Method Article

تطبيق نظام اختبار حساسية مضادات الميكروبات / فحص العاثيات الذكي عالي الإنتاجية ومؤشر لار لمقاومة مضادات الميكروبات

DOI:

10.3791/64785

⸱

July 21st, 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Shandong Key Laboratory of Animal Disease Control and Breeding, Institute of Animal Science and Veterinary Medicine, Shandong Academy of Agricultural Sciences, P.R. China, Key Laboratory of Livestock and Poultry Multi-omics of MARA, 2Department of Genetic and Genomes Biology, University of Leicester, 3College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نقدم هنا مبدأ وهيكل وتعليمات نظام اختبار حساسية مضادات الميكروبات / فحص العاثيات الذكي عالي الإنتاجية. يتضح تطبيقه باستخدام السالمونيلا المعزولة من الدواجن في شاندونغ ، الصين ، كمثال. يتم حساب مؤشر لار ، وتناقش أهميته في تقييم مقاومة مضادات الميكروبات بشكل شامل.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لتحسين كفاءة اختبار الحساسية لمضادات الميكروبات (AST) وفحص العاثيات عالية الإنتاجية للبكتيريا المقاومة وتقليل تكلفة الكشف ، تم تطوير نظام ذكي عالي الإنتاجية لفحص AST / phage ، بما في ذلك ملقح مصفوفة 96 نقطة ، ومحول الحصول على الصور ، والبرامج المقابلة ، وفقا لمعايير AST ونقاط توقف المقاومة (R) التي صاغها معهد المعايير السريرية والمخبرية (CLSI). تم إجراء AST وإحصائيات توزيعات الحد الأدنى للتركيز المثبط (MIC) (من R / 8 إلى 8R) ل 1500 سلالة من السالمونيلا المعزولة من الدواجن في شاندونغ ، الصين ، ضد 10 عوامل مضادة للميكروبات بواسطة نظام فحص AST / phage الذكي عالي الإنتاجية. تم الحصول على مؤشر لار ، الذي يعني "مضادات حيوية أقل ، ومقاومة أقل وبقايا حتى القليل من المضادات الحيوية" ، عن طريق حساب المتوسط المرجح لكل MIC والقسمة على R. يحسن هذا النهج الدقة مقارنة باستخدام انتشار المقاومة لتوصيف درجة مقاومة مضادات الميكروبات (AMR) للسلالات عالية المقاومة. بالنسبة لسلالات السالمونيلا ذات مقاومة مضادات الميكروبات العالية ، تم فحص العاثيات المحللة بكفاءة من مكتبة العاثيات بواسطة هذا النظام ، وتم حساب طيف التحلل وتحليله. أظهرت النتائج أن نظام فحص AST / phage الذكي عالي الإنتاجية كان قابلا للتشغيل ودقيقا وعالي الكفاءة وغير مكلف وسهل الصيانة. وإلى جانب نظام شاندونغ لرصد مقاومة مضادات الميكروبات البيطرية، كان النظام مناسبا للبحث العلمي والكشف السريري المتعلق بمقاومة مضادات الميكروبات.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نظرا لاستخدام العوامل المضادة للميكروبات على نطاق واسع للوقاية من الأمراض المعدية البكتيرية ، أصبحت مقاومة مضادات الميكروبات (AMR) مشكلة صحية عامة عالمية1. مكافحة مقاومة مضادات الميكروبات هي المهمة الرئيسية الحالية لرصد مقاومة مضادات الميكروبات لمسببات الأمراض الوبائية والعلاج التآزري للعوامل الحساسة المضادة للميكروبات والبكتيريا المحللة2.

اختبار حساسية مضادات الميكروبات في المختبر (AST) هو الدعامة الأساسية لرصد العلاج والكشف عن مستوى مقاومة مضادات الميكروبات. إنه جزء مهم من علم الأدوية المضادة للميكروبات والأساس الحاسم للطب السريري. قام معهد المعايير السريرية والمخبرية (CLSI) التابع للولايات المتحدة واللجنة الأوروبية لاختبار الحساسية لمضادات الميكروبات (EUCAST) بصياغة وتنقيح المعايير الدولية ل AST وتعديل واستكمال طرق AST ونقاط التوقف باستمرار لتحديد MIC لمزيج معين من "العامل المضاد للميكروبات" باعتباره حساسا (S) أو مقاوما (R) أو وسيطا (I) 3 ، 4.

