نصف الإجراءات الجراحية التفصيلية للعيوب المركبة العظمية في خياطة الجلسنة في الفئران ، جنبا إلى جنب مع التحقيقات في التكهنات قصيرة وطويلة المدى للنموذج. نهدف إلى بناء نموذج موحد لتطوير العلاجات التجديدية للخياطة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نصف الإجراءات الجراحية التفصيلية للعيوب المركبة العظمية في خياطة الجلسنة في الفئران ، جنبا إلى جنب مع التحقيقات في التكهنات قصيرة وطويلة المدى للنموذج. نهدف إلى بناء نموذج موحد لتطوير العلاجات التجديدية للخياطة.
غالبا ما تتزامن العيوب الجلدية واسعة النطاق مع اضطراب خياطة الجمجمة ، مما يؤدي إلى ضعف في استعادة العيوب الجلدية وتطور الجمجمة (يحدث الأخير في الجمجمة النامية). ومع ذلك ، فإن عدم وجود نموذج موحد يعيق التقدم في التحقيق في العلاجات التجديدية للخياطة ويشكل تحديات لإجراء تحليلات مقارنة عبر دراسات متميزة. لمعالجة هذه المشكلة ، يصف البروتوكول الحالي عملية النمذجة التفصيلية للعيوب المركبة العظمية في خياطة الجلسنة في الفئران.
تم إنشاء النموذج عن طريق حفر ثقوب مستطيلة كاملة السماكة بقياس 4.5 مم × 2 مم عبر الغرز الإكليلية. تم القتل الرحيم للفئران ، وتم حصاد عينات الجمجمة بعد الجراحة في اليوم 0 ، والأسبوع 2 ، والأسبوع 6 ، والأسبوع 12. أكدت نتائج التصوير المقطعي المحوسب من العينات التي تم جمعها مباشرة بعد الجراحة التأسيس الناجح للعيب المركب العظمي للخياطة ، بما في ذلك إزالة الخيط الإكليلي وأنسجة العظام المجاورة.
أظهرت البيانات من الأسبوعين6 و 12بعد الجراحة ميلا طبيعيا للشفاء لإغلاق العيب. أكد التلوين النسيجي صحة هذا الاتجاه من خلال إظهار زيادة الألياف المعدنية والعظام الجديدة في مركز العيب. تشير هذه النتائج إلى اندماج الخيوط التدريجي بمرور الوقت بعد العيوب الجلدية ، مما يؤكد أهمية التدخلات العلاجية لتجديد الخيط. نتوقع أن يسهل هذا البروتوكول تطوير علاجات تجديد الخيوط ، وتقديم رؤى جديدة حول الاستعادة الوظيفية للعيوب الجليسية وتقليل النتائج السلبية المرتبطة بفقدان الخيط.
الغرز القحفية هي وصلات ليفية كثيفة بين عظام الجمجمة ، تعمل كمفاصل لتسهيل حركة الجمجمة الطفيفة وتوفير وسادة واقية للدماغ تحت الضغط1. في السنوات الأخيرة ، سلطت الأبحاث المتزايدة الضوء على الدور المحوري لخيوط الجمجمة في نمو الجمجمة ، والتوازن القحفي الوجهي ، وإمكانات إصلاح العظم المتأصلة2،3،4،5،6،7،8. خلال فترات النمو والتطور ، تعمل الغرز القحفية كمراكز نمو رئيسية في الجمجمة4. يحدث تكوين عظام جديد في الجبهات العظمية على جانبي الغرز ، بينما تحافظ الخلايا الموجودة داخل الغرز على حالة وسيطة غير متمايزة ، مما يضمن تمدد متوازن للجمجمة جنبا إلى جنب مع نمو الدماغ1. يؤدي فقدان خيوط الجمجمة في هذا الوقت إلى تناقض بين نمو الجمجمة والدماغ ، مما يؤدي إلى مشاكل خطيرة مثل إصابات الدماغ ، واستسقاء الرأس ، وزيادة الضغط داخل الجمجمة ، والخلل الوظيفي المعرفي3،9.
