Method Article

إجراءات التشغيل والاحتياطات الخاصة بعلاج الوخز بالإبر المتضمن بالخيوط في مرض الزهايمر

DOI:

10.3791/65895

⸱

May 10th, 2024

 ,  ,  ,  ,  , 
1College of Acupuncture and Orthopedics, Hubei University of Chinese Medicine, 2Hubei Shizhen Laboratory, 3Hubei International Science and Technology Cooperation Base of Preventive Treatment by Acupuncture and Moxibustion, 4Hubei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تقدم هذه الدراسة بروتوكولا لعلاج الوخز بالإبر المضمن بالخيوط في الفئران الشبيهة بمرض الزهايمر.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

علاج التضمين بالخيوط (TEAT) هو علاج يمنع الأمراض ويديرها عن طريق إدخال خياطة قابلة للتحلل في نقطة الوخز ، مما يوفر تحفيزا طويل الأمد. الحلمة هي طريقة بسيطة تتجنب الانزعاج من الوخز بالإبر بانتظام وتوفر تأثيرات علاجية مستدامة. تتناول هذه المقالة التأثير المحتمل ل TEAT على قدرات التعلم والذاكرة للفئران المصابة بأعراض تشبه مرض الزهايمر. نظرا لأن التنكس العصبي المستحث كيميائيا والإعاقات المعرفية في الفئران لا يعكس تماما التغيرات المرضية الحقيقية التي لوحظت في مرض الزهايمر. وبالتالي ، فقد حددت مجموعتنا البحثية هذه المظاهر على أنها أعراض تشبه مرض الزهايمر. تم وضع بروتوكول لتحديد اختيار نقاط الوخز ، وعملية التشغيل ، والاحتياطات اللازمة للرأس وأسفل الظهر. أجريت التجربة على ثلاث مجموعات: مجموعة مراقبة ، ومجموعة نموذجية ، ومجموعة TEAT ، تحتوي كل منها على 6 فئران. للحث على أعراض تشبه مرض الزهايمر ، تم حقن الفئران داخل الصفاق مع D-galactose لمدة 7 أسابيع (49 يوما). تلقت الفئران في مجموعة TEAT علاج تضمين catgut الإبر. بعد فترة التدخل ، تم إجراء متاهة موريس المائية (MWM) لتقييم تعلم الفئران وذاكرتها. في وقت لاحق ، تم التضحية بالفئران ، وتم فحص أنسجة المخ. تم إجراء فحص نسيجي لفهم آثار الحلمة على أمراض الفئران التي تظهر عليها أعراض مرض الزهايمر. تشير هذه الدراسة إلى أن TEAT قد يحسن التعلم والذاكرة لدى الفئران المصابة بأعراض تشبه مرض الزهايمر ، مما يشير إلى نهج علاجي جديد واعد لهذه الحالة التنكسية العصبية.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يتضمن الوخز بالإبر المضمن بالخيوط (TEA) تضمين أمعاء القطط أو الغرز القابلة للامتصاص في نقاط الوخز باستخدام إبرة خاصة. هذه التقنية لها تأثير طويل حتى يتم امتصاص الغرز وتحللها. يوفر تحفيزا مستمرا ومستداما لنقاط الوخز بالإبر لمدة أسبوع أو أكثر1 ، مما يحقق نتيجة مماثلة دون الحاجة إلى إجراءات متكررة يومية2. هذا يقلل من عدد المرضى الذين يسعون للحصول على العلاج الطبي ، وبالتالي الحفاظ على الموارد الطبية إلى حد ما. في السنوات الأخيرة ، تم استخدام TEAT بشكل متزايد في مختلف المجالات الطبية في الصين ، بما في ذلك الطب الباطني والطب الخارجي والأمراض الجلدية وملامح الوجه وأمراض النساء وطب الأطفال3. أظهرت الدراسات أنه فعال في إنتاج تأثيرات طويلة المدى وموثوقة لبعض الأمراض المزمنة والمعقدة ، مثل الصرع4 وشلل العصب الوجهي5. لديها مزايا الحد الأدنى من الصدمات والتشغيل البسيط6. بالإضافة إلى ذلك ، تم الإبلاغ عن أن تكاليف علاج TEAT أقل من تكاليف الوخز بالإبر الكهربائية (EA)7. لذلك ، يتم تقييم TEAT بشكل متزايد في البحث السريري والعلمي.

مرض الزهايمر (AD) هو حالة تنكسية عصبية تتطور بمرور الوقت. تبدأ عمليتها الفيزيولوجية المرضية في التراكم قبل حوالي 20 عاما من ظهور الأعراض السريرية ، لكن آليتها لا تزال غير مفهومة تماما8. نظرا لمحدودية توافر الأدوية الفعالة لمرض الزهايمر ، تركز الأبحاث بشكل متزايد على المراحل البادرية وما قبل السريرية للمرض9. الوقاية هي استراتيجية حاسمة لمعالجة تطوروتقدم AD 9,10. في السنوات الأخيرة ، حقق الطب الصيني التقليدي (TCM) تقدما كبيرا ، ومن المتوقع أن يوفر إمكانيات جديدة للوقاية من مرض الزهايمر11,12 وعلاجه. كنوع فرعي من الوخز بالإبر ، يفضل TEAT على العلاجات الأخرى نظرا لنطاق العلاج الواسع ، والحد الأدنى من الصدمات ، والعملية البسيطة ، وتكرار العلاج المنخفض ، والفعالية طويلة الأمد6. تشير الأدبيات الناشئة إلى أن TEAT قد يفيد الأفراد الذين يعانون من السمنة13،14 ، ومرض السكري15 ، والأرق16 ، وهشاشة العظام بعد انقطاع الطمث17 ، والاكتئاب18 ، وكلها عوامل خطر لمرض الزهايمر. كما أنه يحسن الشيخوخة في الفئران المسنة من خلال تنظيم الميتوفاجي2 ، ويحسن التعلم المكاني وضعف الذاكرة ، ويخفف من الضرر المرضي للحصين ، ويمنع استجابة الالتهاب في فئران الخرف الوعائي (VD)19. بدا من الجذاب معرفة ما إذا كان TEAT يمكن أن يعمل أيضا على العمليات المرضية أثناء مرض الزهايمر.

يفتقر البحث الحالي إلى التوحيد والتوحيد في العديد من العناصر الحاسمة لتشغيل TEAT ، بما في ذلك طريقة التضمين ، وأداة التضمين ، والخيط ، وفترة الفاصل الزمني للتضمين. يؤثر هذا النقص في التوحيد على تقييم تأثير العلاج واستكشاف الآليات ذات الصلة ويقيد الترويج والتواصل الخارجيين. أظهرت الأبحاث السابقة20،21 أن إعطاء D-galactose (D-gal) داخل الصفاق يمكن أن يحفز التغيرات المرضية الشبيهة بمرض الزهايمر في الفئران ، بما في ذلك تنكس الخلايا العصبية والإعاقات المعرفية. علاوة على ذلك ، ثبت أن الوخز بالإبر الكهربائية في Baihui (GV20) و Shenshu (BL23) يخفف بشكل فعال من التدهور المعرفي ، ويخفف من التهاب الأعصاب ، ويقلل من تلف الخلايا العصبية. تأخذ هذه الدراسة الفئران النموذجية الشبيهة بمرض الزهايمر كمثال لتقديم اختيار نقاط الوخز وعملية التشغيل والاحتياطات الخاصة ب TEAT في إطار هذا النموذج. ويناقش العناصر التشغيلية الحاسمة لفريق الخبراء التقنيين في البحوث التجريبية لتوفير مرجع للدراسات المستقبلية.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم إجراء جميع التجارب وفقا لدليل المعاهد الوطنية للصحة لرعاية واستخدام المختبر وتمت الموافقة عليها من قبل لجنة إدارة واستخدام المختبر التابعة لمركز مقاطعة هوبى لمكافحة الأمراض والوقاية منها. تم استخدام ما مجموعه 18 أنثى فأر Sprague-Dawley (SD) البالغة من العمر 3 أشهر والتي تزن 220-250 جم للاختبار. تم الحفاظ على جميع الفئران في دورة الضوء / الظلام لمدة 12 ساعة عند 23 ± 1 درجة مئوية ورطوبة 40٪ -50٪ ، مع حرية الوصول إلى الطعام والماء. بعد فترة تأقلم مدتها أسبوع واحد ، سمح خلالها للفئران بالتعود على ظروف المختبر ، بدأت التجارب.

