يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

تقييم السمية الخلوية لمستقلبات مبيدات الآفات التريازول النموذجية في النباتات

1.5K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/66048

⸱

ديسمبر 22, 2023

 ,  ,  ,  , 
1Key Laboratory of Microbial Control Technology for Industrial Pollution in Zhejiang Province, College of Environment, Zhejiang University of Technology, 2Research and Teaching Center of Agriculture, Zhejiang Open University, 3International Joint Research Center for Persistent Toxic Substances (IJRC-PTS), College of Environment, Zhejiang University of Technology

في هذه المقالة

ملخص

يصف البروتوكول طريقة جديدة لتقييم السمية الخلوية المتكاملة لمستقلبات مبيدات الآفات التريازول في النباتات.

الملخص

تم إطلاق ملوثات عضوية مختلفة في البيئة بسبب الأنشطة البشرية. يمكن أن تمتص نباتات المحاصيل هذه الملوثات ، مما يتسبب في تهديدات محتملة للنظام البيئي وصحة الإنسان في جميع أنحاء السلسلة الغذائية. يولد التحول الأحيائي للملوثات في النباتات عددا من المستقلبات التي قد تكون أكثر سمية من مركباتها الأصلية ، مما يعني أنه ينبغي أخذ المستقلبات في الاعتبار أثناء تقييم السمية. ومع ذلك ، فإن مستقلبات الملوثات في النباتات معقدة للغاية ، مما يجعل من الصعب الحصول على المعلومات السمية لجميع الأيضات بشكل شامل. اقترحت هذه الدراسة استراتيجية لتقييم السمية الخلوية المتكاملة لمستقلبات الملوثات في النباتات من خلال معالجتها ككل أثناء الاختبارات السمية. تم تطبيق مبيدات الآفات Triazole ، وهي فئة من مبيدات الفطريات واسعة الطيف ، على نطاق واسع في الإنتاج الزراعي. وقد اجتذب تلوث بقاياها في الأراضي الزراعية اهتماما متزايدا. ومن ثم ، تم اختيار أربعة مبيدات آفات تريازول ، بما في ذلك فلوسيلازول ، ودينيكونازول ، وتيبوكونازول ، وبروبيكونازول ، كملوثات تم اختبارها. تم إنشاء المستقلبات عن طريق معالجة الكالس الجزري بمبيدات الآفات التريازول المختبرة. بعد معالجة 72 ساعة ، تم استخراج مستقلبات المبيدات الحشرية في الكالس الجزري ، تليها اختبارات السمية باستخدام خط خلية Caco-2. أظهرت النتائج أن مستقلبات المبيدات المختبرة في الكالس الجزري لم تمنع بشكل كبير صلاحية خلايا Caco-2 (P>0.05) ، مما يدل على عدم وجود سمية خلوية لمستقلبات المبيدات. تفتح هذه الطريقة المقترحة طريقا جديدا لتقييم السمية الخلوية لمستقلبات الملوثات في النباتات ، والتي من المتوقع أن توفر بيانات قيمة لتقييم السمية بدقة.

المقدمة

قد تتعرض نباتات المحاصيل التي تنمو في الأراضي الزراعية لملوثات عضوية مختلفة ناشئة عن الأنشطة البشرية 1,2. يمكن أن تمتص النباتات الملوثات ، مما يتسبب في مزيد من التهديدات للنظام البيئي وصحة الإنسان من خلال سلاسل الغذاء 3,4. من المحتمل أن يخضع xenobiotics في النباتات لسلسلة من التحول الحيوي ، مثل المرحلة الأولى والثانية من التمثيل الغذائي5 ، مما يولد عددا من الأيضات. وفقا لمفهوم الكبد الأخضر في النباتات ، يمكن أن يقلل التمثيل الغذائي للنبات من سمية xenobiotics 6,7. ومع ذلك ، فقد تم الكشف عن أن سمية بعض المستقلبات قد تكون أعلى من سمية والديهم. فعلى سبيل المثال، ثبت أن المنتج غير المشبع بالبرومة من رباعي البروم ثنائي الفينول ألف (TBBPA) والمنتج الميثيلي O للثنائي الفينول ألف (BPA) أكثر سمية بكثير من والديهما8، 9، وتشكل إزالة البرومة وميثيل O مسارات التمثيل الغذائي الرئيسية للمرحلة الأولى في النباتات. وبالتالي ، فإن تقييم السمية الذي يعتمد فقط على الوالدين الملوثين في النباتات ليس دقيقا ، في حين يجب أن تؤخذ المستقلبات المقابلة في الاعتبار.

