مقالة منهجية

دراسة مقارنة لمحتويات عديد السكاريد والأنشطة المضادة للأكسدة لفرس النهر rhamnoides subsp. سينينسيس وفرس النهر الجيانتسينسيس

DOI:

10.3791/68855

⸱

أغسطس 15, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

قارنت هذه الدراسة محتويات عديد السكاريد في Hippophae rhamnoides subsp. sinensis Rousi و Hippophae gyantsensis (Rousi) Y. S. Lian التي تم الحصول عليها من خلال استخراج الماء الساخن وقياسها كميا من خلال قياس ألوان حمض الفينول والكبريتيك. قمنا أيضا بالتحقيق في الأنشطة المضادة للأكسدة في المختبر للسكريات من هذين النوعين من Hippophae من خلال تجارب مسح الجذور الحرة 2،2-diphenyl-1-picrylhydrazyl.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تشير هذه الورقة إلى دراسة مقارنة جيدة التصميم ومتعمقة حول غلة عديد السكاريد ومحتوياته وأنشطته المضادة للأكسدة لنوعين من Hippophae ذات قيمة بحثية كبيرة ، وهما Hippophae rhamnoides subsp. sinensis Rousi و Hippophae gyantsensis (Rousi) Y. S. Lian. تم الحصول على إجمالي السكريات من H.rhamnoides subsp. sinensis و H. gyantsensis من خلال استخراج الماء الساخن. تمت مقارنة الغلة ، وتم تحديد محتويات السكريات بدقة من خلال قياس ألوان حمض الفينول والكبريتيك ومقارنتها. وفي الوقت نفسه ، تم تقييم النشاط المضاد للأكسدة للسكريات من خلال 2،2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) الجذور الحرة. أظهرت النتائج أن محصول عديد السكاريد (النسبة المئوية للمستخلص الخام بالنسبة للمادة الخام) من H.rhamnoides subsp. sinensis (1.18٪ ± 0.02٪) كان أقل بكثير من غلة H. gyantsensis (3.12٪ ± 0.06٪) (P < 0.01). كان محتوى السكريات (المعرف على أنه عديد السكاريد النقي في المستخلص) من H.rhamnoides subsp. sinensis (352.97±1.07 مجم / جم) أعلى بكثير من محتوى H. gyantsensis (300.21 ± 1.49 مجم / جم) (P < 0.01). كان التركيز نصف المثبط لنشاط كسح الجذور الحرة DPPH ل H.rhamnoides subsp . عديد السكاريد (0.026 ± 0.004 مجم / مل) أقل قليلا من تركيز عديدات السكريات في H. gyantsensis (0.021 ± 0.004 مجم / مل). ومع ذلك ، لم يتم العثور على فرق كبير بين نوعي Hippophae (P > 0.05). أوضحت هذه التجربة الاختلافات في إنتاجية السكريات ومحتواها ونشاطها المضاد للأكسدة بين H.rhamnoides subsp. سينينسيس و H. gyantsensis. يمكن أن يوفر هذا العمل أساسا علميا لتقييم جودة النبق البحري ومواصلة تطوير المكونات النشطة للسكاريد.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نبق البحر هو الفاكهة الناضجة المجففة للنباتات في عائلة Elaeagnaceae. إنها مادة طبية وصالحة للأكل شائعة الاستخدام في الصين ، فضلا عن كونها مصدرا مهما للمكملات الغذائية ومنتجات الرعاية الصحية في الهند وروسيا وفنلندا ودول أوروبية أخرى بسبب خصائصها في تنشيط الطحال للمساعدة في الهضم وتخفيف السعال وطرد البلغم وتعزيز الدورة الدموية وتبديد ركود الدم1. يحتوي نبق البحر على مجموعة غنية من المكونات النشطة بيولوجيا ، مثل مركبات الفلافونويد والمركبات الفينولية والسكريات والجليكوسيدات والأحماض العضوية ، وله تاريخ طويل من التطبيق في الطب الصينيالتقليدي 2،3. بشكل عام ، تعتبر مركبات الفلافونويد من أهم المركبات النشطة بيولوجيا لنبق البحر. ومع ذلك ، فقد تم التعرف مؤخرا على أن السكريات تمتلك أيضا أنشطة فسيولوجية ودوائية ممتازة ، وبالتالي جذبت انتباه الباحثين العلميين. ثبت أن السكريات النبق البحري لها أنشطة في تنظيم جهاز المناعة ، وحماية الكبد ، وتنظيم اضطرابات التمثيل الغذائي للدهون والميكروبات المعوية ، بالإضافة إلى تأثيرات مضادات الأكسدة والمضادة للالتهابات والأورام وخافضة لسكرالدم 4،5،6. يمكن أن تعمل كمضادات أكسدة طبيعية ، مما يتيح تطوير أطعمة ومستحضرات صيدلانية وظيفية جديدة. وفي الوقت نفسه ، فإن السكريات النبق البحري عرضة أيضا للتحلل بواسطة حمض المعدة ، وهو أمر مفيد لامتصاص واستخدام العناصر الغذائية في جسم الإنسان7،8.

