يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة بحثية

الكوليسترول والستيئاراميد يتوسط موت الخلايا المبرمج للخلايا الليمفاوية وإفراز السيتوكين في الذئبة الحمامية الجهازية

527 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/69038

⸱

أكتوبر 17, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Anhui University of Science & Technology, The First Hospital, 2Department of Rheumatism and Immunology, Peking University Shenzhen Hospital, 3School of Computer Science and Engineering, Anhui University of Science & Technology, 4Taizhou University of Medicine, 5School of Medicine, Anhui University of Science & Technology, 6Department of Radiotherapy, Shenzhen Traditional Chinese Hospital, the Fourth Clinical Medical College of Guangzhou University of Chinese Medicine, the Clinical Medical Research Center of Shenzhen People's Hospital, 7Anhui Provincial Academician Workstation of Anhui University of Science & Technology for Autoimmune Disease Diagnostic Technology, 8Departments of Nephrology, Shenzhen People's Hospital

في هذه المقالة

إشعار تصحيح

Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice

ملخص

هنا ، نقدم دراسة تدمج التوزيع العشوائي المندلي المكون من عينتين ، والتحقق من صحة الأيض المستند إلى الكروماتوغرافيا السائلة - قياس الطيف الكتلي (LC-MS) ، والمقايسات الوظيفية باستخدام الخلايا الليمفاوية المشتقة من المريض من الذئبة الحمامية الجهازية (SLE) لتقييم استجابات موت الخلايا المبرمج والسيتوكين بعد تحفيز المستقلب ، بهدف تحديد المؤشرات الحيوية المتعلقة بالدهون والتحقيق في أدوارها التنظيمية المناعية في مرض الذئبة الحمراء.

الملخص

ارتبطت التغيرات في تكوين مستقلبات المصل بشكل متزايد بالذئبة الحمامية الجهازية (SLE) ، ومع ذلك لا تزال التأثيرات المباشرة لهذه المستقلبات على وظيفة الخلايا المناعية غير محددة بشكل جيد. هدفت هذه الدراسة إلى تحديد مستقلبات الدم المحيطية المرتبطة بمرض الذئبة الحمراء وتقييم تأثيرها على موت الخلايا المبرمج وإفراز السيتوكين في الخلايا الليمفاوية المشتقة من مرضى الذئبة الحمراء.

أجرينا تحليلا عشوائيا مندليا من عينتين للتحقيق في العلاقة بين 565 مستقلبا في المصل ومرض الذئبة الحمراء ، باستخدام النموذج المرجح للتباين العكسي كنهج تحليلي أولي. تم التحقق من صحة النتائج المهمة باستخدام بيانات التمثيل الغذائي غير المستهدفة المنشورة سابقا بناء على قياس الطيف الكتلي للكروماتوغرافيا السائلة (LC-MS). في التجارب الوظيفية ، تم تحفيز الخلايا الليمفاوية المعزولة من مرضى مرض الذئبة الحمراء باستخدام مستقلبات مستهدفة ، متبوعا بتقييم موت الخلايا المبرمج وإفراز السيتوكين.

حدد تحليل التصوير بالرنين المغناطيسي 28 مستقلبا مرتبطا بشكل كبير بمرض الذئبة الحمراء. من بين هذه المجالات ، تم التحقق من صحة الكوليسترول (OR = 1.462 ، فاصل الثقة 95٪: 1.100-1.940 ، P = 0.008) والستيراميد (OR = 0.125 ، فاصل الثقة 95٪: 0.020-0.660 ، P = 0.014) من خلال LC-MS ووجد أنه مرتفع في مرضى الذئبة الحمراء. أظهر تحليل خصائص تشغيل جهاز الاستقبال أداء تشخيصيا قويا (AUC = 0.999 للكوليسترول. AUC = 1.000 للستيراميد). من الناحية الوظيفية ، تسبب كلا المستقلبات في زيادة موت الخلايا المبرمج وإفراز مرتفع ل TNF-α و IFN-γ و TGF-β1 في الخلايا الليمفاوية لمرض الذئبة الحمراء.

باختصار ، يكشف نهجنا المتكامل الذي يجمع بين الارتباط الجيني وتوصيف الأيض والمقايسات الوظيفية أن الكوليسترول قد يساهم في خلل التنظيم المناعي في مرض الذئبة الحمراء. على الرغم من أن ستيئاراميد أظهر ارتباطا سلبيا بخطر مرض الذئبة الحمراء في تحليل التصوير بالرنين المغناطيسي ، إلا أن آثاره في المختبر عكست تأثيرات الكوليسترول ، مما يشير إلى دور معقد ويعتمد على السياق. تؤكد هذه النتائج على أهمية استقلاب الدهون في مرض الذئبة الحمراء وتدعم المزيد من التحقيقات الميكانيكية والسريرية لتأثيرها المناعي.

