يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

تنظيم نمو خلايا شوان بواسطة المجال الكهربائي النبضي نانو ثانية لتجديد الأعصاب الطرفية في المختبر

1.8K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/66097

⸱

مايو 3, 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Orthopedics, The First Affiliated Hospital, College of Medicine, Zhejiang University, 2College of Medicine, Zhejiang University, 3Department of Orthopedics, The Second Affiliated Hospital of Zhejiang Chinese Medical University, 4Department of Orthopedic Physical Therapy, Faculty of Physical Therapy, Nahda University in Beni Suef, 5Plastic & Cosmetic Center, The First Affiliated Hospital, College of Medicine, Zhejiang University

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

هنا ، نقدم بروتوكولا لتطبيق المجال الكهربائي لنبضة النانو ثانية (nsPEF) لتحفيز خلايا شوان في المختبر. أثبتت قدرة التوليف والإفراز للعوامل ذات الصلة وتغييرات سلوك الخلية صحة التحفيز الناجح باستخدام nsPEF. تعطي الدراسة نظرة إيجابية لطريقة تجديد الأعصاب الطرفية.

الملخص

خلايا شوان (SCs) هي خلايا الميالين في الجهاز العصبي المحيطي ، وتلعب دورا مهما في تجديد الأعصاب الطرفية. المجال الكهربائي لنبض النانو ثانية (nsPEF) هو طريقة ناشئة قابلة للتطبيق في التحفيز الكهربائي للأعصاب والتي أثبتت فعاليتها في تحفيز تكاثر الخلايا والعمليات البيولوجية الأخرى. بهدف تقييم ما إذا كانت SCs تخضع لتغييرات كبيرة في إطار nsPEF والمساعدة في استكشاف إمكانات طرق جديدة لتجديد الأعصاب المحيطية ، تعرضت خلايا RSC96 المستزرعة لتحفيز nsPEF عند 5 كيلو فولت و 10 كيلو فولت ، تليها الزراعة المستمرة لمدة 3-4 أيام. بعد ذلك ، تم تقييم بعض العوامل ذات الصلة التي عبرت عنها SCs لإثبات التحفيز الناجح ، بما في ذلك بروتين العلامة المحدد ، وعامل التغذية العصبية ، وعامل النسخ ، ومنظم الميالين. أظهرت النتائج التمثيلية أن nsPEF عزز بشكل كبير انتشار وهجرة SCs والقدرة على تجميع العوامل ذات الصلة التي تساهم بشكل إيجابي في تجديد الأعصاب الطرفية. في الوقت نفسه ، أشار التعبير المنخفض عن GFAP إلى التشخيص الحميد لإصابات الأعصاب الطرفية. تظهر كل هذه النتائج أن nsPEF لديه إمكانات كبيرة كطريقة علاج فعالة لإصابات الأعصاب الطرفية عن طريق تحفيز SCs.

المقدمة

يتأثر ملايين الأشخاص كل عام بإصابات الأعصاب التي تشمل كلا من الجهاز العصبي المحيطي (PNS) والجهاز العصبي المركزي (CNS)1. أظهرت الدراسات أن قدرة الإصلاح المحوري للجهاز العصبي المركزي محدودة للغاية بعد إصابات الأعصاب ، بينما تظهر PNS قدرة معززة بسبب اللدونة الكبيرة ل SCs2. ومع ذلك ، فإن تحقيق التجديد الكامل بعد إصابات الأعصاب الطرفية لا يزال شاقا ولا يزال يشكل تحديا كبيرا لصحة الإنسان 3,4. في الوقت الحاضر ، ظلت الطعوم الذاتية علاجا شائعا على الرغم من عيوب اعتلال موقع المتبرع ومحدودية التوافر5. دفع هذا الموقف الباحثين إلى استكشاف علاجات بديلة ، بما في ذلك المواد6 والعوامل الجزيئية7 والتحفيز الكهربائي (ES). كعامل يعزز نمو المحور العصبي وتجديد الأعصاب8 ، يصبح اختيار طريقة مناسبة ل ES واستكشاف العلاقة بين ES و SCs أمرا ضروريا.