استخراج الماء الساخن (HWE) ، والاستخراج بمساعدة الميكروويف ، والاستخراج بمساعدة الموجات فوق الصوتية هي الطرق الشائعة الاستخدام لاستخراج عديد السكاريد النبقالبحري 9. تختلف هياكل السكريات التي تم الحصول عليها من خلال طرق الاستخراجالمختلفة 10من حيث تكوين السكريات الأحادية ، والوزن الجزيئي (Mw) ، ودرجة التفرع ، ومحتوى حمض اليورونيك ، وأنواع الارتباط الجليكوزيدي ، والتشكل ثلاثيالحلقات 11،12. بشكل عام ، تمتلك محاليل عديد السكاريد عالية ميغاواط لزوجة عالية وقابلية ذوبان منخفضة ، مما قد يؤثر على أنشطتها البيولوجية وتطبيقاتها13. HWE هي التقنية الأكثر استخداما لاستخراج عديد السكاريد في المختبرات والبيئات الصناعية نظرا لميزتها المتمثلة في البساطة14،15. علاوة على ذلك ، فهي واحدة من أكثر طرق الاستخراج شيوعا لعديدات السكاريد النبقالبحري 9. لذلك ، في هذه الدراسة ، تم استخراج السكريات من خلال HWE. تشمل الطرق الأساسية لتحديد محتوى السكريات حمض الفينول والكبريتيك وحمض الكبريتيك16،17،18،19. يتم تطبيق طريقة حمض الفينول والكبريتيك على نطاق واسع بسبب إجراء الكشف البسيط ، والاستقرار الجيد ، والحساسية العالية20. حدد Wen et al. محتوى السكريات المستخرجة من نبق البحر من خلال طريقة حمض الفينولوالكبريتيك 21. لذلك ، في هذه التجربة ، تم تحديد محتوى السكريات باستخدام طريقة حمض الفينول والكبريتيك. يتناسب عمق محلول المركب البرتقالي المتكون بعد تفاعل حمض الفينول والكبريتيك مع محتوى السكريات ويمكن تحديده بطول موجي 490 نانومتر22.

تظهر السكريات الطبيعية أنشطة رائعة مضادة للأكسدة في الجسم الحي وفي المختبر. السكريات التوت قد تخفف من الإجهاد التأكسدي في نماذج النظام الغذائي عالي الدهون عن طريق تنظيم ميكروبات الأمعاء23. السكريات هي المكونات النشطة الرئيسية في Pueraria lobata وتظهر أنشطة بيولوجية متنوعة ، بما في ذلك مضادات الأكسدة24. وجد Dou et al. أن السكريات السوداء لها وظائف فسيولوجية ، مثل مضادات الأكسدة25. عادة ما يتم تقييم النشاط المضاد للأكسدة للسكريات على أساس قدرتها على التخلص من الجذور الحرة المختلفة ، بما في ذلك 2،2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) ، والهيدروكسيل ، وجذور الأنيون الفائق ، بالإضافة إلى قدرتها على الكسح الكاتيوني الجذري ABTS26. يستخدم تحليل DPPH على نطاق واسع لأنه يقيس قدرة مضادات الأكسدة على تقليل جذور DPPH البنفسجي إلى جزيئات مستقرة صفراء شاحبة من خلال نقل ذرة الهيدروجين27. يتم قياس جذور DPPH البنفسجية المتبقية باستخدام مقياس الطيف الضوئي المرئي للأشعة فوق البنفسجية (UV) (Vis) عند حوالي 515-520 نانومتر لتحديد النشاط المضاد للأكسدة28،29.

