تمت الموافقة على هذه الدراسة من قبل لجنة الأخلاقيات الطبية في مستشفى الصناعة النووية بمقاطعة شنشي 215 (الموافقة رقم 2023-LC-011) وتم إجراؤها وفقا لمبادئ إعلان هلسنكي. تم الحصول على موافقة مستنيرة من جميع المشاركين أو الأوصياء القانونيين عليهم قبل التسجيل.
1. تفاصيل المريض
تم تسجيل ما مجموعه 64 مريضا (45 ذكرا و 19 أنثى) تم تشخيص إصابتهم بسرطان الرئة (LC) بين أكتوبر 2023 وأبريل 2024. التزم التشخيص والعلاج بإرشادات التشخيص والعلاج السريري لسرطان الرئة (الجمعية الطبية الصينية ، طبعة 2023). كانت معايير الشمول كما يلي: ضيق التنفس التدريجي الذي يستمر لأكثر من 3 أشهر ، والسعال الجاف ، وضعف وظائف الرئة المقيد مع انخفاض القدرة على نشر أول أكسيد الكربون (DLCO) ، ونقص الأكسجة الشرياني الجهدي ، ووجود طقطقة الشهيق عند التسمع. تضمنت معايير الاستبعاد تاريخا سابقا للعلاج الإشعاعي أو العلاج الكيميائي ، والأمراض الجهازية المتزامنة (على سبيل المثال ، أمراض الدم أو الغدد الصماء أو الكبد أو الكلى) ، والحمل أو الرضاعة ، والتوثيق السريري غير المكتمل.
تم تضمين خمسة عشر مريضا (11 ذكرا و 4 إناث) يعانون من التليف الرئوي مجهول السبب (PF) خلال نفس الفترة. تم استبعاد المرضى الذين يعانون من أسباب محددة لأمراض الرئة الخلالية - مثل التليف الناجم عن المخدرات ، أو التعرض المهني / البيئي ، أو اضطرابات المناعة الذاتية / النسيج الضام. على الرغم من أن حجم العينة لهذه المجموعة كان محدودا بسبب انخفاض انتشار PF في الممارسة السريرية ، فقد تم تضمين جميع الحالات المؤهلة خلال فترة الدراسة لتحقيق أقصى قدر من التمثيل.
تم تجنيد ما مجموعه 136 مريضا (76 ذكرا و 60 أنثى) مصابين بالالتهاب الرئوي. ومن بين هذه الحالات، تم تشخيص 98 شخصا بالالتهاب الرئوي الجرثومي المكتسب من المجتمع، و28 بالالتهاب الرئوي الميكوبلازما الرئوي، و10 بالالتهاب الرئوي الفيروسي، الذي أكدته النتائج الميكروبيولوجية والإشعاعية. كانت معظم الحالات خفيفة إلى متوسطة. تم استبعاد المرضى الذين يحتاجون إلى عناية مركزة. كما تم استبعاد الأفراد الذين يعانون من اضطرابات الجهاز التنفسي المتزامنة أو الالتهابات الجهازية أو الخلل الوظيفي القلبي الرئوي أو غيرها من الحالات الجهازية الخطيرة.
2. جمع البيانات
تحضير عينة وقياس MMP-1 و MMP-7
تم جمع عينات الدم الوريدية (5 مل) في أنابيب مغلفة بالهيبارين بالليثيوم في ظروف معقمة. في غضون 30 دقيقة من التجميع ، تم فصل البلازما عن طريق الطرد المركزي عند 3000 × جم لمدة 10 دقائق عند 4 درجات مئوية. تم نقل المادة الطافية إلى أنابيب البولي بروبلين النظيفة وتخزينها عند -20 درجة مئوية ، مع عدم السماح بأكثر من دورتين للتجميد والذوبان لكل عينة.