مستقلبات xenobiotics في النباتات معقدة للغاية10,11 ، مما يجعل من الصعب تحديدها وفصلها بشكل شامل. بالإضافة إلى ذلك ، لا يمكن الحصول إلا على عدد قليل من معايير الأيضات المحددة. ومن ثم، فإن البيانات السمية لجميع المستقلبات غير متاحة، مما يعوق إجراء تقييم شامل للسمية. اقترحت هذه الدراسة استراتيجية لتقييم السمية المتكاملة لمستقلبات الملوثات في النباتات من خلال معالجتها ككل أثناء الاختبارات السمية ، مما يوفر بيانات جديدة لتقييم سمية الملوثات في النباتات. كشفت دراستنا السابقة أن ثقافة الكالس النباتية تفتح طريقا بسيطا وفعالا للحصول على مستقلبات xenobiotics في النباتات12. وبناء على ذلك ، تم استخدام ثقافة الكالس النباتية في هذه الدراسة لتوليد مستقلبات الملوثات في النباتات ، تليها الاستخراج الكيميائي والاختبارات السمية باستخدام خط الخلايا البشرية. الجهاز المعوي هو أحد الأعضاء المستهدفة مباشرة للأجانب المعرضين للحيوانات والبشر. أثبت خط خلايا Caco-2 أنه أفضل نموذج للتحقيق في السلوكيات المعوية وسمية xenobiotics في المختبر13،14،15. وهكذا ، تم اختيار نموذج خلية Caco-2 في هذه الدراسة.

تم تطبيق مبيدات الآفات Triazole ، وهي فئة من مبيدات الفطريات واسعة الطيف ، على نطاق واسع في الإنتاج الزراعي16. وقد جذب تلوث بقاياها في الأراضي الزراعية اهتماما متزايدا17,18. هنا ، تم اختيار أربعة مبيدات حشرية شائعة الاستخدام ، بما في ذلك فلوسيلازول ، دينيكونازول ، تيبوكونازول ، وبروبيكونازول ، كملوثات نموذجية. تم اختيار الجزر في هذه الدراسة كنبات تمثيلي للخضروات الطازجة الجاهزة للأكل. تعرض الكالس الجزري في البداية لمبيدات الآفات المختبرة بتركيز 100 مجم / لتر. بعد التعرض لمدة 72 ساعة ، تم استخراج المستقلبات لتقييم السمية الخلوية باستخدام خط خلية Caco-2. يمكن توسيع هذه الطريقة بسهولة لتقييم السمية الخلوية المتكاملة لمستقلبات الأنواع الأخرى من الملوثات في النباتات.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. تمايز الكالس الجزرة

ملاحظة: تم وصف البروتوكول التفصيلي لتمايز الكالس الجزري في دراسة سابقة12. هنا وصف موجز.

  1. تعقيم سطح البذور المبتعلة بنسبة 75٪ إيثانول لمدة 20 دقيقة متبوعا ب 20٪ H2O2 لمدة 20 دقيقة. اغسل بالماء المقطر 3x على الأقل.
  2. زرع البذور على وسط موراشيج وسكوج (MS) الخالي من الهرمونات (1٪ وزن / حجم) (الرقم الهيدروجيني = 5.8 ، معقم عند 121 درجة مئوية) ، واحتضانها تحت فترة ضوئية 16 ساعة (350 ميكرومول / م2ثانية) عند 26 درجة مئوية لمدة 15 يوما لتشكيل الشتلات.
  3. احصد النباتات عن طريق قطع الهيبوكوتيل والفلقة من الشتلات إلى قطع صغيرة (0.5 سم) واحتضان النباتات في وسط MS يحتوي على أوكسيمون من 1 ملغ / لتر 2،4-حمض ثنائي كلورو فينوكسي أسيتيك وفيتوكينين من 0.5 ملغ / لتر 6-بنزيلامينوبورين عند 26 درجة مئوية في الظلام لمدة 3-4 أسابيع للحث على الكالس.
  4. اجمع الكالس (قطره حوالي 1 سم ، مضغوط) بالمشارط والملقط.

