يصف هذا البروتوكول إنشاء نموذج للفئران لاكتئاب ما بعد السكتة الدماغية (PSD) من خلال دمج انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) مع التوتر المزمن، والضبط السلوكي، وعزل النفس، وتقييم التأثيرات العلاجية لوصفة يي-ناو-جي-يو (YNJYP) باستخدام اختبارات السلوك.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
يصف هذا البروتوكول إنشاء نموذج للفئران لاكتئاب ما بعد السكتة الدماغية (PSD) من خلال دمج انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) مع التوتر المزمن، والضبط السلوكي، وعزل النفس، وتقييم التأثيرات العلاجية لوصفة يي-ناو-جي-يو (YNJYP) باستخدام اختبارات السلوك.
الاكتئاب بعد السكتة الدماغية (PSD) هو مضاعفات شائعة وقابلة للعلاج للسكتة الدماغية، وتتميز بأعراض اكتئابية وجسدية تؤثر على تعافي المريض وجودة حياته. تصف هذه الدراسة بروتوكولا يجمع بين انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) ونظام التقييد السلوكي وتغطية العزل لتأسيس نموذج PSD للفئران، وتقيم التأثير العلاجي لوصفة يي-ناو-جي-يو (YNJYP) على تكوين الأعصاب البالغة لدى فئران PSD. لتأسيس النماذج، خضعت الفئران المصابة بالسكتة الدماغية، وPSD، وفلوكستين هيدروكلوريد (FXT)، وYNJYP لعملية MCAO: تم تقديم خيط أحادي من الشريان السباتي الداخلي إلى الشريان الدماغي الأوسط (MCA) لمدة ساعتين من نقص التروية، تلاها إعادة تروية. منذ اليوم السابع بعد MCAO، تم تقييد الفئران في مجموعات PSD وFXT وYNJYP في منزل واحد وتقييدها في منصة مخصصة على شكل حرف T لمدة ساعتين يوميا لمدة 7 أيام. شملت التقييمات السلوكية اختبار السباحة القسرية (FST، لليأس)، واختبار استهلاك السكروز (SCT، لفقدان المتعة)، واختبار الحقل المفتوح (OFT، للسلوك الاستكشافي). بعد 4 و8 أسابيع من السكتة الدماغية، أظهرت فئران PSD وقت عدم حركة أطول في FST وتفضيل أقل للسكروز في SCT مقارنة بفئران السكتة الدماغية (P < 0.01). عكس YNJYP هذه السلوكيات الشبيهة بالاكتئاب (P < 0.01)، بفعالية مماثلة ل FXT. يؤكد هذا البروتوكول صحة نموذج PSD والإمكانات العلاجية ل YNJYP، مدعوما بتجارب دقيقة وتحليل بيانات.
الاكتئاب بعد السكتة الدماغية (PSD) هو مضاعفات شائعة وقابلة للعلاج للسكتة الدماغية، والتي تؤثر بشكل كبير على عملية إعادة التأهيل وجودة حياة المرضى. لا يعاني مرضى PSD فقط من إعاقات وظيفية جسدية، بل يواجهون أيضا اضطرابات نفسية مثل انخفاض المزاج وفقدان الاهتمام. وهذا يعيق بشكل كبير تعافي الوظائف العصبية ويزيد من معدل الوفيات. حاليا، فإن مسببات اضطراب الشخصية النفسية معقدة وتشمل جوانب متعددة مثل علم الأعصاب، واختلال توازن الناقلات العصبية، والاستجابة الالتهابية. هناك حاجة ملحة لاستكشاف طرق تدخل فعالة بعمق.
الهدف العام من هذه الطريقة هو إنشاء نموذج موثوق وقابل للتكرار للفئران لاضطراب الدماغ النفسي النفسي يحاكي الحالة البشرية بشكل وثيق من خلال دمج انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) مع الإجهاد المزمن الخفيف (CMS، وبشكل أساسي كبح سلوكي) وتغطية العزل، واستخدام هذا النموذج لتقييم العلاجات المحتملة مثل وصفة يي-ناو-جي-يو (YNJYP). ينبع مبرر تطوير هذه التقنية من الحاجة إلى دمج كل من الإهانة الإقفاري الأولية والضغط النفسي المزمن اللاحق، اللذين يعترف بهما كمكونات رئيسية في مسببات اضطراب PSD، في نموذج موحدواحد 1,2,3. مقارنة بالطرق البديلة، مثل تلك التي تعتمد فقط على نماذج CUMS الواسعة، يقدم هذا البروتوكول نهجا أكثر تركيزا وقابلية للتكرار من خلال استخدام شكل محدد من ضبط السلوك مصمم لمحاكاة تقييد الحركة الذي يعاني منه مرضى السكتةالدماغية 3,4,5.