1. تطوير النموذج

  1. يظهر التصميم التجريبي في الشكل 1. قسم عشوائيا 18 فأرا أنثى Sprague-Dawley البالغة من العمر 3 أشهر تزن 220-250 جم إلى مجموعات تحكم ونموذج وحلمة. كل مجموعة تتكون من 6 فئران.
  2. حقن المجموعة النموذجية ومجموعة الحلمة يوميا مع D-galactose (D-gal؛ 120 ملغ/كغ/يوم)، بينما تتلقى المجموعة الضابطة حقن محلول ملحي (120 ملغ/كغ/يوم)، لمدة 7 أسابيع (49 يوما) في المنطقة البطنيةالسفلى 22. يجب إعطاء الحقن يوميا بين الساعة 8:00 و 9:00 صباحا.
  3. وزن الفئران في اليوم السابع من كل أسبوع بين الساعة 9:00 و 10:00 صباحا. استمرت التجربة لمدة 49 يوما. دفن الخيوط كل 14 يوما في الأيام 14و 28 و 42. حدد الوقت لكل مؤشر ترابط يتم تضمينه بين الساعة 9:00 و 12:00 صباحا.
  4. استمر في إعطاء D-galactose داخل الصفاق لمدة 7 أسابيع للحث على المظاهر المرضية المرتبطة بمرض الزهايمر في الفئران22.

2. التحضير للحلمة

  1. تعقيم الأدوات الجراحية مثل مقص العيون والصواني والملاقط وتطهيرها. تنظيف الأسطح في بيئة غرفة العمليات جيدا وتطهيرها.
  2. قم بإعداد المنصة الجراحية عن طريق وضع وسادة تسخين صغيرة للحيوانات بشكل مسطح على السطح ، تليها اللف بمنشفة معقمة. بعد ذلك ، ضع لوحة التشغيل التي تم تنظيفها وتطهيرها بسلاسة في الأعلى ، مع توجيه الجانب الخشن لأعلى. ثم قم بتشغيل وسادة التدفئة واضبط درجة الحرارة على 32 درجة مئوية.
  3. بالنسبة لهذا الإجراء ، حدد إبرة تضمين خيط رقم 6 يمكن التخلص منها بقطر 0.6 مم وخيط جراحي قابل للامتصاص 5-0 (خياطة كولاجين) بطول 2 سم. قطع الخيط الجراحي القابل للامتصاص 2 سم 5-0 إلى قطع 0.5 سم و 0.2 سم باستخدام مقص العيون. ينقع الخيط المقطوع في محلول ملحي بنسبة 0.9٪ ويترك جانبا.
  4. اغسل يديك بالماء والصابون لمدة 20 ثانية ، ثم جففهما. بعد ذلك ، ارتد قفازات معقمة.
  5. تخدير الفئران بحقن IP من هيدرات الكلورال (300 ملغم / كغم) في المنطقة البطنية السفلية ، وضمان تأكيد التخدير عندما لا تستجيب في المستوى الجراحي ، بناء على عدم الاستجابة من اختبار قرصة إصبع القدم ، والحفاظ على حالة فسيولوجية مستقرة. بالإضافة إلى ذلك ، لمنع جفاف القرنية والأضرار المحتملة أثناء خضوع الفئران للتخدير ، ضع كمية وفيرة من المرهم البيطري على العينين ، مع ضمان بقائها مشحمة طوال العملية.
    ملاحظة: يوصى بتخدير الفئران ، لأنه من المؤلم بالنسبة لهم تجربة الثقب.

3. عملية تضمين الخيط ل Baihui (GV 20)

  1. حدد موقع نقطة الوخز Baihui (GV 20) في الفئران في نقطة المنتصف اليمنى للعظم الجداري (الشكل 2 أ). ضع الفئران لكشف الرأس بالكامل ، مع سحب الأذنين للأمام لتقريب الطريقة المستخدمة في البشر لربط خطوط قمة الأذن. حدد نقطة Baihui (GV 20) عن طريق ملامسة الحافة الطولية المركزية للجمجمة وتحديد الموقع تقريبا عند نقطة منتصفها. تأكد من نقطة الوخز هذه عند المستوى الذي تتلامس فيه الأذنان مع الرأس إذا تم وضعها بشكل مسطح ، مع محاذاة تقاطع الخيط السهمي والعظم الجداري. استخدم علامة لتمييز Baihui (GV 20).
  2. حلق منطقة الرأس حول نقطة الوخز للفأر باستخدام أداة تشذيب (عادة ما تكون أداة تشذيب لحية رجالية كهربائية).
  3. قبل الجراحة ، قم بتطهير نقاط الوخز والجلد المحيط عن طريق تطبيق محلول اليود بنسبة 0.5٪ في حركات دائرية ، بدءا من المركز ، والانتقال إلى الخارج. بعد ذلك ، قم بإجراء عملية تطهير ثلاثية: استخدم iodophor 3x ، متبوعا بكل منها تطبيق الكحول لضمان إزالة التلوث بشكل صحيح وإعداد الموقع لتقنية التعقيم.
  4. استخدم الملقط لتثبيت الخيط الجراحي القابل للامتصاص مقاس 0.2 سم المنقوع في محلول ملحي ووضعه في الطرف الأمامي من أنبوب الإبرة. ثم قم بتوصيله بقلب الإبرة.
  5. اضغط على المنطقة المحيطة ب Baihui (GV 20) بالإبهام والسبابة بيد واحدة ، بينما تمسك الإبرة باليد الأخرى.
  6. أدخل الإبرة أفقيا وبسرعة بزاوية 15 درجة على سطح الجلد ، 0.1 سم تحت نقطة Baihui (GV 20) ، مع قرص الجلد (الشكل 3 أ).
  7. بعد أن يصل طرف الإبرة إلى 0.1 سم فوق نقطة Baihui (GV 20) ، ادفع قلب الإبرة أثناء سحب أنبوب الإبرة لزرع الخيط الجراحي القابل للامتصاص 0.2 سم بالكامل في الأنسجة تحت الجلد لنقطة الوخز (الشكل 3 ب).
  8. قم بإزالة الإبرة ببطء ، وتأكد من عدم تعرض أي خياطة. اضغط على فتحة الإبرة بقطن جاف معقم لمدة 10 ثوان لمنع النزيف. إذا كان الخيط خارج الجسم بعد تضمين الخط عند نقاط الوخز ، فقم باستخراجه وإعادة تشغيله.