بحثت الدراسات السابقة في المحتوى والنشاط المضاد للأكسدة لعديد السكاريد النبقالبحري 21. ومع ذلك ، اقتصرت الغالبية العظمى من هذه الدراسات على Hippophae rhamnoides subsp. sinensis. إنه أكثر أنواع فرس النهر استخداما وانتشارا على نطاق واسع في الصين ويتم تسجيله رسميا في دستور الأدوية الصيني. نادرا ما تم الإبلاغ عن دراسات حول Hipphophae gyantsensis ، وهو نوع مستوطن في Xizang ، الصين ، ويستخدم بشكل متكرر في الطب التبتي ويتم توثيقه في كتالوج مقاطعة سيتشوان للمواد الطبية التبتية. بالإضافة إلى ذلك ، لم يقارن أي بحث محتويات وأنشطة مضادات الأكسدة لعديدات السكاريد من أنواع مختلفة من فرس النهر ، وهي H . rhamnoides subsp. sinensis و H. gyantsensis. لذلك ، تقارن هذه الدراسة أولا محتويات عديد السكاريد في H. rhamnoides subsp. sinensis و H. gyantsensis المستخرج من خلال HWE وقياسه كميا من خلال قياس ألوان حمض الفينول والكبريتيك. تم إجراء مزيد من التحقيق في الأنشطة المضادة للأكسدة للسكاريد من هذين النوعين من Hippophae من خلال فحوصات كسح الجذور الحرة DPPH. ومن المتوقع أن توفر هذه الدراسة بيانات علمية لتقييم الجودة ومواصلة تطوير مكونات عديد السكاريد النشطة لنوعين من فرس النهر المذكورة أعلاه.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. العينات والمواد

  1. اجمع عينات من النبق البحري من فرس النهر المختلفة من هضبة تشينغهاي-شيزانغ.
    ملاحظة: تم تحديد العينات من قبل الأستاذ المساعد يو ليو من جامعة تشنغدو للطب الصيني التقليدي. تم إيداع عينات القسائم في كلية الطب العرقي بجامعة تشنغدو للطب الصيني التقليدي. وترد معلومات أخذ العينات في الجدول 1. تفاصيل الكواشف والمعدات المستخدمة في هذه الدراسة مدرجة في جدول المواد.
  2. جفف العينات في فرن على حرارة 40 درجة مئوية لمدة 72 ساعة.
  3. اطحن 20 جم من كل عينة من النبق البحري إلى مسحوق وقم بتمريرها عبر غربال رقم 3. معالجة كل عينة بثلاث نسخ متوازية. استمر في سحق العينات التي لم تمر عبر الغربال ، ثم غربلها حتى يتم غربلتها جميعا.
  4. تخزين العينات في درجة حرارة -20 درجة مئوية لدراسات المتابعة.

2. استخراج السكريات النبق البحري

ملاحظة: اعتمدت هذه الدراسة طريقة الاستخراج المحددة مسبقا لنبق البحر مع بعض التعديلات للحصول على السكريات30.

  1. تزن 5.0 جم من مسحوق عينة نبق البحر وضعها في قارورة دائرية القاع سعة 250 مل. أضف 50 مل من الإيثانول اللامائي إلى المسحوق وانقعه في درجة حرارة الغرفة (RT ؛ 25 درجة مئوية) لمدة 24 ساعة لإزالة المكونات المحبة للدهون. معالجة كل عينة بثلاث نسخ متوازية.
  2. قم بتصفية مسحوق العينة ، الذي تم نقعه طوال الليل ، باستخدام قمع Buchner ، ثم تخلص من المرشح للحصول على بقايا الفلتر. اغسل بقايا الفلتر ثلاث مرات ب 50 مل من الماء منزوع الأيونات وجففها إلى وزن ثابت عند 40 درجة مئوية.
  3. انقل بقايا المرشح منزوع الدهن إلى قارورة مستديرة القاع سعة 250 مل ، وأضف 150 مل من الماء منزوع الأيونات بنسبة صلبة: سائلة تبلغ 1:30 (جم / مل) ، وقم بإجراء استخراج الارتجاع في حمام مائي عند 80 درجة مئوية مرتين لمدة ساعتين في كل مرة. افصل المرشح للحصول على محلول عديد السكاريد النبق البحري الخام.
  4. ركز المستخلص باستخدام مبخر دوار عند 50 درجة مئوية لمدة 1.5 ساعة. قم بتخزين المحلول المركز في الثلاجة على حرارة 4 درجات مئوية لاستخدامه لاحقا.
  5. أضف كاشف Sevage (CHCl3: C4H9OH = 4: 1 ، v: v) إلى محلول عديد السكاريد الخام في كاشف Sevage: نسبة حجم محلول عديد السكاريد الخام 1: 4. قلب الخليط باستخدام محرك مغناطيسي بسرعة 1050 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة.
  6. انقل السائل إلى أنبوب طرد مركزي سعة 50 مل وقم بطرده عند 4000 × جم لمدة 15 دقيقة ، ثم اجمع المادة الطافية. كرر العملية المذكورة أعلاه ثلاث مرات حتى لا يظهر أي راسب ندف أبيض عند الواجهة بين المرحلتين.
  7. تركيز مستخلص عديد السكاريد النبق البحري بعد إزالة البروتين. أضف الإيثانول اللامائي بنسبة حجم 1: 3 لترسيب الإيثانول اللامائي وضع الخليط عند 4 درجات مئوية طوال الليل.
  8. قم بإزالة الطبقة العليا من الإيثانول اللامائي ، وانقل الخليط إلى أنبوب طرد مركزي سعة 50 مل ، وقم بالطرد المركزي عند 4000 × جم لمدة 15 دقيقة للحصول على الرواسب. جفف الراسب بالتجميد للحصول على السكريات الكلية.
  9. احسب إجمالي غلة السكريات باستخدام المعادلة (1) أدناه:
    figure-protocol-1
    ملاحظة: في المعادلة (1) ، يمثل m الوزن (جم) لعديدات السكاريد النبق البحري ، ويمثل M الكتلة (g) لعينة نبق البحر.

