يصف هذا البروتوكول نموذجا قابلا للتكرار متعدد الأعماق لجرح الحروق في خنازير يوكاتان الصغيرة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
يصف هذا البروتوكول نموذجا قابلا للتكرار متعدد الأعماق لجرح الحروق في خنازير يوكاتان الصغيرة.
التئام الجروح الحروقية عملية معقدة وطويلة. على الرغم من الخبرة الواسعة ، لا يزال جراحو التجميل والفرق المتخصصة في مراكز الحروق يواجهون تحديات كبيرة. من بين هذه التحديات ، يمكن أن يتطور مدى الأنسجة الرخوة المحروقة في المرحلة المبكرة ، مما يخلق توازنا دقيقا بين العلاجات المحافظة وإزالة الأنسجة الناخرة. الحروق الحرارية هي النوع الأكثر شيوعا ، ويختلف عمق الحرق اعتمادا على معايير متعددة ، مثل درجة الحرارة ووقت التعرض. يختلف عمق الحرق أيضا بمرور الوقت ، ويظل التفاقم الثانوي ل "منطقة الظل" ظاهرة غير مفهومة جيدا. استجابة لهذه التحديات ، تمت دراسة العديد من العلاجات المبتكرة ، والمزيد في مرحلة التطوير المبكرة. الجسيمات النانوية في ضمادات الجروح الحديثة والجلد الاصطناعي هي أمثلة على هذه العلاجات الحديثة التي لا تزال قيد التقييم. مجتمعة ، يحتاج كل من تشخيص الحروق وعلاجات الحروق إلى تطورات كبيرة ، وتحتاج فرق البحث إلى نموذج موثوق وملائم لاختبار أدوات وعلاجات جديدة. من بين النماذج الحيوانية ، تعتبر الخنازير هي الأكثر صلة بسبب أوجه التشابه القوية في بنية الجلد مع البشر. وبشكل أكثر تحديدا ، تظهر خنازير يوكاتان الصغيرة ميزات مثيرة للاهتمام مثل تصبغ الميلانين والنمو البطيء ، مما يسمح بدراسة الأنماط الضوئية العالية والشفاء على المدى الطويل. تهدف هذه المقالة إلى وصف بروتوكول موثوق به وقابل للتكرار لدراسة جروح الحروق متعددة العمق في خنازير يوكاتان الصغيرة ، مما يتيح المتابعة طويلة الأمد وتقديم نموذج ذي صلة للتشخيص والدراسات العلاجية.
تعتبر الحروق مشكلة صحية عامة رئيسية وتؤثر على أكثر من 480,000 مريض في الولايات المتحدة كل عام ، وفقا لمستودع الحروقالوطني 1,2. يؤدي هذا إلى أكثر من 50,000 حالة دخول إلى المستشفى سنويا للحالات المعقدة غير المميتة التي تتطلب رعايةمتعمقة 2. علاوة على ذلك ، تعتبر الحروق سببا أساسيا لوفاة العسكريين والمراضة وهي مسؤولة عن 10٪ إلى 30٪ من الخسائر العسكرية3،4. ظلت إدارة الحروق دون تغيير تقريبا لفترة طويلة ، على الرغم من آثارها الهائلة والمتنوعة على المرضى ، والتي تتراوح من الجسدية إلى النفسية والعاطفية5.
يؤدي التشخيص والتقييم الأولي لإصابات الحروق إلى تصنيف أساسي وفقا لنوع الحروق (الأول والثاني والثالث) أو عمق الأنسجة المصابة (سطحية ، سماكة جزئية ، وحروق عميقة)6،7،8. تشمل الحروق ذات السماكة الجزئية (الدرجة الأولى والثانية) البشرة وأعماق مختلفة من الأدمة (الأدمة السطحية أو العميقة ، أي الحروق السطحية والعميقة من الدرجة الثانية)9. على وجه الخصوص ، يستبعد تلف الزوائد في الأدمة العميقة إمكانية إعادة الظهارة من الظهارةالظهارية 10. بحكم التعريف ، تصل الحروق كاملة السماكة إلى الدهون تحت الجلد ، واللفافة و / أو العضلات الأساسية (حروق من الدرجة الثالثة) ، وأحيانا العظام (يشار إليها أيضا باسم حروق الدرجة الرابعة)11،12.
