يصف هذا البروتوكول تقنية إدارة الحمل والتغذية للأرانب المنقولة بالجنين والمعدل وراثيا ، والتي تهدف إلى تقليل وفيات الأرانب حديثي الولادة وتعزيز كفاءة تحضير الأرانب المعدلة جينيا.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
يصف هذا البروتوكول تقنية إدارة الحمل والتغذية للأرانب المنقولة بالجنين والمعدل وراثيا ، والتي تهدف إلى تقليل وفيات الأرانب حديثي الولادة وتعزيز كفاءة تحضير الأرانب المعدلة جينيا.
مع تقدم البحث العلمي ، يتزايد الطلب على نماذج الأرانب المعدلة جينيا. ومع ذلك ، هناك أنظمة محدودة لإدارة الحمل والتغذية للأرانب المعدلة جينيا ، مما يؤدي إلى انخفاض معدلات البقاء على قيد الحياة بين الأرانب المعدلة جينيا التي أعدها العديد من الباحثين عديمي الخبرة. لذلك ، فإن التوجيه المناسب ضروري. تلخص هذه المقالة ممارسات الحمل والتغذية للأرانب المعدلة وراثيا التي تم تطويرها في مختبر المؤلف وتوضح مجموعة من العمليات الأساسية. وتشمل هذه تشخيص الحمل ، ورعاية ما قبل الولادة ، والقبالة ، والرضاعة الطبيعية المساعدة ، والفطام ، وغيرها من الإجراءات ، إلى جانب إنقاذ ورعاية الأرانب حديثي الولادة الضعيفة. بالمقارنة مع طرق الولادة الطبيعية التقليدية والرعاية المستخدمة في مزارع الأرانب ، فإن هذا النهج ينطوي على إدارة أكثر دقة ، مما يتطلب وقتا وجهدا إضافيين ولكنه يزيد بشكل كبير من معدل بقاء الأرانب المرضعة. الطرق الموضحة في هذه المقالة مناسبة لمعظم سيناريوهات التكاثر المختبرية التي تتضمن الأرانب المعدلة جينيا أو المنقولة بالجنين وتوفر مرجعا مباشرا وفعالا للباحثين الآخرين.
الأرانب هي نموذج حيواني كلاسيكي للأبحاث الطبية الحيوية وأصبحت بشكل متزايد النموذج الانتقالي المفضل لسد الفجوة بين نماذج القوارض ونماذج الكبيرة1،2. بالمقارنة مع الكبيرة ، تتمتع الأرانب بحجم جسم معتدل ، ومساحة تغذية صغيرة ، وتكلفة تغذية منخفضة ، وجمع دم مريح ، مما يؤدي إلى الجمع المتكرر لبيانات البحث والعمليات الجراحية. تتميز الأرانب بالقدرة الإنجابية الجيدة ، وفترة الحمل القصيرة (28-32 يوما للأرانب البيضاء النيوزيلندية) ، وعدد كبير من المواليد ، والنمو السريع3،4. بالمقارنة مع القوارض ، فإن الأرانب أقرب إلى البشر في تطورالنشوء 5. إنه بديل تجريبي عملي وفعال من حيث التكلفة للخنازير والرئيسيات غير البشرية6. بالمقارنة مع تحرير الجينات الكبيرة والمتوسطة الحجم الأخرى (الخنازير والماشية والأغنام والقطط) ، فإن تكلفة تحضير أرانب تحرير الجينات منخفضة ، والدورة قصيرة. مع تطور العلاج الجيني7،8،9 ، والعلاج بالخلايا الجذعية10،11،12،13 ، وأبحاث علومالدماغ 14 ، والمجالات العلميةالأخرى 1،15،16،17،18 ، يتزايد الطلب على الأنواع غير القوارض في تحرير الجينات.