SCs هي الخلايا الدبقية الرئيسية في الجهاز العصبي الطرفي ، وتلعب دورا حاسما في تجديد PNS 9,10. بعد إصابات الأعصاب الطرفية ، تخضع SCs للتنشيط السريع ، وإعادة البرمجةالشاملة 2 ، والانتقال من حالة تكوين المايلين إلى مورفولوجيا داعمة للنمو لإجراء تجديد العصب2. يحدث انتشار كبير لل SCs في الطرف البعيد من العصب المصاب ، بينما تخضع SCs للجذع البعيد للتكاثر والاستطالة لتشكيل شريط Bungner ، وهو أمر ضروري لتوجيه المحاور العصبية للنمو نحو العضو المستهدف11. علاوة على ذلك ، تهاجر SCs من جذوع الأعصاب القريبة والبعيدة إلى الجسر العصبي لتشكيل حبال SC التي تعزز تجديد المحورالعصبي 12. علاوة على ذلك ، أظهرت الدراسات السابقة أن تخليق وإفراز العوامل ذات الصلة المتعلقة ب SCs يتغير في حالات تجديد الأعصاب الطرفية ، بما في ذلك عوامل النسخ13 ، وعوامل التغذية العصبية14 ، ومنظمات الميالين13. وهذا يوفر أيضا مؤشرات لتقييم نشاط الطوائف المنبوذة. وبناء على ذلك، تم التحقيق على نطاق واسع في تعزيز انتشار SC والهجرة والتوليف وإفراز العوامل ذات الصلة لتحسين تجديد الأعصاب الطرفية15.

أظهرت الدراسات السابقة إمكانية استخدام ES لتجديد الأعصاب1. التفسير المقبول على نطاق واسع هو أن ES يمكن أن يحفز إزالة استقطاب أغشية الخلايا ، ويغير إمكانات الغشاء ، ويؤثر على وظائف بروتين الغشاء عن طريق تغيير توزيعات الشحن على هذه الجزيئات الحيوية1. ومع ذلك ، فإن PEF المكثف المطبق على نطاق واسع قد يسبب ألما شديدا وتقلصات عضلية لا إرادية ورجفان القلب8. كما أنه يزيد من نشاط الكرياتين كيناز (CK) ، ويقلل من قوة العضلات ، ويحفز على تطور تأخر ظهور وجع العضلات (DOMS) 16. nsPEF هي تقنية ناشئة تحفز موضوعات الاختبار ذات المجالات الكهربائية عالية الجهد خلال مدة نبضة نانوثانية ، ويتم استخدامها تدريجيا في الأبحاث على المستوى الخلوي17,18. أفادت الدراسات السابقة أن الأساس المنطقي المحتمل ل nsPEF الذي يعزز تكاثر الخلايا ونشاط العضيات هو تكوين المسام النانوية الغشائية وتنشيط القنوات الأيونية ، مما يؤدي إلى زيادة تركيز السيتوبلازم Ca2+ 19. يستخدم nsPEF تقنية طاقة النبض لشحن غشاء الخلية ، وإنتاج نبضات تتميز بمدة قصيرة ، ووقت ارتفاع سريع ، وطاقة عالية ، وكثافة طاقة منخفضة20. تشير هذه الخصائص إلى أن nsPEF قد يكون وضعا مفضلا مع الحد الأدنى من الآثار الجانبية للتحفيز8. علاوة على ذلك ، يوفر nsPEF مزايا مثل الإجراءات طفيفة التوغل ، وقابلية الانعكاس ، وقابلية الضبط ، وعدم التدمير للأنسجة العصبية مقارنة بالتدخلات الجراحية. أحد الاتجاهات البحثية السائدة ل nsPEF في المجال الطبي الحيوي هو تطبيقه لاستئصال أنسجة الورم باستخدام تحفيز المجال الكهربائي عالي الطاقة21،22،23. تشير بعض نتائج الأبحاث إلى أن 12-nsPEF يمكن أن يحفز الأعصاب الطرفية دون التسبب في ضرر24. ومع ذلك ، في الوقت الحاضر ، هناك أدلة محدودة فيما يتعلق بتطبيق nsPEF في مجال تجديد الأعصاب. علاوة على ذلك ، فإن تحفيز SCs باستخدام nsPEF هو محاولة رائدة ، مما يساهم في مزيد من البحوث في الجسم الحي والسريري. تستكشف هذه الدراسة ما إذا كان تحفيز NSPEF ل SCs يمكن أن يعزز تجديد الأعصاب ويوفر أساسا موثوقا به للبحث المتعمق والمنهجي اللاحق.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. إذابة خلايا RSC96 المحفوظة بالتبريد

