Method Article

الكشف القائم على تفاعل البلمرة المتسلسل في الوقت الحقيقي والقياس الكمي للحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B

DOI:

10.3791/66249

⸱

December 15th, 2023

 ,  ,  ,  ,  , 
13B BlackBio Biotech India Limited

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعد الكشف عن الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B (HBV) القائم على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وتحديده الكمي في الوقت الفعلي طريقة حساسة ودقيقة لتشخيص عدوى فيروس التهاب الكبد B ورصدها. هنا ، نقدم بروتوكولا للكشف عن الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B وقياس الحمل الفيروسي للعينة.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

فيروس التهاب الكبد B (HBV) هو سبب مهم لأمراض الكبد في جميع أنحاء العالم. يمكن أن يؤدي إلى التهابات حادة أو مزمنة ، مما يجعل الأفراد عرضة للإصابة بتليف الكبد القاتل وسرطان الكبد. يعد الكشف الدقيق عن الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B في الدم وقياسه أمرا ضروريا لتشخيص ومراقبة عدوى فيروس التهاب الكبد الوبائي. الطريقة الأكثر شيوعا للكشف عن الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B هي تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي ، والذي يمكن استخدامه للكشف عن الفيروس وتقييم الحمل الفيروسي لمراقبة الاستجابة للعلاج المضاد للفيروسات. هنا ، نصف بروتوكولا مفصلا للكشف عن الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B وقياسه في المصل البشري أو البلازما باستخدام مجموعة تستند إلى تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي تحمل علامة IVD. تستخدم المجموعة البادئات والمجسات التي تستهدف المنطقة الأساسية المحفوظة للغاية لجينوم HBV ويمكنها تحديد جميع الأنماط الجينية HBV بدقة (A ، B ، C ، D ، E ، F ، G ، H ، I ، و J). تتضمن المجموعة أيضا تحكما داخليا داخليا لمراقبة تثبيط تفاعل البوليميراز المتسلسل المحتمل. يعمل هذا الفحص لمدة 40 دورة ، وقطعه هو 38 قيراطا. لتحديد كمية الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B في العينات السريرية ، يتم توفير مجموعة من 5 معايير قياس كمي مع المجموعة. تحتوي المعايير على تركيزات معروفة من الحمض النووي الخاص بفيروس التهاب الكبد B والتي تمت معايرتها وفقا لمعيارمنظمة الصحة العالمية الدولي الرابع للحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B لاختبار الحمض النووي (رمز NIBSC 10/266). تستخدم المعايير للتحقق من صحة وظائف تضخيم الحمض النووي الخاص بفيروس التهاب الكبد B ولإنشاء منحنى قياسي ، مما يسمح بالقياس الكمي للحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B في العينة. تم الكشف عن الحمض النووي HBV منخفض يصل إلى 2.5 وحدة دولية / مل باستخدام مجموعة PCR. إن الحساسية العالية وقابلية التكرار للمجموعة تجعلها أداة قوية في المختبرات السريرية ، مما يساعد المتخصصين في الرعاية الصحية في تشخيص عدوى فيروس التهاب الكبد B وإدارتها بشكل فعال.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

فيروس التهاب الكبد B (HBV) هو فيروس DNA مزدوج تقطعت به السبل جزئيا من جنس Orthohepadnavirus وعائلة Hepadnaviridae 1. يمكن أن يؤدي إلى عدوى مزمنة تستمر طوال حياة المرء ، مما قد يؤدي إلى تليف الكبد وسرطان الخلايا الكبدية2،3،4. وفقا لمنظمة الصحة العالمية (WHO) ، كان ما يقدر بنحو 296 مليون شخص يعيشون مع عدوى التهاب الكبد B المزمن في عام 2019 ، وأصيب 1.5 مليون شخص حديثا كلعام 5.