4. عملية تضمين الخيط لشنشو (BL 23)

  1. تقع نقطة الوخز Shenshu (BL 23) في الفئران على بعد 5 مم منالفقرة القطنية الثانية (الشكل 2B). أولا ، حدد موقعالفقرة القطنية 6 بناء على درنة الورك للفئران. ثم حدد موقع الفقرة القطنية 2الثانية عن طريق عد أربعة أجسام فقرية. شينشو (BL 23) سيكون 5 مم جانبي له23.
    ملاحظة: إن الجمع بين نقاط الوخز Baihui (GV 20) و Shenshu (BL 23) هو مجموعة مستخدمة بشكل متكرر في نظرية الطب الصيني التقليدي (TCM) للوقاية من الاضطرابات الدماغية وعلاجها. كما أكدت الأبحاث السابقة20,21 ، تم تأسيس هذا الاقتران بنقطة الوخز لفعاليته.
  2. استخدم علامة لتمييز Shenshu (BL 23). احلق منطقة الظهر والخصر حول نقطة الوخز للفأر باستخدام أداة تشذيب (عادة أداة تشذيب اللحية الكهربائية).
  3. قبل الجراحة ، قم بتطهير نقاط الوخز والجلد المحيط عن طريق تطبيق محلول اليود بنسبة 0.5٪ في حركة دائرية ، بدءا من المركز والانتقال إلى الخارج. بعد ذلك ، قم بإجراء عملية تطهير ثلاثية: استخدم اليودوفور ثلاث مرات ، كل منها متبوعا بتطبيق الكحول لضمان إزالة التلوث بشكل صحيح وإعداد الموقع لتقنية التعقيم.
  4. استخدم الملقط لتثبيت الخيط الجراحي القابل للامتصاص 0.5 سم المنقوع في محلول ملحي ووضعه في الطرف الأمامي من أنبوب الإبرة. ثم قم بتوصيله بقلب الإبرة.
  5. قم بتمديد الجلد بالسبابة والأصابع الوسطى لليد الضاغطة أو أصابع الإبهام والسبابة. امسك الإبرة بيد الثقب.
  6. أدخل الإبرة بسرعة بشكل عمودي في النقطة 0.25 سم أسفل Shenshu (BL 23). انظر الشكل 4 أ.
  7. بعد أن يصل طرف الإبرة إلى 0.5 سم تحت الجلد ، اضبط طرف الإبرة ، مما يجعل اتجاه الإدخال جاذبا مركزيا ، ويشكل زاوية 45 درجة مع سطح الجلد وأدخل 0.5 سم بشكل غير مباشر (الشكل 4 ب).
    ملاحظة: من المهم توخي الحذر عند الوخز بالإبر شنشو (BL 23) ، والذي يقع بالقرب من الكلى. يمكن أن يتسبب الإدخال العميق أو الرفع والدفع المتكرر للإبرة في حدوث ضرر. لذلك ، نوصي بعمق إدخال حوالي 0.3-0.6 سم.
  8. ادفع قلب الإبرة أثناء سحب الأنبوب وزرع الخيط الجراحي القابل للامتصاص 0.5 سم بالكامل في الأنسجة العضلية لنقطة الوخز (الشكل 4C).
  9. اسحب الإبرة ببطء ، مع التأكد من عدم تعرض أي خياطة. ثم اضغط على فتحة الإبرة بقطن جاف معقم لمدة 10 ثوان لمنع النزيف. إذا كان الخيط خارج الجسم بعد تضمين الخط عند نقاط الوخز ، فقم باستخراجه وإعادة تشغيله.

5. رعاية ما بعد الجراحة

  1. بعد الجراحة ، ضع الجرذ على وسادة تسخين صغيرة للحيوانات عند درجة حرارة 32 درجة مئوية لتسهيل التعافي من التخدير. تأكد من أن واع تماما وأن حالته مرضية قبل إعادته إلى حظيرته السكنية.
  2. بعد الجراحة ، لاحظ علامات الاستجابات الالتهابية المعقمة في المنطقة المصابة في غضون أسبوع. قد تشمل هذه العلامات الاحمرار أو التورم أو إفرازات تشبه القيح. عادة ، لا تتطلب هذه الأعراض أي علاج. ومع ذلك ، إذا كان هناك كمية زائدة من الإفرازات ، استنزاف وتطهير المنطقة المصابة. في مثل هذه الحالات ، ضع مرهم الاريثروميسين حتى يتعافى الجرح تماما.

6. الاختبارات السلوكية والفحص النسيجي

  1. بعد التدخل ، في الأسبوع 8 ، قم بإجراء تجربة Morris Water Maze (MWM) 2,24 لتقييم قدراتهم على التعلم والذاكرة. قم بإجراء تجارب التعلم على مدار 5 أيام ، مع أربع تجارب في اليوم. ثم قم بإجراء تجربة تحقيق بعد 24 ساعة من آخر يوم استحواذ.
  2. إجراء المقارنات الإحصائية باستخدام برنامج التحليل الإحصائي. تحليل البيانات السلوكية للقدرة على التعلم عن طريق تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) واختبار Tukey اللاحق. قم بتقييم أهمية بيانات زمن انتقال الهروب عن طريق تحليل التباين المتكرر ثنائي الاتجاه (ANOVA) متبوعا باختبار Bonferroni اللاحق. تعتبر قيمة p <0.05 مهمة في جميع الاختبارات.
  3. بعد التقييم السلوكي ، قم بتخدير الفئران على النحو الوارد أعلاه والقتل الرحيم بالحقن داخل الصفاق بمقدار 150 مجم / كجم من وزن الجسم من الصوديوم البنتوباربيتال.
  4. إصلاح دماغ الفئران من خلال التروية باستخدام 4٪ بارافورمالدهيد يتخلى عن طريق نظام الأوعية الدموية25.
    1. إدخال وتثبيت إبرة التزويج
      1. قم بإعداد إبرة 12G وتأكد من أنها مستقيمة ومناسبة للمرور عبر بطين الفئران. حدد موقع بطين الجرذ ، وهو عادة البطين الأيسر ، وأدخل الإبرة من خلاله في الشريان الأورطي الصاعد. تتطلب هذه الخطوة الدقة والفهم الجيد لتشريح الفئران.
      2. بمجرد وضع الإبرة في مكانها ، استخدم مرقئا لتثبيت إبرة التزويج بالقرب من النقطة التي تدخل فيها الشريان الأورطي. هذا سوف يساعد على تأمين الإبرة ومنعها من الحركة.
      3. تأكد من أن المشبك محكم بما يكفي لتثبيت الإبرة بإحكام ولكن ليس ضيقا بحيث يتلف الشريان الأورطي أو يعيق تدفق الدم. يجب أن تبقى إبرة التزويج في الشريان الأورطي الصاعد طوال العملية للحفاظ على التروية المناسبة.
    2. التروية مع المياه المالحة العادية
      1. تحضير حقنة 50cc دون إبرة للتروية. قم بتوصيل الطرف الآخر من إبرة التجويف ، الموجودة خارج جسم الجرذ ، بالمحقنة المملوءة بالمحلول الملحي العادي.
      2. قم بعمل شق صغير لقطع الزائدة الأذينية اليمنى للسماح بتدفق الدم خارج القلب. تضمن هذه الخطوة إزاحة الدم بواسطة المحلول الملحي أثناء التروية.
      3. ابدأ بحقن المحلول الملحي الطبيعي في الشريان الأورطي الصاعد بمعدل ثابت وثابت. سيؤدي ذلك إلى طرد الدم وإعداد الأنسجة للتثبيت.
      4. راقب السائل الخارج من الزائدة الأذينية اليمنى وكن مستعدا لتغيير المحقنة حسب الحاجة للحفاظ على التروية المستمرة بمحلول ملحي طازج.
        وضعت ، والاستعداد ل perperuse مع المثبت.
      5. استبدل المحقنة التي تحتوي على محلول ملحي بأخرى تحتوي على 4٪ بارافورمالدهيد ، وهو مثبت شائع الاستخدام في علم الأنسجة. استمر في التروية باستخدام بارافورمالدهيد لتثبيت الأنسجة في مكانها للمعالجة والتحليل اللاحقين.
        ملاحظة: خلال هذا الإجراء ، من الضروري الحفاظ على تقنيات التعقيم لمنع العدوى والتعامل مع الفئران بلطف لتقليل الإصابة. بالإضافة إلى ذلك ، يجب تدريب جميع الموظفين المعنيين على هذه التقنية لضمان الاتساق والفعالية.
  5. قم بإزالة دماغ الفئران ووضعه في زجاجة عينة تحتوي على 4٪ بارافورمالدهيد لمدة 24-48 ساعة عند 4 درجات مئوية25,26. قم بإجراء تجفيف الإيثانول ومعالجة الزيلين خطوة بخطوة ، متبوعا بمقاطع إكليلية مستمرة تقليدية (4-5 ميكرومتر) للقياس. تقييم مورفولوجيا وفقدان الخلايا العصبية الحصين في كل مجموعة باستخدام تلطيخ الهيماتوكسيلين والإيوسين (H&E) (200x).
    ملاحظة: لم يتم إجراء فحص التشريح لتقييم آفات الجهاز الهضمي (GI) على القوارض بناء على عدم وجود علامات سريرية تشير إلى اضطرابات الجهاز الهضمي طوال الفترة التجريبية. لم تظهر أي ردود فعل سلبية علنية تشير إلى وجود مثل هذه الأمراض.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تقدم هذه المقالة طريقة التشغيل المحددة ل TEAT في الفئران الشبيهة بمرض الزهايمر. ويناقش العناصر التشغيلية الحاسمة لفريق الخبراء التقنيين في البحوث التجريبية لتوفير مرجع للدراسات المستقبلية.