  1. قم بإذابة المبرد الذي يحتوي على 1 مل من معلق الخلية عن طريق رجه بسرعة في حمام مائي 37 درجة مئوية ، ثم أضفه إلى أنبوب طرد مركزي يحتوي على 4-6 مل من وسط الاستزراع الكامل واخلطه جيدا.
  2. أجهزة الطرد المركزي عند 1000 × جم لمدة 3-5 دقائق ، تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق الخلايا في 3 مل من وسط الاستزراع الكامل.
  3. أضف معلق الخلية إلى دورق (أو طبق) يحتوي على 6-8 مل من وسط الاستزراع الكامل واحتضانه عند 37 درجة مئوية طوال الليل.
  4. في اليوم التالي ، لاحظ نمو الخلايا وكثافتها تحت المجهر.

2. مرور الخلية:

ملاحظة: إذا وصلت كثافة الخلية إلى 80٪ -90٪ ، فهي جاهزة للمرور.

  1. تخلص من وسط الاستزراع وشطف الخلايا 1-2 مرات بمحلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS) بدون أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم.
  2. أضف 0.25٪ (وزن / حجم) التربسين -0.53 مللي متر EDTA إلى دورق الاستزراع (1-2 مل لدورق T25 ، 2-3 مل لدورق T75) واحتضانه عند 37 درجة مئوية لمدة 1-2 دقيقة.
  3. مراقبة انفصال الخلية تحت المجهر. إذا أصبحت معظم الخلايا مستديرة ومنفصلة ، أعد القارورة بسرعة إلى منطقة العمل ، واضغط على القارورة برفق ، وأضف 3-4 مل من وسط الاستزراع الذي يحتوي على 10٪ FBS لإيقاف عملية الهضم.
  4. امزج المحتويات ، ونضح المحلول ، وأجهزة الطرد المركزي عند 1000 × جم لمدة 5 دقائق. بعد ذلك ، تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق الخلايا بإضافة 1-2 مل من وسط الثقافة الطازج وسحب الإصبع برفق.
  5. انقل معلق الخلية إلى دورق T25 جديد بنسبة 1: 2 وأضف 7 مل من وسط الاستزراع.

3. تشغيل جهاز nsPEF

  1. أعد تعليق خلايا RSC96 في 1 مل من وسط زراعة DMEM وانقلها إلى أطباق قياس الألوان مع أقطاب كهربائية على كلا الجانبين.
  2. قم بتشغيل مفتاح الطاقة.
  3. اضبط المعلمات عن طريق تدوير المقبض الموجود على الجهاز لتغيير شدة المجال الكهربائي. الشدة المحددة في هذه الدراسة هي 5 كيلو فولت / سم ، 10 كيلو فولت / سم ، 20 كيلو فولت / سم ، و 40 كيلو فولت / سم.
  4. قم بتدوير الأقطاب الكهربائية بعناية حتى تظهر الشرر ، مما يسمح للخلايا بتلقي 5 نبضات من nsPEF وفقا لشدة شدة المجال المحددة مسبقا قبل فصل القطبين على الفور. بعد هذا العلاج ، خذ خلايا المجموعة التجريبية المعالجة ب nsPEF وخلايا المجموعة الضابطة غير المعالجة لأداء الأقسام 4-6 ، على التوالي ، بعد فترة معينة من زراعة الخلايا (1 يوم في هذه التجربة).