يعد تحديد وقياس الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B في عينات المصل أو البلازما بمثابة طريقة قيمة للكشف عن الأفراد المصابين بعدوى التهاب الكبد B المستمرة ، وتقييم فعالية العلاج المضاد للفيروسات ، والتنبؤ باحتمال نجاح العلاج6،7،8،9،10،11. يرتبط الحمل الفيروسي المرتفع بزيادة خطر الإصابة بأمراض الكبد ، بما في ذلك تليف الكبد وسرطان الكبد12,13. وبالتالي ، فإن القياس الدقيق للحمل الفيروسي أمر بالغ الأهمية لتتبع تطور عدوى فيروس التهاب الكبد B وإبلاغ القرارات المتعلقة بالعلاج.

تتميز فحوصات تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمية في الوقت الفعلي بحساسية أعلى ونطاق ديناميكي أوسع وتقدير كمي أكثر دقة للحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B مقارنة بتقنيات تفاعل البوليميراز المتسلسل التقليدية14،15،16،17. تتوفر في السوق العديد من مجموعات التشخيص الجزيئي التجارية القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي لتحديد كمية الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B في عينات المصل أو البلازما. هنا ، نصف سير عمل مفصل للكشف عن الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B وقياسه في المصل البشري أو البلازما باستخدام مجموعة PCR في الوقت الفعلي المتاحة تجاريا والتي تحمل علامة IVD. المجموعة عبارة عناختبار 18,19 مستخدم على نطاق واسع ، منخفض التكلفة ، ولكنه حساس للغاية ، وخصائص أدائه قابلة للمقارنة مع مجموعة (مجموعات) أخرى تحمل علامة CE المتاحة تجاريا 18. بصرف النظر عن تضخيم المنطقة المستهدفة لفيروس التهاب الكبد B ، يتم أيضا تضمين جين تحكم داخلي داخلي في المجموعة للتحقق من جودة العينات وجودة الحمض النووي المستخرج وتضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل وتثبيط تفاعل البوليميراز المتسلسل المحتمل.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لم تشمل هذه الدراسة أي مشاركين بشريين أو عينات سريرية. كانت المادة البيولوجية الوحيدة المستخدمة هي المعيار الدولي الرابعلمنظمة الصحة العالمية للحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B لاختبار الحمض النووي (رمز NIBSC 10/266). هذا المعيار هو مادة مرجعية متاحة للجمهور لا تحتوي على أي معلومات شخصية أو بيانات يمكن التعرف عليها. على هذا النحو ، لم تكن هناك حاجة إلى موافقة أخلاقية لهذه الدراسة.

1. استخراج الحمض النووي

  1. استخراج الحمض النووي الفيروسي من المصل البشري أو عينة البلازما. قم بتخزين الحمض النووي المستخرج في -20 درجة مئوية حتى استخدامه مرة أخرى في تفاعل البوليميراز المتسلسل.
    ملاحظة: الحجم الموصى به من المصل أو البلازما لاستخراج الحمض النووي هو 500 ميكرولتر ، وحجم الشطف هو 50 ميكرولتر. في هذه الدراسة ، تم استخراج الحمض النووي الفيروسي باستخدام مجموعة استخراج الحمض النووي الفيروسي (جدول المواد).