من ثمانينيات القرن العشرين إلى تسعينيات القرن العشرين ، تم تطوير أدوات التخفيف الدقيقة الأوتوماتيكية بسرعة وتطبيقها على الممارسة السريرية ، مع أمثلة تشمل Alfred 60AST و VITEK System و PHOENIXTM و Cobasbact5،6،7. ومع ذلك ، كانت هذه الأدوات باهظة الثمن ، وتتطلب مواد استهلاكية عالية التكلفة ، وتم تصميم نطاقات الكشف الخاصة بها لأدوية المرضى السريرية5،6،7. لهذه الأسباب ، فهي ليست مناسبة للفحص السريري البيطري والكشف عن كميات كبيرة من السلالات شديدة المقاومة. في هذه الدراسة ، تم تطوير نظام فحص AST / phage ذكي عالي الإنتاجية ، بما في ذلك ملقح مصفوفة 96 نقطة (الشكل 1) ، ومحول الحصول على الصور (الشكل 2) ، والبرنامجالمقابل 8 ، لإجراء AST لمجموعة من سلالات البكتيريا ضد عوامل متعددة مضادة للميكروبات في وقت واحد بواسطة طريقة تخفيف أجار. علاوة على ذلك ، تم استخدام النظام أيضا للكشف عن أنماط تحلل العاثيات وتحليلها ضد البكتيريا المقاومة لمضادات الميكروبات9 ، وتم اختيار العاثيات المحللة بكفاءة من مكتبة العاثيات. تم العثور على هذا النظام ليكون فعالا وبأسعار معقولة وسهل التشغيل.

figure-introduction-1
الشكل 1: مخطط إنشائي لملقح المصفوفة المكون من 96 نقطة. 1: لوحة دبوس التلقيح. 2: الناقل المحمول. 3: كتلة البذور. 4: لوحة حضن. 5: قاعدة. 6: مقبض التشغيل. 7: دبوس الحد. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-introduction-2
الشكل 2: مخطط هيكلي لمحول الحصول على الصور. 1: قذيفة. 2: شاشة عرض. 3: غرفة الحصول على الصور. 4: قاعدة لوحة الكشف. 5: لوحة الكشف داخل وخارج المستودع. 6: لوحة التحكم. 7: جهاز تحويل الحصول على الصور. 8: مصدر الضوء. 9: ماسح الصور. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم جمع سلالات السالمونيلا المستخدمة في هذه الدراسة من الدواجن في شاندونغ ، الصين ، بعد الحصول على موافقة من لجنة السلامة الحيوية التابعة لمعهد علوم والطب البيطري ، أكاديمية شاندونغ للعلوم الزراعية ، الصين.