4. اختبار مجموعة عد الخلايا -8 (CCK-8)

  1. تحضير معلق خلية بتركيز معين من خلايا RSC96 المحفزة بالتحفيز الكهربائي. أضف 100 ميكرولتر من معلق الخلية إلى كل بئر من صفيحة زراعة الخلايا المكونة من 96 بئرا. بالنظر إلى متطلبات فحص CCK-8 ، تحكم في العدد الإجمالي للخلايا في مجموعة الكاشف بين 1 × 103 و 1 × 106.
  2. خذ 10 ميكرولتر من محلول CCK-8 من المجموعة وأضفه إلى لوحة زراعة الخلايا المكونة من 96 بئرا. احتضان في حاضنة CO2 عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة إضافية إلى 4 ساعات.
  3. قياس الامتصاص. استخدم قياس الطول الموجي المزدوج بطول موجي للكشف يبلغ 430-490 نانومتر وطول موجي مرجعي يبلغ 600-650 نانومتر.
  4. تحديد شدة المجال للتجارب اللاحقة بناء على النتائج التجريبية لتكاثر الخلايا. حدد الخلايا ذات الانتشار الجيد للتجارب اللاحقة.

5. فحص خدش الخلية

  1. في كل بئر من صفيحة من ستة آبار ، البذور 3 × 105 خلايا بحجم إجمالي 2 مل لكل بئر. بعد حوالي 72 ساعة ، ستغطي الخلايا البئر. إجراء الاختبار على المجموعات التجريبية والضابطة بشكل منفصل.
  2. استخدم طرف ماصة لرسم خط أفقي في الجزء السفلي من بئر الثقافة. تأكد من تثبيت طرف الماصة عموديا وحاول تجنب إمالته.
  3. نضح وسائل الإعلام الثقافة وغسل مع برنامج تلفزيوني 2-3 مرات.
  4. أضف 2 مل من الوسط الخالي من المصل إلى كل بئر.
  5. ضع اللوحة في حاضنة 37 درجة مئوية. التقط صورا تحت تكبير رباعي للمجهر المقلوب عند 0 ساعة و 24 ساعة لمراقبة التغيرات في هجرة الخلايا.

6. التألق المناعي

  1. نفاذية الخلية:
    1. بعد سحب معلقات الخلايا برفق في أطباق الاستزراع ، ارسم دوائر بقلم الأنسجة في المواقع التي يتم فيها توزيع الخلايا بالتساوي على غطاء الغطاء. تعامل مع المجموعة الضابطة والمجموعات التجريبية المختلفة بشكل منفصل.
    2. أضف 50-100 ميكرولتر من محلول عمل النفاذية (0.25-0.5٪ Triton X-100) واحتضانه في درجة حرارة الغرفة (RT) لمدة 20 دقيقة. اغسل ثلاث مرات مع برنامج تلفزيوني لمدة 5 دقائق في كل مرة.
  2. حجب المصل: أضف 3٪ BSA داخل الدوائر لتغطية الأنسجة بشكل موحد. احتضان في RT لمدة 30 دقيقة.
  3. حضانة الأجسام المضادة الأولية: قم بإزالة محلول الحجب برفق وأضف الجسم المضاد الأولي المخفف بشكل مناسب (مشتق من الماوس ، مخفف عند 1: 300) إلى آبار الخلايا. ضع طبق زراعة الخلايا في صندوق رطب واحتضانه طوال الليل عند 4 درجات مئوية.
  4. حضانة الأجسام المضادة الثانوية: ضع لوحة الخلية على شاكر واغسلها ثلاث مرات لمدة 5 دقائق في كل مرة. أضف الجسم المضاد الثانوي المقابل (المسمى CY3 الماعز المضاد للفأر IgG ، المخفف عند 1: 300) واحتضانه في RT لمدة 50 دقيقة.
  5. تلطيخ DAPI النووي:
    1. ضع غطاء الغطاء في PBS (درجة الحموضة 7.4) على شاكر واغسله ثلاث مرات لمدة 5 دقائق في كل مرة.
    2. بعد تجفيف الشريحة برفق ، أضف محلول تلطيخ DAPI (2 ميكروغرام / مل ، 0.5 مل لكل دائرة) داخل الدوائر واحتضانها في RT لمدة 10 دقائق في غرفة مظلمة.
  6. التركيب: ضع غطاء الغطاء في PBS (درجة الحموضة 7.4) على شاكر واغسله ثلاث مرات لمدة 5 دقائق في كل مرة. بعد تجفيف الشريحة برفق ، أغلق غطاء الغطاء بوسط تثبيت مضاد للبهتان من أجل التألق.
  7. الحصول على الصور: إثارة DAPI بطول موجي 330-380 نانومتر واكتشاف الانبعاث عند 420 نانومتر ؛ إثارة عند 465-495 نانومتر وكشف الانبعاثات عند 515-555 نانومتر ل AF488 ؛ إثارة عند 510-560 نانومتر وكشف الانبعاثات عند 590 نانومتر ل CY3 ؛ إثارة عند 608-648 نانومتر وكشف الانبعاثات عند 672-712 نانومتر ل CY5.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