2. PCR في الوقت الحقيقي

  1. قم بإذابة جميع الكواشف (الجدول 1) لمجموعة تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي في درجة حرارة الغرفة (RT ؛ 15-25 درجة مئوية) قبل بدء تفاعل البوليميراز المتسلسل. عند إذابة الجليد ، امزج المكونات عن طريق دوامة النبض لمدة 10 ثوان بسرعة معتدلة وأجهزة الطرد المركزي عند 8000 × جم لمدة 15 ثانية في RT. احتفظ بجميع المكونات المذابة على كتلة تبريد.
  2. إعداد رد الفعل
    1. تحضير مزيج PCR وفقا للجدول 2. احسب حجم الكواشف المراد إضافتها بناء على عدد العينات والمعايير وعدم وجود عنصر تحكم في القالب.
      ملاحظة: عند تحضير مزيج تفاعل البوليميراز المتسلسل ، يجب إضافة حجم إضافي بنسبة 10٪ على الأقل من كل كاشف (على سبيل المثال ، إذا كانت هناك حاجة إلى 10 تفاعلات ، فاحسب 11 تفاعلا).
    2. ماصة 15 ميكرولتر من مزيج PCR المحضر أعلاه في كل أنبوب PCR. ثم أضف 15 ميكرولتر من عينة الحمض النووي المستخرجة. أضف 15 ميكرولتر من واحد على الأقل من معايير HBV (معيار HBV 1-5) كعنصر تحكم إيجابي (PC) للكشف عن الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B و 15 ميكرولتر من الماء الخالي من النيوكلياز من درجة تفاعل البوليميراز المتسلسل كعنصر تحكم سلبي (NC). لإنشاء منحنى قياسي مطلوب لتحديد كمية الحمض النووي ل HBV ، استخدم جميع معايير القياس الكمي الخمسة المرفقة مع المجموعة (معيار HBV 1-5) لكل تشغيل PCR.
    3. أغلق الأنابيب ، وامزج المكونات عن طريق دوامة النبض لمدة 10 ثوان بسرعة معتدلة ، وأجهزة الطرد المركزي عند 8000 × جم لمدة 15 ثانية في RT قبل الانتقال إلى الدورة الحرارية. تأكد من عدم وجود فقاعات في مزيج التفاعل ، لأنها قد تتداخل مع اكتشاف التألق.
  3. إعداد البرنامج
    1. قم ببرمجة جهاز التدوير الحراري باستخدام ظروف الدورة كما هو موصى به في الجدول 3.
  4. اختيار القناة / الفلوروفور
    1. حدد الأصباغ الفلورية لمنصات تفاعل البوليميراز المتسلسل شائعة الاستخدام في الوقت الفعلي ، كما هو مذكور في الجدول 4.
  5. تحليل البيانات
    1. بعد اكتمال التشغيل ، قم بتحليل مخطط التضخيم على مقياس خطي.
    2. إعداد العتبة
      1. اضبط العتبة داخل المرحلة الأسية لتفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل. وترد في الجدول 5 قيم العتبة الموصى بها للمجموعة. كن متسقا مع إعداد العتبة. بمجرد تحديد العتبة المثلى للفحص ، استخدمها باستمرار لجميع العينات لجهاز PCR معين. سيساعد ذلك على ضمان دقة النتائج وتكرارها.
        ملاحظة: إذا تم ضبط العتبة منخفضة جدا ، فقد تكون الإشارة أقل من مستوى الضوضاء ، وستكون قيمة Ct غير موثوقة. إذا تم تعيين العتبة عالية جدا ، فقد تكون الإشارة في مرحلة الهضبة من التفاعل ، حيث لا يكون التضخيم بنفس الكفاءة ، وقد تكون قيمة Ct غير دقيقة.
    3. قطع