2. علاج الكالس الجزرة بالمبيدات الحشرية

  1. قم بإذابة 10 ملغ لكل من فلوسيلازول ودينيكونازول وتيبوكونازول وبروبيكونازول في 100 مل من وسط MS المعقم بتركيزات نهائية 100 مجم / لتر (درجة حموضة 5.6-7.0).
    ملاحظة: تم اختيار تركيز المعالجة للمبيدات المختبرة كحد أقصى لتركيز تثبيط نمو الخلايا بنسبة 50٪ (IC50) لخلية Caco-2.
  2. امزج 3 جم من الكالس الجزري (من الخطوة 1.4) مع 10 مل من محاليل مبيدات الآفات المحضرة (من الخطوة 2.1) في قوارير زجاجية تحت ظروف معقمة.
  3. امزج 3 جم من الكالس الجزري (من الخطوة 1.4) مع 10 مل من وسط MS المعقم في قوارير زجاجية تحت ظروف معقمة.
    ملاحظة: تم تعقيم جميع القوارير الزجاجية.
  4. احتضان الكالس الجزرة (من الخطوة 2.2 و 2.3) عند 130 دورة في الدقيقة و 26 درجة مئوية في الظلام لمدة 72 ساعة.
    ضع جميع العلاجات في ثلاث نسخ.
  5. جمع الكالس الجزرة من الوسط عن طريق الترشيح باستخدام مرشحات الألياف الزجاجية (0.45 ميكرومتر) بعد حضانة 72 ساعة. اغسل الكالس بماء عالي النقاء 3x.
  6. قم بتجميد الكالس وتجفيفه باستخدام مجفف تجميد عند -55 درجة مئوية ، ثم قم بتجانسها باستخدام مطحنة أنسجة عالية الإنتاجية عند 70 هرتز لمدة 3 دقائق.

3. الاستخراج الكيميائي للجزرة الكالس

  1. امزج 0.2 غرام من مسحوق مؤرض من الكالس المجفف بالتجميد مع 3 مل من الأسيتونيتريل في أنبوب طرد مركزي (10 مل).
  2. دوامة أنبوب الطرد المركزي لمدة 8 دقائق ، ثم صوتنة لمدة 5 دقائق (150 واط ، 40 كيلو هرتز).
  3. اجمع المواد الطافية عن طريق السحب بعد الطرد المركزي عند 8000 × جم عند 4 درجات مئوية لمدة 10 دقائق.
  4. كرر إجراءات الاستخراج 3x وقم بتجميع المستخلصات في أنبوب طرد مركزي نظيف (10 مل).
  5. ركز المستخلصات المجمعة حتى تجف باستخدام مكثف نفخ النيتروجين عند 40 درجة مئوية.
  6. إعادة إذابة بقايا المستخلصات (من الخطوة 3.5) مع 1 مل من وسط النسر المعدل من Dulbecco (DMEM) مع 0.3٪ ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO).
    ملاحظة: تم الحصول على المخلفات في الخطوة 3.6 من مستخلصات الكالس المعالج بمبيدات الآفات (من الخطوة 2.2).
  7. إعادة إذابة بقايا المستخلصات (من الخطوة 3.5) مع 1 مل من DMEM مع 0.3٪ DMSO ، وإذابة 1 ملغ من فلوسيلازول ، دينيكونازول ، تيبوكونازول ، وبروبيكونازول في 4 أنابيب مختلفة ، على التوالي.
    ملاحظة: تم الحصول على البقايا في الخطوة 3.7 من مقتطفات الكالس الفارغة (من الخطوة 2.3).
    ملاحظة: تم تحضير DMEM مع 10٪ مصل بقري جنيني (FBS) و 1٪ مضادات حيوية (البنسلين والستربتومايسين).