تحفز المجالات الكهربائية النبضية منخفضة الكثافة تكاثر الخلايا
وفقا لفحص CCK-8 ، كان معدل انتشار RSC96 في مجموعة 5 كيلو فولت / سم أسرع بكثير من خلايا المجموعة الضابطة. ومع ذلك، ومع زيادة البارامترات (20 كيلو فولت/سم و 40 كيلو فولت/سم)، كان معدل الانتشار غير مستقر، بل أقل من معدل الانتشار في المجموعة الضابطة. كان معدل تكاثر الخلايا لخلايا RSC96 في مجموعة 40 كيلو فولت / سم أقل بكثير من مجموعات التحكم و 5 كيلو فولت / سم ، مما يدل على اختلاف إحصائي كبير (P < 0.05). بسبب عدم تلبية المتطلبات التجريبية لتك...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

في السنوات الأخيرة ، شهد تطبيق nsPEF تعزيز النمو ، كما ورد. nsPEF له تأثير مستهدف للغاية على المنطقة المرغوبة فقط ، حيث يوفر طاقة كافية للعلاج دون التسبب في أضرار حرارية إضافية ، مما يجعله أكثر أمانا لجسم الإنسان28. هذه الخصائص تعطيه آفاقا متعدية واعدة في علاج الأورام وتجديد الأعصاب. ومع ذلك ، فقد اقترحت بعض الدراسات بعض القيود على nsPEF. بالمقارنة مع أبحاث المواد ، فإن ES مقيدة بمصادر الطاقة والأسلاك الخارجية29. علاوة على ذلك ، أثبتت دراسة حديثة أن إعطاء يدوكائين في الفترة...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

تم تمويل هذا العمل من قبل المشروع الوطني لتطوير الأدوات والمعدات العلمية الرئيسية (رقم 82027803).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
مضاد للتلاشي تصاعد متوسطووهان كزافييه التكنولوجيا الحيوية المحدودةG1401
ماوس مضاد للجي جي إف إيه مابووهان كزافييه التكنولوجيا الحيوية المحدودةGB12100-100
ماوس بولي ببتيد الثقيل المضاد للخيوط العصبية mAbووهان كزافييه التكنولوجيا الحيوية المحدودةGB12144-100
ماوس بيتا المضادة S100 ماوسووهان كزافييه التكنولوجيا الحيوية المحدودةGB14146-100
BSAووهان Xavier Biotechnology Co.، LTDGC305010
CoverslipJiangsu Shitai المعدات التجريبية المحدودة10212432C
CY3 علامة الماعز المضادة للفأر IgGووهان Xavier التكنولوجيا الحيوية المحدودةGB21302
DAPI تلطيخ الكاشفووهان Xavier التكنولوجيا الحيوية المحدودةG1012
اللون شاكرووهان كزافييه التكنولوجيا الحيوية المحدودةDS-2S100
امدادات الطاقة ذات الجهد العالي ل nsPEFMatsusada Precision Inc.AU-60P1.6-L
القلم الكيميائيالنسيجي ووهان Xavier التكنولوجيا الحيوية المحدودةG6100
غشاء كسر السائلووهان كزافييه التكنولوجيا الحيوية المحدودةG1204
مجهر الشريحةووهان Xavier التكنولوجيا الحيوية المحدودةG6012
النخيل الطرد المركزيووهان Xavier التكنولوجيا الحيوية المحدودةMS6000
PBS مسحوقووهان كزافييه التكنولوجيا الحيوية المحدودةG0002
ماصةووهان كزافييه التكنولوجيا الحيوية المحدودة
مجهر مضان إيجابينيكون ، الياباننيكون كسوف C1
أرنب مضاد SOX10 / AF488 الأجسام المضادة المترافقةبكين Bioss التكنولوجيا الحيوية المحدودةBS-20563R-AF488
RSC96 خلايا شوانووهان كزافييه التكنولوجيا الحيوية المحدودةSTCC30007G-1
ماسح ضوئي3DHISTECHPannoramic MIDI
كابل خاص لأنظمة الميكروويف nsPEFTimesM17 / 78-RG217
خلاط توربينيووهان كزافييه للتكنولوجيا الحيوية المحدودةMV-100
إزالة

