أظهرت هذه الدراسة أن جنتيوبيكروسيد يمكن أن يعالج إصابة الكبد الصفراوية عن طريق التحكم في إنتاج واستقلاب الأحماض الصفراوية والدهون ومنع الإجهاد التأكسدي والاستجابات الالتهابية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة بحثية
أظهرت هذه الدراسة أن جنتيوبيكروسيد يمكن أن يعالج إصابة الكبد الصفراوية عن طريق التحكم في إنتاج واستقلاب الأحماض الصفراوية والدهون ومنع الإجهاد التأكسدي والاستجابات الالتهابية.
ثبت أن المكون النشط الأساسي ل Swertia chirayita ، gentiopicroside (GPS) ، يحمي الكبد في حالات الركود الصفراوي. من أجل توضيح آلية حماية نظام تحديد المواقع العالمي (GPS) على إصابة الكبد الصفراوية ، تمت معالجة خلايا HepG2 بحمض تشينوديوكسيكوليك (CDCA) لمحاكاة بيئة ركود صفراوي في المختبر ، وتم استخدام طريقة CCK-8 لتحديد التأثير الوقائي لنظام تحديد المواقع العالمي (GPS) على خلايا HepG2. باستخدام مجموعة بيولوجية ، تم الكشف عن محتويات TBA و T-CHO و TG و ALP و ALT و AST و GSH و IL-1β و IL-6 و TNF-α و SOD و MDA. تم استخدام الفحص المجهري بالليزر متحد البؤر لتأكيد مستوى ROS. تم تقييم تعبيرات خلايا HepG2 عن SHP-2 و Tgr5 و CYP7A1 و NTCP باستخدام التألق المناعي وتحليل اللطخة الغربية. ثم تم استخدام برنامج Autodock للتحقق من الإرساء الجزيئي لمكوناته النشطة الرئيسية. أظهرت النتائج أن نظام تحديد المواقع العالمي (GPS) منع بشكل كبير الضرر الذي تسببه CDCA لخلايا HepG2. قد يكون هذا التأثير الوقائي قد تحقق من خلال التحكم في إنتاج واستقلاب الأحماض الصفراوية والدهون داخل الخلية ومنع الإجهاد التأكسدي والاستجابات الالتهابية.
موقع التمثيل الغذائي للجهاز الهضمي في الجسم هو الكبد. إفراز الصفراء هو آلية رئيسية في عملية تقويض الدهون في الجهاز الكبدي. المكونات الأساسية للصفراء ، الأحماض الصفراوية ، تطلقها خلايا الكبد وهي ضرورية للحفاظ على توازن التمثيل الغذائي للدهون. بالنسبة لكل من الأفراد الأصحاء والحالات المرضية ، تعتمد العمليات الفسيولوجية والمرضية للكبد على توازن الأحماض الصفراوية الحرة والمترافقة في الكبد. إذا كان هذا التوازن مضطربا ، فلن تعمل الدورة الدموية في حمض الصفراء بشكل طبيعي ، مما قد يؤدي إلى ركود صفراوي داخل الكبد وتلف الكبد اللاحق1. وفقا للبحث الذي تم إجراؤه بالفعل ، فإن إصابة الكبد الصفراوية (CLI) هي حالة مرتبطة باضطراب....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
زراعة الخلايا وعلاجها
تم شراء خلايا HepG2 ووسائط MEM من بائع تجاري. نمت خلايا HepG2 في وسائط MEM مكملة بنسبة 10٪ FBS و 1٪ 100 وحدة / مل بنسلين و 100 وحدة / مل من الستربتومايسين ، عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون2 في الغلاف الجوي. بعد التصاق الخلية ، تم تغيير وسائط الاستزراع. تمت زراعة الخلايا بنسبة 1: 3 بعد 2-3 أيام ، وتم استخدامها في التجربة بمجرد أن حققت زراعة الخلايا التقاء 80٪.
مقايسة بقاء الخلية
في اليوم الأول ، تم زرع الخلايا في 2 × 104 خلايا HepG2 (2 × 105 خلايا / مل ، 100 ميكرولتر لكل بئر) في صفيحة 96 بئرا في ستة مكررا....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم ضبط تركيز CDCA على 0 ميكرومتر ، 20 ميكرومتر ، 40 ميكرومتر ، 60 ميكرومتر ، 80 ميكرومتر ، و 100 ميكرومتر تدرج تركيز للتجارب. عندما كان تركيز CDCA 60 ميكرومتر ، كان نشاط الخلية مختلفا بشكل كبير عن نشاط المجموعة الضابطة ، وأخيرا تم استخدام 60 ميكرومتر كتركيز CDCA (الشكل 1 أ). أظهرت النتائج أنه بعد الحضانة لمدة 24 ساعة بعد إعطاء الدواء ، لم يكن هناك فرق كبير في نشاط الخلية بين كل مجموعة والمجموعة الضابطة (الشكل 1 ب) ، مما يشير إلى أن نظام تحديد المواقع العالمي (GP.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
CLI هو مرض في الكبد ناتج عن انسداد تكوين الصفراء أو إفرازها أو إفرازها. يتجلى سريريا في شكل حكة وهشاشة العظام ، بل ويتطور إلى تليف الكبد وتليف الكبد وأمراض أخرى ، مما يعرض الحياة والصحة للخطربشكل خطير 36،37،38. يعرف UDCA بأنه الدواء الأكثر استخداما في علاج CLI39. ومع ذلك ، نظرا للعدد الكبير من المرضى الذين يعانون من ضعف الاستجابة ل UDCA في الممارسة السريرية ، فقد تم تطوير.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.