4. إنعاش خلية Caco-2

ملاحظة: تم تعقيم جميع الكواشف والمواد المشاركة في اختبارات خلايا Caco-2 لمدة 20 دقيقة وتعقيمها تحت الأشعة فوق البنفسجية لمدة ساعتين.

  1. قم بإزالة أنبوب الحفظ بالتبريد (تخزين الخلايا المجمدة) من خزان النيتروجين السائل وانقله بسرعة إلى حمام مائي عند 37 درجة مئوية. رجها باستمرار لإذابة المحلول المجمد.
    ملاحظة: تجنب تدفق الماء فوق غطاء أنبوب الحفظ بالتبريد عند الرج.
  2. تطهير سطح أنبوب الحفظ بالتبريد بنسبة 75٪ كحول بعد ذوبان المحلول المجمد. انقل محلول الخلية بسرعة إلى أنبوب طرد مركزي معقم عن طريق الماصة.
  3. قم بإزالة المواد الطافية في أنبوب الحفظ بالتبريد بعد الطرد المركزي عند 1000 × جم عند 4 درجات مئوية لمدة 3 دقائق. أضف 1 مل من DMEM وقم بتعليق الخلايا عن طريق النقر والهز برفق.
  4. انقل تعليق الخلية (من الخطوة 4.3) إلى قارورة زجاجية عن طريق الماصة. أضف 5 مل من DMEM في الدورق الزجاجي ، وهز القارورة الزجاجية برفق لتوزيع الخلايا بشكل موحد.
  5. احتضان الخلايا في حاضنة عند 37 درجة مئوية مع 5٪ CO2.
    ملاحظة: تم تنفيذ الخطوات 4.2-4.4 في مقعد نظيف للغاية.

5. مرور خلية Caco-2

  1. قم بإزالة القارورة الزجاجية من الحاضنة وتخلص من وسط الاستزراع عندما تصل كثافة الخلية إلى أكثر من 80٪. اغسل الخلايا باستخدام PBS 3x.
  2. أضف 1 مل من محلول التربسين-EDTA وانشره بشكل موحد لضمان الاتصال الكامل بالخلايا.
  3. قم بإزالة المحلول الهضمي عندما تتقلص الخلايا من شكل ملتصق إلى نقطة مستديرة صغيرة ولم تعلق تحت الملاحظة بواسطة المجهر (تكبير 100x). اضغط برفق على جدار القارورة للتسبب في إزالة الخلايا.
  4. أضف 2 مل من DMEM ، وكرر شطف جدار القارورة 10x ، واضغط برفق على جدار القارورة ، وانقل 1 مل من تعليق الخلية إلى قارورة زجاجية أخرى.
  5. أضف 5 مل من DMEM في قوارير زجاجية. اضغط برفق على جدار القارورة لتوزيع الخلايا بشكل موحد.
  6. احتضان الخلايا في الحاضنة عند 37 درجة مئوية مع 5٪ CO2. استبدل وسط الاستزراع ب DMEM الطازج كل 24 ساعة حتى تصل كثافة الخلية إلى أكثر من 80٪.
  7. كرر إجراءات مرور الخلية حتى يتم حصاد خلايا كافية (حوالي 2 × 106) لاختبارات التعرض التالية.
    ملاحظة: تم تنفيذ الخطوات 5.1-5.5 في المقعد النظيف للغاية. تم تحديد عدد الخلايا بواسطة مقياس الدم19.