1. تطبيق نظام AST الذكي عالي الإنتاجية8

  1. إعداد اللقاح
    1. احتضان كائن مراقبة الجودة الإشريكية القولونية و 93 سلالة من السالمونيلا ليتم اختبارها ل AST على ألواح مولر هينتون أجار (MHA) لمدة 16-18 ساعة عند 37 درجة مئوية3.
    2. قم بإعداد لقاح كل سلالة لمطابقة معيار التعكر 0.5 McFarland بناء على الطريقة المحددة في معيار CLSI3ثم قم بتخفيفه 10 مرات.
    3. ضع 200 ميكرولتر من المياه المالحة العادية المعقمة فيالبئر الأفقي الأول (A1) للوحة 96 بئرا كعنصر تحكم سلبي ، وتعليقين لكائن مراقبة الجودةفي البئرين الأفقيين 2 و 3 (A2و A3) كتحكم إيجابي ، ومراقبة الجودة ، على التوالي. أضف 200 ميكرولتر من معلقات اللقاح المخففة لكل بقعة تم اختبارها في 93 بئرا المقابلة في كتلة البذور المكونة من 96 بئرا.
  2. تحضير لوحة أجار مضادات الميكروبات
    1. اضبط نطاقات تركيز العوامل المضادة للبكتيريا المختلفة التي تم اختبارها وفقا لنطاق حساب مؤشر لار (من 0.125R إلى 8R). تتراوح التركيزات من نطاق مراقبة الجودة أو 0.0625R (يخضع للنطاق الأدنى) إلى 8R.
      ملاحظة: إذا لم يتم حساب مؤشر لار ، يمكن تعيين نطاق تركيزات المضادات الحيوية وفقا لاحتياجات AST.
    2. تنفيذ مخطط تخفيف مضاعفة log2 لمحلول المضادات الحيوية بدءا من تركيز مخزون مناسب بناء على طريقة تخفيف الآجار المحددة في معيار CLSI3.
    3. تعقيم عبوات زجاجية سعة 50 مل تحتوي على 18 مل من وسائط أجار مولر-هينتون. أضف 2 مل من التخفيفات المناسبة للمحلول المضاد للميكروبات إلى 18 مل من الوسائط المنصهرة المبردة إلى 45-50 درجة مئوية ، واخلطها جيدا ، واسكبها في الألواح في خزانة السلامة الأحيائية.
    4. اسمح للأجار بالتصلب في درجة حرارة الغرفة (RT) ، واترك فجوة تحت غطاء الألواح المحتضنة وانفخ لتجفيف سطح الآجار قبل التلقيح.
    5. قم بتسمية أنواع العوامل المضادة للميكروبات والتركيزات على الجانب الخلفي من الألواح المحتضنة. رتب الألواح المحتضنة المتعددة لكل عامل مضاد للميكروبات في كومة بترتيب تخفيف مضاعف log2.
    6. قم بإعداد لوحين أجار خاليين من الأدوية كعناصر تحكم لكل عامل مضاد للميكروبات.
  3. خطوات التلقيح لملقح المصفوفة 96 نقطة
    1. قم بتركيب لوحة دبوس التلقيح المعقم على دعم ملقح مصفوفة 96 نقطة في خزانة السلامة البيولوجية.
    2. ضع كتلة البذور المحضرة مع سلالات مختبرة وصفيحة محتضنة أجار على الناقل المحمول ، بنفس زاوية تحديد المواقع للوحتين.
    3. ادفع الناقل المحمول بحيث تكون كتلة البذور أسفل لوحة دبوس التلقيح مباشرة.
    4. اضغط على مقبض التشغيل ، وحرك لوحة دبوس التلقيح لأسفل ، وقم بتوجيه 96 دبابيس إلى اللقاح في 96 بئرا من كتلة البذور.
    5. حرر مقبض التشغيل مع التحكم ، ثم أعد ضبط لوحة دبوس التلقيح تحت تأثير الزنبرك.
    6. اضغط على مقبض التشغيل 2-3 مرات لتحريك كل لقاح جيدا وغمسه. ادفع وحرك اللوحة الحاملة بحيث تكون اللوحة المحتضنة أسفل لوحة دبوس التلقيح مباشرة.
    7. اضغط على مقبض التشغيل ، وحرك لوحة دبوس التلقيح لأسفل ، وتوقف لمدة 1-2 ثانية لجعل دبابيس التلقيح تلامس سطح اللوحة المحتضنة بالكامل.
    8. حرر مقبض التشغيل. هذا يكمل تلقيح واحد. استبدل صفيحة محتضنة أخرى واستمر في الدورة حتى تنتهي مجموعة واحدة من ألواح أجار مضادات الميكروبات.
    9. استبدل صفيحة دبوس تلقيح أخرى وكتلة بذور ، وقم بتلقيح مجموعة أخرى من السلالات المختبرة. دورة حتى يتم الانتهاء من جميع التطعيمات.