3. تحديد محتوى عديد السكاريد

  1. تحضير الحل
    1. تحضير محلول كاشف الفينول
      1. قم بوزن 3 جم من الفينول بدقة وانقله إلى قارورة حجمية بنية. أضف 50 مل من الماء منزوع الأيونات لإذابة الفينول.
      2. رجي الخليط جيدا حتى يصبح متجانسا. قم بتسمية القارورة وتخزينها لاستخدامها لاحقا.
    2. تحضير محلول الجلوكوز القياسي
      1. قم بوزن 10 مجم من الجلوكوز اللامائي بدقة ونقله إلى قارورة حجمية سعة 10 مل. أضف الماء منزوع الأيونات لإذابة الجلوكوز ورج الخليط جيدا.
      2. خفف الخليط إلى الحجم المطلوب بالماء منزوع الأيونات للحصول على محلول قياسي للجلوكوز.
    3. تحضير محلول عينة الاختبار.
      1. قم بوزن 5 ملغ بدقة من عديد السكاريد النبق البحري المجفف بالتجميد (ZG1-ZG5 و JZ1-JZ5) في قوارير حجمية (ن = 10). أضف الماء منزوع الأيونات إلى كل قارورة إلى الحجم النهائي 50 مل.
      2. قم بتقطيع الخليط لمدة 20 دقيقة حتى تذوب السكريات تماما. معالجة كل عينة بثلاث نسخ متوازية.
  2. بناء المنحنى القياسي
    ملاحظة: في طريقة حمض الفينول والكبريتيك ، تتفاعل السكريات مع حمض الكبريتيك المركز لتوليد مشتقات فورفورال ، والتي تتكثف بعد ذلك مع الفينول لتشكيل مركب برتقالي أصفر. يبلغ الحد الأقصى للطول الموجي للامتصاص لهذا المركب حوالي 490 نانومتر. لذلك ، تم تعيين الطول الموجي للكشف لهذه التجربة عند 490 نانومتر22.
    1. خفف محلول الجلوكوز القياسي بالماء منزوع الأيونات إلى تركيز 0.1 مجم / مل. باستخدام ماصة دقيقة، انقل بعناية 200 و300 و400 و500 و600 و700 ميكرولتر من محلول الجلوكوز القياسي إلى ستة أنابيب اختبار نظيفة منفصلة. أضف الماء النقي إلى الحجم الإجمالي البالغ 1.0 مل ، ثم امزج كل محلول برفق لضمان تخفيف موحد.
    2. أضف 1.0 مل من محلول الفينول 6٪ و 5.0 مل من حمض الكبريتيك إلى أنابيب الاختبار المذكورة أعلاه. تخلط جيدا وتبرد ثم تترك في RT لمدة 30 دقيقة.
      ملاحظة: الفينول مركب كيميائي سام ، وحمض الكبريتيك المركز مادة أكالة. يجب ارتداء القفازات عند تحضير محاليل الفينول وحمض الكبريتيك ، ويجب إجراء الإجراء داخل غطاء الدخان.
    3. انقل العينات المذكورة أعلاه إلى كوفيت واستخدم الماء النقي كفارغ بدلا من العينة. قم بقياس امتصاصها عند 490 نانومتر باستخدام مقياس الطيف الضوئي للأشعة فوق البنفسجية وثلاثة نسخ مكررة.
    4. ارسم المنحنى القياسي بتركيزات الجلوكوز كمحور x وقيم الامتصاص كمحور ص. الحصول على معادلة الانحدار وحساب معامل الارتباط (R²).
      ملاحظة: يجب تسخين مقياس الطيف الضوئي UV-Vis مسبقا لمدة نصف ساعة مقدما. عند قياس الامتصاص في هذه الخطوة ، يجب أن يكون الامتصاص بين 0.2 و 0.8. لذلك ، يجب تحديد تركيز العينة.
  3. دراسة المنهجية
    1. اختبار الدقة:
      1. خذ JZ2 وقم بإعداد محلول الاختبار وفقا للطريقة الموضحة في الخطوة 3.1.3. قم بإجراء قياس ألوان حمض الفينول والكبريتيك باتباع الطريقة الموضحة في الخطوة 3.2.2.
      2. بعد ذلك ، حدد الامتصاص وفقا للإجراء الموضح في الخطوة 3.2.3. كرر هذا الإجراء ست مرات واحسب الانحراف المعياري النسبي (RSD).
    2. اختبار الاستقرار:
      1. قم بإعداد محلول عينة JZ2 باتباع الطريقة الموضحة في الخطوة 3.1.3. في 0 و 2 و 4 و 6 و 8 و 10 ساعات بعد تحضير العينة ، قم بإجراء قياس ألوان حمض الفينول والكبريتيك وفقا للطريقة المحددة في الخطوة 3.2.2.
      2. بعد ذلك ، حدد الامتصاص باتباع الإجراء الموضح في الخطوة 3.2.3 وحساب RSD.
    3. اختبار التكرار:
      1. قم بإعداد محلول عينة JZ2 باتباع الطريقة الموضحة في الخطوة 3.1.3. قم بإعداد ستة نسخ مكررة بالتوازي. إجراء قياس ألوان حمض الفينول والكبريتيك وفقا للطريقة المحددة في الخطوة 3.2.2.
      2. بعد ذلك ، حدد الامتصاص باتباع الإجراء الموضح في الخطوة 3.2.3 وحساب RSD.
    4. اختبار التعافي:
      1. خذ JZ2 وقم بإعداد محلول الاختبار وفقا للطريقة الموضحة في الخطوة 3.1.3. قم بإعداد تسعة نسخ مكررة بالتوازي. أضف المحاليل المرجعية المكافئة ل 80٪ و 100٪ و 120٪ من إجمالي محتوى السكريات في العينة وقم بإعداد ثلاث عينات متوازية.
      2. قم بإجراء قياس ألوان حمض الفينول والكبريتيك وفقا للطريقة المحددة في الخطوة 3.2.2. بعد ذلك ، حدد الامتصاص باتباع الإجراء الموضح في الخطوة 3.2.3 وحساب معدل الاسترداد باستخدام المعادلة (2).
        figure-protocol-2
        ملاحظة: في المعادلة (2) ، يمثل A كمية الجلوكوز في محلول عينة نبق البحر ، ويمثل B كمية الجلوكوز المضافة ، ويمثل C القيمة المقاسة للمحلول المحتوي على الجلوكوز ومحلول عينة نبق البحر.
  4. تحديد المحتوى
    1. قم بإعداد محلول العينة كما هو موضح في الخطوة 3.1.3 وقم بإجراء قياس ألوان حمض الفينول والكبريتيك وفقا للطريقة المحددة في الخطوة 3.2.2.
    2. حدد الامتصاص باتباع الإجراء الموضح في الخطوة 3.2.3 وحساب محتوى عديد السكاريد باستخدام طريقة المنحنى القياسية. قم بإجراء هذه العمليات بالتوازي ثلاث مرات لكل عينة.

