باستخدام نموذج فأر مرض الكبد الدهني غير الكحولي الناجم عن النظام الغذائي (NAFLD) ، وصفنا استخدام تقنيات التصوير المقطعي المحوسب الدقيقة الجديدة في الجسم الحي كطريقة غير جراحية لتقييم مراحل تطور NAFLD ، مع التركيز في الغالب على شبكة الأوعية الدموية الكبدية بسبب مشاركتها الكبيرة في خلل التنظيم الكبدي المرتبط ب NAFLD.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تقنيات التصوير المقطعي المحوسب الدقيق الجديدة في الجسم الحي لتقييم تطور مرض الكبد الدهني غير الكحولي
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
يعد مرض الكبد الدهني غير الكحولي (NAFLD) مشكلة صحية عالمية متنامية ، ويتفاقم تأثير NAFLD بسبب النقص الحالي في العلاجات الفعالة. العوامل المحددة الكبيرة التي تعيق التشخيص الدقيق في الوقت المناسب (بما في ذلك الدرجات) ومراقبة مرض الكبد الدهني غير الكحولي ، فضلا عن تطوير العلاجات المحتملة ، هي أوجه القصور الحالية في توصيف بنية البيئة المكروية الكبدية وتسجيل مرحلة المرض بطريقة مكانية زمانية وغير جراحية. باستخدام نموذج فأر NAFLD الناجم عن النظام الغذائي ، قمنا بالتحقيق في استخدام تقنيات التصوير المقطعي المحوسب الدقيق (CT) في الجسم الحي كطريقة غير جراحية لتقييم مراحل تطور NAFLD ، مع التركيز في الغالب على شبكة الأوعية الدموية الكبدية بسبب مشاركتها الكبيرة في خلل التنظيم الكبدي المرتبط ب NAFLD. تسمح منهجية التصوير هذه بالتحليل الطولي لتنكس دهني الكبد وامتصاص الأنسجة الوظيفية ، بالإضافة إلى تقييم حجم الدم النسبي وقطر الوريد البابي وكثافة شبكة الأوعية الدموية. إن فهم تكيفات شبكة الأوعية الدموية الكبدية أثناء تطور NAFLD وربط ذلك بطرق أخرى لتوصيف تطور المرض (التنكس الدهني ، الالتهاب ، التليف) باستخدام الطريقة المقترحة يمكن أن يمهد الطريق نحو إنشاء مناهج جديدة وأكثر كفاءة وقابلة للتكرار لأبحاث NAFLD في الفئران. ومن المتوقع أيضا أن يؤدي هذا البروتوكول إلى رفع قيمة النماذج الحيوانية قبل السريرية للتحقيق في تطوير علاجات جديدة ضد تطور المرض.
المقدمة
مرض الكبد الدهني غير الكحولي (NAFLD) هو مرض استقلابي يصيب حوالي 25٪ من السكان و >80٪ من الأشخاص الذين يعانون من السمنة المفرطة1. ما يقدر بنحو ثلث هؤلاء الأفراد يتقدمون إلى التهاب الكبد الدهني غير الكحولي (NASH) ، والذي يتميز بالتنكس الدهني الكبدي والالتهاب والتليف2. NASH هي مرحلة مرضية ذات مخاطر أعلى بكثير لتطوير تليف الكبد وسرطان الخلايا الكبدية (HCC)3,4. لهذا السبب ، يعد NASH حاليا السبب الثاني الأكثر شيوعا لزراعة الكبد ، ومن المتوقع أيضا أن يصبح قريبا أهم مؤشر لزراعة الكبد5،6،
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تم تنفيذ جميع الإجراءات من قبل موظفي BIOEMTECH وفقا للوائح الرعاية الأوروبية والوطنية وتمت الموافقة عليها من قبل السلطات الوطنية (رقم الترخيص EL 25 BIOexp 45 / PN 49553 21/01/20). تم تصميم جميع التجارب والإبلاغ عنها مع الالتزام بإرشادات REACH26. تم شراء الفئران من معهد باستور اليوناني ، أثينا ، اليونان.
ملاحظة: تم إيواء الحيوانات بشكل جماعي في أقفاص جيدة التهوية غنية بقضبان وأنابيب من الورق المقوى في غرفة عند 20-22 درجة مئوية ، مع رطوبة نسبية تتراوح بين 50٪ و 60٪ ودورة ضوء / مظلمة لمدة 12 ساعة (الضوء 07:00 صباحا - 07:00 مساء). تم استخدام مزيج من نظام غذائي عالي الدهون (HFD) وشراب الذرة عالي الفركتوز (HFCS) ، وهو محلي....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
في هذه الدراسة التمثيلية ، أشار التصوير المقطعي المحوسب الدقيق بدون أي عامل تباين إلى نسبة أعلى من دهون الكبد في الفئران المصابة ب NAFLD مقارنة بالضوابط (الجدول 2) ، مما يؤكد علم الأمراض. باستخدام عامل التباين ExiTron وبنية شبكة الأوعية الدموية الكبدية وتحليل الكثافة الموصوف أعلاه ، تم العثور على كثافة الحجم الإجمالية لشبكة الأوعية الدموية الكبدية أعلى في الفئران المصابة ب NAFLD مقارنة بالضوابط الصحية (الشكل 6 ، الجدول 2). كان لدى الفئران المصابة ب NAFLD أيض.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
الطريقة الحالية الموصى بها لتشخيص NAFLD وتنظيمه في البشر هي خزعة الكبد ، والتي تؤوي خطر حدوث مضاعفات النزيف ، بالإضافة إلى عدم دقة أخذ العينات40. على العكس من ذلك ، في النماذج الحيوانية ، يتم إجراء هذا التشخيص عن طريق الأنسجة بعد الوفاة ، على الرغم من أن بروتوكولات خزعة الكبد القابلة للبقاء على قيد الحياة متاحة الآن ويوصى بها عندما يسمح تصميم الدراسةب 41. استخدام الأنسجة بعد الوفاة يعني أن هناك حاجة إلى عدد كبير من الحيوانات للتحقيق في تطور هذا المرض. على هذا النحو ، لا يمك.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
شكر وتقدير
تم إنشاء الشكل 1 باستخدام BioRender.com. تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة اليونانية للبحث والابتكار (# 3222 إلى AC.). يتم تمويل آنا حاجيهامبي من قبل معهد روجر ويليامز لأمراض الكبد ، مؤسسة أبحاث الكبد.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| eXIA160 | Binitio Biomedical، Inc. | https://www.binitio.com/?Page=Products | |
| نظام غذائي غني بالدهون يحتوي على 60٪ من السعرات الحرارية من الدهون | الحمية البحثية ، نيو برونزويك ، نيوجيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية | D12492 | |
| شراب الذرة عالي الفركتوز ؛ | أفضل النكهات ، مرهم العيون CA | hfcs-1gallon | |
| Lacrinorm ؛ | Bausch & أمبير حمية Lomb | ||
| Normal مع 10٪ من السعرات الحرارية من الدهون | الحميات البحثية ، نيو برونزويك ، نيوجيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية | D12450 | |
| Viscover ExiTron nano 12000 | Milteny Biotec, Bergisch Gladbach, Germany | 130-095-698 | |
| VivoQuant | Invicro | ||
| X-CUBE | Molecubes ، بلجيكا | https://www.molecubes.com/systems/ |
المراجع
- Lazarus, J. V., et al. Advancing the global public health agenda for NAFLD: A consensus statement. Nature Reviews. Gastroenterology & Hepatology. 19 (1), 60-78 (2022).
- Takahashi, Y., Fukusato, T.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