المقدمة

الذئبة الحمامية الجهازية (SLE) هو مرض مناعي ذاتي مزمن ، يتميز بالتسبب المعقد والمظاهر السريرية المتنوعة ، والذي يصيب ملايين الأشخاص في جميع أنحاء العالم1. إن عدم تجانس مرض الذئبة الحمراء - حيث تختلف الأعراض بشكل كبير بين الأفراد وتتطور بمرور الوقت - يخلق تحديات كبيرة في التشخيص ومراقبة نشاط المرض وتصميم خطط العلاج الشخصية2،3. على الرغم من أن معايير تصنيف الرابطة الأوروبية لمكافحة الروماتيزم لعام 2019 والكلية الأمريكية لأمراض الروماتيزم (EULAR / ACR) SLE قد حسنت دقة التشخيص4 ، إلا أن هذه المعايير لا تلتقط جميع مظاهر المرض وغالبا ما تعتمد على إجراءات جراحية مثل خزعة الكلى ، والتي يمكن أن تكون غير عملية ومرهقة للمرضى.

في السنوات الأخيرة ، تتزايد الأبحاث حول مستقلبات المستقلب كمؤشرات حيوية في مرض الذئبة الحمراء ، مما يدل على إمكاناتها الهائلة في التشخيص المبكر للمرض والطباعة والتقييم التنبؤي5،6،7. ومع ذلك ، فإن الإمكانات الانتقالية للأبحاث القائمة على الأيض في مرض الذئبة الحمراء لا تزال محدودة بالعديد من التحديات الرئيسية. أولا ، تعد أحجام العينات الصغيرة عائقا رئيسيا8. تضمنت معظم الدراسات الأيضية حتى الآن عددا قليلا نسبيا من المشاركين ، مما يحد من قدرتهم على التقاط عدم التجانس السريري الكامل لمرض الذئبة الحمراء. بالنظر إلى أن مرض الذئبة الحمراء يمكن أن يتراوح من الإصابة الجلدية الخفيفة إلى المظاهر الكلوية أو العصبية الشديدة ، فإن الدراسات ذات التنوع الناكافي للعينات قد تعاني من ضعف قابلية التكاثر وقابلية التعميمالمحدودة 9. ثانيا ، لا يزال العمق الميكانيكي غير موجود. في حين أن الدراسات السابقة أظهرت ارتباطات بين مستقلبات معينة ونشاط المرض أو تلف الأعضاء أو سمات سريرية معينة ، تظل معظم النتائج وصفية بطبيعتها10. ركزت هذه التحقيقات إلى حد كبير على الاختلافات الكمية في مستويات المستقلب وارتباطاتها الإحصائية بالمؤشرات السريرية ، دون استكشاف الأدوار السببية للمستقلبات في علم الأمراض المناعية لمرض الذئبة الحمراء. نظرا لأن عدم التنظيم المناعي - بما في ذلك موت الخلايا المبرمج الشاذ للخلايا الليمفاوية وإفراز السيتوكين غير المتوازن - أمر أساسي للتسبب في مرض الذئبة الحمراء ، فإن فهم كيفية تأثير المستقلبات على هذه العمليات أمر بالغ الأهمية11. في الوقت الحالي ، بحثت دراسات قليلة بشكل مباشر في كيفية تعديل مستقلبات معينة لموت الخلايا المبرمج للخلايا المناعية أو إنتاج السيتوكين في سياق مرض الذئبة الحمراء.

هنا ، تهدف هذه الدراسة إلى تحديد المؤشرات الحيوية الأيضية المرتبطة بمرض الذئبة الحمراء من خلال دمج تحليلات التمثيل الغذائي غير المستهدفة العشوائية المندلية (MR) و LC-MS ، وتوضيح الأدوار الوظيفية لهذه المستقلبات المرشحة في تعديل موت الخلايا المبرمج للخلايا الليمفاوية وإنتاج السيتوكين الالتهابي باستخدام المقايسات المستهدفة القائمة على الخلايا ، كما هو موضح في الشكل 1.

هذه هي الدراسة الأولى التي تدمج التصوير بالرنين المغناطيسي ، والتحقق من صحة التمثيل الغذائي ، والمقايسات الوظيفية في المختبر للتحقيق في الأدوار السببية والميكانيكية لمستقلبات الدهون - وخاصة الكوليسترول والستيراهاميد - في التسبب في مرض الذئبة الحمراء. من خلال الجمع بين الأدلة الجينية والتمثيلية والتجريبية ، يوفر هذا العمل نظرة ثاقبة شاملة ومتعددة الطبقات حول كيفية تأثير التغيرات الدهنية المحددة على اختلال التنظيم المناعي في مرض الذئبة الحمراء. يقدم هذا النهج التكاملي إطارا جديدا لتحديد المؤشرات الحيوية الأيضية المحتملة والأهداف العلاجية في أمراض المناعة الذاتية12.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

أجريت هذه الدراسة وفقا لمعايير تصنيف EULAR / ACR لعام 2019. تمت الموافقة على هذه الدراسة من قبل مستشفى شنتشن الشعبي (رقم موافقة لجنة الأخلاقيات LL-KY-2019514).