4. نشاط الكسح الجذري DPPH31،32

  1. قم بوزن 2.7 مجم من DPPH بدقة في قارورة حجمية فارغة سعة 50 مل. قم بإذابته في 50 مل من الإيثانول اللامائي لتحضير محلول مخزون DPPH بتركيز 0.054 مجم / مل والحصول على محلول عمل DPPH.
    ملاحظة: يجب تخزين محلول DPPH في الظلام.
  2. قم بوزن 5 مجم من فيتامين سي (Vc) بدقة في قارورة حجمية فارغة سعة 10 مل وقم بإذابتها في 10 مل من الماء منزوع الأيونات لتحضير محلول Vc بتركيز 0.5 مجم / مل. تخفيفه على التوالي لتحضير محاليل اختبار VC بتركيزات 0.5 و 0.125 و 0.03125 و 0.0078125 و 0.001953 مجم / مل.
  3. تزن بدقة 5 ملغ من كل عديد السكاريد النبق البحري (ZG1-ZG5 و JZ1-JZ5). قم بإذابة كل عينة في 10 مل من الماء منزوع الأيونات لتحضير محاليل عينة عديد السكاريد النبق البحري بتركيز 0.5 مجم / مل. قم بتخفيف المحاليل المذكورة أعلاه على التوالي لتحضير محاليل اختبار عديد السكاريد النبق البحري بتركيزات 0.5 و 0.125 و 0.03125 و 0.0078125 و 0.001953 مجم / مل.
  4. باستخدام محلول DPPH كركيزة ، قم بإعداد المجموعات التالية في صفيحة مكونة من 96 بئرا: مجموعة التحكم السلبية A0 (150 ميكرولتر من الماء و 50 ميكرولتر من محلول DPPH) ، مجموعة العينة A1 (150 ميكرولتر من العينة أو محلول Vc و 50 ميكرولتر من محلول DPPH) ، ومجموعة التحكم في العينة A2 (150 ميكرولتر من العينة و 50 ميكرولتر من الإيثانول اللامائي قم بتنفيذ هذا الإجراء في ثلاث نسخ.
  5. اسمح للتفاعل بالاستمرار لمدة 30 دقيقة في الظلام. بعد ذلك ، قم بقياس الامتصاص عند 517 نانومتر. كرر التجربة ثلاث مرات واحسب معدل كسح الجذور الحرة DPPH باستخدام المعادلة (3).
    ملاحظة: يجب الحفاظ على امتصاص محلول DPPH عند 0.7 ± 0.02. يمكن أن تؤدي التركيزات العالية والمنخفضة بشكل مفرط إلى قراءات امتصاص غير دقيقة ، مما يؤثر على النتائج التجريبية النهائية.
    figure-protocol-3
    في المعادلة (3) ، A0 هو امتصاص الماء منزوع الأيونات ومحلول DPPH ، و A1 هو امتصاص العينة أو محلول Vc و DPPH ، و A2 هو امتصاص العينة والإيثانول اللامائي
  6. حساب التركيز نصف المثبط (Ic50)
    1. قم بإنشاء جدول بيانات منظم بصريا يوضح العلاقة بين تركيزات مركب اختبار التفاعل (0.5 ، 0.125 ، 0.03125 ، 0.0078125 ، و 0.001953 مجم / مل) وقيم تفاعل النسبة المئوية المقابلة لها.
    2. استخدم تركيب المنحنى غير الخطي (مع GraphPad Prism) لتحديد IC50 والخطأ القياسي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