      1. قم بتشغيل المجموعة لمدة 40 دورة تضخيم. لا تفكر في أي تضخيم يتجاوز 38 دورة لأي تفسير.
    4. تحليل النتائج النوعية
      1. استخدم المجموعة للكشف النوعي عن الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد الوبائي. استخدم المعيار 2 كجهاز كمبيوتر مع قيم Ct المتوقعة عند 20 ± 2 ل HBV و 24 ± 3 ل IC.
      2. تأكد من عدم وجود عنصر تحكم في القالب (NTC) لا يظهر أي تضخيم لكل من أهداف HBV والتحكم الداخلي (IC). إذا حدث تفاعل تضخيم في تفاعل NTC ، فقد يكون تلوث العينة قد حدث.
      3. نظرا لأن قطع الفحص هو 38 ، ضع في اعتبارك أي تضخيم قبل 38 قيراطا لهدف HBV كعينة إيجابية لفيروس التهاب الكبد الوبائي. عندما تفي جميع الضوابط بالمتطلبات المذكورة أعلاه ، ضع في اعتبارك عينة تتبع التفسيرات المذكورة في الجدول 6.
    5. تحليل النتائج الكمية
      1. استخدم مجموعة من 5 معايير للقياس الكمي للتركيزات المعروفة للحمض النووي النوعي لفيروس التهاب الكبد B والتي تمت معايرتها مقابل المعيار الدولي الرابع لمنظمة الصحة العالمية للحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B لتقنيات تضخيم الحمض النووي (NAT)20 (الجدول 7).
      2. استخدم هذه المعايير لإنشاء منحنى قياسي. استخدم المنحنى القياسي لتحديد الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B لعينة غير معروفة.
        ملاحظة: سيولد برنامج تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي منحنى قياسيا باستخدام قيم Ct التي تم الحصول عليها لأهداف HBV لجميع المعايير ال 5 وتركيزاتها المقابلة بالوحدات الدولية لكل ميكرولتر (IU / μL).
      3. قم بتفسير قيم العينات غير المعروفة فقط إذا كان ميل المعايير يقع بين -3.1 و -3.6 ، وقيمة R2 بين 0.99 و 1.0 ، وكفاءة PCR بين 90٪ -110٪ (0.9-1.1) ، ولا يوجد تضخيم في التحكم السلبي.
      4. سيقوم البرنامج بحساب تركيز كل عينة إيجابية HBV بالوحدات الدولية لكل ميكرولتر (IU / μL). لحساب الحمل الفيروسي (تحويل IU / μL إلى وحدات دولية لكل مليلتر [IU / mL]) ، استخدم المعادلة التالية:
        النتيجة (وحدة دولية / مل) = (النتيجة [وحدة دولية / ميكرولتر] × حجم الشطف [ميكرولتر]) / حجم العينة (مل)
        ملاحظة: تم استخراج المعيار الدوليالرابع لمنظمة الصحة العالمية للحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B ، رمز NIBSC 10/266 ، لتنقية الحمض النووي الفيروسي من بلازما 0.5 مل ، واستخلص الحمض النووي الفيروسي المنقى إلى 50 ميكرولتر من المخزن المؤقت للشطف واستخدم مع مجموعة PCR كعينة مرجعية جنبا إلى جنب مع معايير 5 HBV و NTC. تم حساب الحمل الفيروسي HBV للعينة المرجعية (رمز NIBSC 10/266) على أنه (6659 وحدة دولية / ميكرولتر × 50 ميكرولتر) / 0.5 مل = 6,65,900 وحدة دولية / مل.