تحليل التوزيع العشوائي المندلي (MR)

مصادر بيانات GWAS
تم الحصول على بيانات الارتباط الجيني لمرض الذئبة الحمراء و 565 مستقلبا من قاعدة بيانات OpenGWAS (https://gwas.mrcieu.ac.uk/). يتم تلخيص مجموعات بيانات GWAS للمرض في الجدول 1 ، بينما يتم تفصيل المصادر وأحجام العينات لبيانات GWAS للمستقلب في الجدول 2. قدمت مجموعات البيانات هذه الأساس لتحليل التصوير بالرنين المغناطيسي لاستكشاف العلاقات السببية بين المستقلبات و SLE13،14،15،16.

اختيار المتغيرات الآلية
تم اختيار المتغيرات الجينية المرتبطة بمستقلبات الدم ومرض الذئبة الحمراء كمتغيرات مفيدة (IVs) لتحليل التصوير بالرنين المغناطيسي. تم اختيار IVs بناء على الافتراضات الأساسية الثلاثة ل MR: الملاءمة والاستقلالية وتقييد الاستبعاد17. على وجه التحديد ، تم اختيار تعدد أشكال النوكليوتيدات المفردة (SNPs) المرتبطة بالمستقلبات عند عتبة أهمية على مستوى الجينوم تبلغ P < 5 × 10-8 18. لضمان الاستقلال بين الوريدات ، تم إجراء تكتل عدم توازن الارتباط (LD) بحتبةr 2 < 0.001 ومسافة مادية قدرها 10,000 كيلوبايت باستخدام السكان الأوروبيين كلوحة مرجعية19. أدت هذه العملية إلى تقليل التكرار وضمنت أن كل IV يوفر معلومات فريدة لتحليل التصوير بالرنين المغناطيسي.

التحليلات الإحصائية
كان المنهج الإحصائي الأولي لتحليل التصوير بالرنين المغناطيسي هو طريقة التباين العكسي المرجح (IVW) ، والتي تجمع بين تأثيرات الوريدات المتعددة لتقدير التأثير السببي للمستقلبات على مرض الذئبة الحمراء20. لحساب تعدد الأشكال المحتمل ، أجريت تحليلات الحساسية باستخدام انحدار MR-Egger21. تم تقييم قوة كل IV باستخدام إحصائيات F ، مع الاحتفاظ فقط بتعدد الأشكال التي تظهر F > 10 لضمان قوة الأداةالقوية 22. تم استبعاد SNPs ذات إحصائيات F أقل لتجنب تحيز الأداة الضعيف. تم إجراء تحليلات التصوير بالرنين المغناطيسي النهائية فقط عندما لم يتم الكشف عن عدم تجانس أو تعدد الأشكال بشكل كبير ، مما يضمن موثوقية التقديرات السببية23.

تحليلات الحساسية
تم استخدام العديد من تحليلات الحساسية لتقييم متانة نتائج التصوير بالرنين المغناطيسي. تم تقييم عدم التجانس بين الوريدين باستخدام اختبار كوكران Q ، بينما تم تقييم تعدد الأشكال عبر انحدار MR-Egger24. بالإضافة إلى ذلك ، تم إجراء تحليل ترك واحد لتحديد ما إذا كانت نتائج MR قد تأثرت بشكل غير متناسب بأي SNP25 واحد. تم إنشاء قطع أراضي الغابات لتصور التأثيرات الفردية والمشتركة للوريد. ضمنت هذه التحليلات بشكل جماعي أن نتائج التصوير بالرنين المغناطيسي لم تكن متحيزة بسبب تأثيرات تعدد الاتجاهات أو تعدد الأشكال المتطرفة.

مصدر بيانات التمثيل الغذائي
تم اشتقاق بيانات التمثيل الغذائي المستخدمة في هذه الدراسة من دراسة نشرت سابقا من قبل مجموعتناالبحثية 10. في تلك الدراسة ، أجرينا تحليلات التمثيل الغذائي على عينات مصل الدم من 121 مريضا بمرض الذئبة الحمراء و 106 من الأفراد الأصحاء. تم إجراء تنميط التمثيل الغذائي غير المستهدف باستخدام كروماتوغرافيا سائلة فائقة الأداء مقترنة بقياس الطيف الكتلي (UHPLC-MS). تمت معالجة البيانات باستخدام سير عمل التمثيل الغذائي القياسي ، بما في ذلك اكتشاف الذروة والمحاذاة والتطبيع ، لتحديد المستقلبات المرتبطة بشكل كبير بمرض الذئبة الحمراء. ثم تمت الإشارة إلى هذه المستقلبات مع نتائج تحليل التصوير بالرنين المغناطيسي لتحديد المستقلبات المتداخلة. يمكن العثور على مزيد من المعلومات التفصيلية في المنشور السابق10. تم تعيين المستقلبات المرتبطة بشكل كبير في تحليل التمثيل الغذائي وتلك التي لها ارتباطات سببية كبيرة في تحليل التصوير بالرنين المغناطيسي إلى معرفات HMDB الخاصة بها باستخدام منصة MetaboAnalyst. ثم تم تحديد المستقلبات الشائعة عن طريق تقاطع مجموعتين من معرفات HMDB.