يساهم هذا النموذج في الأدبيات الأوسع حول PSD من خلال توفير إطار عمل مفصل وعملي لتحفيز وتقييم PSD لدى القوارض، مع تلبية الحاجة إلى التوحيد في الأبحاث قبل السريرية. قد يجد الباحثون المهتمون بدراسة التأثيرات الفسيولوجية المرضية المشتركة لنقص التروية الدماغي وضغط ما بعد السكتة الدماغية، أو في فحص التدخلات الجديدة لاضطراب الدماغ الدماغي، أن هذا البروتوكول مناسب، لأنه يحدد إجراءات واضحة لإنشاء النماذج، وتطبيق التوتر، وتقييم السلوك.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت الموافقة على بروتوكول دراسة من قبل لجنة العناية والاستخدام للحيوانات في جامعة بكين للطب الصيني. المواد المستخدمة والمواد المستخدمة مدرجة في جدول المواد.
1. التحضير
2. جراحة انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO)
ملاحظة: تصف هذه الخطوة تأسيس نموذج MCAO/إعادة التروية (MCAO/R)، المعدل من بيدرسون وآخرين.
3. تجميع
4. إعطاء فلوكستين هيدروكلوريد (FXT) وYNJYP
5. التوتر المزمن الخفيف (ضبط سلوكي) مع سكن العزل
6. اختبار استهلاك السكروز (SCT)
ملاحظة: اختر عشوائيا ستة فئران من كل مجموعة بعد أسبوعين و4 و8 أسابيع من MCAO. اختبر جميع الفئران بترتيب SCT وOFT وFST.
7. اختبار الحقل المفتوح (OFT)
ملاحظة: اختر نفس دفعة الفئران من كل مجموعة استخدمت في FST في الأسبوع 2 و4 و8. صوم وحرم الفئران من الماء لمدة 24 ساعة قبل الاختبار للحفاظ على ظروف فسيولوجية ثابتة.
8. اختبار السباحة القسرية (FST)
ملاحظة: اختر نفس دفعة الفئران من كل مجموعة استخدمت في FST في الأسبوع 2 و4 و8. صوم وحرم الفئران من الماء لمدة 24 ساعة قبل الاختبار للحفاظ على ظروف فسيولوجية ثابتة.
9. التحليل الإحصائي
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم تشكيل ما مجموعه 5 مجموعات تجريبية في هذه الدراسة للكشف المناسب. بعد التحليل الإحصائي لبيانات سلوك كل مجموعة من الفئران، تبين أنه في الأسبوع الرابع من التجربة، زاد وقت عدم الحركة لفئران مجموعة PSD في FST بشكل ملحوظ مقارنة بفئران مجموعة السكتة الدماغية، وكان الفرق بين المجموعتين ذا دلالة إحصائية (P < 0.01); وفي الوقت نفسه، كان تفضيل السكروز لفئران مجموعة PSD في SCT أقل بشكل ملحوظ من فئران مجموعة السكتة الدماغية، وكانت الفروقات بين المجموعتين في الأسبوعين الرابع والثامن من التجربة ذات دل...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في عملية بناء نموذج نقص التروية في دماغ الفئران، هناك عدة طرق نمذجة مختلفة، بما في ذلك طريقة الربط، وطريقة شق الجمجمة، وطريقة الاختناق، وطريقة الإغلاق السلكي. مقارنة بطرق النمذجة الثلاث: الربط، وقطع الجمجمة، والاختناق، تظهر طريقة انسداد السلك مزايا كبيرة وفريدة. تكمن هذه المزايا بشكل رئيسي في ثلاثة جوانب رئيسية: الطبيعة الطفيفة للتدخل، دقة التحكم في الوقت والمكان، وموثوقية الطراز 1,2,3.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.
كتب يوانكاي سو ويونغهاو سون المخطوطة، بما في ذلك تفسير النتائج وقسم النقاش. أجرى هويلينغ تيان التجارب وحلل البيانات. راجع نينغ دينغ وشين وانغ المخطوطة. ساهم زيتونغ يانغ وجينغياو تشاو في البحث عن البيانات.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| ذكور البالغين من فئران سبراج-داولي | مختبر فيتال ريفر لتقنية الحيوانات، بكين، الصين | لا. SCXK2012-0001 | 300– 320 جرام |
| كبسولات فلوكسيتين هيدروكلوريد | باثيون فرنسا، جيانغسو، الصين | 0943A | |
| حبيبات YNJYP | قسم الصيدلة، المستشفى الثالث التابع لجامعة بكين للطب الصيني | منزلي الصنع | |
| صندوق مفتوح لاختبار الحقل المفتوح | منزلي الصنع | - | |
| الصوديوم بنتوفينوباربيتال | شركة سيغما أوف أمريكا | P3761-5 | |
| خيط الإخفاء | شركة بكين شادونغ للتكنولوجيا الحيوية المحدودة | 2838-A4 | |
| خزان المياه لتجربة السباحة القسرية | منزلي الصنع | - |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.