إلى جانب ذلك ، تلعب خيوط الجمجمة دورا مهما في تحديد تشخيص العيوب الجلدية5،7،10. يتم توزيع إمكانات التجدد عبر سطح الجلسنة بشكل غير متساو ، حيث تظهر خيوط الجمجمة قدرات فائقة بشكل ملحوظ مقارنة بالمناطق غير الخيطة10،11. تشير إحدى الدراسات إلى أن سرعة التئام العيوب الجليزية ترتبط عكسيا بالمسافة بين خياطة الجمجمة وموقع الإصابة10. على وجه التحديد ، تؤدي إزالة الغرز الإكليلي والسهمي إلى عدم التئام عيوب العظام الجداري7 ، مع التأكيد على ضرورة تجديد الخيط في عيوب الجلالة. ومع ذلك ، فإن تركيز الدراسات الحالية ينصب في الغالب على استعادة البنية العظمية القحفية مع إهمال تجديد اللحمة المتوسطة للخياطة.
فيما يتعلق بالتقدم في تجديد الخيوط ، لوحظت نتائج واعدة مع زرع اللوحات العظمية المحتوية على الخيط والخلايا الجذعية الوسيطة (MSCs) والمواد الحيوية الاصطناعية. عندما تم زرع اللوحات العظمية مع الغرز في عيوب الجلالة ، فقد نجحت في الاندماج والشفاء ، على عكس تلك التي لا تحتوي على خيوط جراحية تظهر عدم الاتحاد وعدم القدرة على تكوين السمحاق أو الأم الجافية أو الخلايا العظمية5. وبالمثل ، فإن زرع الخلايا الجذعية الجذعية المشتقة من نخاع العظام في العيوب المركبة العظمية السهمية سهل تكوين فجوات تشبه الخيط12. وتجدر الإشارة إلى أن دراسة حديثة سلطت الضوء على تحقيق تجديد الخيط باستخدام Gli1 + MSCs ، مما يسمح بالتحكم في الضغط داخل الجمجمة ، وتصحيح تشوه الجمجمة ، وتعزيز الوظيفة العصبيةالمعرفية 13. مع تطور الطب التجديدي والهندسة الطبية الحيوية ، يركز الباحثون بشكل متزايد على المواد الحيوية لهندسة الأنسجة نظرا لخصائصها القابلة للتكيف والقابلةللتخصيص 14. والجدير بالذكر أن أغشية البولي تترافلورو إيثيلين أثبتت فعاليتها في إعادة بناء عظام الجمجمة واللحمة المتوسطة للخياطة في وقت واحد15،16.
ومع ذلك ، تفتقر الأبحاث القحفية الوجهية إلى النماذج الراسخة لاستكشاف العلاجات التجديدية للخياطة ، على عكس النماذج الناضجة نسبيا في إصلاح الأنسجة الأخرى مثل العظام والجلد والغضاريف والعضلات17. يقيد عدم وجود نموذج موحد دراسة العلاجات التجديدية للخياطة ويجعل من الصعب إجراء تحليل مقارن عبر الدراسات المختلفة. لذلك ، أثبتت دراستنا عيبا مركبا عظميا في خياطة الفئران الجلجلية وقابلا للتكرار. من خلال هذه الطريقة ، نهدف إلى تطوير التدخلات السريرية المناسبة لإعادة بناء خياطة الجمجمة ، وتقديم وجهات نظر جديدة حول الإصلاح الوظيفي للعيوب الجلدية وتقليل النتائج غير المواتية الناتجة عن فقدان الخياطة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت مراجعة جميع الإجراءات الحيوانية في هذه الدراسة والموافقة عليها من قبل اللجنة الأخلاقية لكلية غرب الصين لطب الأسنان بجامعة سيتشوان (WCHSIRB-D-2021-597). تم الحصول على ما مجموعه 12 (3 فئران في كل نقطة من النقاط الزمنية الأربع) من فئران Sprague-Dawley (SD) (ذكر ، 300 جرام ، 8 أسابيع) من مصدر تجاري (انظر جدول المواد).