بعد دخول المستشفى ، يتلقى مرضى الحروق رعاية خاصة تتضمن استراتيجية تتكون من توازن دقيق بين تنضير الأنسجة والحفاظ عليها. يجب إزالة الأنسجة الرخوة التالفة و / أو المصابة بشكل ثانوي تدريجيا حتى يتم الكشف عن الأنسجة السليمة ، مما يسمح باستخدام ضمادات محددة وترقيع جلدي لتحسين عملية الشفاء13،14،15،16. ومع ذلك ، يجب توخي الحذر أثناء الجراحة لتجنب الإزالة غير المقصودة للأنسجة الشافية وتقليل المضاعفات من أجل الشفاء الأمثل. من الناحية البيولوجية ، تظهر الحروق منطقة نخرية مركزية محاطة بمنطقة "ظل" أو "ركود" ، مما يشير إلى نقص التروية الذي يحتمل أن يكون عكاسا. يمكن أن تتدهور هذه المنطقة ، مما يؤدي إلى منطقة نخر ممتدة ، أو تلتئم عن طريق عكس عملية موت الخلايا المبرمج17،18. تمثل هذه الشدة المتفاوتة للحروق تحديات للجراحين لتقييمها بدقة ، مما يعقد التوازن بين العلاجات التحفظية والاستئصال الجراحي19. حتى الآن ، لا توجد أداة فعالة متاحة للمساعدة في توصيف "منطقة الظل" السابقة لتحويل النسخ. يعد تطوير مثل هذه الأدوات أمرا بالغ الأهمية لتحسين هذا التوازن الدقيق.
تم اختبار العديد من العلاجات للمساعدة في تقليل تحويل الحروق الثانوية. ومع ذلك ، لا يوجد علاج محدد متاح حاليا في العيادة18. تشمل الأمثلة الأخرى على التقدم في علاجات الحروق تطوير ضمادات الجروح الحديثة والمواد النانوية20،21 ، والجلد المصمم بالأنسجة22،23 ، ومناهج زراعة البشرة الجديدة24،25. أيضا ، حسنت الجراحة الترميمية الحديثة واللوحات اللفافية الجلدية إدارة الآثار اللاحقة طويلة المدى ، وخاصة تقلصات الحروق بعد الشفاء المرضي لمناطق الطيات26،27. تعطي هذه التطورات آفاقا واعدة لمرضى الحروق ، وتحسين استراتيجيات العلاج ونوعية الحياة ، لكن النتائج الأخيرة تظهر أن التأثير الوظيفي لا يزال كبيرا ، سواء في المجالين الجسدي أو النفسي28. مجتمعة ، فإن الطلب على التطورات المبتكرة في كل من تشخيص الحروق وعلاج الحروق كبير.
بشكل عام ، تهدف العديد من الأساليب إلى تحسين تشخيص وإدارة وعلاج حالات الحروق المعقدة ، ويحتاج الباحثون إلى نموذج قابل للتكرار وذي صلة لاختبار هذه الأساليب الجديدة. نظرا لتعقيده البيولوجي ، الذي يتضمن العديد من الأعضاء والتفاعلات الجهازية ، لم يثبت أي نموذج في المختبر أنه مناسب لدراسة عملية جرح الحروق29. أظهرت نماذج القوارض تناقضات كبيرة مع البشر بسبب الاختلافات الرئيسية في علم الأحياء وبنية الجلد والمرونة وعدم الالتزام بالهياكل الأساسية29. في المقابل ، أثبت نموذج الخنازير أنه مناسب بسبب التشابه الهيكلي لجلد الخنازير مع جلد الإنسان30،31،32. إنه يقدم مع نفس الأوعية الدموية ، وتكوين الألياف المرنة ، وتوقيت التجديد. علاوة على ذلك ، تسمح بصيلات الشعر وملحق الشعراء بإعادة الظهارة الجزرية ، كما يمكن ملاحظته في الحروق السطحية السريرية33،34. وبشكل أكثر تحديدا ، توفر نماذج Yucatan minipig ميزات مثيرة للاهتمام ، مما يجعلها ذات صلة بدراسة الجلد المصطبغ35 والنتائج طويلة المدى مع الحد الأدنى من التغييرات الجسدية36.
