استخراج الحمض النووي والمقارنة بين عينات الذباب الميت القديمة والطازجة

Bo Wang; Yu-zhao Xu; Yun-chao Zhou; Shan Ha; Xiao-shi Qin; Jie Cai; Bin Cong; Jian-hua Chen; Jian-qiang Deng

doi:10.3791/66737

يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

استخراج الحمض النووي والمقارنة بين عينات الذباب الميت القديمة والطازجة

1.4K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/66737

⸱

مايو 3, 2024

Bo Wang^*¹^,² , Yu-zhao Xu^*¹ , Yun-chao Zhou¹ , Shan Ha¹ , Xiao-shi Qin¹ , Jie Cai¹^,² , Bin Cong¹^,³ , Jian-hua Chen¹ , Jian-qiang Deng¹

¹Hainan Province Tropical Forensic Engineering Research Center, Department of Forensic Medicine, Hainan Medical University, Hainan Provincial Academician Workstation (tropical forensic medicine), ²Hainan Vocational College of Political Science and Law, Hainan Gongping Forensic Center, ³Department of Forensic Medicine, Hebei Medical University

^* These authors contributed equally

في هذه المقالة

إشعار تصحيح

Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice

ملخص

توضح هذه المقالة بروتوكولا لاستخراج الحمض النووي للذبابة الميتة حديثا وقديما باستخدام مجموعة استخراج الحمض النووي الشائعة المعدلة.

الملخص

تم اختيار ما مجموعه خمس عينات من عينات Chrysomya megacephala - ثلاث عينات جديدة ، وعينة واحدة مخزنة في الكحول لمدة 2 سنوات ، وعينة واحدة مخزنة في تخزين جاف مختوم لمدة 2 سنوات محمية من الضوء فقط - للتحقيق فيما إذا كانت مجموعة استخراج الحمض النووي في الدم يمكن أن تستخرج الحمض النووي من الذباب الميت ولتحديد ما إذا كان الكحول يمكن أن يطيل الحفاظ على الحمض النووي للذباب الميت. أولا ، تم استخدام مجموعة استخراج الحمض النووي في الدم لاستخراج الحمض النووي من أنسجة الصدر. بعد ذلك ، تم فحص نقاء الحمض النووي وتركيزه باستخدام قارئ الصفائح الدقيقة ومقياس الفلور. أخيرا ، تم إجراء تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل والرحلان الكهربائي للحمض النووي المستخرج باستخدام بادئات خاصة بالذباب الميتوفيلي الموجودة في تسلسل جين CO I للميتوكوندريا. أظهرت النتائج أن نقاء الحمض النووي لجميع العينات كان أكبر من 2.0. لوحظ أن تركيز الحمض النووي بالترتيب التالي: عينات جديدة > عينات قديمة محفوظة بالكحول > عينات قديمة غير معالجة. كان لجميع العينات نطاقات كهربائية محددة بعد تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل. في الختام ، يمكن استخدام مجموعة استخراج الحمض النووي للدم لاستخراج الحمض النووي من الذباب الميت بنجاح ، وتركيز الحمض النووي لعينات الذباب الطازجة أكبر من تركيز عينات الذباب القديمة. يمكن تخزين الذباب في الكحول لفترة طويلة.

المقدمة

لطالما كان الاستدلال على وقت الوفاة أحد القضايا الرئيسية والصعبة التي يجب حلها في الممارسة القضائية. في ممارسة علم الطب الشرعي ، بالنسبة للقضية الجنائية ، يلعب تحديد فترة ما بعد الوفاة دورا حاسما في استنتاج وقت الجريمة ، وحبس المشتبه به ، وتضييق نطاق التحقيق. تعتمد الطرق التقليدية للاستدلال على وقت الوفاة في المقام الأول على ظواهر ما بعد الوفاة المبكرة ، والتي لا يمكن استخدامها بشكل عام إلا لاستنتاج وقت الوفاة في غضون 24 ساعة. ومع ذلك ، لا يمكن تحديد وقت الوفاة الطويل من خلال ظواهر ما بعد الوفاة. من المسلم به الآن بشكل عام في مجتمع علوم الطب الشرعي أن علم الحشرات الشرعي لديه القدرة على أن يكون وسيلة فعالة للاستدلال على وقت أطول من الوفاة.

س....