كانت أرانب تحرير الجينات تعتبر ذات يوم واحدة من تحرير الجينات متوسطة الحجم التي يمكن أن تحقق التطبيقات الصناعية6. ومع ذلك ، حتى اليوم ، لم تتمكن الأرانب المجردة للجينات من تحقيق إنتاج واسع النطاق. أحد الأسباب الرئيسية هو أن إنتاج وتربية الأرانب المحررة للجينات يمثل تحديا ، والصعوبة أكبر بكثير من تلك التي تعاني من الفئران أو الفئران المجردة للجينات. لا توجد العديد من المختبرات التي يمكنها زراعة الأرانب المعدلة للجينات بكفاءة. غالبا ما يكون من الصعب على المبتدئين إعداد أرانب تحرير الجينات بنجاح ، وغالبا ما يواجهون مشاكل غير سارة مثل انخفاض معدل الحمل19 ، والإجهاض20 ، وعسر الحياة21 ، ورفض الرضاعة من قبل إناث الأرانب22 ، وموت الأرانبالرضيعة 23. ومع ذلك ، هناك عدد قليل من البيانات المنهجية أو إرشادات الأدبيات حول حمل وتغذية الأرانب المعدلة للجينات أو الأرانب المنقولة بالجنين. يعتمد معظمهم على تجربة مزارع الأرانب العادية.
لذلك ، تلخص هذه المقالة التجربة الناضجة للحمل وإدارة التمريض للأرانب المعدلة وراثيا من مختبر المؤلف ، وتقدم مجموعة من العمليات الأساسية للأرانب المنقولة بالجنين والأرانب المعدلة وراثيا ، بما في ذلك تشخيص الحمل ، ورعاية ما قبل الولادة ، والقبالة ، والتغذية الاصطناعية بمساعدة ، والاستبعاد ، وكذلك إنقاذ ورضاعة الأرانب الصغيرة الضعيفة. تم إنشاء هذه العملية خصيصا لتربية الأرانب المعدلة للجينات أو الأرانب المنقولة بالجنين. بالمقارنة مع طريقة الولادة الطبيعية التقليدية والرعاية لمزارع الأرانب ، فإن نموذج إدارة الحمل والتمريض يستغرق مزيدا من الوقت والطاقة ، ولكنه يمكن أن يقلل بشكل كبير من وفيات صغار الأرانب ، والجهد يستحق كل هذا العناء.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت الموافقة على جميع البروتوكولات التجريبية من قبل لجنة أخلاقيات التجارب على التابعة لمركز المختبر الطبي في قوانغدونغ. رقم المراجعة الأخلاقية لتربية الأرانب المعدلة جينيا MKRN3 المشاركة في هذه الدراسة هو B202210-6. تلتزم الدراسة بالإجراءات التي تمتثل للمعايير الأخلاقية المبينة في إعلان هلسنكي لعام 1975 (المنقح عام 1983). تم الحصول على الأرانب النيوزيلندية المستخدمة في هذه الدراسة من مركز مختبر قوانغدونغ الطبي في الصين. عملية الحمل والتغذية للأرانب المعدلة وراثيا الموصوفة في هذه المقالة هي ملخص لممارسات تربية اليومية في مختبر المؤلف. وترد تفاصيل الكواشف والمعدات المستخدمة في جدول المواد.
1. تشخيص الحمل
2. رعاية ما قبل الولادة
3. الولادة
ملاحظة: يشير اليوم 0 إلى فترة وجيزة بعد الإخصاب وتكوين بدائية النواة. الأرانب هي محفزة للإباضة وتحدث الإباضة بعد 10-12 ساعة من التزاوج. تعتبر الأجنة أحادية الخلية التي تم الحصول عليها في اليوم التالي للتزاوجفي اليوم 0.5. إذا تم استزراع أجنة المرحلة المفردة في المختبر لمدة 2-3 ساعات فقط ثم نقلها إلى الأرانب البديلة ، فإنها تعتبرأيضا اليوم 0.5 من الحمل.