الحلمة تحسن التعلم في الفئران الشبيهة بمرض الزهايمر
كما هو موضح في المخطط الانسيابي (الشكل 5) ، خلال فترة التدريب التكيفي ، لوحظ أن الفئران في كل مجموعة كانت تراقب البيئة المحيطة أثناء السباحة. أظهر تحليل سرعة السباحة (الشكل 6) عدم وجود فرق كبير بين المجموعات ، مما يشير إلى مستويات أساسية ثابتة لسرعة الحركة والإدراك البصري. أي اختلافات ملحوظة في النتائج التجريبية لم تكن بسبب الاختلافات في القدرة على الحركة أو الإدراك البصري.

خضعت الفئران ل 5 أيام من التدريب على البحث عن المنصة. في الشكل 7 أ ، يمكن ملاحظة أن مسارات حركة كل مجموعة من الفئران تختلف في المراحل المبكرة والمتأخرة من التدريب. في اليوم 2 ، سبحت معظم مجموعات الفئران التي يحركها الهروب بشكل عشوائي. ومع ذلك ، في اليوم 5 ، سبحت الفئران في المجموعة الضابطة مع الاتجاه ، بينما سبحت فئران المجموعة النموذجية بشكل عشوائي على طول جدار المسبح. أصبحت حركة فئران مجموعة TEAT أكثر كثافة في الربع المستهدف. قامت التجربة بقياس زمن انتقال الهروب ، حيث يشير زمن الوصول الأقصر إلى قدرات أقوى. يوضح الشكل 7B أن المجموعة النموذجية أظهرت قدرات تعلم وذاكرة منخفضة مقارنة بالمجموعة الضابطة. ومع ذلك ، أظهرت مجموعة TEAT تحسنا كبيرا في ضعف الذاكرة المرجعية المكانية في الفئران المصابة بأمراض تشبه مرض الزهايمر.

الحلمة يحسن الذاكرة المكانية في الفئران الشبيهة بمرض الزهايمر
في تجربة التحقيق ، يشير الموقع الذي يقضي فيه الوقت إلى التحيز المكاني27. تستخدم الفئران أربع طرق أساسية للبحث عن المنصات: القائمة على الحافة ، والعشوائية ، والقائمة على الاتجاه ، والقائمة علىالخط 28. تشير النتائج إلى أن كل مجموعة من الفئران استخدمت استراتيجيات بحث مختلفة (الشكل 8 أ). استخدمت المجموعة الضابطة في المقام الأول استراتيجيات البحث الخطي والاتجاهي ، مما يشير إلى ذاكرة قوية وقدرة على تذكر موقع النظام الأساسي. في المقابل ، أظهرت الفئران في مجموعة النموذج استراتيجية بحث رئيسية تشبه الحافة ، مما يشير إلى انخفاض كبير في قدرتها على الذاكرة. لم يتعلموا العثور على المنصة أو تذكر موقعها. أظهرت الفئران في مجموعة TEAT استراتيجية بحث قائمة على الاتجاه. كانت كثافة المسار أعلى في الربع حيث توجد المنصة الأصلية ، وكذلك في الأرباع المجاورة. يشير هذا إلى تحسن الذاكرة مقارنة بمجموعة الطرازات.

يوضح الشكل 8B والشكل 8C نتائج مدة الإقامة في ربع المنصة الأصلية وعدد المرات التي عبرت فيها الفئران المنصة. أظهرت فئران المجموعة النموذجية انخفاضا كبيرا في وقت بقائها في ربع المنصة الأصلي وعدد المرات التي عبرت فيها المنصة مقارنة بالمجموعة الضابطة (p <0.01). بالمقارنة مع المجموعة النموذجية ، أظهرت فئران مجموعة TEAT زيادة كبيرة في وقت إقامتهم في ربع المنصة الأصلي وعدد المرات التي عبروا فيها المنصة (p <0.01). تشير هذه النتائج إلى أن TEAT يمكن أن يحسن التعلم المكاني وضعف الذاكرة لدى الفئران المصابة بأمراض تشبه مرض الزهايمر.

الحلمة يحسن شيخوخة الحصين في الفئران (الشكل 9). بالمقارنة مع المجموعة الضابطة ، أظهرت الفئران في المجموعة النموذجية تغيرات مرضية حادة ، بما في ذلك انخفاض كبير في عدد الخلايا الهرمية وترتيبها غير المنتظم. بالإضافة إلى ذلك ، لوحظ التكثيف النووي ، وتنكس الخلايا العصبية ، وغيرها من التشوهات. ومع ذلك ، بعد علاج الحلمة ، زاد عدد الخلايا الهرمية الحصين في الفئران وكانت أكثر تنظيما. على الرغم من أن بعض النوى أظهرت تكاثفا ، إلا أن مورفولوجيا الخلية الكلية بدت أكثر طبيعية. كانت الخلايا موزعة ومرتبة بشكل أكثر كثافة ، وكان تلطيخ السيتوبلازم أكثر اتساقا ، وتم تقليل الوذمة المحيطة بالخلايا بشكل كبير. والجدير بالذكر أنه لوحظت خلايا هرمية طبيعية.