غلة السكريات الخام
تم استخراج السكريات من خلال HWE. يظهر ارتجاع الحمام المائي في الشكل التكميلي 1. يتم توضيح تركيز محلول مستخلص السكريات في الشكل التكميلي 2. يتم عرض تأثير التقسيم الطبقي للطرد المركزي بعد إزالة البروتين في الشكل التكميلي 3. الدفعات الخمس من H. rhamnoides subsp. sinensis لها غلة عديد السكاريد تبلغ 0.89٪ ± 0.01٪ ، 0.78٪ ± 0.02٪ ، 1.63٪ ± 0.03٪ ، 1.50٪ ± 0.01٪ ، 1.12 ± 0.03٪ ، ومتوسط العائد 1.18٪ ± 0.02٪ (الجدول...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نبق البحر هو دواء تبتي تقليدي. السكريات هي مكونات مهمة لنبق البحر. تم إجراء العديد من الدراسات حول تحديد محتوى السكريات ونشاط مضادات الأكسدة21. ومع ذلك ، فقد قارن عدد قليل فقط محتويات عديد السكاريد والأنشطة المضادة للأكسدة لأنواع مختلفة من فرس النهر ، مثل الأنواع الطبية H. rhamnoides subsp. sinensis و H. gyantsensis. لذلك ، حدد هذا العمل محتويات عديد السكاريد لنوعين من Hippophae من خلال قياس ألوان حمض الفينول والكبريتيك...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإفصاح عنه.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم دعم هذا العمل ماليا من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 82374145) ، ومؤسسة العلوم الطبيعية في مقاطعة سيتشوان (رقم 2025ZNSFSC0608) ، والمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم U23A20520)