6. التعرض لخلية Caco-2

  1. قم بإزالة القوارير الزجاجية (من الخطوة 5.7) من الحاضنة وكرر الخطوات 5.1-5.4 لجمع الخلايا.
  2. اضغط برفق على جدار القارورة لتوزيع الخلايا بشكل موحد ونقل معلقات الخلايا إلى أنبوب طرد مركزي (15 مل).
  3. قم بتخفيف تعليق الخلية (من الخطوة 6.2) باستخدام DMEM مع قياس الخلايا للوصول إلى كثافة خلية تبلغ حوالي 1 × 105 خلايا / مل. اضغط برفق على جدار القارورة لتوزيع الخلايا بشكل موحد.
  4. أضف 100 ميكرولتر من PBS في الآبار الخارجية للوحة 96 بئرا لمنع تبخر وسط الاستزراع بسبب تأثير الحافة.
    ملاحظة: اضغط باستمرار على جدار أنبوب الطرد المركزي للحفاظ على تعليق الخلية موحدا.
  5. أضف 100 ميكرولتر من تعليق الخلية (من الخطوة 6.3) في الآبار اليسرى للوحة 96 بئرا ، واتركها ترتاح لمدة 10 دقائق.
  6. احتضان الخلايا في الحاضنة عند 37 درجة مئوية مع 5٪ CO2 لمدة 48 ساعة.
  7. قم بإزالة لوحة 96 بئرا من الحاضنة بعد حضانة 48 ساعة وتجاهل وسط الاستزراع.
  8. قم بتعيين مجموعة مستقلب مبيدات الآفات عن طريق إضافة 100 ميكرولتر من المحاليل (من الخطوة 3.6) في كل بئر.
    ملاحظة: في كل بئر في الخطوة 6.8 ، كانت هناك مستقلبات مبيدات الآفات المتولدة من 0.1 ملغ من الآباء.
  9. قم بتعيين مجموعة أصلية لمبيدات الآفات عن طريق إضافة 100 ميكرولتر من المحاليل (من الخطوة 3.7) في كل بئر للمقارنة.
    ملاحظة: في كل بئر في الخطوة 6.9 ، كان هناك 0.1 ملغ من الآباء المبيدات.
  10. قم بتعيين عنصر تحكم فارغ عن طريق إضافة 100 ميكرولتر من DMEM مع 0.3٪ DMSO في كل بئر. استخدم ستة آبار لكل مجموعة (الخطوة 6.8-6.9).
  11. احتضان الخلايا في الحاضنة عند 37 درجة مئوية مع 5٪ CO2 لمدة 24 ساعة.
    ملاحظة: تم تنفيذ الخطوات 6.1-6.5 و 6.7-6.10 في المقعد النظيف للغاية.

7. تقييم صلاحية الخلية

  1. قم بإزالة لوحة 96 بئرا (من 6.11) من الحاضنة وتخلص من وسط الاستزراع بعد التعرض لمدة 24 ساعة. اغسل الخلايا باستخدام برنامج تلفزيوني 2x.
  2. أضف 100 ميكرولتر من DMEM في كل بئر ، ثم أضف 10 ميكرولتر من كواشف CCK-8. هز اللوحة برفق لتوزيع الخلايا بشكل موحد.
  3. احتضان الخلايا في الحاضنة عند 37 درجة مئوية مع 5٪ CO2 لمدة 4 ساعات.
  4. قم بإزالة لوحة 96 بئرا من الحاضنة بعد حضانة 4 ساعات وقياس الامتصاص البصري (OD) عند 450 نانومتر بواسطة مقياس الطيف الضوئي الفلوري.
  5. احسب صلاحية الخلية بالمعادلة التالية:
    صلاحية الخلية (٪) = (المجموعة التجريبية OD - ODDMEM) / (التحكم في OD - ODDMEM) × 100٪.
    ملاحظة: تم تنفيذ الخطوات 7.1-7.2 في المقعد النظيف للغاية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