figure-results-1
الشكل 1: مخطط التدفق للتجربة. بعد أسبوع واحد من التكيف (الأسبوع 0) ، خصصت الدراسة 18 فأرا في ثلاث مجموعات: التحكم والنموذج والحلمة. خلال الأسابيع من 1 إلى 7 ، تلقت المجموعة الضابطة حقن محلول ملحي ، بينما تم إعطاء مجموعات النموذج و TEAT D-galactose. بالإضافة إلى ذلك ، خضعت مجموعة TEAT للعلاج بالوخز بالإبر في الأسابيع 2 و 4 و 6. خضعت جميع الفئران لاختبار متاهة موريس المائية في الأسبوع 8 ، تليها القتل الرحيم. الاختصارات: التكيف = التكيف ، Con = مجموعة التحكم ، Mod = مجموعة النموذج ، TEAT = مجموعة العلاج بالوخز بالإبر لتضمين الخيط ، D-gal = D-galactose ، MWM = اختبار متاهة موريس المائية. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-2
الشكل 2: موقع نقطة الوخز بالإبر. أ: نقطة الوخز Baihui (GV 20) في الفئران. وهي تقع في منتصف اليمين من العظم الجداري. ب: نقطة الوخز شنشو (BL 23) في الفئران. يقع على بعد 5 مم من الفقرة القطنية الثانية. الاختصارات: GV = سفينة الحاكم ، وهو مفهوم في الطب الصيني التقليدي (TCM) يشير إلى خط الطول الرئيسي الذي يمتد على طول خط الوسط للجانب الخلفي للجسم ، BL = المثانة ، يرمز إلى خط الطول المثانة ، والذي يتوافق في الطب الصيني التقليدي مع خط الطول Foot-Taiyang ، أحد خطوط الطول الستة ، التي تمتد على طول الجزء الخلفي من الجسم والساقين. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-3
الشكل 3: عملية تضمين الخيط التفصيلية ل Baihui (GV 20). (أ) يتم إدخال الإبرة أفقيا بزاوية 15 درجة على سطح الجلد ، 0.1 سم تحت نقطة الوخز Baihui (GV 20) ، مع قرص الجلد لتسهيل الإجراء. (ب) بمجرد أن يصل طرف الإبرة إلى موضع 0.1 سم فوق نقطة الوخز Baihui (GV 20) ، يتم دفع قلب الإبرة أثناء سحب أنبوب الإبرة لزرع الخيط الجراحي القابل للامتصاص 0.2 سم بالكامل في الأنسجة تحت الجلد عند نقطة الإبر. الاختصارات: GV = سفينة الحاكم ، وهو مفهوم في الطب الصيني التقليدي (TCM) يشير إلى خط الطول الرئيسي الذي يمتد على طول خط الوسط للجانب الخلفي للجسم. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-4
الشكل 4: عملية تضمين الخيط التفصيلية ل Shenshu (BL 23). (أ) يتم إدخال الإبرة بسرعة بشكل عمودي في نقطة الوخز إلى عمق 0.25 سم تحت Shenshu (BL 23). (ب) بمجرد أن يصل طرف الإبرة إلى عمق 0.5 سم تحت سطح الجلد ، يتم إعادة توجيه الإبرة نحو مركز نقطة الوخز ، مما يخلق زاوية 45 درجة مع الجلد ، ثم يتم إدخالها بشكل غير مباشر على عمق 0.5 سم. (ج) أثناء تقدم عمود الإبرة ، يتم سحب الأنبوب ، مما يضمن الزرع الكامل لجزء 0.5 سم من الخيط الجراحي القابل للامتصاص في الأنسجة العضلية في Shenshu (BL 23) نقطة الإبر. الاختصارات: BL = المثانة ، تعني خط الطول المثانة ، والذي يتوافق في الطب الصيني التقليدي مع خط الطول Foot-Taiyang ، أحد خطوط الطول الستة لليانغ ، التي تمتد على طول الجزء الخلفي من الجسم والساقين. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-5
الشكل 5: مخطط انسيابية اختبار WMW. يشار إلى تدريب التكيف قبل التجربة على أنه اليوم 0 ، حيث يتم ملاحظة القدرات الحركية للفئران ويتم تحليل سرعة السباحة إحصائيا. يتبع ذلك مرحلة التنقل في المكان لمدة خمسة أيام (الأيام من 1 إلى 5) ، حيث تتم مقارنة زمن الانتقال للهروب (زمن انتقال الهروب) وتحليلها بين المجموعات المختلفة. في اليوم 6 ، يتم إجراء تجربة مسبار مكاني لتقييم الوقت المستغرق في الربع المستهدف (وقت مكوث الربع المستهدف) وعدد معابر المنصة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-6
الشكل 6: مقارنة سرعة السباحة (م / ث) بين المجموعات. يحدد هذا الشكل متوسط سرعات السباحة (بالأمتار في الثانية) للفئران عبر مجموعات تجريبية مختلفة ، تضم كل منها ستة (ن = 6). تظهر أشرطة الخطأ الانحراف المعياري. لم يتم الحصول على فروق بين المجموعات ، كما هو موضح في ns (p > 0.05). تم تنفيذ التحليل الإحصائي باستخدام برنامج SPSS ، مع التزام جميع البيانات بالتوزيع الطبيعي. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-7
الشكل 7: نتائج التنقل في مكان WMW. (أ) تعرض هذه اللوحة مخططات مسار الحركة التمثيلية ، التي توضح المسارات الملاحية للفئران داخل كل مجموعة تجريبية أثناء تجارب الملاحة في المكان. (ب) تتم مقارنة زمن انتقال الهروب ، الذي يقاس بالثواني (ثوان) ، عبر المجموعات ، حيث تتكون كل مجموعة من ستة فئران (ن = 6). تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام مقاييس ANOVA المتكررة ثنائية الاتجاه لتقييم التأثيرات داخل الموضوعات على مدار تجارب الملاحة والاختلافات بين الموضوعات بين المجموعات. تتوافق البيانات مع افتراضات التوزيع الطبيعي ويتم تصويرها على أنها متوسط المجموعة ± الانحراف المعياري. يشار إلى الاختلافات ذات الدلالة الدلالة (* p < 0.05 ، ** p < 0.01) مقارنة بالمجموعة الضابطة وعلامات التصنيف (#p < 0.05 ، ##p < 0.01) مقارنة بمجموعة النموذج. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-8
الشكل 8: نتائج مسار مسبار WMW. (أ) تعرض اللوحة مخططات مسار الحركة التمثيلية التي تلتقط سلوكيات الاستكشاف المكاني للفئران في تجربة المسبار داخل كل مجموعة تجريبية. (ب) يقارن هذا الرسم البياني وقت السكون (بالثواني ، ثانية) داخل الربع المستهدف بين المجموعات ، مما يعكس احتفاظ الفئران بالذاكرة لموقع المنصة. (ج) يوضح الرسم البياني التردد (المتكرر) الذي عبرت به الفئران منطقة المنصة ، مما يشير إلى أداء ذاكرتها المكانية. تألفت كل مجموعة من ستة فئران (ن = 6) ، وتم تحليل البيانات إحصائيا باستخدام ANOVA أحادي الاتجاه لتقييم الاختلافات عبر المجموعات. تلتزم البيانات بالتوزيع الطبيعي ويتم تقديمها كمتوسط ± الانحراف المعياري. يشار إلى الاختلافات ذات الدلالة الدلالة الدلالة (** p < 0.01) مقارنة بالمجموعة الضابطة وعلامات التصنيف (#p < 0.05 ، ##p < 0.01) مقارنة بمجموعة النموذج. ** P < 0.01 مقابل مجموعة التحكم ، # P < 0.05 مقابل مجموعة النماذج ، # # P < 0.01 مقابل مجموعة الطرازات. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-9
الشكل 9: تقييم تلطيخ الهيماتوكسيلين والإيزوسين لمنطقة الحصين CA1 في مجموعات الفئران عند تكبير 200x. (أ) تظهر المجموعة الضابطة تركيبا عصبيا نموذجيا مع خلايا هرمية محفوظة جيدا. (ب) تعرض المجموعة النموذجية تغيرات مرضية واضحة ، تتميز بانخفاض ملحوظ في كثافة الخلايا الهرمية ، والخلايا العصبية المتدهورة الملطخة بالظلام ، والترتيب المضطرب. (ج) تظهر مجموعة TEAT بنية محسنة لالحصين ، مع زيادة عدد الخلايا الهرمية الأكثر تنظيما وتمتلك مورفولوجيا أكثر معيارية. على الرغم من التكثيف النووي العرضي ، فإن الخلايا أكثر كثافة ، وتظهر تلطيخا سيتوبلازميا موحدا ، وتظهر انخفاضا كبيرا في الوذمة المحيطة بالخلية. لوحظ وجود خلايا هرمية معيارية بشكل ملحوظ. شريط المقياس = 50 ميكرومتر. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقت التدخل
مسببات مرض الزهايمر معقدة ، ولا يزال التسبب في المرض غير مؤكد. حاليا ، لا يوجد علاج فعال لهذا المرض ، ومساره لا رجعة فيه. لذلك ، توصل المجتمع الأكاديمي إلى توافق في الآراء حول أهمية التركيز على الوقاية من مرض الزهايمر وعلاجه. تؤكد استراتيجيات الوقاية والعلاج لمرض الزهايمر على التدخل المبكر ، باتباع مفهوم الطب الصيني التقليدي لعلاج الحالات قبل حدوثها ، مع التركيز على العلاج قبل ظهوره وانتقاله وتكراره. أظهرت الأبحاث المتراكمة في البشر29،30 والقوارض31،32 أن الوخز بالإبر المبكر والتدخل في الكى يمكن أن يحقق نتائج مهمة دون آثار جانبية واضحة ، مما يجعله طريقة محتملة واعدة للوقاية من مرض الزهايمر وعلاجه. لذلك ، أدارت هذه الدراسة العلاج أثناء عملية النمذجة. تم تنفيذ الحلمة في بداية الحقن داخل الصفاق D-gal.