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
الميزان التحليلي (بدقة 0.0001 جم)سارتوريوس للأدوات العلمية (بكين) المحدودةBSA224S-CW
التوازن التحليلي (بدقة 0.00001 جم)سارتوريوس للأدوات العلمية (بكين) المحدودةCPA225D
جهاز طرد مركزي منخفض السرعة على الطاولةشنغهاي Zigui أداة المحدودةطراز TD4K-Z
DPPHشنغهاي Yuanye التكنولوجيا الحيوية المحدودةسجل المستخلصات الكيميائية 1898-66-4
ايثانولتشنغدو كيلونج المنتجات الكيماوية المحدودةسجل في الباب 64-17-5
أنبوب EPهونان BKMAK القابضة المحدودةBS-20-م2 مل
مجفف التجميدشركة لابكونكولابكونكو
الجلوكوز اللامائيتشنغدو كيلونج المنتجات الكيماوية المحدودةسجل المستخلصات الكيميائية 50-99-7المعيار المرجعي
GraphPad   بريم 9.5.0 برنامج GraphPadغير متاححدد قيمة IC50 وقيمة P.
فرن تجفيف دوران الهواء الساخنشنغهاي Yiheng التكنولوجيا أداة المحدودةملحوظة-DGG-9070A
حمض الأسكوربيكبكين لابجيك التكنولوجيا المحدودةسجل المستخلصات الكيميائية 50-81-7دواء التحكم الإيجابي
قارئ الصفيحة الصغيرةشنغهاي شانبو التكنولوجيا الحيوية المحدودةقراءة 1500 كحد أقصى
لوحة 96 بئربكين لابجيك التكنولوجيا المحدودة11512
أوريجينبرو 2025مختبر أصلغير متاحإنشاء مخطط خطي لمعدل الخلوص
نصائح الماصةبكين لابجيك التكنولوجيا المحدودةBS-200-T200 μ L
نصائح الماصةبكين لابجيك التكنولوجيا المحدودةتي 1000 ب1000 μ L
الفينولتشنغدو كيلونج المنتجات الكيماوية المحدودةسجل المستخلصات الكيميائية 108-95-2
المبخر الدوار  بوتشي لتجارة معدات المختبرات (شنغهاي) المحدودةبوتشي R-100
نظام المياه النقية من نوع الكاشف القياسيتشينغداو فلوم التكنولوجيا المحدودةFBZ2001 حتى ص
حمام مائي بعرض رقمي ثرموستاتيشركة Guan'an Scientific Instruments (Zhejiang) Co.، Ltd.WB100-6F
مقياس الطيف الضوئي المرئي للأشعة فوق البنفسجيةشنغهاي مابادا للأدوات المحدودة ؛V-1100D
منظف بالموجات فوق الصوتيةشنغ تشنغ تشاوجي الصناعية المحدودةسي جيه - 060SDمنظف بالموجات فوق الصوتية 360 واط 50 هرتز