      ملاحظة: قم بتلقيح صفيحة أجار تحكم (بدون عامل مضاد للميكروبات) أولا ، ثم اللوحة بترتيب تركيز الدواء من الأقل إلى الأعلى ، ولوحة أجار التحكم الثانية أخيرا لضمان عدم وجود تلوث أو ترحيل عامل مضاد للميكروبات. يعتمد حجم التلقيح على حجم الترسب الطبيعي لكل دبوس يبلغ حوالي 2 ميكرولتر.
  4. احتضان ألواح أجار المضادة للميكروبات
    1. احتضان ألواح الآجار المضادة للميكروبات الملقحة في RT حتى يتم امتصاص الرطوبة الموجودة في بقع اللقاح في الآجار.
    2. اقلب الألواح واحتضنها لمدة 16-20 ساعة عند 37 درجة مئوية للسلالات المختبرة للتأكد من أن البكتيريا غير المقيدة تشكل مستعمرات.
  5. الحصول على الصور وإحصاءات البيانات
    1. انقر نقرا مزدوجا فوق نظام الحصول على صور AST مصفوفة 96 نقطة لفتح البرنامج.
    2. انقر فوق معلومات الاختبار في شريط المهام. انقر فوق جديد لإنشاء مهمة اختبار جديدة ، واملأ المعلومات وفقا للمطالبات ، بما في ذلك الرمز والاسم والمصدر والبكتيريا وعدد السلالات والمضادات الحيوية والتدرج.
    3. انقر فوق جمع البيانات > عنصر اختبار > الصورة لتحديد المهمة الجديدة التي تم إنشاؤها. انقر فوق المضادات الحيوية لتحديد اسم المضاد الحيوي ، وانقر فوق التدرج لتحديد التركيز الأولي لهذا المضاد الحيوي.
    4. انقر فوق اتصال للاتصال بمحول الحصول على الصور.
    5. ضع الألواح المحتضنة المقابلة على قاعدة لوحة الكشف مع الزاوية المفقودة في المقدمة اليمنى للتوجيه وادفع إلى محول التقاط الصور.
    6. انقر فوق مجموعة للحصول على الصور. سوف يقفز تدرج المضادات الحيوية تلقائيا إلى التدرج التالي. ضع اللوحة التالية بدورها واستمر في النقر فوق المجموعة حتى يتم جمع لوحات هذا المضاد الحيوي.
    7. انقر فوق المضادات الحيوية ، وحدد المجموعة التالية من اللوحات المحتضنة. انقر فوق التدرج لتحديد تدرج البداية وانتقل إلى الجولة التالية من مجموعة الصور.
    8. بعد الانتهاء من جميع المجموعات ، انقر فوق إرسال. سيتعرف البرنامج تلقائيا على عدد وحدات البكسل البيضاء المنسقة في كل نقطة تلقيح في الصور ، ويحدد ما إذا كان هناك تكوين مستعمرة ويحول الصور إلى قيم MIC.
    9. انقر فوق استعلام للحصول على جميع نتائج MIC للسلالات ضد المضادات الحيوية المختبرة.
      ملاحظة: نظام AST الذكي عالي الإنتاجية مناسب لتحديد MICs لدفعات كبيرة من السلالات البكتيرية. تستغرق عملية الاختبار ، بما في ذلك التحضير والتلقيح والحضانة وقراءة النتائج ، 3 أيام. يمكن ضبط أنواع المضادات الحيوية ونطاقات الكشف عن MIC وفقا للاحتياجات الخاصة ، ويمكن إعادة استخدام المواد الاستهلاكية الرئيسية.
  6. حساب مؤشر لار
    1. حدد مؤشر لار بدقة باستخدام الصيغة: ، حيث: figure-protocol-1
      MICi: الحد الأدنى من التركيز المثبط.
      يمثل نطاق توزيعات MIC من MIC-3 إلى MIC3 تركيزات تسلسلية مزدوجة تتمحور حول R: 0.125R و 0.25R و 0.5R و R و 2R و 4R و 8R.
      figure-protocol-2 هو 2 i ، ونطاقi هو -3 إلى 3.
      R: نقاط توقف مقاومة البكتيريا ضد العوامل المضادة للميكروبات الموحدة بواسطة CLSI.
      f: توزيع تردد هيئة التصنيع العسكري.
      ملاحظة: مؤشر لار العام هو المتوسط الحسابي لجميع مؤشرات لار. بعد حساب مؤشر لار ، قم بتقريب القيمة النهائية إلى رقمين مهمين بعد الفاصلة العشرية.