اختيار نقطة الوخز
مرض الزهايمر هو مرض تنكسي عصبي حاد يؤثر بشكل أساسي على مناطق الدماغ المسؤولة عن الذاكرة واللغة والتفكير والسلوك الاجتماعي. يعتبر الدماغ (ناو) بحر النخاع (سوي) في الطب الصيني التقليدي. يتكون النخاع (Sui) من جوهر (Jing) ، وهي مادة فريدة من نوعها في الطب الصيني التقليدي يعتقد أنها القوة الدستورية الأساسية للجسم وحيويتها ومقاومتها. يتم تخزين جوهر (جينغ) أساسا في الكلى (شين). إذا كان جوهر الكلى (شين جينغ) ضعيفا ، فقد يفتقر الدماغ (ناو) إلى التغذية ، وقد يحدث ضعف إدراكي. لذلك ، يقترح الطب الصيني التقليدي أن تنغيم الكلى والاستفادة من الجوهر (جينغ) يمكن أن يساعد في تحسين وظائف المخ. يمكن أن يتأثر الدماغ بشكل مباشر ببعض خطوط الطول ، مثل وعاء الحاكم (GV) وخط الطول المثانة للقدم Taiyang (BL) ، عند دخولها إلى الدماغ. يتم استخدام مزيج من سفينة الحاكم (GV) وخط الطول المثانة للقدم Taiyang (BL) المستخدم لمنع وعلاج مرض الزهايمر بشكل كبير33,34. Baihui (GV 20) هي نقطة وخز تقع في قمة الرأس وهي جزء من سفينة الحاكم. وفقا للأدبيات ، في الدراسات التي تستخدم الوخز بالإبر والكي للوقاية والعلاج من مرض الزهايمر ، Baihui (GV 20) لديه أعلى تواتر للحدوث ويعتبر نقطة حرجة في الصيغة35. شنشو (BL 23) هي نقطة الوخز على خط الطول المثانة للقدم تايانغ. وهي تقع على بعد 1.5 cun الجانبي إلى الحد السفلي للعملية الشائكة للفقرة القطنية الثانية. كما الكلى الظهر نقل شو نقطة، فإنه يمكن أن تقوي جميع جوانب الكلى، بما في ذلك الكلى يين، يانغ، جوهر (جينغ)، وتشي. قد يؤدي الوخز بالإبر والكي في Baihui (GV 20) و Shenshu (BL 23) إلى تحسين الوظيفة الإدراكية وتخفيف أعراض مرض الزهايمر بطرق مختلفة36,37.

الفاصل الزمني
تملي معايير تشغيل TEAT38 أنه يجب تحديد فترة العلاج ومسار العلاج بناء على حالة المرض وموقع التشغيل المحدد ، مع فاصل زمني من أسبوع واحد إلى شهر واحد. يمكن أن تتراوح مدة العلاج من 1 إلى 5 مرات. يمكن أيضا اتباع هذا الاقتراح في أبحاث التجارب. استنادا إلى الأدبيات التي تمت مراجعتها39 ، يتم إعطاء العلاج بشكل عام مرة واحدة في الأسبوع أو كل أسبوعين ، مع معظم الحالات التي تنطوي على 4-8 علاجات متتالية. استمرت التجربة 49 يوما ، تم خلالها دفن الخيوطفي أيام 14 و 28 و 42.

الأداة والأساليب
يتم استخدام العديد من أدوات تضمين الخيوط في الأبحاث الحالية على التجارب. وتشمل هذه الإبر رقم 740 أو رقم 941 التي تستخدم لمرة واحدة ، والإبر المعاد اختراعها ذاتيا ، وإبرة البزل القطني رقم 1242. تستخدم الإبر المعاد اختراعها ذاتيا المحاقن رقم 5-7 كأنبوب وإبرة خيطية مناسبة لقلب الإبرة. تم تنعيم طرف الإبرة مسبقا. على سبيل المثال ، في دراسة باستخدام فئران SD تزن 250 ± 20 جم (عمر الشهر غير محدد في النص) ، اختر المحقنة رقم 7 والإبرة الخيطية 0.30 × 0.40 مم43,44. ومع ذلك ، يجب تطهير الإبر المعاد اختراعها ذاتيا بشكل صارم ، مما يجعلها غير قابلة للاستخدام على نطاق واسع. إذا كان طرف الإبرة كبيرا جدا أو حادا ، فقد يؤدي ذلك إلى تلف الأوعية الدموية والأعصاب ، مما يزيد من احتمال حدوث كدمات45. من المرجح أن تؤدي إبر البزل القطني ، التي لها قطر كبير ونصائح حادة ، إلى تلف الأوعية الدموية والأعصاب. إبرة التضمين التي تستخدم لمرة واحدة هي الأكثر استخداما في الممارسة السريرية39. إنه أكثر ملاءمة للاستخدام وأكثر أمانا في التشغيل مقارنة بالإبر المعاد ابتكارها ذاتيا وإبر البزل القطني ، مما يجعله مثاليا للحلمة. بالإضافة إلى ذلك ، فإن الهدف من التجربة هو تحسين صحة الإنسان. لذلك ، يجب أن تعكس الدراسات على الوضع السريري. وبالتالي ، فمن المستحسن استخدام إبر تضمين الخيوط التي تستخدم لمرة واحدة كأدوات لتضمين الخيوط.

كانت Catgut هي مادة الخيط الأساسية المستخدمة في TEAT ، ولكن بسبب رفض الأنسجة والمكونات المشتقة من ، تم استبدالها بخيوط جراحية قابلة للامتصاص الحيوي. تتوفر الغرز بأحجام مختلفة ويجب أن تكون متطابقة مع الإبرة ، مثل رقم 7 للخيوط 4-0 أو 3-0. في البحوث الحيوانية ، يتم استخدام 3-041 و 4-046 و 5-047 بشكل أساسي. يبلغ طول معظم الغرز 1-2 سم. ومع ذلك ، فإن القوارض لديها أجسام أصغر بكثير من البشر ، لذلك هناك نقص في الحجم المناسب لحجم الجسم. لذلك ، يجب على الباحثين قطع الغرز إلى شرائح 0.2-0.5 سم لجعلها مناسبة للقوارض. لذلك ، يوصى بشطف الغرز بالماء المقطر النظيف والمعقم أو المالحة بعد القطع وقبل النقع لاستخدامها لاحقا أو التطبيق الفوري لتقليل خطر الإصابة46.

اقترحت بعض الدراسات متطلبات مفصلة لطريقة التضمين ، مثل إدخال الإبر بسرعة في نقطة الوخز من حوالي 0.5 سم تحت نقطة الوخز باتجاه نقطةالوخز 48. هذا مهم لأن القوارض صغيرة. بالإضافة إلى وجود أنسجة عضلية وفيرة في أطرافهم السفلية ، فإن أنسجتهم تحت الجلد وطبقات العضلات في الرأس والظهر والبطن ضعيفة نسبيا. لذلك ، يجب التأكيد هنا على مسألة نقاط إدخال TEAT وزاوية الإدراج في البحوث الحيوانية. عند إجراء الحلمة على الأطراف السفلية للقوارض ، يكون الوخز بالإبر المباشرة عند نقاط الوخز ممكنا. بالنسبة للجسم ، يوصى بإدخال الإبرة أسفل نقاط الوخز (يمكن ضبط المسافة بمرونة وفقا لطول جسم الخيط) باستخدام الوخز بالإبر المائلة (<45 درجة) أو الوخز بالإبر المسطحة (<15 درجة) لتجنب تلف الأعضاء الداخلية.