يمثل الشكل 1 مخططا للطريقة المقترحة لتوليد واستخراج وتقييم السمية الخلوية لمستقلبات مبيدات الآفات في الكالس الجزري. في الشكل 2 ، منحنيات حركية الامتصاص والتمثيل الغذائي لمبيدات الآفات المختبرة ، والتي يمكننا من خلالها أن نجد أن تركيزات مبيدات الآفات في وسط الاستزراع قد انخفضت بشكل كبير ، بينما بدأت تلك الموجودة في الكالس الجزري في الزيادة ، وبلغت ذروتها عند 4 أو 8 ساعات ، متبوعة بانخفاض تدريجي. تشير هذه النتائج إلى أنه يمكن تناول المبيدات الحشرية بسرعة وتحويلها ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تم تطوير هذا البروتوكول لتقييم السمية الخلوية المتكاملة لمستقلبات مبيدات الآفات التريازول في النباتات من خلال الجمع بين الكالس النباتي ونماذج الخلايا البشرية. الخطوات الحاسمة لهذا البروتوكول المقترح هي زراعة الكالس النباتي وخلية Caco-2. تم تقديم الجزء الأكثر صعوبة والنصائح النسبية لثقافة الكالس النباتية في دراستنا السابقة12. هنا ، تجدر الإشارة إلى أن صيانة الخلايا هي أصعب جزء لثقافة خلايا Caco-2 ، لأن الخلايا تصاب بسهولة. نتيجة لذلك ، من المهم التأكد من أن جميع ال...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

تم دعم هذه الدراسة من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (21976160) ومشروع أبحاث تطبيق تكنولوجيا الرفاهية العامة بمقاطعة تشجيانغ (LGF21B070006).

     

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
2،4-حمض ثنائي كلورو فينوكسي أسيتيكWAKO1 مجم / لتر
20٪ H2< / sub>O2< / sub>Sinopharm Chemical Reagent Co.، Ltd.10011218-500 مل
6-بنزيل لامينوبورينWAKO0.5 مجم / لتر
75٪ إيثانولسينوفارم كاشف كيميائي المحدودة1269101-500 مل
96 بئر لوحةالحرارية فيشر
أسيتونيتريلسيجما ألدريتش
حاضنة المناخ الاصطناعينينغبو دونغنان مختبر المعدات المحدودةRDN-1000A-4
الأوتوكلافSTIKMJ-سلسلة
Caco-2 خلاياNuoyang التكنولوجيا الحيوية المحدودة
كواشف CCK8معهد نانجينغ جيانتشنغ للهندسة الحيوية ، الصينG021-1-3
أجهزة الطرد المركزيالحرارية فيشر
CO2< / sub> حاضنةLabtripHWJ-3-160
ثنائي ميثيل سلفوكسيدSolarbio Life SciencesD8371
Diniconazole ، 98.7٪J& K Scientific83657-24-3
Dulbecco المتوسطSolarbio Life Sciences11965-500 مل
الميزان الإلكترونيShanghai Precision Instrument Co.، LtdFA1004B
مصل الأبقار الجنينيCellmax
Fluorescenceمقياس الطيف الضوئي TecanInfinite M200
Flusilazole ، 98.5٪J& ك العلمية85509-19-9   
مجفف التجميدSCIENTZ
طاحونة مناديل عالية الإنتاجيةSCIENTZ
مجهر مقلوبLeica BiosystemsDMi1
نظام Milli-QMilliporeMS1922801-4L
Murashige & Skoog متوسطHOPEBIOHB8469-7
مكثف نفخ النيتروجينAOSHENGMD200-2
PBSSolarbio Life SciencesP1022-500 مل
البنسلين الستربتومايسين السائلSolarbio Life SciencesP1400-100 مل
بروبيكونازول ، 100٪J& ك علمية60207-90-1 
البحث بالإضافة إلىEppendorf10-1000 & mu ؛ L
بذور الجزر الصغير الإصبع (Daucus carota var. sativus)Shouguang Seed Industry Co.، Ltd
حاضنات اهتزازشنغهاي bluepard الأدوات المحدودةTHZ-98AB
تيبوكونازول ، 100٪J& K Scientific107534-96-3
حل التربسين-EDTASolarbio علوم الحياةT1300-100 مل
آلة الموجات فوق الصوتيةZKIUC-6
مقعد فائق التنظيف المعقم بالأشعة فوق البنفسجيةAIRTECH
أداة دوامةWuxi Laipu Instrument Equipment Co.، LtdBV-1010
المعدل