2. نظام ذكي عالي الإنتاجية لفحص العاثيات9

  1. تحضير كتلة بذور العاثية وألواح محتضنة مزدوجة الطبقة تحتوي على بكتيريا.
    1. استخدم طريقة أجار الطبقةالمزدوجة 10 أو طريقة الاستزراع السائل11 لصنع عاثيات مختلفة. خفف إلى تركيز مواز مناسب مع عيار 1 × 104-5 pfu / mL ، وأضف 200 ميكرولتر من لقاح العاثية إلى كتلة البذور المكونة من 96 بئرا.
    2. اصنع صفائح مزدوجة الطبقات من البكتيريا (10 مل من وسائط أجار القاع [أجار 12 جم / لتر] و 6 مل من وسائط شبه أجار العلوية [6 جم / لتر] مع 100 ميكرولتر من البكتيريا [0.5 ماكفارلاند]) ليتم اختبارها.
    3. اصنع صفيحة محتضنة مزدوجة الطبقة لكل سلالة ليتم اختبارها. اترك فجوة تحت غطاء اللوحة ذات الطبقات المزدوجة وانفخ لتجفيف سطح أجار في خزانة السلامة الحيوية.
  2. اختبار الفحص
    1. ضع كتلة بذور العاثية المحضرة ولوحة الطبقة المزدوجة على الناقل المتحرك للقاح المصفوفة المكون من 96 نقطة ، وانقل كل لقاح العاثيات إلى سطح شبه أجار. استمر في الدورات حتى تكتمل جميع السلالات المختبرة.
    2. اترك الألواح ذات الطبقة المزدوجة الملقحة تبقى في RT حتى يتم امتصاص الرطوبة الموجودة في بقع اللقاح بالكامل في شبه أجار.
    3. اقلب الألواح واحتضانها في ظل ظروف مناسبة للسلالات المختبرة لمدة 4-6 ساعات لضمان تكوين بقع تحلل واضحة.
  3. تحليل البيانات
    1. احصل على صورة النتيجة التجريبية لكل لوحة مزدوجة الطبقة واحفظها بواسطة محول الحصول على الصور (الخطوات 1.5.4-1.5.6).
    2. سجل عدد وأشكال الأشكال المختلفة للبقع في جدول بيانات بناء على الصور التي تم الحصول عليها ، واحسب النسب الخاصة بالأنواع المختلفة من العاثيات.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

باتباع بروتوكول نظام AST الذكي عالي الإنتاجية ، تم توضيح تطبيقه بواسطة السالمونيلا من الدواجن في شاندونغ ، الصين ، كمثال.

يوضح الشكل 3 نمو سلالات السالمونيلا على ألواح الآجار مع الأمبيسلين (R من 32 ميكروغرام / مل) بتركيزات من 2 إلى 256 ميكروغرام / مل يحددها محول الحصول على الصور. كانالبئر الأفقي الأول A1 هو التحكم السلبي ولم يظهر أي نمو للمستعمرة. كانت A2 و A3 سلالات مراقبة الجودة مع MIC 4 ميكروغرام / مل (تشكيل مستعمرة على صفيحة أجار م...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تأسيس طريقة تخفيف الآجار واستخدامها على نطاق واسع. كان مبدأ نظام AST عالي الإنتاجية هو مبدأ طريقة تخفيف أجار. كانت إحدى الخطوات الحاسمة في البروتوكول هي النقل الدقيق عالي الإنتاجية ل 96 لقاحا في وقت واحد ، والذي تم إجراؤه عدة مرات متتالية. لإكمال هذه الخطوة الحاسمة ، كانت دبابيس ملقح المصفوفة المكونة من 96 نقطة موحدة وسلسة للغاية. كان الترسب الطبيعي لكل دبوس بحجم 2 ميكرولتر تقريبا ، والذي تم تجميعه في قطرات صغيرة على سطح وسط الآجار ليتم امتصاصه بسرعة في الأجار ، ولا يتدفق أو يتناثر ليسبب تلوثا متبادلا. وكانت الخطوة ال...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yuqing Liu et al. قدموا براءات اختراع صينية لملقح المصفوفة 96 نقطة ومحول الحصول على الصور وتطبيقاتهم (رقم براءة الاختراع ZL 201610942866.3 ورقم براءة الاختراع ZL 201910968255.X).