قبل التحليل ، تم إذابة العينات في درجة حرارة الغرفة وخلطها برفق باستخدام دوامة منخفضة السرعة لمدة 10 ثوان. في حالة وجود طبقات مرئية ، تم إجراء دوامة إضافية حتى تبدو البلازما متجانسة. لضمان الوضوح ، تم إعادة طرد العينات عند 3000 × جم لمدة 5 دقائق ، وتم استخدام المادة الطافية الناتجة للقياس.
تم إجراء القياس الكمي ل MMP-1 و MMP-7 باستخدام محلل المقايسة المناعية للتلألؤ الكيميائي الآلي بالكامل (MAGLUMI X8 ، Snibe ، Shenzhen ، الصين). تم تشغيل الأداة في وضع فحص الساندويتش المكون من خطوتين مع منحنى معايرة من ست نقاط (ملاءمة لوغاريت. تضمنت كل عملية عينات مكررة ، وغسيل آلي لمدة 3 دورات ، وأحجام كاشف / عينة تبلغ 100 ميكرولتر و 50 ميكرولتر ، على التوالي. تم إجراء المعايرة كل 72 ساعة ، واعتبرت النتائج صالحة فقط إذا كانت ضوابط الجودة الداخلية (منخفضة ، متوسطة ، عالية) تقع ضمن ±2 SD من النطاقات المستهدفة للشركة المصنعة. تم إجراء جميع القياسات في نسختين لضمان قابلية التكاثر.
كانت معاملات التباين داخل الفحص وبين المقايسة (CV) 5.2٪ و 7.8٪ ل MMP-1 ، و 4.6٪ و 6.5٪ ل MMP-7 ، على التوالي ، بناء على قياسات مراقبة الجودة المكررة.
على الرغم من أن البلازما هي المصفوفة المفضلة في البروتوكولات القياسية ، فقد تم استخدام المصل في هذه الدراسة بسبب القيود العملية في التعامل مع العينات. تم تطبيق هذا الاستبدال باستمرار عبر جميع المجموعات وتم أخذه في الاعتبار في الترجمة الفورية. تم استبعاد أي عينات متحللة بشكل واضح أو شحمية من التحليل.
لم يتم تحديد عتبات الإيجابية البالغة 1.79 نانوغرام / مل ل MMP-1 و 4.51 نانوغرام / مل ل MMP-7 مسبقا بواسطة مجموعات الفحص ولكن تم اشتقاقها تجريبيا في هذه الدراسة باستخدام تحليل منحنى ROC والحد الأقصى لمؤشر Youden. لذلك يجب تفسير هذه القيم على أنها مجموعة محددة وتتطلب التحقق من الصحة في مجموعات سكانية مستقلة.
3. الأساليب الإحصائية
تم تقييم الحالة الطبيعية للبيانات باستخدام اختبار كولموغوروف سميرنوف ، وتم تقييم تجانس التباين عبر اختبار ليفين. بالنسبة للمتغيرات المستمرة ، تم التعبير عن النتائج كمتوسط ± الانحراف المعياري أو المتوسط (النطاق الربيعي) ، اعتمادا على توزيع البيانات. تم إجراء مقارنات من مجموعتين باستخدام اختبار Mann-Whitney U ، ومقارنات متعددة المجموعات باستخدام اختبار Kruskal-Wallis H.
4. تم تحليل البيانات الفئوية باستخدام اختبار مربع كاي
تم تقييم العلاقة بين العمر وتعبير MMP باستخدام معامل ارتباط رتبة سبيرمان. بالإضافة إلى ذلك ، تم إجراء مقارنات معدلة حسب العمر بين المجموعات باستخدام تحليل التغاير (ANCOVA) للتحكم في الخلط.
تم تقييم الأداء التشخيصي من خلال تحليل منحنى خصائص تشغيل المستقبل (ROC) ، مع تحديد قيم القطع المثلى باستخدام الحد الأقصى لمؤشر Youden.
اعتبرت القيمة الموصية ثنائية الذيل البالغة < 0.05 ذات دلالة إحصائية.