المراجع

  1. Fan, Y., et al. Uptake of halogenated organic compounds (HOCs) into peanut and corn during the whole life cycle grown in an agricultural field. Environ Pollut. 263, 114400(2020).
  2. Wu, Q., et al. Trace metals in e-waste lead to serious health risk through consumption of rice growing near an abandoned e-waste recycling site: Comparisons with PBDEs and AHFRs. Environ Pollut. 247, 46-54 (2019).
  3. Liu, A. F., et al. Tetrabromobisphenol-A/S and nine novel analogs in biological samples from the Chinese Bohai Sea: Implications for trophic transfer. Environ Sci Technol. 50 (8), 4203-4211 (2016).
  4. Awasthi, A. K., Zeng, X., Li, J. Environmental pollution of electronic waste recycling in India: A critical review. Environ Pollut. 211, 259-270 (2016).
  5. Zhang, Q., et al. Plant accumulation and transformation of brominated and organophosphate flame retardants: A review. Environ Pollut. 288, 117742(2021).
  6. Sandermann, H. Higher plant metabolism of xenobiotics: the 'green liver' concept. Pharmacogenetics. 4, 225-241 (1994).
  7. Zhang, J. J., Yang, H. Metabolism and detoxification of pesticides in plants. Sci Total Environ. 790, 148034(2021).
  8. Debenest, T., et al. Ecotoxicity of a brominated flame retardant (tetrabromobisphenol A) and its derivatives to aquatic organisms. Comp Biochem Phys C. 152 (4), 407-412 (2010).
  9. McCormick, J. M., Van Es, T., Cooper, K. R., White, L. A., Haggblom, M. M. Microbially mediated O-methylation of bisphenol A results in metabolites with increased toxicity to the developing zebrafish (Danio rerio) embryo. Environ Sci Technol. 45 (15), 6567-6574 (2011).
  10. Zhang, Q., et al. Multiple metabolic pathways of 2,4,6-tribromophenol in rice plants. Environ Sci Technol. 53 (13), 7473-7482 (2019).
  11. Hou, X., et al. Glycosylation of tetrabromobisphenol A in pumpkin. Environ Sci Technol. 53 (15), 8805-8812 (2019).
  12. Wu, J., et al. Elucidating the metabolism of 2,4-Dibromophenol in plants. J Vis Exp. (192), e65089(2023).
  13. Zucco, F., et al. An Inter-laboratory study to evaluate the effects of medium composition on the differentiation and barrier function of Caco-2 cell lines. Atla-Altern Lab Anim. 33, 603-618 (2005).
  14. Eisenbrand, G., et al. Methods of in vitro toxicology. Food Chem Toxicol. 40, 193-236 (2002).
  15. Sambuy, Y., et al. The Caco-2 cell line as a model of the intestinal barrier: influence of cell and culture-related factors on Caco-2 cell functional characteristics. Cell Biol Toxicol. 21, 1-26 (2005).
  16. Li, H., et al. Uptake, translocation, and subcellular distribution of three triazole pesticides in rice. Environ Sci Pollut Res. 29 (17), 25581-25590 (2022).
  17. Satapute, P., Kamble, M. V., Adhikari, S. S., Jogaiah, S. Influence of triazole pesticides on tillage soil microbial populations and metabolic changes. Sci Total Environ. 651, 2334-2344 (2019).
  18. Xu, Y., et al. A possible but unrecognized risk of acceptable daily intake dose triazole pesticides exposure-bile acid disturbance induced pharmacokinetic changes of oral medication. Chemosphere. 322, 138209(2023).
  19. Louis, K. S., Siegel, A. C. Cell viability analysis using trypan blue: manual and automated methods. Methods Mol Biol. 740, 7-12 (2011).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

نواتج أيض مبيدات التريازولتقييم السُمية الخلويةزراعة الكالوس النباتيالتحول الحيوي للمبيداتالخط الخلوي Caco-2تحليل بقايا المبيداتالاختبارات السموميةاستخلاص كالوس الجزرمقايسة حيوية الخليةكاشف CCK8
تقييم السمية الخلوية لمستقلبات مبيدات الآفات التريازول النموذجية في النباتات
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.