قياسات السيتوكين ومقايسة موت الخلايا المبرمج
تم تسجيل ما مجموعه 3 مرضى من مرض الذئبة الحمراء (الجدول 3) ، وفقا لمعايير تصنيف EULAR / ACR لعام 2019.

جمع عينات الدم المحيطية وعزل الخلايا الليمفاوية
تم جمع عينات الدم المحيطية (3-6 مل) من المشاركين باستخدام أنابيب مفرغة تحتوي على الهيبارين الصوديوم كمضاد للتخثر. تم عزل خلايا الدم المحيطية أحادية النواة (PBMCs) عن طريق الطرد المركزي المتدرج بكثافة Ficoll-Paque (400-800 × جم لمدة 20-30 دقيقة). تم غسل الخلايا المعزولة مرتين باستخدام محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS ، HyClone) عن طريق الطرد المركزي منخفض السرعة (250 × جم لمدة 10 دقائق) وأعيد تعليقها في وسط RPMI-1640 كامل مكمل ب 10٪ مصل أبقار الجنين. تم تعديل كثافة الخلية إلى 1 × 106 خلايا / مل ، كما تم التحقق منها بواسطة عداد الخلايا التلقائي. تم زرع معلق الخلية في ألواح الاستزراع واحتضانه مسبقا لمدة ساعتين عند 37 درجة مئوية في جو 5٪ من ثاني أكسيد الكربون2 لتعزيز الالتصاق. بعد ما قبل الحضانة ، تم جمع الخلايا غير الملتصقة في المادة الطافية المزرعة بعناية وإخضاعها لعزل الخلايا الليمفاوية. تم وضع نظام التعليق الذي تم جمعه برفق فوق Ficoll-Paque وتم طرده بالطرد المركزي مرة أخرى عند 400 × جم لمدة 20 دقيقة بدون فرامل. تم شفط طبقة الخلية أحادية النواة في واجهة البلازما وفيكول بعناية ، وغسلها مرتين بمحلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS) ، وأعيد تعليقها في وسط RPMI-1640 يحتوي على 10٪ من مصل أبقار الجنين. تم تقييم صلاحية الخلية وتركيزها باستخدام عداد الخلايا الأوتوماتيكي ، وتم استخدام الخلايا الليمفاوية لاحقا للتطبيقات النهائية.

العلاج الخلوي والثقافة
تم تقسيم الخلايا إلى خمس مجموعات للعلاج: المجموعة الضابطة: عولجت بحجم متساو من DMSO. مجموعة معالجة الكوليسترول: تعامل بالكوليسترول بتركيز 1.5 مليمول / لتر. تم اختيار تركيز 1.5 مليمول / لتر من الكوليسترول الحر المستخدم في هذه الدراسة لمحاكاة بيئة مكروية غنية بالدهون تتجاوز المستويات الفسيولوجية. عادة ما يتراوح تعميم الكوليسترول الحر لدى الأفراد الأصحاء من 0.9-1.3 مليمول / لتر. كان الغرض من التركيز المرتفع قليلا المستخدم في هذه التجارب هو تقليد تراكم الدهون المرضي الذي قد يحدث في الأنسجة الملتهبة أو المضطربة أيضيا في مرض الذئبة الحمراء. مجموعات معالجة الستيراميد: تعامل بالستيياراميد بتركيزات 5 ميكرول/لتر و10 ميكرول/لتر. تم اختيار تركيزات الستيياراميد (5 و 10 ميكرول/لتر) بناء على تقرير سابق26 ، والذي أشار إلى أن مستويات الستيراميد في حدود 5-10 ميكرول/لتر قد تحاكي تراكم الدهون المرتفع في ظل الظروف المرضية. كان القصد هنا هو استكشاف التأثيرات المؤيدة لموت الخلايا المبرمج والمناعة للتعرض للدهون عالية التركيز على الخلايا الليمفاوية الذئبة الحمراء ، ومحاكاة الحالات الالتهابية أو غير المنظمة الأيضية. تم إذابة الكوليسترول والستيئاراميد أولا في DMSO لتحضير محاليل مخزون عالية التركيز ، والتي تم تخفيفها بعد ذلك في وسط الاستزراع لتحقيق التركيزات المستهدفة. لم يتجاوز التركيز النهائي ل DMSO في جميع المجموعات 0.1٪ (حجم / حجم). بعد إضافة المعالجات المعنية ، تم هز الألواح برفق لضمان التوزيع المتساوي واحتضانها لمدة 48 ساعة عند 37 درجة مئويةفي بيئة 5٪ من ثاني أكسيد الكربون.