الغرض من هذه المقالة هو وصف نموذج حرق موثوق به متعدد الدرجات في خنازير يوكاتان ، مما يتيح دراسة العديد من حروق الدرجة الثانية والثالثة حول نفس الموضوع. يوفر هذا نموذجا ذا صلة وقابلا للتكرار لدراسة الابتكارات التشخيصية والعلاجية لإدارة الحروق. علاوة على ذلك ، يتميز هذا النموذج بأنواع مختلفة من الحروق وشدة ، ومتابعة طويلة الأمد تسمح بدراسة تقلص الحروق والشفاء المرضي ، والسلوك التفاضلي للجلد المصطبغ ، والذي من المعروف أن له خصائص محددة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم تنفيذ جميع الأعمال الحيوانية وفقا لقائمة مراجعة ARRIVE (أبحاث: الإبلاغ عن التجارب في الجسم الحي)37 وكانت متوافقة مع لجنة رعاية المؤسسي لمستشفى ماساتشوستس العام واستخدامها (IACUC) بموجب البروتوكول #2021N000271. تم توفير رعاية إنسانية للحيوانات ، وفقا لدليل رعاية واستخدام المختبر38. تم استخدام خمس أنثى خنازير يوكاتان صغيرة تزن 30 كجم في هذه التجارب. تم الحصول على من مصدر تجاري (انظر جدول المواد).
1. رعاية ما قبل الجراحة والتخدير
2. تصميم جرح الحروق والتوزيع العشوائي
3. ترسيم الجرح الوشم
ملاحظة: يتكون الإجراء الأول من إنشاء وشم دائري على ظهر الخنزير من أجل تحديد الجروح العشوائية وترقيمها (الشكل 1). يتم إجراء ذلك قبل يومين من إجراء الحرق الأولي للسماح بالتأقلم بشكل أفضل ، ولكن يمكن إجراؤه في يوم إجراء الحرق.
4. إنشاء جرح الحروق وتضميد الجروح المتقدمة
ملاحظة: سيتم إنشاء الحروق عن طريق وضع الكتلة النحاسية على اتصال الجلد على البقعة المخصصة (التوزيع العشوائي) لمدة 30 ثانية (ثابتة). ستحدد درجة الحرارة عمق الاحتراق.
5. شق الحروق كامل السماكة
ملاحظة: بين 1 و 3 أيام بعد الجراحة ، ستتلقى استئصالا جراحيا كامل السماكة للسخار بعد حروق الدرجة الثالثة.
6. متابعة ضمادات الجرح
ملاحظة: يتم إجراء الضمادات اللاحقة كل 2 إلى 7 أيام ، اعتمادا على تصميم العلاج التجريبي وتحمل. يمكن إيقاف ضمادات الجروح بعد 21 يوما للسماح بإعادة الظهارة في بيئة جافة وتحسين تحمل. بدلا من ذلك ، إذا كانت مجموعة العلاج تتطلب بيئة رطبة أو رطبة ، فيمكن إطالة الضمادات حتى نهاية الدراسة. تم تمديد فترة المتابعة لمدة تصل إلى 10 أسابيع من أجل دراسة كل من عمليات الشفاء الحادة والمطولة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يعرض الشكل 2 أ ، ب نتائج الحروق المتعددة على ظهر خنزير يوكاتان الصغير. الجروح (I) و (VII) هي جروح تحكمية (37 درجة مئوية). جروح من الدرجة الثانية (II; III و VIII) مع احمرار شديد وبثور. في المقابل ، جروح من الدرجة الثالثة (IV; V; و VI) شاحبة ومغمورة للجس. وتجدر الإشارة إلى أن الجرح الثامن يبدو متوسطا بين الدرجة الثانية والثالثة: لغرض دراسة مستمرة ، قمنا بزيادة وقت الاتصال إلى 45 ثانية عند 65 درجة. يوضح الشكل 2 ج جانب الجروح بعد بضع الإسكاروجين في ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
التئام الجروح بعد إصابات الحروق هو عملية طويلة يمكن أن تستغرق ما يصل إلى عدة أشهر ، مع خيارات واعتبارات علاجية مختلفة لرعاية المرضى2،13. من أجل دراستها ، هناك حاجة إلى نموذج موثوق به وقابل للتكرار. تم وصف العديد من النماذج الحيوانية ، بما في ذلك القوارض29،45،46 والخنازير29،47. يع...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإعلان عنه.
