الأوعية الدموية الفعالة لعضويات الكلى من خلال زرع Inenterlomic في أجنة الدجاج

Marije Koning; Ellen Lievers; Thierry Jaffredo; Cathelijne W. van den Berg; Ton J. Rabelink

doi:10.3791/65090

يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

الأوعية الدموية الفعالة لعضويات الكلى من خلال زرع Inenterlomic في أجنة الدجاج

2.7K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/65090

⸱

فبراير 17, 2023

Marije Koning¹^,² , Ellen Lievers¹^,² , Thierry Jaffredo³ , Cathelijne W. van den Berg¹^,²^,⁴ , Ton J. Rabelink¹^,²^,⁴

¹Department of Internal Medicine - Nephrology, Leiden University Medical Center, ²Einthoven Laboratory of Vascular and Regenerative Medicine, Leiden University Medical Center, ³IBPS, CNRS UMR7622, Developmental Biology Laboratory, Sorbonne Université, ⁴The Novo Nordisk Foundation Center for Stem Cell Medicine (reNEW), Leiden University Medical Center

في هذه المقالة

ملخص

هنا ، نقدم بروتوكولا مفصلا لزرع عضويات الكلى في التجويف السيلومي لأجنة الدجاج. تحفز هذه الطريقة الأوعية الدموية والنضج المعزز للعضويات في غضون 8 أيام ويمكن استخدامها لدراسة هذه العمليات بطريقة فعالة.

الملخص

تحتوي عضويات الكلى المشتقة من الخلايا الجذعية متعددة القدرات التي يسببها الإنسان على هياكل تشبه النيفرون تشبه تلك الموجودة في الكلى البالغة إلى حد ما. لسوء الحظ ، فإن قابليتها للتطبيق السريري يعوقها عدم وجود الأوعية الدموية الوظيفية وبالتالي النضج المحدود في المختبر. إن زرع عضويات الكلى في التجويف السيلومي لأجنة الدجاج يحفز الأوعية الدموية عن طريق الأوعية الدموية المثقوبة ، بما في ذلك تكوين الشعيرات الدموية الكبيبية ، ويعزز نضجها. هذه التقنية فعالة للغاية ، مما يسمح بزرع وتحليل أعداد كبيرة من المواد العضوية. تصف هذه الورقة بروتوكولا مفصلا للزرع الداخلي لعضويات الكلى في أجنة الدجاج ، يليه حقن الليكتين المسمى بالفلورسنت لتلطيخ الأوعية الدموية المثقوبة ، وجمع المواد العضوية المزروعة لتحليل التصوير. يمكن استخدام هذه الطريقة للحث على دراسة الأوعية الدموية العضوية والنضج للعثور على أدلة لتعزيز هذه العمليات في المختبر وتحسين نمذجة المرض.

المقدمة

لقد ثبت أن عضويات الكلى المشتقة من الخلايا الجذعية متعددة القدرات التي يسببها الإنسان (hiPSC) لديها إمكانات للدراسات التنموية¹،²،³،⁴ ، وفحص السمية 5،⁶ ، ونمذجة المرض⁵،⁷،⁸،⁹،^10،11،¹²^،¹³. ومع ذلك ، فإن قابليتها للتطبيق له....