مقايسة موت الخلايا المبرمج
بالنسبة لتجارب موت الخلايا المبرمج ، تم جمع 1 ×10 6 إلى 3 × 106 خلايا وغسلها مرتين باستخدام PBS المبردة مسبقا. تم إعداد مجموعة تحكم إيجابية عن طريق تعليق الخلايا في 500 ميكرولتر من محلول التحكم الإيجابي لموت الخلايا المبرمج المبرد مسبقا واحتضانها على الثلج لمدة 30 دقيقة ، متبوعا بغسل آخر من PBS. عولجت المجموعات التجريبية كما هو موضح في القسم 1.7 ، مع معالجات الكوليسترول (1.5 مليمول / لتر) والستيراميد. بعد المعالجة ، تم جمع 1-10 × 105 خلايا (بما في ذلك تلك الموجودة في الطافق المزرعة) وتعليقها في 500 ميكرولتر من 1× Binding Buffer (تم تحضيرها عن طريق تخفيف محلول مخزون 5× بالماء المقطر المزدوج). تم خلط كل عينة بعدد متساو من الخلايا الحية غير المعالجة ، وتم تعديل الحجم إلى 1.5 مل مع 1× Binding Buffer المبرد مسبقا. ثم تم تقسيم التعليق إلى ثلاثة أنابيب: واحد للتحكم الفارغ واثنان للتعويض عن البقعة المفردة (الملحق V-FITC و PI). تمت إضافة 5 ميكرولتر من Annexin V-FITC و 10 ميكرولتر من محلول تلطيخ PI لكل أنبوب تجريبي ، متبوعا بالدوامة والحضانة في درجة حرارة الغرفة في الظلام لمدة 5 دقائق. تم إجراء قياس التدفق الخلوي باستخدام ليزر الإثارة 488 نانومتر للكشف عن Annexin V-FITC (الانبعاث عند 530 نانومتر) و PI (الانبعاث عند 615 نانومتر). تم استخدام أنبوب التحكم الفارغ لضبط التشتت الأمامي (FSC) ، والتشتت الجانبي (SSC) ، وفولتية قناة التألق ، بينما تم استخدام الأنابيب أحادية البقعة لتعويض التألق. تم تحليل موت الخلايا المبرمج باستخدام مخططات تشتت مزدوجة المعلمات لتقييم نسبة الخلايا المبرمج27،28.

كشف العوامل المناعية
بعد الحضانة لمدة 48 ساعة ، تم طرد معلقات الخلايا (250 × جم لمدة 5 دقائق) لجمع المواد الطافية المزرعة ، والتي تم تخزينها عند -80 درجة مئوية حتى التحليل. تم إجراء القياس الكمي للسيتوكين باستخدام لوحة الاستجابة المناعية الأساسية البشرية التجارية ، باتباع تعليمات الشركة المصنعة مع تحسينات للأداة. باختصار ، تمت إضافة 25 ميكرولتر من مخزن الفحص و 25 ميكرولتر من المعايير (تتراوح من 2.4 إلى 10,000 بيكوغرام / مل) أو عينات إلى كل بئر من صفيحة دقيقة. تم دوامة خليط الخرزة لمدة 30 ثانية وإضافته إلى الآبار ، ليصل حجم التفاعل الإجمالي إلى 75 ميكرولتر. تم تحضين اللوحة بالاهتزاز (800 دورة في الدقيقة) في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين في الظلام. بعد غسلتين آليتين (1× مخزن مؤقت للغسيل ، 250 × جم لمدة 5 دقائق) ، تمت إضافة 25 ميكرولتر من الجسم المضاد للكشف عن البيوتينيل إلى كل بئر واحتضانته لمدة ساعة واحدة. بعد ذلك ، تمت إضافة 25 ميكرولتر من الستربتافيدين فيكواريثرين (SA-PE) لمدة 30 دقيقة لتضخيم الإشارة.

تم الحصول على البيانات باستخدام مقياس التدفق الخلوي المزود بليزر إثارة 488 نانومتر ومرشح 575/26 نانومتر للكشف عن PE. قبل كل تجربة ، تم استخدام حبات المعايرة لتحسين الفولتية الأنبوبية الضوئية والتعويض الطيفي. تم تحليل البيانات باستخدام برنامج LEGENDplex v8.0 ، مع تحديد تركيزات السيتوكين من خلال تركيب منحنى لوجستي من خمس معلمات (5PL). تراوحت حدود الكشف لكل سيتوكين من 0.68 بيكوغرام / مل إلى 1.97 بيكوغرام / مل ، وأجريت التجارب بشكل مكرر لضمان الدقة (معامل التباين بين الآبار <10٪). تم التعبير عن النتائج كمتوسط ±± انحراف معياري ، وتم تقييم الاختلافات الإحصائية بين المجموعات باستخدام ANOVA أحادي الاتجاه متبوعا باختبار Tukey اللاحق في برنامج تحليل إحصائي مناسب. تم اختيار فترة الحضانة البالغة 48 ساعة بناء على التغيرات الديناميكية في إفراز السيتوكين لالتقاط الاستجابة المناعية بشكل شامل. ضمنت معايرة الأدوات اليومية والتحكم في تركيز DMSO (≤0.1٪) موثوقية النتائج وقابليتها للتكرار29،30،31.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