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم دعم هذا العمل من قبل المشروع الوطني للبحث والتطوير الرئيسي (2019YFA0904003) ؛ النظام الصناعي الزراعي الحديث في مقاطعة شاندونغ (SDAIT-011-09) ؛ مشروع تحسين منصة التعاون الدولي (CXGC2023G15)؛ مهام الابتكار الرئيسية لمشروع ابتكار العلوم والتكنولوجيا الزراعية التابع لأكاديمية العلوم الزراعية شاندونغ ، الصين (CXGC2023G03).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
96 جيدا & nbsp; لوحة الثقافةBeijing lanjieke Technology Co., Ltd11510
96-dot مصفوفة AST نظام الحصول على الصورمعهد علوم والطب البيطري ، أكاديمية شاندونغ للعلوم الزراعيةحقوق الطبع والنشر
96 نقطة مصفوفة لقاح   ؛معهد علوم والطب البيطري ، أكاديمية شاندونغ للعلوم الزراعيةغير / منتجحاصل على براءة اختراع
AgarQingdao مرحبا التكنولوجيا الصناعية Haibo Biotechnology Co.، LtdHB8274-1
Amikacin  ؛شنغهاي ماكلين التكنولوجيا الكيميائية الحيوية المحدودةA857053
أموكسيسيلينشنغهاي ماكلين التكنولوجيا الكيميائية الحيوية المحدودةA822839
أمبيسلينشنغهاي ماكلين التكنولوجيا الكيميائية الحيوية المحدودةA830931
الميزان التحليليSartoriusBSA224S
الحساب الآلي لمؤشر لار لمقاومة مضادات الميكروباتمعهد علوم والطب البيطري ، أكاديمية شاندونغ للعلوم الزراعيةحقوق الطبع والنشر للبرامج
البكتيريا السالمونيلا < / em>ss سلالات معهد علوم والطب البيطري ، أكاديمية شاندونغ للعلوم الزراعيةغير متاح منأصل
حيواني المقاومة البكتيرية نظام إدارة شهادة مؤشر لار V1.0معهد علوم والطب البيطري ، أكاديمية شاندونغ للعلوم الزراعيةحقوق الطبع والنشر
CeftiofurShanghai McLean Biochemical Technology Co.، LtdC873619
CiprofloxacinShanghai McLean Biochemical Technology Co.، LtdC824343
حمض ClavulanicShanghai McLean Biochemical Technology Co.، LtdC824181
منضدة العمل النظيفةSuzhou معدات التنقية المحدودةSW-CJ-2D
كبريتاتكوليستين شنغهاي ماكلين التكنولوجيا الكيميائية الحيوية المحدودةC805491
لوحة الثقافةلعلوم والطب البيطري ، أكاديمية شاندونغ للعلوم الزراعيةغير / Aمنتج حاصل على براءة اختراع
دوكسيسيكلينشنغهاي ماكلين التكنولوجيا الكيميائية الحيوية المحدودةD832390
EnrofloxacinShanghai McLean Biochemical Technology Co.، Ltdمرشح E809130
0.22 & mu ؛ مميليبورSLGP033RB
فلورفينيكولشنغهاي ماكلين للتكنولوجيا الكيميائية الحيوية المحدودةF809685
جنتاميسينشنغهاي ماكلين للتكنولوجيا الكيميائية الحيوية المحدودةG810322
زجاجة زجاجية 50 ملXuzhou Qianxing Glass Technology Co.، LtdQX-7
نظام الكشف عن المقاومة عالية الإنتاجية V1.0معهد علوم والطب البيطري ، أكاديمية شاندونغ للعلوم الزراعية ،حقوق الطبع والنشر للبرامج
محول الحصول على الصور، معهد علوم والطب البيطري ، أكاديمية شاندونغ للعلوم الزراعيةغير متوفر / منتجحاصل على براءة
MeropenemShanghai McLean Biochemical Technology Co.، LtdM861173
Mueller-Hinton agarتشينغداو مرحبا التكنولوجيا الصناعية حديقة هايبو التكنولوجيا الحيوية المحدودةHB6232
طبق بتري 60 مم × 15 ممتشينغداو جينديان معدات الكيمياء الحيوية المحدودة16021-1
طبق بتري 90 مم × 15 ممتشينغداو جينديان معدات الكيمياء الحيوية المحدودة16001-1
السالمونيلا < / em> العاثياتمعهد علوم والطب البيطري ، أكاديمية شاندونغ للعلوم الزراعيةN / A
شاكر حاضنةشنغهاي Minquan Instrument Co.، LtdMQD-S2R
مقياس التعكرشنغهاي XingBai Biotechnology Co.، LtdF-TC2015
Varms نظام مكتبة من النوع الأساسي V1.0معهد علوم والطب البيطري ، أكاديمية شاندونغ للعلوم الزراعيةحقوق الطبع والنشر للبرامج الداخلية البخار
العمودي عالي الضغط معقممصنع شنغهاي شين للأدوات الطبيةLDZX-75L
نظام إدارة اختبار مقاومة مسببات الأمراض البيطريةمعهد علوم والطب البيطري ، أكاديمية شاندونغ للعلوم الزراعيةحقوق الطبع والنشر
المراقبة السحابية للمقاومة البيطرية ومنصة التحكم في العاثيات V1.0معهد علوم والطب البيطري ، أكاديمية شاندونغ للعلوم الزراعيةحقوق الطبع والنشر
للبرامج الداخلية برنامج الداخليةللبرامج الداخليةمعهد الداخلية ، اختراع للبرامج الداخلية الداخلية للبرامج