إمكانات الحلمة للوقاية والعلاج من مرض الزهايمر
في الآونة الأخيرة ، بدأت الأبحاث حول TEAT في الظهور ، على الرغم من أن آثارها وآلياتها لا تزال بعيدة المنال. كما ذكر أعلاه ، يمكن للحلمة تحسين عوامل الخطر المرتبطة بمرض الزهايمر مثل السمنة13،14 ، والسكري15 ، والأرق16 ، وهشاشة العظام بعد انقطاع الطمث17 ، والاكتئاب18. له تأثير مفيد على التعلم وضعف الذاكرة في الفئران VD19. ينظم TEAT عملية التمثيل الغذائي للدهون من خلال مسار PPAR لتحسين إصابة الأنسجة في الفئران المتعبة التي يسببها التمرين49 ويمارس تأثيرات مضادة للالتهابات ومسكنات في الفئران المتقطعة التي يسببها الإجهاد البارد من خلال مسار TRPV150. في الدراسة الحالية ، أثبتنا أن علاج تضمين الخيوط على الفئران الشبيهة بمرض الزهايمر يمكن أن يخفف من ضعف التعلم والذاكرة عن طريق تحسين فقدان الذاكرة المكانية وتقليل الخلايا المتدهورة في مناطق الحصين CA1. ومع ذلك ، نظرا لافتقار البحث الحالي إلى التوحيد والتوحيد في العديد من العناصر الحاسمة لتشغيل TEAT ، بما في ذلك طريقة التضمين ، وأداة التضمين ، والخيط ، وفترة الفاصل الزمني للتضمين ، تناقش هذه المقالة بشكل أساسي العناصر التشغيلية الحاسمة ل TEAT في البحث التجريبي. كان هذا البحث مجرد استكشاف أولي لتأثير TEAT على مرض الزهايمر ، الأمر الذي تطلب المزيد من التكامل والتحسين في توضيح الجزيئي الدقيق والتفاعل بينهما. ومع ذلك ، فقد عرضت تجربة جديدة لعملية AD التي لا مفر منها ، والتي قد تخفف بطريقة ما العبء الثقيل على نظام الرعاية الصحية العامة.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعلن أصحاب البلاغ أنه ليس لديهم ما يكشفون عنه.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم دعم هذا العمل بأموال من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (NSFC) رقم 82374564 (إلى YJD) ورقم 82074566 (إلى YJD) ومن قاعدة وراثة Sun Guojie للوخز بالإبر TCM - الكى التابع للاتحاد العالمي لجمعيات الوخز بالإبر والكي في ووهان ، الصين (الاتحاد العالمي لجمعيات الوخز بالإبر والكي [2019] رقم 26) (إلى YJD) ومشروع بناء استوديو الميراث الوطني الشهير TCM التابع للإدارة الوطنية للطب الصيني التقليدي ، الصين (الإدارة الوطنية للطب الصيني التقليدي [2022] رقم 5) (إلى YJD).

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
0.9٪ محلول ملحي ، 4٪ بارافورمالدهيد ، هيماتوكسيلين ، إيوسين Y (قابل للذوبان في الماء) ، إيثانول مطلق ، مسحوق 0.01M PBS ، زيلين ، حمض الهيدروكلوريك ، البارافين المدمج ، الصمغالمحايد sinopharm (www.sinopharm.com)
5-0 خياطة جراحية قابلة للامتصاصبوداميديك (www.bodamedical.com)
70٪ كحول ، يودوفور ، كرةقطنية تستخدم للتطهير.
هيدرات الكلورالسيجماC8383
أغطية ، شرائح زجاجيةقوانغتشو Wuqiang المعدات التجريبية المحدودة
مجففووهان جونجي JT-12J مجفف
ديلوكس ترموستات الحرارة حصيرةZhenhua الأدواتللحفاظ على درجة حرارة الجسم للفئران.
D-galactosesigmaG0750
ماكينة حلاقةالكهربائية تستخدم لحلاقة الفئران.
مقياس إلكتروني للحيوانات الصغيرة (ZK-DST)Henan Zhike Information Technology Co.، Ltd
مرهم الإريثروميسين
يستخدم لوضع خيوط قابلة للامتصاص.
وعاء التعقيم بالبخار عالي الضغط (YM100Z) مصنعشنغهاي سانشان للمعداتلتعقيم الأدوات الجراحية.
صانع الثلج (CMB40)شنغهاي شيان للأدوات المحدودة
مجهر (BX-53)
يستخدم لاختبار MWM.
نظام تتبع الفيديو Morris Water Maze & برنامج تحليل البيانات (الإصدار: Watermaze 2.0)Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd
رقم 6 إبرة تضمين الخيطbodamedical (www.bodamedical.com)
مقص العيون ، الصواني ، الملقط
علم الأمراض Microtome   ؛ (RM 2016)LEICA ، ألمانيا
pentobarbitalألمانياP11011
علامةدائمة تستخدم لتمييز نقطة الوخز بالإبر.
سكاكين التقطيع (R35)الريش والصابون
يستخدم لغسل اليدين.
قفازات
الأنسجة البيولوجية المحوسبة اللحية الرجالية طبق زجاجي فرونتفارم الطبية مسحوق حليب أوليمبوس الياباني معقمة