يتم دعم هذا العمل من قبل مؤسسة العلوم الطبيعية لمقاطعة سيتشوان (2024NSFSC0697) ، مشروع صندوق الابتكار المشترك لجامعة تشنغدو للطب الصيني التقليدي (LH202402015).
مساهمة المؤلف:
كايتونغ وو: المنهجية ، والتحليل الرسمي ، وتنظيم البيانات ، وكتابة المسودة الأصلية ، والكتابة والتحرير. يانغ شياو: التصور والتحقيق والتصور والتحقق من الصحة. Fuhan Fan: التحقق من الصحة والتحرير. Zhangli Lei و Xianhua Zhou و Xianli Meng: التحرير والترجمة. يونغ تسنغ ، هو يا وبينغ شين: التصور ، والمنهجية ، والتحقق ، والتحقيق ، ومراجعة المسودة وتصحيحها ، والإشراف.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| ALP | نانجينغ جيانتشنغ معهد الهندسة الحيوية | A059-2-2 | |
| ALT | معهد نانجينغ جيانتشنغ للهندسة الحيوية | C009-2-1 | |
| AST | معهد نانجينغ جيانتشنغ للهندسة الحيوية | C010-2-1 | |
| BCA | بوستر التكنولوجيا البيولوجية المحدودة | AR0146 | |
| CDCA | تشنغدو ميديشنغ التكنولوجيا المحدودة | 474-25-9 | |
| مجموعة عد الخلايا -8 | شركة بوستر للتكنولوجيا البيولوجية المحدودة | AR1160-500 | |
| السيتوكروم P450 7A1 الأجسام المضادة | Abmart Shanghai Co.، Ltd. | TD2612S | |
| DAPI | Beyotime Biotechnology | C1005 | |
| DMSO | Boster Biological Technology Co. ، Ltd | PYG0040 | |
| الماعز المضادة للأرانب IgG (H & amp; amp; ل) | شركة تشنغدو زين بيوساينس المحدودة | 511202 | |
| الماعز المضادة للأرانب IgG AF488 | Abmart Shanghai Co.، Ltd. | M21012M | |
| GPS | Chengdu Medesheng Technology Co. ، Ltd | RP210717 | |
| GSH | Nanjing Jiancheng معهد الهندسة الحيوية | A006-2-1 | |
| خلايا HepG2 | Procell Life Science & amp التكنولوجيا المحدودة | CL-0103 | |
| HRP الماعز المضادة للأرانب IgG | ووهان & nbsp ؛ أباستيلي التكنولوجيا الحيوية المحدودة | AS014 | |
| IL-1 وبيتا ؛ | Elabscience التكنولوجيا الحيوية المحدودة | E-EL-H0149c | |
| IL-6 | Elabscience التكنولوجيا الحيوية المحدودة | E-EL-H6156 | |
| MDA | معهد نانجينغ جيانتشنغ للهندسة الحيوية | A003-1-2 | |
| MEM قاعدة متوسطة | Procell Life Science & شركة التكنولوجيا المحدودة | PM150410 | |
| PBS | Boster Biological Technology Co.، Ltd | PYG0021 | |
| عازلة النقل السريع (20 مرة) | NCM Biotech | WB4600 | |
| RIPA | Boster Biological Technology Co.، Ltd | BL651A | |
| ROS | Beyotime Biotechnology | S0033S | |
| SHP2 Rabbit pAb | Wuhan & nbsp ؛ أباستيلي التكنولوجيا الحيوية المحدودة | A12486 | |
| SLC10A1 الأجسام المضادة | Abmart شنغهاي المحدودة | PU276166S | |
| SOD | معهد نانجينغ جيانتشنغ للهندسة الحيوية | A001-3-1 | |
| TBA | معهد نانجينغ جيانتشنغ للهندسة الحيوية | E003-2-1 | |
| T-CHO | معهد نانجينغ جيانتشنغ للهندسة الحيوية | A111-1-1 | |
| TG | معهد نانجينغ جيانتشنغ للهندسة الحيوية | A110-1-1 | |
| TGR5 الأجسام المضادة متعددة النسيلة | شركة ImmunoWay للتكنولوجيا الحيوية | YT4636 | |
| TNF- & alpha ؛ | Elabscience Biotechnology Co., Ltd | E-EL-H0109c | |
| حل التربسين (0.25٪) | Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co.، Ltd | 40126ES60 | |
| UDCA | Chengdu Lemetian Medical Technology Co., Ltd | DSTDX007601 | |
| β-Actin Rabbit mAb | Wuhan أباستيلي التكنولوجيا الحيوية المحدودة | تيار متردد 026 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم نشر هذه المقالة
الفيديو قريباً