الارتباط بين المستقلبات الرئيسية والمظاهر السريرية في مرض الذئبة الحمراء

في هذه الدراسة ، حدد تحليل التصوير بالرنين المغناطيسي ل 565 مستقلبا مع مرض الذئبة الحمراء ارتباطات سببية مهمة. كما هو موضح في الشكل 2 ، تم تحديد ما مجموعه 28 مستقلبا مرتبطا بشكل كبير بمرض الذئبة الحمراء ، بما في ذلك فئات مثل الببتيدات والأحماض الأمينية والطاقة والدهون والكربوهيدرات والأحماض الدهنية. كانت الببتيدات مثل جاما جلوتاميل فينيل ألانين وبرو هيدروكسي برو ، والأحماض ال...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

توضح دراستنا أن 1.5 مليمول / لتر كوليسترول ، و 5 ميكرومول / لتر ستيئاراميد ، و 10 ميكرومول / لتر ستيئاراميد تحفز أنماطا مماثلة من موت الخلايا المبرمج وإفراز السيتوكين في الخلايا الليمفاوية من مرضى مرض الذئبة الحمراء ، على الرغم من ملاحظة اختلافات في الحجم. على وجه التحديد ، زاد كل من 1.5 مليمول / لتر من الكوليسترول و 5 ميكرولتر / لتر ستيئاراميد بشكل كبير من موت الخلايا المبرمج في الخلايا الليمفاوية الذئبة الحمراء. بالإضافة إلى ذلك ، فإن العلاج ب 1.5 مليمول / لتر كوليسترول بالاشتراك مع 5 ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح متضاربة.

شكر وتقدير

تم دعم هذا البحث من قبل مشروع صندوق ابتكار الخريجين التابع لجامعة آنهوي للعلوم والتكنولوجيا (رقم 2024cx2204) ، ومحطة العمل الأكاديمية لمقاطعة آنهوي (محطة العمل الأكاديمية لمقاطعة آنهوي (تقنيات التشخيص لاضطرابات المناعة الذاتية) ، جامعة آنهوي للعلوم والتكنولوجيا ، هوينان ، آنهوي 232001 ، الصين) (الوثيقة رقم 317 [2023] ، الصادرة عن قسم العلوم والتكنولوجيا في مقاطعة آنهوي) ، صندوق البحوث الأساسية الأساسية والتطبيقية لمقاطعة قوانغدونغ (رقم 2021A1515110250) ، المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 82271824).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
مجموعة الاستماتة Annexin V-FITC/PIالعلوم المتعددةAP101للكشف عن المبرمج المبرمج عبر قياس خلوية التدفق
كولسترولشركة شنغهاي جينبان للتكنولوجيا الحيوية المحدودة.JP1210051يستخدم في تجارب التحفيز في PBMCs (10 جرام)
إدخال الحوض المضادكورنينجCBG10001يستخدم لفصل الخلايا فعليا في تجارب الزراعة المشتركة
مقياس التدفق الخلويبيكمان كولترسايتو فليكستحليل التدفق الخلوي
برنامج جراف باد بريزمجراف بادالتحليل الإحصائي والرسوم البيانية
لوحة الاستجابة المناعية الأساسية للبشر في LEGENDplexبيو ليجند740390الكشف المتعدد عن السيتوكينات المرتبطة بالمناعة
مجموعة ميكروبايبت إبندورفمختلفمناولة السوائل ونقل الحجم (0.1– 10 μ L، 10" 100 μ L، 100– 1000 μ L)
وسط فصل الخلايا اللمفاوية الدموية المحيطيةالمصنع المحليB1.1420Aيستخدم لعزل PBMC (200 مل)
RPMI-1640 متوسطجيبكوC22400500BTوسيلة الزراعة لأجهزة PBMC
ستيراميدشركة شنغهاي جينبان للتكنولوجيا الحيوية المحدودة.1267285يستخدم لتحفيز الدهون في PBMCs (100 جم)
صفيحة معقمة ذات 24 بئرالمصنع المحليBLJ182Aلزراعة الخلايا
كاونت ستارشنغهاي روييو للتكنولوجيا الحيويةCS200عداد الخلايا الأوتوماتيكي
برنامج تلفزيونيهايكلون10010023غسل الخلايا
فيكول-باك  سيتيفا17-5442-03عزل الخلايا الزلالية
برنامج LEGENDplex  بيو ليجندالإصدار 8تحليل بيانات قياس تدفق الخلايا
جراف باد بريزم 9.0برنامج جراف بادالإصدار 9التحليل الإحصائي