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Huang, W., et al. Acupoint catgut embedding for obesity: A protocol systematic review. Medicine (Baltimore). 99 (51), e23728(2020).
  2. Zhou, M., et al. Acupoint catgut embedding improves senescence in a rat model of ageing by regulating mitophagy via the pink1 pathway. J Cell Mol Med. 25 (8), 3816-3828 (2021).
  3. Zhang, X., et al. Acupoint catgut-embedding therapy: Superiorities and principles of application. Zhongguo Zhen Jiu. 32 (10), 947-951 (2012).
  4. Lin, J., Deng, Q. Observation on therapeutic effect of 160 cases of epilepsy treated with acupoint catgut embedding therapy. Zhongguo Zhen Jiu. 36 (11), 14-15 (2001).
  5. Li, L. Acupuncture combined with catgut embedding therapy for treatment of 158 cases of facial paralysis. Zhongguo Zhen Jiu. 25 (3), 23-24 (2005).
  6. Wang, J., Wu, Z., Huo, J., Yuan, Y. Questionnaire investigation on cost-effectiveness analysis of acupuncture for migraine. Zhongguo Zhen Jiu. 35 (4), 377-383 (2015).
  7. Huang, L., Pan, W. Comparation of effect and cost-benefit analysis between acupoint catgut-embedding and electroacupuncture on simple obesity. Zhongguo Zhen Jiu. 31 (10), 883-886 (2011).
  8. Jack, C. R., et al. Tracking pathophysiological processes in alzheimer's disease: An updated hypothetical model of dynamic biomarkers. Lancet Neurol. 12 (2), 207-216 (2013).
  9. Sperling, R. A., et al. Toward defining the preclinical stages of alzheimer's disease: Recommendations from the national institute on aging-alzheimer's association workgroups on diagnostic guidelines for alzheimer's disease. Alzheimer's Dementia. 7 (3), 280-292 (2011).
  10. Guzman-Martinez, L., et al. New frontiers in the prevention, diagnosis, and treatment of alzheimer's disease. J Alzheimers Dis. 82, S51-S63 (2021).
  11. Yang, W. T., et al. Chinese herbal medicine for alzheimer's disease: Clinical evidence and possible mechanism of neurogenesis. Biochem Pharmacol. 141, 143-155 (2017).
  12. Zhao, J. L., Yang, J., Ding, L., Wang, F., Lin, L. A review of the pathogenesis and chinese medicine intervention of alzheimer's disease. J Integr Neurosci. 22 (1), 2(2022).
  13. Chen, I. J., Yeh, Y. H., Hsu, C. H. Therapeutic effect of acupoint catgut embedding in abdominally obese women: A randomized, double-blind, placebo-controlled study. J Womens Health (Larchmt). 27 (6), 782-790 (2018).
  14. Zhang, X., et al. Effect of catgut embedding at acupoints versus non-acupoints in abdominal obesity: A randomized clinical trial. J Tradit Chin Med. 43 (4), 780-786 (2023).
  15. Xia, T., Yang, Y., Li, W., Tang, Z., Guo, Y. Acupoint catgut embedding for diabetic gastroparesis: A protocol of systematic review. Medicine (Baltimore). 98 (43), e17718(2019).
  16. Xu, F., et al. Acupoint catgut embedding alleviates insomnia in different chinese medicine syndrome types: A randomized controlled trial. Chin J Integr Med. 25 (7), 543-549 (2019).
  17. Shi, N., et al. Effects of acupoint catgut embedding on the postmenopausal osteoporosis patients and related mechanism. Am J Transl Res. 13 (3), 1789-1798 (2021).
  18. Li, Y., Zhou, J., Wei, Z., He, X., Kejimu, S. The efficacy and safety of acupoint catgut embedding therapy for depression: A protocol for systematic review and meta-analysis. Front Psychiatry. 14, 1331780(2023).
  19. Zhu, S., et al. Acupoint catgut embedding improves learning and memory impairment in vascular dementia rats. Ann Transl Med. 11 (2), 108(2023).
  20. Yu, C. C., et al. Preventive electroacupuncture ameliorates d-galactose-induced alzheimer's disease-like pathology and memory deficits probably via inhibition of gsk3β/mtor signaling pathway. Evid Based Complement Alternat Med. 2020, 1428752(2020).
  21. He, C., et al. Preventive electroacupuncture ameliorates d-galactose-induced alzheimer's disease-like inflammation and memory deficits, probably via modulating the microbiota-gut-brain axis. Iran J Basic Med Sci. 24 (3), 341-348 (2021).
  22. Hong, X. P., et al. Puerarin ameliorates d-galactose induced enhanced hippocampal neurogenesis and tau hyperphosphorylation in rat brain. J Alzheimers Dis. 51 (2), 605-617 (2016).
  23. Gao, S., Li, R., Tian, H. H. Research progress of Shenshu (BL 23). Zhongguo Zhen Jiu. 37 (8), 845-850 (2017).
  24. Su J, S. K., Wyss, J. m Sripanidkulchai B. Curcuma comosa improves learning and memory function on ovariectomized rats in a long-term morris water maze test. J Ethnopharmacol. 130 (1), 70-75 (2010).
  25. Gage Gj, K. D., Shain, W. Whole animal perfusion fixation for rodents. J Vis Exp. (65), e3564(2012).
  26. Jacobowitz, D. M. Removal of discrete fresh regions of the rat brain. Brain Res. 80 (1), 111-115 (1974).
  27. Vorhees, C. V., Williams, M. T. Assessing spatial learning and memory in rodents. Ilar j. 55 (2), 310-332 (2014).
  28. Zhou, J., et al. Methodology of morris water maze for detecting animal learning and memory levels. Chinese Journal of gerontology. 37 (24), 4(2017).
  29. Wang, Y., et al. Effectiveness and safety of acupuncture for the treatment of Alzheimer's disease: A systematic review and meta-analysis. Front Aging Neurosci. 12, 98(2020).
  30. Jia, Y. J., et al. Acupuncture for patients with mild to moderate alzheimer's disease: A randomized controlled trial. BMC Complement Altern Med. 17 (1), 556(2017).
  31. Yu, C. C., et al. Experimental evidence of the benefits of acupuncture for alzheimer's disease: An updated review. Front Neurosci. 14, 549772(2020).
  32. Zheng, X., et al. Electroacupuncture ameliorates beta-amyloid pathology and cognitive impairment in alzheimer disease via a novel mechanism involving activation of tfeb (transcription factor eb). Autophagy. 17 (11), 3833-3847 (2021).
  33. Hu, J., Zhao, J., Lu, M., Li, Z. Treatment of alzheimer's disease by using "tongdu qishen" acupuncture therapy. World Science and Technology-Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica. 22 (8), 2634-2640 (2020).
  34. Liang, X., et al. Visualization analysis of literature on acupuncture-moxibustion treatment of alzheimer's disease based on citespace. World Science and Technology-Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica. 24 (10), 3998-4006 (2022).
  35. Xia, Y. W., et al. Acupoint selection rules in treating alzheimer's disease with acupuncture and moxibustion in china and abroad based on data mining. Journal of Yunnan University of Chinese Medicine. 44 (02), 46-52 (2021).
  36. Zhang, H., Zhu, M., Zhang, W. Effects of serum acetyl choline and amyloid-beta protein by using acupuncture baihui ( gv20) and yongguan ( ki1) acupoint to treat patients with alzheimer disease. World Chinese Medicine. 13 (11), 2855-2857 (2018).
  37. Wang, Y. Y., et al. effect of electroacupuncture of different acupoint groups on learning-memory ability and expression of il-1β and tnf-α in hippocampus and prefrontal cortex in rats with alzheimer's disease. Zhen Ci Yan Jiu. 45 (8), 617-622 (2020).
  38. Guan, L., Zuo, F., Song, Q., Shi, X. study on standardization of thread-embedding technique: Elucidation on the establishment of the national standard standardized manipulation of acupuncture and moxibustion, part x, thread-embedding. Zhongguo Zhen Jiu. 29 (5), 401-405 (2009).
  39. Cheng, L., et al. bibliometric analysis on key elements of clinical application of acupoint catgut embedding therapy in recent ten years. Zhen Ci Yan Jiu. 47 (9), 830-836 (2022).
  40. Dan, Y. Experimental study on the effects of acupoint thread burial and acupoint injection on insulin resistance and islet morphology in diabetic rats. Hubei University of Traditional Chinese Medicine. , (2015).
  41. Huang, Y. To investigate the regulation of th1/th2 balance in rats with allergic rhinitis by acting on dc at yingxiang acupoint thread burial. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , (2020).
  42. Zhang, X. Y., Shen, L., Fan, H., Liao, Y., Liang, L. Influence of catgut implantation at acupoints on splenic lymphocyte nuclear factor (nf-κb p65) and correlated signaling molecules (β2ar) in rats with experimental colitis. World J Acupuncture-Moxibustion. 20 (4), 48-53 (2010).
  43. Yu, Q. H. Experimental study on the effect of acupoint thread insertion combined with moxibustion on il-6/jak/stat3 signaling pathway in rats with ulcerative colitis. Guizhou Medical University. , (2020).
  44. Wang, Y. J., et al. Effect of moxibustion combined with acupoint catgut embedding on il-6/jak/stat3 signaling pathway in colonic mucosa of ulcerative colitis rats. Zhen Ci Yan Jiu. 47 (6), 525-530 (2022).
  45. Ke, C., et al. Application development of acupoint embedding line body and needle. China J Tradl Chinese Med Pharm. 35 (11), 5644-5647 (2020).
  46. Yue, Y. R., et al. Regulatory effect of acupoint thread-embedding therapy at the shu points of the five organs on the hypothalamic-pituitary-adrenocortical axis in senescent rats under stress. Hunan J Tradl Chinese Med. 34 (05), 180-182 (2018).
  47. Bao, J. Experimental study on the intervention of acupoint thread insertion in the expression of bcl-2 and bax in cochlear spiral ganglion cells in presbycus mice. Liaoning University of Traditional Chinese Medicine. , (2019).
  48. Liu, M. Effect of acupoint thread insertion on nasal mucosa th1/th2, treg/th17 in rats with allergic rhinitis. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , (2013).
  49. Song, Y., et al. Acupoint catgut embedding improves lipid metabolism in exercise-induced fatigue rats via the ppar signaling pathway. Animals (Basel). 13 (4), 558(2023).
  50. Lai, P. C., Yen, C. M., Hsiao, I. H., Chen, Y. H., Lin, Y. W. Acupoint catgut embedding diminishes fibromyalgia pain through trpv1 in the mouse brain. J Integr Neurosci. 22 (4), 97(2023).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Thread Embedding TherapyAcupuncture TherapyAlzheimer DiseaseLearning And MemoryMorris Water MazeAcupoint SelectionBiodegradable SutureAnimal ModelSpatial MemoryHistological Examination

Related Articles