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ramanan, L., et al. Antimicrobial resistance-the need for global solutions. The Lancet Infectious Diseases. 13 (12), 1057-1098 (2013).
  2. Xiaonan, Z., Qing, Z., Thomas, S. P., Yuqing, L., Martha, R. J. C. inPhocus: Perspectives of the application of bacteriophages in poultry and aquaculture industries based on Varms in China. PHAGE: Therapy, Applications, and Research. 2 (2), 69-74 (2021).
  3. CLSI. Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests. CLSI document M100. , M100 32nd edition, Clinical and Laboratory Standards Institute, Wayne, PA . (2022).
  4. Yuqing, L., et al. Antimicrobial Sensitivity Testing Standard of EUCAST. , China Standards Press, Beijing. (2017).
  5. Barnini, S., et al. A new rapid method for direct antimicrobial susceptibility testing of bacteria from positive blood cultures. BMC Microbiology. 16 (1), 185-192 (2016).
  6. Höring, S., Massarani, A. S., Löffler, B., Rödel, J. Rapid antimicrobial susceptibility testing in blood culture diagnostics performed by direct inoculation using the VITEK®-2 and BD PhoenixTM platforms. European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases. 38 (3), 471-478 (2019).
  7. Dupuis, G. Evaluation of the Cobasbact automated antimicrobial susceptibility testing system. European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases. 4 (2), 119-122 (1985).
  8. A system of bacterial antimicrobial resistance detection and its operation method. China Patent. , ZL 201610942866.3 (2019).
  9. A high throughput test plate for screening bacteriophage of zoonotic pathogens and its application. China Patent. , ZL 201910968255.X (2022).
  10. Adams, M. H. Bacteriophages. , Interscience Publishers, New York. (1959).
  11. Nair, A., Ghugare, G. S., Khairnar, K. An appraisal of bacteriophage isolation techniques from environment. Microbial Ecology. 83 (3), 519-535 (2022).
  12. Shandong veterinary antibiotic resistance system. , http://www.varms.cn (2023).
  13. Ming, H., et al. Comparison of the results of 96-dot agar dilution method and broth microdilution method. Chinese Journal of Antibiotics. 43 (6), 729-733 (2018).
  14. Laxminarayan, R., Klugman, K. P. Communicating trends in resistance using a drug resistance index. BMJ Open. 1 (2), e000135(2011).
  15. Chen, Y., et al. Assessing antibiotic therapy effectiveness against the major bacterial pathogens in a hospital using an integrated index. Future Microbiology. 12, 853-866 (2017).
  16. Ciccolini, M., Spoorenberg, V., Geerlings, S. E., Prins, J. M., Grundmann, H. Using an index-based approach to assess the population-level appropriateness of empirical antibiotic therapy. Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 70 (1), 286-293 (2015).
  17. Yanbo, L., et al. Preliminary application of inoculation system for high-throughput drug susceptibility test. China Poultry. 42 (6), 52-57 (2020).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Antimicrobial Sensitivity TestingPhage ScreeningHigh Throughput SystemLar IndexAntimicrobial ResistanceMinimum Inhibitory ConcentrationSalmonella Strains96 Dot MatrixImage AcquisitionDouble Layer Agar

Related Articles