420لوحات وسائط انتقائية ل Pseudomonas aeruginosa< / em> نمو
قضبان نحاسيةn / an / aتستخدم للحث على إصابة الحروق
أدوات تطبيق قطنية ذات رأسOMEGA Surgical Supply ، الولايات المتحدة الأمريكية4225-IMCتستخدم لتطبيق مرهم العين
ماكينة حلاقة كهربائيةOster ، الولايات المتحدة الأمريكيةGolden A5تستخدم لإزالة الشعر الجانبي الظهري
تشحيم العينDechra ، المملكة المتحدةغير / أعامل ترطيب العين لتوفير راحة طويلة الأمد وتجنب جفاف العين
زغب مملوء بالوسادات السفلية Medline، الولايات المتحدة الأمريكيةMSC281225تستخدم في إجراء الحرق
ForcepFST.11027-12تستخدم لحمل قطعة الجلد
إسفنج شاشالواحة ، الولايات المتحدة الأمريكيةPK412تستخدم لتنظيف كريم ناير المطبق من الجانب الظهري ؛
قفازات مقاومة للحرارةn / an / aتستخدم لعقد قضبان النحاس الساخنة
محلل أمراض الدممختبرات IDEXX ، الولايات المتحدة الأمريكيةغرفة الحث ProCyte Dx
كينت العلمية ، الولايات المتحدة الأمريكيةvetFlo-0730تستخدم لتخدير
حقنة الأنسولينBD ، الولايات المتحدة الأمريكية329461
IsofluranePivetal ، الولايات المتحدة الأمريكيةNDC46066-755-04تستخدم لتخدير الفئران للحث على فقدان الوعي
مبخر الأيزوفلورانn / an / a
محلول الرنين اللضعيicumedical ، الولايات المتحدة الأمريكيةNDC0990-7953-09يستخدم لإنعاش الفئران موزعة
على شكل حرف Lفيشر ساینتميك ، الولايات المتحدة الأمريكية14-665-230
مانيتول أجارBD ، الولايات المتحدة الأمريكية211407لوحات وسائط انتقائية ل المكورات العنقودية الذهبية < / em> أنابيب
Minicollect (K2< / sub>EDTA)greiner bio-one ، الولايات المتحدةالأمريكية 450480تستخدم لجمع الدم
المورفينMallinckrodt ، المملكةالمتحدة NDC0406-8003-30استخدام هذا التسكين للحث على عدم القدرة على الشعور بألم إصابة الحروق
Muller Hinton BrothBD ، الولايات المتحدة الأمريكية275730
Muller هينتون الثاني أجارBD ، الولايات المتحدة الأمريكية211438
ناير لوشن إزالة الشعرناير ، الولايات المتحدة الأمريكيةغيرلإزالة الشعر المتبقي على الجانب الظهري
إبرة 23 جمدينار بحريني ، الولايات المتحدة الأمريكيةتستخدم لحقن محلول اللاكتات
، الولايات المتحدة الأمريكيةGenesys 30
فئران Sprague-Dawley ، ذكور وإناثمختبرات نهر تشارلزغير7-9 أسابيع لتحريض الحروق
مقص جراحيFST.14501-14تستخدم لقطع قطعة الجلد المرغوبة
أنابيب جمع الأنسجةGlobe Scientific220101236
Tissue HomogenizerKinematica، Inc، USAPOLYTRON PT2100تستخدم لتجانس عينات الأنسجة
حمام مائيFischer Scientific ، الولايات المتحدة الأمريكيةn / aتستخدم للحث على إصابة الحروق
وسادة تسخين مرجحةComfytemp ، الولايات المتحدة الأمريكيةN / aيستخدم أثناء العملية للحفاظ على دفء جسم الفئران
تم متوفرة 305193 الملحي العادي غير الملحي ThermoScientific