1. التحضير قبل الجراحة
2. العملية الجراحية
3. رعاية ما بعد الجراحة
4. جمع العينات وتحليل البيانات
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في هذه الدراسة ، تم إنشاء عيب مركب خياطة الفئران العظمية عن طريق حفر ثقب مستطيل 4.5 مم × 2 مم عبر الخيط الإكليلي. تم تصوير الرسم التخطيطي الجراحي ومخطط تدفق البحث في الشكل 3. أكدت الصورة ثلاثية الأبعاد وعرض المقطع العرضي لعينات ما بعد الجراحة لمدة 0 يوم ، أي العينات التي تم جمعها مباشرة بعد الجراحة ، الإنشاء الناجح لعيب جليزي كامل السماكة ، بما في ذلك الإزالة الكاملة للخياطة الإكليلية وكذلك الهياكل العظمية المجاورة في كلا الطرفين (الشكل 4 أ). كشفت صور التصوير ال...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تركز نماذج العيوب الجلجية التقليدية ، سواء كانت تنطوي على خيوط الجمجمة أم لا ، بشكل أساسي على إصلاح الأنسجة الصلبة ، وغالبا ما تتجاهل التجديد الحيوي لللحمة المتوسطة للخياطة19،20. في أبحاث تجديد الخيط ، أدت النماذج السابقة ، مثل تلك التي أجراها Mardas et al.15،16 ، باستخدام تريفين بار لإنشاء عيب دائري 5 مم عبر خياطة السهمية للفئران ، إلى فقدان كبير للأنسجة الصلبة ، وبالتال...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإعلان عنه.
تم دعم هذه الدراسة من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين 82100982 (FL) ، 82101000 (HW) ، 82001019 (BY) ، إدارة العلوم والتكنولوجيا في مقاطعة سيتشوان 2022NSFSC0598 (BY) ، 2023NSFSC1499 (HW) وتمويل البحث من مدرسة غرب الصين / مستشفى طب الأسنان بجامعة سيتشوان (RCDWJS2021-5). تم إنشاء الشكل 3 باستخدام Biorender.com.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 4٪ بارافورمالديهايد | Biosharp | BL539A | |
| 2٪ محلول اليودوفور | تشنغدو جينشان الكاشف الكيميائي المحدودة | لا شيء | |
| 75 ٪ الإيثانول | تشنغدو جينشان الكاشف الكيميائي المحدودة | لا شيء | |
| كرات القطن | Haishi Hainuo Group Co., Ltd. | لا شيء | |
| مسحات القطن | Lakong Medical Devices Co., | لا شيء | |
| ملقط منحني | تشنغدو شيفنغ المحدودة | لا يوجد | |
| برنامج Dataviewer و Ctan لتقييمات حجم العيوب المتبقية | Bruker | None | |
| Dental منخفض السرعة دائري | Dreybird Medical Equipment Co.، Ltd. | RA3-012 RA1-008 | |
| مشرط معقم يمكن التخلص منه | هانغتشو هواوي للمستلزمات الطبية المحدودة | لا يوجد | |
| محاقن يمكن التخلص منها (22 جم) | Chengdu Shifeng Co.، Ltd. | SB1-089 (IX) | |
| ماكينة حلاقة كهربائية | JASE | BM320210 | |
| حمض رباعي الأسيتيك ثنائي الإيثيلين (EDTA) | BioFroxx | 1340GR500 | |
| Hematoxylin و Eosin Stain Kit | Biosharp | BL700B | |
| إبرة الري (23 جم) شركة | Sichuan New Century Medical Polymer Products Co.، Ltd. | لا شيء | |
| منخفضة السرعة | قوانغتشو Dental Guard Technology Co.، Ltd. | لا شيء | |
| ماسون s Trichrome Stain Kit | Solarbio | G1340 | |
| الأقمشة الطبية غير المنسوجة | Henan Yadu Industrial Co., Ltd. | لا شيء | |
| المقطعي المحوسب الدقيقة (& micro; CT) | Scanco Medical AG | µ CT45 | |
| يحاكي 20.0 للصور المقطعية | تجسيد | لا | |
| توجد حاملات إبرة | تشنغدو شيفنغ المحدودة | لا شيء | |
| مصعد Periosteal | تشنغدو شيفنغ المحدودة | لا شيء | |
| محلول ملحي | سيتشوان كيلون الصيدلانية المحدودة | لا شيء | |
| برنامج Scanco medical visualizer for 3D image | reconstruction Scanco Medical AG | None | |
| SPSS Statistics 20.0 للتحليل الإحصائي | IBM | None | |
| Sprague-Dawley rats | Byrness Weil Biotech Ltd | لا شيء | |
| مقص مستقيم | Chengdu Shifeng Co.، Ltd. | لا يوجد | |
| محرك جراحي | MARATHON | N3-140232 | |
| خيوط جراحية (3-0 شعيرات أحادية) | هانغتشو هواوي للمستلزمات الطبية المحدودة | اي |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.