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chinese Pharmacopoeia Committee. Pharmacopoeia of the People's Republic of China. 1, Chinese Medical Science and Technology Press. (2025).
  2. Su, S. Y., et al. Structure elucidation, immunomodulatory activity, antitumor activity and its molecular mechanism of a novel polysaccharide from Boletusreticulatus Schaeff. Food Sci Hum Wellness. 12 (2), 647-661 (2023).
  3. Wang, Y. X., et al. Utilizing relative ordered structure theory to guide polysaccharide purification for structural characterization. Food Hydrocoll. 115, 106603(2021).
  4. Zhang, W., et al. Seabuckthorn berry polysaccharide protects against carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity in mice: via anti-oxidative and anti-inflammatory activities. Food Funct. 8 (9), 3130-3138 (2017).
  5. Wang, X., et al. Seabuckthorn berry polysaccharide extracts protect against acetaminophen induced hepatotoxicity in mice via activating the Nrf-2/HO-1-SOD-2 signaling pathway. Phytomedicine. 38, 90-97 (2018).
  6. Zhao, L., et al. Proteomic analysis reveals the molecular mechanism of Hippophae rhamnoides polysaccharide intervention in LPS-induced inflammation of IPEC-J2 cells in piglets. Int J Biol Macromol. 164, 3294-3304 (2020).
  7. Chen, J. H., Chen, X., Zhou, G. H., Xu, X. L. Ultrasound: a reliable method for regulating food component interactions in protein-based food matrices. Trends Food Sci Technol. 128, 316-330 (2022).
  8. Pundir, S., et al. Ethnomedicinal uses, phytochemistry and dermatological effects of Hippophae rhamnoides L.: A review. J Ethnopharmacol. 266, 113434(2021).
  9. Teng, H., He, Z. G., Hong, C. Z., Xie, S. Z., Zha, X. Q. Extraction, purification, structural characterization and pharmacological activities of polysaccharides from sea buckthorn (Hippophae rhamnoides L.): A review. J Ethnopharmacol. 324, 117809(2024).
  10. Niu, H., et al. Pectin-stabilized emulsions: Structure-emulsification relationships, covalent and non-covalent modifications, and future trends. Trends Food Sci Technol. 159, 104986(2025).
  11. Dou, Z. M., Chen, C., Huang, Q., Fu, X. The structure, conformation, and hypoglycemic activity of a novel heteropolysaccharide from the blackberry fruit. Food Funct. 12 (12), 5451-5464 (2021).
  12. Niu, H., et al. Multiscale combined techniques for evaluating emulsion stability: A critical review. Adv Colloid Interface Sci. 311, 102813(2023).
  13. Yuan, D., Li, C., Huang, Q., Fu, X. Ultrasonic degradation effects on the physicochemical, rheological and antioxidant properties of polysaccharide from Sargassum pallidum. Carbohydr Polym. 239, 116230(2020).
  14. Chen, R., et al. Extraction, structural characterization and biological activities of polysaccharides from mulberry leaves: A review. Int J Biol Macromol. 257, 128669(2024).
  15. Lei, J., et al. Pressurized hot water extraction, structural properties, biological effects, and in vitro microbial fermentation characteristics of sweet tea polysaccharide. Int J Biol Macromol. 222 (Pt B), 3215-3228 (2022).
  16. Chen, F., Huang, G. L. Antioxidant activity of polysaccharides from different sources of ginseng. Int J Biol Macromol. 125, 906-908 (2019).
  17. Chen, Y. F., Yang, H., Shen, Z. Z., Ye, J. R. Whole-genome sequencing and potassium-solubilizing mechanism of Bacillus aryabhattai SK1-7. Front Microbiol. 12, 722379(2022).
  18. Yun, Y. H., et al. A green method for the quantification of polysaccharides in Dendrobium officinale. RSC Adv. 5, 105057-105065 (2015).
  19. Kim, J. M., et al. Quantitative determination of fucoidan using polyion-sensitive membrane electrodes. Anal Chim Acta. 877, 1-8 (2015).
  20. Ogura, I., Sugiyama, M., Tai, R., Mano, H., Matsuzawa, T. Optimization of microplate-based phenol-sulfuric acid method and application to the multi-sample measurements of cellulose nanofibers. Anal Biochem. 681, 115329(2023).
  21. Wen, J., et al. Polysaccharides from sea buckthorn - Ultrasound-assisted enzymatic extraction, purification, structural characterization, and antioxidant activity analysis. Food Chem X. 26, 102265(2025).
  22. Yue, F. F., et al. Effects of monosaccharide composition on quantitative analysis of total sugar content by phenol-sulfuric acid method. Front Nutr. 9, 963318(2022).
  23. Dou, Z. M., et al. Pectin-type polysaccharides from raspberry (Rubus idaeus L.): structure characterization and activity against DSS-induced colitis. Carbohydr Polym. 364, 123710(2025).
  24. Li, Q., et al. α-D-1,3-glucan from Radix Puerariae thomsonii improves NAFLD by regulating the intestinal flora and metabolites. Carbohydr Polym. 299, 120197(2023).
  25. Dou, Z. M., Chen, C., Fu, X. Digestive property and bioactivity of blackberry polysaccharides with different molecular weights. J Agric Food Chem. 67 (45), 12428-12440 (2019).
  26. Zhou, S. Y., Huang, G. L., Huang, H. L. Extraction, derivatization and antioxidant activities of onion polysaccharide. Food Chem. 388, 133000-133009 (2022).
  27. Musa, K. H., Abdullah, A., Kuswandi, B., Hidayat, M. A. A novel high throughput method based on the DPPH dry reagent array for determination of antioxidant activity. Food Chem. 141 (4), 4102-4106 (2013).
  28. Garcia, E. J., et al. Antioxidant activity by DPPH assay of potential solutions to be applied on bleached teeth. Braz Dent J. 23 (1), 22-27 (2012).
  29. Wei, A., Shibamoto, T. Antioxidant/lipoxygenase inhibitory activities and chemical compositions of selected essential oils. J Agric Food Chem. 58 (12), 7218-7225 (2010).
  30. Song, Y. C. Extraction, purification and modulation of mice gut microbiota by sea buckthorn polysaccharides. , Xihua University. (2022).
  31. Dong, N., et al. Exploring quality variations of Polygonati Rhizoma during nine-steaming and nine-drying process through color-polysaccharides-antioxidant activity linkages. Chin Tradit Herbal Drugs. 56 (2), 476-486 (2025).
  32. Rumpf, J., Burger, R., Schulze, M. Statistical evaluation of DPPH, ABTS, FRAP, and Folin-Ciocalteu assays to assess the antioxidant capacity of lignins. Int J Biol Macromol. 233, 123470(2023).
  33. Zhang, C. C., et al. Research progress in microevolutionary process of excellent traits and quality of Dao-di herbs. Chin Mater Med. 48 (22), 6021-6029 (2023).
  34. Li, X. W., Zhang, H. T., Zhang, Z. J. The relation between contents of flavonoids in leaves of Hippophae tibetana Schlecht. and ecological factors. J Ecological Environ. 27 (02), 239-245 (2018).
  35. Li, C., et al. Characterization, antioxidant and immunomodulatory activities of polysaccharides from Prunella vulgaris Linn. Int J Biol Macromol. 75, 298-305 (2015).
  36. Cao, C., et al. Physicochemical characterization, potential antioxidant and hypoglycemic activity of polysaccharide from Sargassum pallidum. Int J Biol Macromol. 139, 1009-1017 (2019).
  37. Li, Q. Y., et al. A comparison study on structure-function relationship of polysaccharides obtained from sea buckthorn berries using different methods: antioxidant and bile acid-binding capacity. Food Sci Hum Wellness. 13 (1), 494-505 (2024).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

polysaccharides DPPH polysaccharides

مقالات ذات صلة