المراجع

  1. Peck, M., Molnar, J., Swart, D. A global plan for burn prevention and care. Bulletin of the World Health Organization. 87, 802-803 (2009).
  2. American Burn Association. Burn incidence and treatment in the United States: 2011 fact sheet. Chicago: American Burn Association. , (2011).
  3. Miller, S. F., et al. National burn repository 2007 report: a synopsis of the 2007 call for data. Journal of Burn Care & Research. 29 (6), 862-870 (2008).
  4. Kruger, E., Kowal, S., Bilir, S. P., Han, E., Foster, K. Relationship between patient characteristics and number of procedures as well as length of stay for patients surviving severe burn injuries: analysis of the American Burn Association National Burn Repository. Journal of Burn Care & Research. 41 (5), 1037-1044 (2020).
  5. American Burn Association. Burn incidence and treatment in the United States: 2016. Burn Incidence Fact Sheet. Chicago: American Burn Association. , (2016).
  6. Willis, M. L., et al. Plasma extracellular vesicles released after severe burn injury modulate macrophage phenotype and function. Journal of Leukocyte Biology. 111 (1), 33-49 (2022).
  7. Kartchner, L. B., et al. One-hit wonder: late after burn injury, granulocytes can clear one bacterial infection but cannot control a subsequent infection. Burns. 45 (3), 627-640 (2019).
  8. Abdullahi, A., Amini-Nik, S., Jeschke, M. Animal models in burn research. Cellular and Molecular Life Sciences. 71 (17), 3241-3255 (2014).
  9. Cai, E. Z., et al. Creation of consistent burn wounds: a rat model. Archives of Plastic Surgery. 41 (4), 317(2014).
  10. Pessolato, A. G. T., dos Santos Martins, D., Ambrósio, C. E., Mançanares, C. A. F., de Carvalho, A. F. Propolis and amnion reepithelialise second-degree burns in rats. Burns. 37 (7), 1192-1201 (2011).
  11. Gurung, S., Škalko-Basnet, N. Wound healing properties of Carica papaya latex: in vivo evaluation in mice burn model. Journal of Ethnopharmacology. 121 (2), 338-341 (2009).
  12. Eloy, R., Cornillac, A. Wound healing of burns in rats treated with a new amino acid copolymer membrane. Burns. 18 (5), 405-411 (1992).
  13. Upadhyay, N., et al. Safety and healing efficacy of Sea buckthorn (Hippophae rhamnoides L.) seed oil on burn wounds in rats. Food and Chemical Toxicology. 47 (6), 1146-1153 (2009).
  14. El-Kased, R. F., Amer, R. I., Attia, D., Elmazar, M. M. Honey-based hydrogel: In vitro and comparative In vivo evaluation for burn wound healing. Scientific Reports. 7 (1), 1-11 (2017).
  15. Fan, G. -Y., et al. Severe burn injury in a swine model for clinical dressing assessment. Journal of Visualized Experiments. (141), e57942(2018).
  16. Davenport, L., Dobson, G., Letson, H. A new model for standardising and treating thermal injury in the rat. MethodsX. 6, 2021-2027 (2019).
  17. Kaufman, T., Lusthaus, S., Sagher, U., Wexler, M. Deep partial skin thickness burns: a reproducible animal model to study burn wound healing. Burns. 16 (1), 13-16 (1990).
  18. Casal, D., et al. Blood supply to the integument of the abdomen of the rat: a surgical perspective. Plastic and Reconstructive Surgery Global Open. 5 (9), (2017).
  19. Casal, D., et al. A model of free tissue transfer: the rat epigastric free flap. Journal of Visualized Experiments. (119), e55281(2017).
  20. Naldaiz-Gastesi, N., Bahri, O. A., Lopez de Munain, A., McCullagh, K. J., Izeta, A. The panniculus carnosus muscle: an evolutionary enigma at the intersection of distinct research fields. Journal of Anatomy. 233 (3), 275-288 (2018).
  21. Weber, B., et al. Modeling trauma in rats: similarities to humans and potential pitfalls to consider. Journal of Translational Medicine. 17 (1), 1-19 (2019).
  22. Nguyen, J. Q. M., et al. Spatial frequency domain imaging of burn wounds in a preclinical model of graded burn severity. Journal of Biomedical Optics. 18 (6), 066010(2013).
  23. Sobral, C., Gragnani, A., Morgan, J., Ferreira, L. Inhibition of proliferation of Pseudomonas aeruginosa by KGF in an experimental burn model using human cultured keratinocytes. Burns. 33 (5), 613-620 (2007).
  24. Olivera, F., Bevilacqua, L., Anaruma, C., Boldrini Sde, C., Liberti, E. Morphological changes in distant muscle fibers following thermal injury i n Wistar rats. Acta Cirurgica Brasileira. 25, 525-528 (2010).
  25. Davies, J. W. Physiological Responses to Burning Injury. , Academic Press. (1982).
  26. Neely, C. J., et al. Flagellin treatment prevents increased susceptibility to systemic bacterial infection after injury by inhibiting anti-inflammatory IL-10+ IL-12-neutrophil polarization. PloS One. 9 (1), e85623(2014).
  27. Dunn, J. L., et al. Direct detection of blood nitric oxide reveals a burn-dependent decrease of nitric oxide in response to Pseudomonas aeruginosa infection. Burns. 42 (7), 1522-1527 (2016).
  28. Gouma, E., et al. A simple procedure for estimation of total body surface area and determination of a new value of Meeh's constant in rats. Laboratory Animals. 46 (1), 40-45 (2012).
  29. Dawson, N. The surface-area/body-weight relationship in mice. Australian Journal of Biological Sciences. 20 (3), 687-690 (1967).
  30. Moins-Teisserenc, H., et al. Severe altered immune status after burn injury is associated with bacterial infection and septic shock. Frontiers in Immunology. 12, 529(2021).
  31. Robins, E. V. Immunosuppression of the burned patient. Critical Care Nursing Clinics. 1 (4), 767-774 (1989).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Pseudomonas Aeruginosa Staphylococcus Aureus

مقالات ذات صلة