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يظهر الشكل 1 رسم تخطيطي لسير العمل للكشف عن الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B وقياسه من البلازما / المصل البشري. يظهر مخطط تضخيم للمعيار 2 (المستخدم كجهاز كمبيوتر) و NTC لكل من HBV و IC في الشكل 2. يوضح الشكل 3 منحنيات التضخيم لعينة إيجابية لفيروس التهاب الكبد B ، وعينة سلبية من HBV ، وعينة مع تثبيط تفاعل البوليميراز المتسلسل. يوضح الشكل 4 منحنى التضخيم وقيمة Ct ل HBV وتركيز HBV الذي تم الحصول عليه بال...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تعيين رمز NIBSC 10/266 لوحدة 9،55،000 وحدة دولية / مل عند إعادة تكوينها في 0.5 مل من الماء الخالي من النيوكلياز وفقا لمعلومات المورد21. يمكن اعتبار هذا عينة إيجابية عالية الحمل HBV. كان الحمل الفيروسي HBV الذي حددته مجموعة الحمل الفيروسي المستخدمة في هذه الدراسة 6،65،900 وحدة دولية / مل (الشكل 4). نظرا لأن كفاءة استخراج الحمض النووي لأي مجموعة استخراج الحمض النووي ليست 100٪ ، فغالبا ما يتم فقد بعض الحمض النووي أثناء عملية التنقية. على الرغم من أن الحمل الفيروسي الذ...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يرتبط المؤلفون بشركة Kilpest India Limited ، الشركة المصنعة لمجموعة الحمل الفيروسي HBV المستخدمة في هذه الدراسة.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نحن نعرب عن تقديرنا لبرافين وكوسوم وشاندان وإيشا وراشمي وبابلي وشيفاني وأنكيتا وشيخة لمساعدتهم الفنية.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
4th المعيار الدولي لمنظمة الصحة العالمية لفيروس التهاب الكبد B رمز الحمض النوويNIBSC: 10/266يقصد بالمعيار الدولي الرابع لمنظمة الصحة العالمية بشأن الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B (HBV) ، رمز NIBSC 10/266 ، استخدامه لمعايرة الكواشف المرجعية الثانوية المستخدمة في تقنيات تضخيم الحمض النووي HBV (NAT).
ABI في الوقت الحقيقي أجهزة PCR ثيرموفيشر العلميABI 7500 ؛ QuantStudio 5هذا هو جهاز PCR في الوقت الحقيقي  
HBV و HCV و HIV Multiplex 14/198NIBSCرمز NIBSC: 14/198هذا كاشف ثلاثي موجبة منخفض جدا لمقايسات NAT التي تحتوي على التهاب الكبد B (HBV) والتهاب الكبد C (HCV) وفيروس نقص المناعة البشرية -1 (HIV-1)
QIAGEN آلة PCR في الوقت الحقيقيQiagenRotor-Gene Qهذه آلة PCR في الوقت الفعلي  
طقم الحمل الفيروسي TRUPCR HBV Kilpest India Limited3B294هذه مجموعة قائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي تستخدم في هذه الدراسة للكشف عن الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد B وتحديد الحمل الفيروسي
TRUPCR مجموعة استخراج الحمض النووي الفيروسيKilpest India Limited3B214هذه مجموعة استخراج الحمض النووي المستخدمة لاستخراج الحمض النووي الفيروسي HBV من NIBSC: 10/266 و NIBSC: 14/198