المراجع

  1. Barber, M. R., et al. Global epidemiology of systemic lupus erythematosus. Nat Rev Rheumatol. 17 (8), 515-532 (2021).
  2. Owen, K. A., Grammer, A. C., Lipsky, P. E. Deconvoluting the heterogeneity of SLE: the contribution of ancestry. J Allergy Clin Immunol. 149 (1), 12-23 (2022).
  3. Allen, M. E., Rus, V., Szeto, G. L. Leveraging heterogeneity in systemic lupus erythematosus for new therapies. Trends Mol Med. 27 (2), 152-171 (2021).
  4. Aringer, M., et al. European League against Rheumatism (EULAR)/American College of Rheumatology (ACR) SLE classification criteria item performance. Ann Rheum Dis. 80 (6), 775-781 (2021).
  5. Yoon, N., Jang, A. K., Seo, Y., Jung, B. H. Metabolomics in autoimmune diseases: Focus on rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematous, and multiple sclerosis. Metabolites. 11 (8), 812(2021).
  6. Liang, J., et al. Targeted metabolomics combined with machine learning to identify and validate new biomarkers for early SLE diagnosis and disease activity. Clin Immunol. 264, 110235(2024).
  7. Liu, Y., Yang, X. A review on the novel biomarkers of systemic lupus erythematosus discovered via metabolomic profiling. Front Immunol. 15, 1443440(2024).
  8. Cheng, S., et al. Uncovering potential biomarkers and metabolic pathways in systemic lupus erythematosus and lupus nephritis through integrated microbiome and metabolome analysis. BMC Microbiol. 25 (1), 275(2025).
  9. Júnior, V. F. A. J. A., Silva, S. M., Amaral, A. L., Perini, J. V. deF. V., dos Santos, J. E. N. Systemic lupus erythematosus (SLE): Most common clinical manifestations and renal complications. Braz J Implantol Health Sci. 6, 647-660 (2024).
  10. He, J., et al. Serum proteome and metabolome uncover novel biomarkers for the assessment of disease activity and diagnosing of systemic lupus erythematosus. Clin Immunol. 251, 109330(2023).
  11. Moysidou, E., et al. Lymphocytes change their phenotype and function in systemic lupus erythematosus and lupus nephritis. Int J Mol Sci. 25, 10905(2024).
  12. Deng, P., Li, Z., Yi, B., Leng, Y. A Mendelian randomization study to assess the genetic liability of type 1 diabetes mellitus for IgA nephropathy. Front Endocrinol. 13, 874562(2022).
  13. Wang, Y. F., et al. Identification of 38 novel loci for systemic lupus erythematosus and genetic heterogeneity between ancestral groups. Nat Commun. 12, 772(2021).
  14. Hom, G., et al. Association of systemic lupus erythematosus with C8orf13-BLK and ITGAM-ITGAX. N Engl J Med. 358, 900-909 (2008).
  15. Shin, S. Y., et al. An atlas of genetic influences on human blood metabolites. Nat Genet. 46, 543-550 (2014).
  16. Kettunen, J., et al. Genome-wide study for circulating metabolites identifies 62 loci and reveals novel systemic effects of LPA. Nat Commun. 7, 11122(2016).
  17. Moodie, E. E., le Cessie, S. Instrumental variables analysis and mendelian randomization for causal inference. J Infect Dis. 231 (3), 556-558 (2025).
  18. Zhang, S., Zhang, W., Sun, H., Xue, R., Lv, Q. Therapeutic potential of single-nucleotide polymorphism-mediated interleukin-6 receptor blockade in cancer treatment: A Mendelian randomization study. Heliyon. 9, (2023).
  19. Yuan, S., Larsson, S. C., Gill, D., Burgess, S. Concerns about instrumental variable selection for biological effect versus uptake of proton pump inhibitors in Mendelian randomisation analysis. Gut. 74, e6-e6 (2025).
  20. Lin, Z., Deng, Y., Pan, W. Combining the strengths of inverse-variance weighting and Egger regression in Mendelian randomization using a mixture of regressions model. PLoS Genet. 17 (1), e1009922(2021).
  21. Markozannes, G., et al. Systematic review of Mendelian randomization studies on risk of cancer. BMC Med. 20, 41(2022).
  22. Li, Y., et al. The effects of coagulation factors on the risk of endometriosis: a Mendelian randomization study. BMC Med. 21, 195(2023).
  23. Grant, A. J., Burgess, S. Pleiotropy robust methods for multivariable Mendelian randomization. Stat Med. 40 (25), 5813-5830 (2021).
  24. Wang, C., Zhang, J., Han, F., Liu, D., Han, Y. No evidence for a causal link between Helicobacter pylori infection and irritable bowel syndrome: a Mendelian randomization study. Front Microbiol. 14, 1268492(2024).