تم دعم هذا العمل بتمويل سخي من منحة أبحاث الأطفال Shriners إلى S.N.T. Y.B. تم دعمه من قبل مستشفى شرينرز للأطفال. كما نعرب عن امتناننا لتمويل S.N.T. من المعهد الوطني الأمريكي للصحة (K99 / R00 HL1431149; R01HL157803. R01DK134590 ، R24OD034189) ، جمعية القلب الأمريكية (18CDA34110049) ، كلية الطب بجامعة هارفارد إليانور وزمالة مايلز شور ، مؤسسة عائلة بولسكي ، وجائزة كلافلين للباحث المتميز نيابة عن قسم الجراحة في MGH و / أو اللجنة التنفيذية ل MGH للأبحاث. علاوة على ذلك ، نقدر الدعم المقدم من اللجنة التنفيذية للأبحاث في مستشفى ماساتشوستس العام لمنح جائزة صندوق الاكتشاف الطبي (FMD) إلى RJ. أخيرا ، يتم الاعتراف بالدعم المقدم من "Fondation des Gueules Cassées" (فرنسا) وجامعة رين (فرنسا) و CHU de Rennes (فرنسا) والجمعية الفرنسية لجراحة التجميل ل Y.B. يشكر المؤلفون مختبر أبحاث جراحة نايت على مساهمتهم ومساعدتهم في تخدير.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| ملقط الأنسجة Adson | Jarit | 130-234 | |
| حبات الألومنيوم | مختبر درع | 42370-002 | مختبر درع الخرز |
| بوبرينورفين هيدروكلوريد | رانباكسي للمستحضرات الصيدلانية | NDC: 12469-0757-01 | بوبرينكس عن طريق الحقن |
| كاربروفين | فايزر | نادا 141-199 | ريماديل 50 مجم / مل عن طريق الحقن ؛ |
| كتلة نحاسية أسطوانية | مصنوعة يدويا | N / A | رسم هندسي مدرج في المخطوطة |
| قلم Dermographic | McKesson | Surgical Skin Marker معقم | |
| يمكن التخلص منه # 15 مشارط جراحية | Medline | MDS15315 | شفرات مشرط |
| رقعة فنتانيل | Mylan | NDC: 60505-7082 | نظام الفنتانيل عبر |
| Isoflurane | Piramal | NDC: 66794-013-25 | Isoflurane ، USP |
| McPherson ملقط التخثر ثنائي القطب | Bovie | A842 | قابلة لإعادة الاستخدام وقابلة للتعقيم |
| (3،4 و 5 مم) | Integra | 33-38 | لكمات خزعة - حجم للتكيف مع الدراسة |
| غير منسوج | Starryshine | GZNW22 | 2 × 2 "غير منسوج 4 طبقات ضمادات شاش طبي |
| Povidone-Iodine | بيتادين | NDC: 0034-9200-88 | مقشر جراحي 7.5٪ |
| محلول كلوريد الصوديوم معقم متساوي التوتر 0.9٪ | نظام Aqualite | RL-2095 | محلول ملحي معقم |
| حبر الوشم | Spaulding & روجرز | بلاك - 2 أونصة - # 9053 | |
| علامة وشم | Spaulding & روجرز | خاص الوشم الكهربائية علامة | |
| إبرة الوشم | Spaulding & روجرز | 1310251 | الوشم 5 نقاط إبرة |
| Tegaderm خلع الملابس الشفافة 3M | 1.628 | ضمادة لاصقة شفافة كبيرة | |
| صفيحة ساخنة يتم التحكم في درجة حرارتها | كول بارمر | 03407-11 | StableTemp لوحة ساخنة النمام |
| ميزان الحرارة | الأمريكي العلمي | U14295 | أنبوب ميزان الحرارة الزئبق |
| تيلتامين وزولاتيبام هيدروكلوريد | Zoetis | NDC: 54771-9050 | التيلازول |
| من رذاذ البنزوين | سميث & ابن أخ | 407000 | رذاذ طبقة لاصقة |
| مرهم مضاد حيوي ثلاثي | Fougera | NDC 0168-0012-31 | مرهم مضاد حيوي ثلاثي |
| مخزون أنبوبي | Medline | NONNET02 | Curad Medline Medline Free Latex شباك |
| مرنة بطانية تسخين | بطانية 3M | Bair Hugger 750 وحدة | |
| Xeroform انسداد الشاش قطاع | Covidien | 8884433301 | ضمادات الجروح الفازلية |
| Xylazine | Vetone | NDC: 13985-704-10 | AnaSed LA |
| Yucat & agrave ؛ n خنازير صغيرة (أنثى ، 30 كجم) | سنكلير بيو ريسورسز | N / A | تصبغ كامل ؛ |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.