المراجع

  1. Jing, W., et al. Study of electrical stimulation with different electric-field intensities in the regulation of the differentiation of PC12 cells. ACS Chem Neurosci. 10 (1), 348-357 (2018).
  2. Nocera, G., Jacob, C. Mechanisms of Schwann cell plasticity involved in peripheral nerve repair after injury. Cell Mol Life Sci. 77, 3977-3989 (2020).
  3. Aguilar, Z. Nanomaterials for Medical Applications. , Newnes. (2012).
  4. Xie, S., et al. Efficient generation of functional Schwann cells from adipose-derived stem cells in defined conditions. Cell Cycle. 16 (9), 841-851 (2017).
  5. Rosenbalm, T. N., Levi, N. H., Morykwas, M. J., Wagner, W. D. Electrical stimulation via repeated biphasic conducting materials for peripheral nerve regeneration. J Mater Sci Mater Med. 34 (11), 1-18 (2023).
  6. Daly, W. T., et al. Comparison and characterization of multiple biomaterial conduits for peripheral nerve repair. Biomaterials. 34 (34), 8630-8639 (2013).
  7. Lee, B. -K., et al. End-to-side neurorrhaphy using an electrospun PCL/collagen nerve conduit for complex peripheral motor nerve regeneration. Biomaterials. 33 (35), 9027-9036 (2012).
  8. Kim, V., Gudvangen, E., Kondratiev, O., Redondo, L., Xiao, S., Pakhomov, A. G. Peculiarities of neurostimulation by intense nanosecond pulsed electric fields: how to avoid firing in peripheral nerve fibers. Int J Mol Sci. 22 (13), 7051(2021).
  9. Assinck, P., Duncan, G. J., Hilton, B. J., Plemel, J. R., Tetzlaff, W. Cell transplantation therapy for spinal cord injury. Nat Neurosci. 20 (5), 637-647 (2017).
  10. Chen, Y. Y., McDonald, D., Cheng, C., Magnowski, B., Durand, J., Zochodne, D. W. Axon and Schwann cell partnership during nerve regrowth. J Neuropathol Exp Neurol. 64 (7), 613-622 (2005).
  11. Yi, S., et al. Tau modulates Schwann cell proliferation, migration and differentiation following peripheral nerve injury. J Cell Sci. 132 (6), (2019).
  12. Min, Q., Parkinson, D. B., Dun, X. Migrating Schwann cells direct axon regeneration within the peripheral nerve bridge. Glia. 69 (2), 235-254 (2021).
  13. Zhang, Y., Zhao, Q., Chen, Q., Xu, L., Yi, S. Transcriptional control of peripheral nerve regeneration. Mol Neurobiol. 60 (1), 329-341 (2023).
  14. Nishi, M., Kawata, M., Azmitia, E. C. Trophic interactions between brain-derived neurotrophic factor and S100β on cultured serotonergic neurons. Brain Res. 868 (1), 113-118 (2000).
  15. Gu, Y., et al. miR-sc8 inhibits Schwann cell proliferation and migration by targeting EGFR. PLoS One. 10 (12), e0145185(2015).
  16. Dong, H. -L., et al. AMPK regulates mitochondrial oxidative stress in C2C12 myotubes induced by electrical stimulations of different intensities. Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 38 (6), 742-747 (2018).
  17. Beebe, S. J., Blackmore, P. F., White, J., Joshi, R. P., Schoenbach, K. H. Nanosecond pulsed electric fields modulate cell function through intracellular signal transduction mechanisms. Physiol Meas. 25 (4), 1077(2004).