  25. Zhu, K., Shi, J., Yang, R., Zhou, C., Liu, Z. Evidence based on Mendelian randomization: causal relationship between mitochondrial biological function and lung cancer and its subtypes. Neoplasia. 46, 100950(2023).
  26. Lin, F., Wang, Z., Xiang, L., Deng, L., Cui, W. Charge-guided micro/nano-hydrogel microsphere for penetrating cartilage matrix. Adv Funct Mater. 31, 2101132(2021).
  27. Chen, L. J., et al. Long non-coding RNA 01614 hyperactivates WNT/β-catenin signaling to promote pancreatic cancer progression by suppressing GSK-3β. Int J Oncol. 61, 116(2022).
  28. Zhao, J., Liang, K., Zhong, H., Liu, S., He, R., Sun, P. A cold-water polysaccharide-protein complex from Grifola frondosa exhibited antiproliferative activity via mitochondrial apoptotic and Fas/FasL pathways in HepG2 cells. Int J Biol Macromol. 218, 1021-1032 (2022).
  29. Tovar Acero, C., et al. IL-4, IL-10, CCL2 and TGF-β as potential biomarkers for severity in Plasmodium vivax malaria. PLoS Negl Trop Dis. 16, e0010798(2022).
  30. Strengert, M., et al. Cellular and humoral immunogenicity of a SARS-CoV-2 mRNA vaccine in patients on haemodialysis. EBioMedicine. 70, 103524(2021).
  31. Bhandi, S., et al. Modulation of the dental pulp stem cell secretory profile by hypoxia induction using cobalt chloride. J Pers Med. 11, 247(2021).
  32. Mao, C., et al. Alpha-ketoglutarate alleviates systemic lupus erythematosus-associated periodontitis in a novel murine model. J Clin Periodontol. 52, 457-470 (2025).
  33. Vaishnav, P., Yoo, Y. J., Yoon, Y. J., Demain, A. L. Immunosuppressants: Remarkable Microbial Products. Bioactive Nat. Prod. Chem. Biol. , 43-82 (2014).
  34. Shi, W., et al. Causal effect of three autoimmune diseases on brain functional networks and cerebrospinal fluid metabolites to underlie the pathogenesis of autoimmune psychosis: a two-sample Mendelian randomization analysis. J Transl Med. 23, 440(2025).
  35. Baig, S., Vanarsa, K., Ding, H., Titus, A., McMahon, M., Mohan, C. Baseline elevations of leukotriene metabolites and altered plasmalogens are prognostic biomarkers of plaque progression in systemic lupus erythematosus. Front Cardiovasc Med. 9, 861724(2022).
  36. Warda, M., et al. Lipid rafts: novel therapeutic targets for metabolic, neurodegenerative, oncological, and cardiovascular diseases. Lipids Health Dis. 24, 147(2025).
  37. Hu, C., Wu, H., Zhu, Q., Cao, N., Wang, H. Cholesterol metabolism in T-cell aging: accomplices or victims. FASEB J. 37, e23136(2023).
  38. Song, Y., Liu, J., Zhao, K., Gao, L., Zhao, J. Cholesterol-induced toxicity: an integrated view of the role of cholesterol in multiple diseases. Cell Metab. 33, 1911-1925 (2021).
  39. Wei, Y., Wang, D., Topczewski, F., Demain, A. L. Saturated fatty acids induce endoplasmic reticulum stress and apoptosis independently of ceramide in liver cells. Am J Physiol-Endocrinol Metab. 291 (2), E275-E281 (2006).
  40. Rámek, J., Němcová-Fürstová, V., Pavlíková, N., Kovář, J. Effect of saturated stearic acid on MAP kinase and ER stress signaling pathways during apoptosis induction in human pancreatic β-cells is inhibited by unsaturated oleic acid. Int J Mol Sci. 18 (11), 2313(2017).
  41. Westerterp, M., et al. Cholesterol accumulation in dendritic cells links the inflammasome to acquired immunity. Cell Metab. 25 (6), 1294-1304.e6 (2017).
  42. Chen, J., et al. UPLC-MS/MS-based plasma lipidomics reveal a distinctive signature in systemic lupus erythematosus patients. MedComm (2020). 2 (2), 269-278 (2021).
  43. López, P., et al. Low-density granulocytes and monocytes as biomarkers of cardiovascular risk in systemic lupus erythematosus. Rheumatology (Oxford). 59 (7), 1795(2020).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

تصحيح


Formal Correction: Erratum: Cholesterol and Stearamide Mediate Lymphocyte Apoptosis and Cytokine Secretion in Systemic Lupus Erythematosus
Posted by JoVE Editors on 11/18/2025. Citeable Link.

This corrects the article 10.3791/69038

الوسوم

تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.