$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمثل أخطاء الربط 10-30٪ من الطفرات المسببة للأمراض المسؤولة عن الاضطرابات الوراثية النادرة. يضمن تضفير الحمض النووي الريبي التعبير الجيني الصحيح عن طريق الانضمام الانتقائي إلى exons وإزالة الإنترونات ، مع وجود التسلسلات التنظيمية الرئيسية داخل الإنترونات. يتفاعل موقع لصق 5 بوصات وموقع الفرع مع الحمض النووي الريبي النووي الصغير لتشكيل مركب التعرف على الجسيم الرسولي ، في حين أن عناصر مثل مجرى البولي بيريميدين ومحسنات / كاتمات صوت الربط تجند البروتينات لتنظيم تجميع الجسيم. يعد التنبؤ باضطرابات الربط من المتغيرات الداخلية أمرا صعبا بسبب تعقيد هذه التفاعلات.
قد تؤدي المتغيرات الداخلية ، التي تشكل 90٪ من الاختلافات الجينية البشرية الطبيعية ، إلى تعطيل التضفير الكنسي وتؤدي إلى الإصابة بالمرض. للتحقيق في هذا الاحتمال ، قمنا بتطوير مقايسة التضفير المتوازية على نطاق واسع (MaPSY) لتقييم المتغيرات الداخلية التي يحددها المريض. تم ربط قليل النوكليوتيدات المركبة مع التسلسلات المرجعية أو المتغيرة في الجينات المصغرة التي تحتوي على إشارات المحفز والبولي أدينيل. تضمن كل بناء إكسونين ثابتين يحيطان بإكسون متوسط يؤوي تسلسل تقاطع الإنترون والإكسون المتغير ذي الاهتمام. تمت مقارنة كفاءة الربط الخلوي للتسلسلات المتغيرة بنظيراتها المرجعية ، مما يسمح لنا بتحديد الاضطرابات الكبيرة كمتغيرات الربط.
يمكن التحقق من صحة نتائج MaPSy من خلال مناهج إضافية ، مثل فحوصات الجينات الصغيرة أو تحرير الجينوم بوساطة كريسبر في الجسم الحي. علاوة على ذلك ، يمكن أن يوفر التحليل الكلي للوصلات المعطلة رؤى أعمق لآليات الربط والأساس الجزيئي للأمراض المرتبطة بأخطاء الربط.