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ryu, W. -S. Molecular Virology of Human Pathogenic Viruses. , Elsevier, Academic Press. (2016).
  2. Lin, X., et al. Chronic hepatitis b virus infection in the Asia-Pacific region and Africa: Review of disease progression. Journal of Gastroenterology and Hepatology. 20 (6), 833-843 (2005).
  3. Iloeje, U. H., et al. Predicting cirrhosis risk based on the level of circulating Hepatitis B viral load. Gastroenterology. 130 (3), 678-686 (2006).
  4. Huang, Y. -T., et al. Lifetime risk and sex difference of hepatocellular carcinoma among patients with chronic Hepatitis B and C. Journal of Clinical Oncology. 29 (27), 3643(2011).
  5. World Health Organization. World Health Organization fact sheet. , https://www.who.int/news-room/fact-sheets (2023).
  6. Watanabe, M., Toyoda, H., Kawabata, T. Rapid quantification assay of hepatitis b virus DNA in human serum and plasma by fully automated genetic analyzer mutaswako g1. PLoS One. 18 (2), e0278143(2023).
  7. Chan, H. L. -Y., et al. Viral genotype and Hepatitis B virus DNA levels are correlated with histological liver damage in HBeAg-negative chronic Hepatitis B virus infection. The American Journal of Gastroenterology. 97 (2), 406-412 (2002).
  8. Liu, C. J., et al. Viral factors correlate with Hepatitis B e antigen seroconverson in patients with chronic Hepatitis B. Liver International. 26 (8), 949-955 (2006).
  9. Liu, C. -J., et al. Role of Hepatitis B viral load and basal core promoter mutation in hepatocellular carcinoma in Hepatitis B carriers. The Journal of Infectious Diseases. 193 (9), 1258-1265 (2006).
  10. Yeo, W., et al. Hepatitis B viral load predicts survival of HCC patients undergoing systemic chemotherapy. Hepatology. 45 (6), 1382-1389 (2007).
  11. Yim, H. J., et al. Levels of Hepatitis B virus (HBV) replication during the nonreplicative phase: HBV quantification by real-time PCR in korea. Digestive Diseases and Sciences. 52, 2403-2409 (2007).
  12. Noh, R., et al. Clinical impact of viral load on the development of hepatocellular carcinoma and liver-related mortality in patients with hepatitis c virus infection. Gastroenterology Research and Practice. 2016, 7476231(2016).
  13. Mendy, M., et al. Hepatitis B viral load and risk for liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma in the Gambia, West Africa. Journal of Viral Hepatitis. 17 (2), 115-122 (2010).
  14. Abe, A., et al. Quantitation of Hepatitis B virus genomic DNA by real-time detection PCR. Journal of Clinical Microbiology. 37 (9), 2899-2903 (1999).
  15. Pas, S. D., Fries, E., De Man, R. A., Osterhaus, A. D., Niesters, H. G. Development of a quantitative real-time detection assay for Hepatitis B virus DNA and comparison with two commercial assays. Journal of Clinical Microbiology. 38 (8), 2897-2901 (2000).
  16. Ronsin, C., Pillet, A., Bali, C., Denoyel, G. R. -A. Evaluation of the cobas ampliprep-total nucleic acid isolation-cobas Taqman Hepatitis B Virus (HBV) quantitative test and comparison to the versant HBV DNA 3.0 assay. Journal of Clinical Microbiology. 44 (4), 1390-1399 (2006).
  17. Sum, S. S. M., Wong, D. K. H., Yuen, J. C. H., Lai, C. L., Yuen, M. F. Comparison of the cobas taqman™ HBV test with the cobas amplicor monitor™ test for measurement of Hepatitis B virus DNA in serum. Journal of Medical Virology. 77 (4), 486-490 (2005).
  18. Lall, S., Choudhary, M. C., Mahajan, S., Kumar, G., Gupta, E. Performance evaluation of TRUPCR® HBV real-time PCR assay for Hepatitis B virus DNA quantification in clinical samples: Report from a tertiary care liver centre. Virusdisease. 30 (2), 186-192 (2019).
  19. Garg, G., et al. Presence of entry receptors and viral markers suggest a low level of placental replication of Hepatitis B virus in a proportion of pregnant women infected with chronic Hepatitis B. Scientific Reports. 12 (1), 17795(2022).
  20. NIBSC-Code:10/266. Standard for Hepatitis B Virus (Hbv) DNA for Nucleic Acid Amplification Techniques (NAT). , 4th ed, National Institute for Biological Standards and Control (NIBSC). Potters Bar, UK. NIBSC Code: 10/266 (2016).
  21. Kim, H., Hur, M., Bae, E., Lee, K. A., Lee, W. I. Performance evaluation of cobas HBV real-time PCR assay on Roche cobas 4800 system in comparison with cobas Ampliprep/cobas Taqman HBV test. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. 56 (7), 1133-1139 (2018).
  22. Madihi, S., Syed, H., Lazar, F., Zyad, A., Benani, A. Performance comparison of the artus HBV QS-RGQ and the CAP/CTM HBV v2.0 assays regarding HEPATITIS B virus DNA quantification. BioMed Research International. 2020, 4159189(2020).
  23. Nibsc-14/198. , National Institute for Biological Standards and Control (NIBSC). At: HBV, HCV and HIV multiplex 14/198 https://www.nibsc.org/ (2023).
  24. Guvenir, M., Arikan, A. Hepatitis B virus: From diagnosis to treatment. Polish Journal of Microbiology. 69 (4), 391-399 (2020).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Hepatitis B VirusHBV DNAReal Time PCRViral Load QuantificationPCR KitDNA DetectionClinical SamplesStandard CurvePCR EfficiencySerological Tests

Related Articles