  18. Haberkorn, I., Siegenthaler, L., Buchmann, L., Neutsch, L., Mathys, A. Enhancing single-cell bioconversion efficiency by harnessing nanosecond pulsed electric field processing. Biotechnol Adv. 53, 107780(2021).
  19. Ruiz-Fernández, A. R., Campos, L., Gutierrez-Maldonado, S. E., Núñez, G., Villanelo, F., Perez-Acle, T. Nanosecond pulsed electric field (nsPEF): Opening the biotechnological Pandora's box. Int J Mol Sci. 23 (11), 6158(2022).
  20. Nuccitelli, R., et al. First-in-human trial of nanoelectroablation therapy for basal cell carcinoma: proof of method. Exp Dermatol. 23 (2), 135-137 (2014).
  21. Nuccitelli, R., et al. Non-thermal nanoelectroablation of UV-induced murine melanomas stimulates an immune response. Pigment Cell Melanoma Res. 25 (5), 618-629 (2012).
  22. Carr, L., et al. A nanosecond pulsed electric field (nsPEF) can affect membrane permeabilization and cellular viability in a 3D spheroids tumor model. Bioelectrochemistry. 141, 107839(2021).
  23. Hornef, J., Edelblute, C. M., Schoenbach, K. H., Heller, R., Guo, S., Jiang, C. Thermal analysis of infrared irradiation-assisted nanosecond-pulsed tumor ablation. Sci Rep. 10 (1), 5122(2020).
  24. Zuo, K. J., Gordon, T., Chan, K. M., Borschel, G. H. Electrical stimulation to enhance peripheral nerve regeneration: Update in molecular investigations and clinical translation. Exp Neurol. 332, 113397(2020).
  25. Juckett, L., Saffari, T. M., Ormseth, B., Senger, J. -L., Moore, A. M. The effect of electrical stimulation on nerve regeneration following peripheral nerve injury. Biomolecules. 12 (12), 1856(2022).
  26. Jessen, K. R., Mirsky, R. Negative regulation of myelination: relevance for development, injury, and demyelinating disease. Glia. 56 (14), 1552-1565 (2008).
  27. Chen, Z. -L., Yu, W. -M., Strickland, S. Peripheral regeneration. Annu Rev Neurosci. 30, 209-233 (2007).
  28. Yin, D., et al. Cutaneous papilloma and squamous cell carcinoma therapy utilizing nanosecond pulsed electric fields (nsPEF). PloS One. 7 (8), e43891(2012).
  29. Qi, F., et al. Photoexcited wireless electrical stimulation elevates nerve cell growth. Colloids Surf B Biointerfaces. 220, 112890(2022).
  30. Mi, Y., Liu, Q., Li, P., Xu, J., Yang, Q., Tang, J. Targeted gold nanorods combined with low-intensity nsPEFs enhance antimelanoma efficacy in vitro. Nanotechnology. 31 (35), 355102(2020).
  31. Ho, T. -C., et al. Hydrogels: Properties and applications in biomedicine. Molecules. 27 (9), 2902(2022).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

خلايا RSC96تكاثر الخلاياهجرة الخلايامقايسة CCK-8مقايسة الخدشتعبير S100-Betaتعبير Sox10
تنظيم نمو خلايا شوان بواسطة المجال الكهربائي النبضي نانو ثانية لتجديد الأعصاب الطرفية في المختبر
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.