4. القبالة
5. رعاية ما بعد الولادة
6. الاستئصال
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
توضح هذه المقالة إجراء إدارة الحمل والتغذية للأرانب المنقولة بالجنين والمعدل وراثيا. في نهاية عام 2022 ، بدأ مختبر المؤلف في تطوير منصة تحضير للأرانب المعدلة جينيا. خلال هذه الفترة ، تمت مواجهة العديد من المشكلات الشائعة ، بما في ذلك الإجهاض ، والفشل في الولادة ، وعسر الولادة ، والفشل في نتف الشعر لإعداد العش قبل الولادة ، وعدم رغبة الأرانب الأم في الرضاعة الطبيعية أو حوادث أكل لحوم البشر ، وعدم كفاية حليب الثدي بسبب أحجام القمامة الكبيرة ، وفشل صغار الأرانب في شرب الحليب. أدت هذه التحديات إلى تقليل كفاءة تربية الأرانب ا...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تشمل الخطوات الرئيسية في إدارة الحمل والتمريض للأرانب المنقولة بالجنة والمعدل وراثيا القبالة والرضاعة الطبيعية المبكرة. الولادة الصعبة هي مشكلة شائعة في الأرانب19. غالبا ما تؤدي أوقات الولادة الطويلة إلى نقص تروية الجنين ونقص الأكسجة والموت25. يمكن أن يؤدي الاستخدام المناسب للأوكسيتوسين إلى تقصير أوقات الولادة بشكل فعال وتقليل حالات عسر ولادة الجنين26. تفشل العديد من الأرانب الأم البدائية في نتف الشعر لإعداد الأعشاش ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.
تم دعم هذا البحث من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (المنحة رقم 82101937) ، ومشروع صندوق أبحاث العلوم والتكنولوجيا الطبية في قوانغدونغ ، الصين (المنحة رقم B2024069) ، ومشروع خطة قوانغتشو للعلوم والتكنولوجيا ، الصين (المنحة رقم 17). SL2023A04J02229 ، التعيين رقم 2024A04J4923).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| القطن الاصطناعي أسفل | يانغتشو Anguang المنسوجات المحدودة ، الصين | 5490-Jinyu | |
| Cloprostenol حقن الصوديوم | شنغهاي Quanyu التكنولوجيا الحيوية (Zhumadian) الصيدلانية المحدودة ، الصين | 163232207 | |
| حبيبات Corncob مركز | المختبر الطبي الإقليمي قوانغدونغ ، الصين | YUMIXIN | |
| مقياس | منصة إلكترونيةYongkang Runjin وزن أداة المحدودة ، الصين | rj-09 | |
| Gentamicin | Shanxi Jinfukang البيولوجية الصيدلانية المحدودة ، الصين | 041531504 | |
| حقن الجلوكوز | Henan Kelun Pharmaceutical Co.، Ltd ، الصين | H41022251 | |
| حاضنة | Foshan Chancheng Hualong مصنع البلاستيك ، الصين | AAA-2 | للأرانب حديثي الولادة |
| حاضنة مربع ؛ | شركة Hebei mabao منتجات شبكة سلكية المحدودة ، الصين | https://qr.1688.com/s/AJ1K7O3p | كعش للأرانب الأم |
| Inslin حقنة | Becton ، Dickinson and Company ، الولايات المتحدة الأمريكية | فائقة الدقة ، 328421 | |
| حقن الأوكسيتوسين | قوانغتشو Baiyunshan Mingxing الصيدلانية المحدودة | H44025245 | |
| حقن البنسلين | قوانغدونغ Kangtaiyuan تربية المحدودة ، الصين | 300012430 | |
| قفص تسليم الأرانب | سوتشو سوهانغ التكنولوجيا المعدات المحدودة ، سوتشو ، الصين | RB42-8G | |
| منشفة | تشجيانغ Jieliya المحدودة ، الصين | W3290 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.